/ 16
Най-лошото Най-доброто
Проучването на инфекцията HIV е предмет на:
2. лица с подозрение или потвърдена диагноза: бактериална инфекция при деца под 13 години, многократно и повтарящо се; Кандидат на хранопровода, трахеята, бронхите или белите дробове; цервикален инвазивен рак; разпространена или екстрахираща кокцидомикоза; криптоксококоза на екстрапулк; криптоспоридиоза с диария за 1 месец или повече; цитомегаловирус лезия на други органи, с изключение на черния дроб, далака, лимфните възли при пациенти на възраст над 1 месец; цитомегаловирусен ретинит със загуба на визия; Херпетна инфекция, която причинява многокласни язви, които не са излекувани за 1 месец, или бронхит, пневмония, езофагит; хистоплазмоза, разпространявана или екстрапиталност; Стрелба с диария над 1 месец; Туберкулоза обща или екстрапулмонарна; белодробна туберкулоза при възрастни или юноши над 13 години; Туберкулоза екстрапулция; друго заболяване, причинено от микобактерии, с изключение на m. туберкулоза, разпространявана или екстрапулозирана; пневмония, причинена от пневматисти; прогресивна мултифокси леуобзалопатия; Salmonellus (с изключение на Salmonella typhi) на септицемия повтаряща се; Мозъка на мозайка за токсоилаза при деца на възраст над 1 месец; Caposhi Sarcoma; лимфоидна интерстициална пневмония при деца под 13-годишна възраст; Berkitta лимфом; имунобластен лимфом; първичен мозък лимфом; Синдром на изтощение, хепатит В, превоз на HBsAg; инфекциозна мононуклеоза; рецидивиращ херпес в лица над 60 души; болести, предавани по полов път.
В силно специализирана лаборатория се извършва:
а) определяне на антитела, циркулиращи в кръвта, антигените и имунните комплекси; отглеждане на вируса, откриване на неговия геномен материал и ензими;
б) оценка на функциите на клетъчната имунна система. Основната роля принадлежи на методите на серологична диагностика, насочена към определяне на антитела, както и антигени на причинителя в кръвта и други биологични течности на тялото.
Изпитването за антитела към ХИВ се извършва с цел:
а) безопасност на хемотрансфа и трансплантации;
б) наблюдение, изпитване за наблюдение на надвишаването на HIV инфекцията и изследване на динамиката на нейното разпространение в определено население;
в) диагностициране на HIV инфекция, т.е. доброволно изпитване на серума на практически здрави хора или пациенти с различни клинични признаци и симптоми, подобни на HIV инфекцията или СПИН.
Системата за лабораторна диагностика на HIV инфекцията е изградена по тристепенна принцип. Първият етап е скрининг, предназначен да извършва първични кръвни изследвания за присъствието на антитела към ХИВ протеини. Вторият етап от референтния - позволява използването на специални методологически техники за изясняване (потвърждение) основният положителен резултат, получен на сцената на скрининга. Третият етанка е експерт, предназначен за окончателната проверка на присъствието и спецификата на маркерите за ХИВ, определени в предишните етапи на лабораторната диагностика. Необходимостта от няколко етапа на лабораторната диагностика се дължи предимно на икономически съображения.
На практика се използват няколко теста, които позволяват с достатъчна степен на точност за идентифициране на хората, заразени с HIV:
ELISA (ELISA) -tecte (анализ на имуноанализ на твърда фаза) Откриване на първо ниво се характеризира с голяма чувствителност, макар и по-малко специфичност по-долу;
Имунно блот (Western-blot), много специфичен и най-използван тест, което позволява да се диференцират HIV-1 и HIV - 2;
Antigenemia p25-тест ефективен в началните етапи на инфекцията;
Реакция на полимераза (PCR).
В случаите на масово скрининг на кръвни проби се препоръчва да се изпитват серуми смеси от групата на изследваната група, съставена с такова изчисление, така че крайното разреждане на всяка проба да не надвишава 1: 100. Ако сместа от серума се окаже положителна, се извършва изследването на всеки серум на положителната смес. Този метод не води до загуба на чувствителност както в ELISA, така и в имуноблот, но намалява разходите за труд и цената на първичните проучвания с 60-80%.
В първичната серодиагностизация на HIV инфекцията, общият антитела се определя с помощта на скрининг квалифицирани тестове - МФК и аглутинационни реакции. На втория (арбитражен) етап използвайте по-сложен тест - имуноблот, който позволява не само да се потвърди или отхвърли първоначалното заключение, но и да се направи това на ниво дефиниция на антитела към отделни вирусни протеини.
Свързан имуносорбентен анализ (IFA) е основният и най-широко използван метод за определяне на антитела към ХИВ. Но недостатъците на употребата на ELISA в серодиагностима на HIV инфекцията трябва да се приписват често фалшиви положителни резултати. В това отношение резултатът в ELISA не е основание за заключението за серопозицията на ХИВ на изследваната. Това се дължи на недостатъчното почистване на имуносорбент от баластни протеини; Спонтанното свързване на серумните антитела с пластмаса, ако неговите парцели, които не са заети от имуносорбент, не са блокирани достатъчно или не са блокирани от много специален неутрален протеин; кръстосано взаимодействие с HIV протеини на имуносорбент на различни протеини, присъстващи в кръвта на хора със сигурни, по-често автоимунни патологични процеси на вида на склероза, SLE, туберкулоза; с често дарение, инфекциозен и рак, изгаряния, бременност, повтарящи се хемотранс, трансплантация на органи, тъкани, както и хора на хемодиализа; с присъствието на ревматоиден фактор в кръвта, често провокират HIV-фалшиви положителни реакции; Наличието на антитела към GAG протеините на HIV изследва в кръвта и главно към P24 протеина (очевидно, антитела се образуват в екзо или ендогенен неидентифициран ретровирус. Тъй като анти-Р24 се синтезира при задължително в ранните етапи на ХИВ-сероконверсия, по-нататъшно имунологично наблюдение на лицата с антитела към протеини за ХИВ, както и отстраняването им от дарението.
Чувствителността и специфичността на имуноферменталния анализ непрекъснато се увеличават. В резултат на това, че четвъртото поколение IFA не е по-ниско в техните диагностични способности на имунния блот и може да се използва не само на скрининг, но и на етапа на потвърждение на диагнозата HIV инфекция [Soltskaya T., 1997].
Имуноблотинг Той е окончателният метод на серологична диагностика, което позволява да се направи окончателното заключение за ХИВ-позитивност или негативност на изследваната.
Съществува ясна връзка между резултатите от изследването на серума в имуноблот и ELISA - два пъти положителни в ELISA с различни тестови системи на серум в 97-98% от случаите след това е HIV положително при имуноблотинг. Ако серумът се оказа положителен в IFA само в една от двете използвани тестови системи, те се откриват в имуноблот положителни само в 4% от случаите. В 5% от случаите, при провеждане на потвърждаване на изследвания в лица с положителни данни, IFA-имуноблот може да даде "неопределени" резултати, а сред тях около 20% от случаите "неопределени" резултати причиняват антитела към GAG протеини на HIV-1 (P55, \\ t P25, P18). Наличието на антитела само за HIV-1 GAG протеини е причина за допълнително проучване на кръвния серум за HIV-2 инфекция.
Оценката на имуноблотивните резултати се извършва строго в съответствие с инструкциите, свързани с тестовата система. При липса на инструкции за тълкуване на резултатите трябва да се използват критериите.
При получаване на положителни резултати от научните изследвания на референтния етап на лабораторната диагностика на HIV инфекцията и отрицателния резултат от проучването по метода на имунно попиване, след 6 месеца след първото изследване се извършва задължителна референтна диагноза.
Ако резултатите от имуноблотирането след 12 месеца след първото проучване на пробата остават отрицателни или несигурни, след това при липса на рискови фактори, клинични симптоми или други фактори, свързани с HIV инфекция, се изследват от диспансерното наблюдение.
Сред серологичните методи в случай на несигурни резултати от имунобот, използвани като експертна диагностика Радиоимунопреципитация (ПОЧИВАЙ В МИР). Тя се основава на използването на вирусни протеини, обозначени с радиоактивен йод, и се откриват утайки, използващи бета-броячи. Недостатъците на метода се отнасят до високата цена на оборудването, необходимостта от оборудване за тези цели на специалните помещения.
Лицата, които са диагностицирани с HIV инфекция, подлежат на постоянно динамично наблюдение с задължително лабораторно изследване на всеки 6 месеца.
Реакцията на полимераза (PCR) разкрива предварително умножените нуклеотидни последователности, специфични за генома на този патоген. Изолираното умножение на гена или неговия фрагмент, наречен амплификация, PCR дава възможност да се извърши в тръбата, като се използва термичният стабилен ДНК полимеразен ензим. За 2-3 часа PCR ви позволява да получите милиони копия на специфичен сегмент на вируса. Когато HIV инфекция от клетъчна РНК, включително вирусна РНК, ако е била възпроизведена в клетка или е интегрирана в нейния геном, като се използва обратна транскрипция и хибридизация с белязани олигонуклеотидни "проби", се получава достатъчно количество индузивна ДНК, която се получава, което се открива и се характеризира с количествено, както по отношение на принадлежността към HIV ген, върху радиоактивен или друг етикет на сондата, установяването на ДНК хомология и вирусни специфични аминокиселинни последователности. Чувствителността на PCR е откриването на вирусни гени в една от петте хиляди клетки.
PCR, включително количествено, може да се използва само за да се определи плазменият вирусен товар за решаване на въпроса за началото на лекарството лечение на пациент или смяна на антиретровирусни лекарства. PCR не може да се препоръчва за диагностика на HIV инфекцията, тъй като дори най-ултра-модерните методи на неговата формулировка и реагенти ви позволяват да определите вирусния товар най-малкото ниво - 50 копия / ml. А сложността на PCR продукцията и високата му цена (около $ 200) намалява своята мащабна употреба като метод за ежедневна лабораторна диагностика на HIV инфекцията. Така PCR остава незаменим само за оценка на плазмения вирусен товар при пациенти с вече установена диагностика на HIV инфекция, за да се реши проблемът с пациентската терапия.
Схематично, етапите на лабораторната диагностика на HIV инфекцията са представени на фиг. един.
Фиг. 1. Етапи на лабораторната диагностика на HIV инфекцията
По време на HIV инфекцията има период на "тъмен лабораторен прозорец", когато броят на HIV антителата е недостатъчен за чувствителността на тестовите системи. Този период варира от една седмица до три месеца от момента на инфекцията на ХИВ в зависимост от нивото на чувствителност на тестовата система. С това явление има трудности при изследването на донорната кръв от лица, които са в споменатия период на ХИВ-инфекция. Ето защо, в повечето страни по света системата за използване на кръвта е въведена само след нейното съхранение за 3-6 месеца, за да се приложи задължително преразглеждане на дозите на ХИВ набиране на кръв и неговите компоненти.
Етапът на първичните прояви се характеризира с активността на репликативния процес. Корекция на виремия и антигенетност причиняват образуването на специфични IgM клас антитела: анти-P24, анти GP41, анти GP120. Антиген р24 в част от заразените части може да бъде открит в кръвта на МФК метода след 2 седмици след инфекция и се определя до 8-та седмица. След това в клиничния ход на HIV инфекцията се наблюдава второто повдигане на кръвното съдържание на P24 протеин за периода на образуване на етапа на СПИН.
Появата на пълна сероконверсия, когато в периферната кръв се записва високо ниво на специфични IgG клас антитела към структурните протеини на HIV GP41, P24, GPL20, значително улеснява диагностиката на HIV инфекцията. Повечето търговски комплекти са предназначени да посочат точно такива антитела.
Трудностите при откриването на антитела при пациенти с HIV инфекция могат да възникнат по време на периоди на масивна виремия и антигенетност, когато наличните специфични антитела в кръвта се консумират за свързването на вирусни частици, а процесът на репликация е пред операцията на новото антивирусно състояние антитела.
При хора с отслабена имунна система виремия и антигенетност изглеждат по-рано и се запазват на високо ниво преди болестта. В същото време тези пациенти имат ниско съдържание на свободни антитела към ХИВ, поради две причини - недостатъчни продукти от антитяло в лимфоцити и свързващи антитела на вириони и разтворими HIV протеини, следователно тестовите системи с повишена чувствителност или модификация на анализа Необходими са методи за определяне на инфекцията. Етапно освобождаване на антитела от имунните комплекси.
Въпреки изобилието от специфични HIV маркери, най-често определянето е наличието на общи антитела към HIV протеините. Терминът "общо" предполага наличието на два класа антитела (IgG и IgM) и широк спектър от антитела към различни, главно на структурните, HIV протеини.
Определение на CD4 клетки. Основният клиничен и лабораторен показател за диагностицирането на етапа на ХИВ-инфекцията, степента на унищожаване на имунната система при пациенти в ежедневието е определението на съдържанието на CD4 + Limphockytes: намаление на ниво под 200 клетки / mm3 е основният критерий за диагностика на СПИН. Смята се, че всички заразени с ХИВ лица с количеството на CD4 + -LIMPHOCYTES 200 клетки / mm3 и по-ниски нужда от антивирусна терапия и предотвратяването на пневматична пневмония. И въпреки че 1/3 от HIV-инфектирани с количеството С04 + -лимфоцити е по-малко от 200 клетки / mm3, няма клинични прояви, опитът е показал, че имат симптоми, които имат симптоми в следващите 2 месеца, така че всички те се считат за Пациенти на етапа на СПИН.
Понастоящем новите диагностични технологии позволяват да се идентифицират етиологичните и патогенетични причини за много заболявания и радикално да повлияят на резултатите от лечението. Може би най-впечатляващите резултати от въвеждането на тези технологии в клиничната практика се постигат в областта на имунологията и диагностицирането на инфекциозни заболявания.
Тестовите системи, базирани на имуно-емантален и имунохемилумилюмски анализ, позволяват да се идентифицират антитела на различни класове, които значително увеличават съдържанието на информацията в методите за клинична, аналитична чувствителност и специфичност за диагностицирането на инфекциозни заболявания. Трябва да се отбележи, че най-значимите успехи в диагнозата инфекции са свързани с прилагането на метода на полимеразна верижна реакция към лабораторната практика, която се счита за "златен стандарт" в диагностиката и оценката на ефективността на лечението на редица инфекциозни заболявания.
За проучването може да се използва различен биологичен материал: серум, кръвна плазма, изстъргване, биопт, плеврален или гръбначен флуид (SMG). На първо място, методите на лабораторна диагностика на инфекции са насочени към идентифициране на заболявания като вирусен хепатит В, С, D, цитомегаловирусна инфекция, инфекции, предавани по полов път (гонина, хламидиална, микоплазма, уреаплазма), туберкулоза, HIV инфекция и др.
HIV инфекция - заболяване, причинено от човешки имунодефицитен вирус (HIV), дълго време, устойчиви в лимфоцити, макрофаги, клетки на нервната тъкан, което води до бавно прогресивно увреждане на имунната и нервната система на тялото, проявяваща се чрез вторични инфекции, тумори, \\ t подкументен енцефалит и други патологични промени.
Патогените на инфекцията са вируси за имунна недостатъчност на лицето на 1-ви и 2-ри типове (HIV-1, HIV-2) - се отнасят до семейството на ретровирусите, твърденията на бавни вируси. Вириотите са сферични частици с диаметър 100-140 nm. Вирусната частица има външна фосфолипидна обвивка, включително гликопротеини (структурни протеини) с определено молекулно тегло, измерено в килодалтоните. HIV-1 е GPL60, GPL20, GP41. Вътрешната обвивка на вируса, покриваща ядрото, също е представена от протеини с известно молекулно тегло - Р17, Р24, р55 (HIV-2 съдържа GPL40, GPL05, GP36, P16, P25, P55).
HIV геномът включва РНК и ензим за обратна транскриптаза (обратно). За да се свърже ретровирусният ген с генома на клетката гостоприемник, първо с помощта на обръщане, синтез на ДНК върху матрицата на вирусната РНК. След това ДНК на провирата е вградена в генома на гостоприемника. HIV има изразена антигенна вариабилност, значително надвишава такъв грипен вирус.
В човешкото тяло основната цел на HIV е Т-лимфоцити, които носят най-голямото количество CD4 рецептори на повърхността. След проникване на HIV в клетка, използвайки реверза съгласно РНК, вирусът синтезира ДНК, който е вграден в генетичния апарат на гостоприемната клетка (CD4 лимфоцити) и остава там за цял живот в състояние на провирата. В допълнение към Т-лимфоцитехели, са засегнати макрофаги, в лимфоцити, клетки на невролия, чревна лигавица и някои други клетки. Причината за намаляване на количеството t-лимфоцити (CD4 клетки) е не само директен цитопатичен ефект на вируса, но и с сливането им с не заразени клетки. Наред с лезията на Т-лимфоцити при пациенти с HIV инфекция, има поликлонално активиране на В-лимфоцити с увеличаване на синтеза на имуноглобулини от всички класове, особено IgG и IgA, и последващото изчерпване на този отдел на имунния \\ t система. Нарушаването на регулирането на имунните процеси също се проявява чрез увеличаване на нивото на α-интерферон, β2-микроглобулин, намаление на ниво IL-2. В резултат на увреждане на функцията на имунната система, особено с намаляване на броя на Т-лимфоцитите (CD4) до 400 клетки в 1 μl кръв и по-малко, за неконтролирано ХИВ репликация със значително увеличение броя на вирионите в различни среди. В резултат на поражението на много връзки на имунната система човек, заразен с ХИВ, става беззащитен преди причинно-следствените агенти на различни инфекции.
На фона на увеличаване на имуносупресията се развиват тежки прогресивни заболявания, които не се намират при хора с нормално функционираща имунна система. Това са болести, които Световната здравна организация (която) е идентифицирана като маркер на СПИН или болести на СПИН-индикатор.
Показатели на СПИН заболявания
Първата група - болести, присъщи само чрез тежка имунна недостатъчност (ниво CD4<200). Клинический диагноз ставится при отсутствии анти-ВИЧ-антител или ВИЧ-антигенов.
Втората група е болести, които могат да се развият както на фона на тежката имунна недостатъчност, а в някои случаи без него.
Следователно, в тези случаи е необходимо лабораторно потвърждение на диагнозата.
Първа група:
- кандидоза на хранопровода, трахеята, бронхите;
- екстрапол криптококоза;
- cryptosporidia с диария повече от 1 месец;
- цитомегаловирусни лезии на различни органи освен черния дроб, далака или лимфните възли при пациент под 1 месец;
- инфекцията, причинена от завеса на обикновена херпес, проявяваща се с язви върху кожата и лигавицата, която олицетворява повече от 1 месец, както и бронхит, пневмония или езофагит с всяка продължителност, засягаща пациент на възраст над 1 месец;
- генерализирани саркома хаза при пациенти под 60-годишна възраст;
- мозъчен лимфом (първичен) при пациенти под 60-годишна възраст;
- лимфоцитна интерстициална пневмония и / или белодробна лимфоидна дисплазия при деца под 12-годишна възраст;
- разпространявана инфекция, причинена от атипични микобактерии (микобактерии на M. aviumintraCellaure комплекс) с локализация или локализация на екстрапиталта (допълнително към светлина) в кожата, цервикални лимфни възли, лимфни възли на белите дробове;
- пневматична пневмония;
- прогресивна многостепенна левкоензелопатия;
- токсоплазмоза на мозъка при пациенти на възраст над 1 месец.
Втора група:
- бактериални инфекции, комбинирани или периодични, при деца под 13-годишна възраст (повече от два случая за 2 години наблюдение): сепсис, пневмония, менингит, кост или стави, абсцеси, дължащи се на gemophilic пръчки, стрептококи;
- дисеминирана кокцидиоидомикоза (локализация на екстрапилока);
- ХИВ-енцефалопатия (ХИВ деменция, деменция на СПИН);
- хистоплазмоза с диария, постоянни повече от 1 месец;
- isosport с диария продължава повече от 1 месец;
- саркома Капоши на всяка възраст;
- мозъчен лимфом (първичен) в лица от всяка възраст;
- други В-клетъчни лимфоми (с изключение на болестта на Ходжкин) или лимфом на неизвестен имунофенотип: фин клетъчен лимфом (като лимфом на Berkitta и др.); имунобластна саркома (имунобластен лимфом, голяма клетка, дифузен хистиоцит, дифузен недиференциран);
- mycobacteriosis се разпространява (не туберкулоза) с лезия в допълнение към лека кожа, шийните или печенето на лимфни възли;
- туберкулоза екстрапулция (с вреди вътрешни органи, в допълнение към белите дробове);
- салмонелична септицемия, повтаряща се;
- ХИВ-дистрофия (изтощение, остър загуба на тегло).
Таблица 1 (виж позоваване на източника по-горе) СПИН-индикаторни заболявания и техните етиологични агенти са дадени.
Има много класификации на СПИН.
Съгласно новата класификация, предложена от Центъра за контрол на заболяването (таблица 2 - виж позоваването на източника по-горе), диагнозата на СПИН се установява от лица, които имат ниво на CD4-лимфоцит, по-малко от 200 / μl, дори при липса на индикаторни заболявания на СПИН .
Категория В включва различни синдроми, най-важното от които са оралегия ангиоматоза, орофорния теглене на кандидоза, повтарящ се кандидатен вулвивагинит, трудно да бъде терапия, цервикална дисплазия, цервикален карцином, идиопатичен тромбоцитопен лилав, ветериза, периферна невропатия.
Антитела за HIV-1 и HIV-2 в кръвта
Антителата за HIV-1 и HIV-2 в серума отсъстват.
Определението за HIV антитела е основният метод на лабораторната диагностика на HIV инфекцията. Методът се основава на анализ на ензим имуноанализ (IFA) - чувствителност над 99.5%, специфичност - повече от 99.8%. ХИВ антитела се появяват в 90-95% заразени в рамките на 1 месец след инфекция, 5-9% след 6 месеца, в 0.5-1% по-късно. В етапа на СПИН броят на антителата може да намалее до пълно изчезване.
Резултатът от проучването се изразява качествено: положително или отрицателно.
Отрицателният резултат от изследването показва липсата на антитела към HIV-1 и HIV-2 в серума. Отрицателният резултат от лабораторните въпроси незабавно по своята готовност. При получаване на положителен резултат - откриване на антитела към ХИВ - за да се избегнат фалшиви положителни резултати в лабораторията, анализът се повтаря още 2 пъти.
Имуноблотинг за антитела към вирусни протеини HIV в серум
Антителата за вирусни протеини HIV в серума отсъстват.
Методът на IFA за определяне на антителата за ХИВ е скрининг. При получаване на положителен резултат, методът на имуноблотиране се използва за потвърждаване на нейното специфичност - брояч утаяване в гела на антитела в серума на пациента с различни вирусни протеини, подложени на разделяне на молекулното тегло, използвайки електрофореза и нанесена нитроцелулоза. Антитела за вирусни протеини GP41, GPL20, GPL60, P24, PI8, P17 и др.
Съгласно препоръките на Руския център за превенция и контрол на СПИН, откриването на антитела към един от гликопротеините GP41, GPL20, GPL60 трябва да се счита за положителен резултат. В случай на откриване на антитела към други вирусни протеини, резултатът се счита за съмнителен, такъв пациент трябва да бъде изследван два пъти - след 3 и 6 месеца.
Липсата на антитела към специфични HIV протеини означава, че имуно-имунимен метод дава фалшив положителен резултат. В същото време, в практическа работа, при оценката на резултатите от имуноблотичния метод е необходимо да се ръководи от инструкцията, приложена от компанията към използвания "набор от имуноблотиране".
Методът на имуноблотинг се използва за лабораторната диагностика на HIV инфекцията.
Antigen P24 в серум
Antigen P24 в серума отсъства.
Антиген P24 е протеин на HIV нуклеотидната стена. Етапът на първичните прояви след ХИВ инфекцията е следствие от началото на репликативния процес. Antigen P24 се появява в кръвта след 2 седмици след инфекцията и може да бъде открит от ELISA метода от 2 до 8 седмици. След 2 месеца от момента на инфекцията, антигенът P24 изчезва от кръвта. В бъдеще се отбелязва в бъдеще, в клиничния ход на инфекцията на ХИВ, второто увеличение на кръвното съдържание на протеин P24 се отбелязва. Той идва от формирането на СПИН. Съществуващите системи за изпитване на IFA за откриване на антиген P24 се използват за ранно откриване на HIV в кръвоносните донори и деца, определящи прогнозирането на потока на СПИН и контрол на терапията при пациенти със СПИН. ELISA има висока аналитична чувствителност, която позволява да се открие HIV-1 антиген R24 в серум в концентрация от 5-10 pkg / ml и HIV-2 - по-малко от 0.5 ng / ml и специфичност. Въпреки това следва да се отбележи, че нивото на антиген Р24 в кръвта е обект на индивидуални вариации, което означава, че само 20-30% от пациентите могат да бъдат открити чрез това проучване в началото на периода след инфекцията (Rose Nr et al., 1997).
Антителата за антиген R24 класове IgM и IgG в кръвта се появяват от втората седмица, достигат връх за 2-4 седмици и се държат на такова ниво от различни времена: IgM клас антитела - в продължение на няколко месеца, изчезват в рамките на една година след инфекцията, \\ t И IgG антитела могат да бъдат запазени от години.
Алгоритъмът за диагностика на HIV инфекцията зависи от фазата на заболяването и се характеризира с промяна в динамиката на антителата на различни класове (фиг. 1, 2 - виж позоваването на източника по-горе).
Резултатът от изследването се изразява качествено - положително или отрицателно. Отрицателният резултат на изследването показва липсата на антитела към HIV-1 и HIV-2 и антигена P24 в серума.
Отрицателният резултат от лабораторните въпроси незабавно по своята готовност. При получаване на положителен резултат - откриване на антитела към HIV-1 и HIV-2 и / или антиген P24 - за да се избегнат фалшиви положителни резултати в лабораторията, анализът се повтаря още 2 пъти.
Независимо от резултатите от изследването на кръвната проба на пациента и резултатите от 3 проучвания се изпращат в лабораторията към регионалния център на СПИН, за да се потвърди положителен резултат или проверка на неопределен резултат. В такива случаи окончателният отговор на това изследване издава регионалния център за СПИН.
Откриване на ХИВ чрез полимеразна верижна реакция (качествено)
Откриването на HIV метод на полимеразна верижна реакция - PCR (качествено) се извършва за:
- разрешение на съмнителни резултати от имуноблотинг изследвания;
- за ранна диагностика на HIV инфекция;
- контрол на ефективността на антивирусното лечение;
- определения на етапа на болестта на СПИН (преходна инфекция в болестта).
Когато първичната инфекция, HIV, PCR методът ви позволява да идентифицирате HIV РНК в кръвта след 10-14 дни след инфекцията.
Резултатът от проучването се изразява качествено: положително или отрицателно. Отрицателният резултат от изследването показва липсата на ХИВ РНК.
Положителният резултат е идентифицирането на ХИВ РНК - свидетелства за инфекцията на пациента.
HIV откриване чрез полимеразна верижна реакция (количествено)
ХИВ в кръвта отсъства.
Директно количествено определяне на HIV РНК с PCR позволява по-точно от определянето на съдържанието на CD4 клетки, прогнозира скоростта на развитието на СПИН при хора, заразени с ХИВ, следователно, по-точно оценява тяхното оцеляване. Високото съдържание на вирусни частици обикновено корелира с изразено нарушено имунно състояние и ниски CD4 клетки. Ниското съдържание на вирусни частици обикновено корелира с по-проспериращ имунен статус и по-високо съдържание на CD4 клетки. Съдържанието на вирусната РНК в кръвта позволява да се предскаже преходът на заболяването в клиничния етап. При поддържане на РНК-1 HIV\u003e 74 100 копия / ml, почти всички пациенти разработват клинична картина на СПИН (старши D., Holden E., 1996).
Вероятността за развитието на СПИН е 10.8 пъти по-висока от лицата със съдържанието на HIV-1 в кръвта\u003e 10 000 копия / ml от тези с HIV-1 в кръвта<10 000 копий/мл. При ВИЧ-инфекции прогноз непосредственно определяется уровнем виремии. Снижение уровня виремии при лечении улучшает прогноз заболевания.
Американският експерт екип е разработил указания за терапия на пациенти с ХИВ. Лечението се показва на пациенти с CD4 клетки в кръвта<300/мкл или уровнем РНК ВИЧ в сыворотке >20 000 копия / ml (PCR). Оценка на резултатите от антиретровирусна терапия при лица, заразени с ХИВ, се извършват за намаляване на нивото на HIV серумната РНК.
С ефективно лечение, нивото на вирхията трябва да намалява 10 пъти през първите 8 седмици и да бъде под границата на чувствителност (PCR) (<500 копий/мл) через 4-6 месяцев после начала терапии.
Така, днес, много изследвания се въвеждат в клинична практика за диагностициране на HIV инфекция, както и за всички други вирусни инфекции. Сред тях водещата роля се възлага на серологични изследвания. Основните методи за диагностициране на HIV инфекции са представени в таблица 3 (виж позоваване на източника по-горе), където те са разделени в зависимост от важността на всеки метод за откриване на вируси до четири нива:
- А - тест обикновено се използва за потвърждаване на диагнозата;
- Б - изпитването е полезно при определени обстоятелства за диагностика на отделни форми на инфекция;
- C - тест рядко се използва за диагностични цели, но е от голямо значение за епидемиологичните проучвания;
- D - тест обикновено не се използва от лаборатории за диагностични цели.
Тъй като диагностицират вирусни инфекции, в допълнение към избора на оптимален метод за анализ, е също толкова важно за правилното определяне и вземане на биоматериал за изследването, в таблица 4 (вж. Позоваването на изхода по-горе) предоставя препоръки за избор на оптимален биоматериал за изследване на ХИВ.
За да се следи за заразените с ХИВ, е необходимо да се използват възможностите за цялостно проучване на имунния статус - количественото и функционалното определение на всички негови връзки: хуморален, клетъчен имунитет и неспецифична резистентност като цяло.
В съвременните лабораторни условия многостепенният принцип за оценка на имунологичния статус включва определянето на субпопулацията на лимфоцити, кръвни имуноглобулини. При оценката на индикаторите трябва да се има предвид, че за HIV инфекцията се характеризира с намаляване на съотношението на CD4 / CD8 Т клетки по-малко от 1. CD4 / CD8 индексът 1.5-2.5 показва норфното състояние, повече от 2.5 - показва Хиперактивност, по-малко 1.0 - показва имунодефицит. Също така, съотношението CD4 / CD8 може да бъде по-малко от 1 с тежък поток от възпалителния процес.
От принципно значение, това съотношение при оценката на имунната система при пациенти със СПИН, тъй като ХИВ селективно засяга и унищожава CD4 лимфоцитите, в резултат на което съотношението CD4 / CD8 се намалява до стойности, значително по-малко от 1.
Оценката на имунологичния статус се основава и на откриване на общи или "груби" дефекти в системата на клетъчен и хуморален имунитет: хипергамаглобулинемия (увеличаване на концентрацията на IgA, IgM, IgG) или хипогаммаглобулинемия в крайния етап; увеличаване на концентрацията на циркулиращи имунни комплекси; намалени продукти на цитокин; Отслабване на отговора на лимфоцитите върху антигени и митоген.
Нарушаването на съотношението на популациите в общия куршум в лимфоцитите е характерен за недостатъчността на хуморалния имунитет. Въпреки това, тези промени са неспецифицирани за HIV инфекция и могат да възникнат с други заболявания. В цялостна оценка на редица други лабораторни показатели трябва да се има предвид, че за инфекцията HIV също е характерна за: анемия, лимфа и левкопения, тромбоцитопения, увеличавайки нивото на β2-микроглобулин и С-реактивен протеин, увеличавайки дейност на трансаминаза в серума.
Клинична и лабораторна диагностика на HIV инфекцията Има три посоки:
- Установяване на факта, заразено с ХИВ, диагностика на HIV инфекция.
- Определяне на етапа на клиничния ход на заболяването и идентифициране на вторични заболявания.
- Прогноза за прогресирането на клиничния ход на заболяването, лабораторния контрол върху ефективността на лечението и страничните ефекти на антиретровирусни лекарства.
1. Създаване на инфекция на ХИВ, диагностика на HIV инфекция
Следните специфични показатели се използват за определяне на HIV инфекцията: антитела към ХИВ, ХИВ антигени, HIV РНК и ДНК доставчици. Антителата за ХИВ се определят чрез метода на имуноанализния анализ (ELISA) или имуноблотинг, което по същество е вид ELISA. Антигените (протеини) HIV се определят от метода на IFA. С помощта на молекулярни генетични методи на полимеразна верижна реакция (PNRR) и BDNA може да се определи РНК на HIV и ДНК на провируса. Използването на допълнителни методи за хибридизация на нуклеинови киселини със специфични ДНК сонди позволява да се тества специфичността на ДНК последователностите, получени по време на PCR. Чувствителността на PCR е откриването на вирусни гени в една от петте хиляди клетки.
В първичната инфекция се наблюдава следната динамика на HIV маркерите в заразените кръв. През първия месец, в резултат на активирането на репликативния процес, настъпва рязко увеличаване на вирусния товар (съдържание на HIV РНК в плазмата), след това поради разпространението на вируса и масовата инфекция на целевите клетки в кръвта и. \\ T лимфните възли, става възможно да се определи провиретната ДНК. Първичната диагностична стойност е фактът, че откриването на временна ДНК, интегрирана в генома на целевия клетки.
Вирусният товар отразява интензивността на репликативния процес в заразените клетки. През периода на първична инфекция нивото на вирусно натоварване е различно при заразяване с различни подтипове на ХИВ, но динамиката на промените му е приблизително еднаква. Така че, когато инфекцията с подтипа, например, ако през първия месец след инфекцията, стойността на вирусния товар е 700 копия / ml, след това в 2-ри месец има намаление до 600, в 3-ти - до 100 , през 4 - до 50 копия / ml. Такава динамика се наблюдава на фона на увеличаването на кръвното съдържание на специфични антитела към ХИВ. Съдържанието на привързаната ДНК в кръвните мононуклеи HIV-инфектира се характеризира с относителна постоянство през първите 6 месеца с малки колебания в някои подтипове. Така, RNA и ДНК натоварванията не са идентични.
В инкубационния етап за известно време специфичните антитела към ХИВ в количество, достатъчно за определяне на съществуващите лабораторни методи. Преди регистрация на антителата се наблюдава много кратко време в кръвта на NE протеин, който потиска репликативния процес и структурния протеин P24. Antigen P24 може да бъде открит в кръвта чрез неуспешен анализ, който вече е след 1-2 педал след инфекция и се определя до 8-та седмица, тогава съдържанието му намалява рязко. Освен това, в клиничния ход на HIV инфекцията, се отбелязва второто повдигане на кръвното съдържание на протеин P24. Той пада за периода на формиране на СПИН. Изчезването на кръвта на свободното (не обвързано с антитела) ядро \u200b\u200bпротеини P24 и появата на специфични антитела към HIV протеини бележи появата на сероконверсия (фиг. 9.6).
Вирнията и антигенемия причиняват образуването на специфични IgM-класови антитела (анти-P24, анти-GR41, анти-GR120, анти-GR160). Свободните IgM и IgG IgG антитела към P24 протеина могат да се появят, като се започне от втората седмица, тяхното съдържание се повишава в рамките на 2-4 седмици, достигайки определено ниво, на което се съхранява в продължение на месеци (IgM) и години (IgG) (фиг. 9.7).
Появата на цялостна сероконверсия, когато в периферната кръв се записва високо ниво на антитела на клас на Spex IgG към структурните протеини на HIV P24, GP41, GP120, GR160, значително улеснява диагностиката на HIV инфекцията. ХИВ антитела се появяват в 90-95% заразени в продължение на 3 месеца след инфекцията, в 5-9% - в периода от 3 до 6 месеца от момента на инфекцията и в 0.5-1% в по-късните крайни срокове.
Въпреки факта, че антителата към ХИВ се появяват последно, основният лабораторен диагностичен индикатор към настоящето е откриването на специфични антитела чрез метода на ELISA и имуноблотирането.
Данните, представени в таблица 9.2 [Show] и 9.3. [Show] Това ясно демонстрира високата чувствителност на съвременните имуноферапионни тестови системи при определяне на антителата към ХИВ, по-високи от чувствителността на имуноблотирането. В някои случаи, когато получавате първичен положителен резултат в ELISA, е възможно да се потвърди в имуноблотинг само след 2-3 седмици.
| Таблица 9.3. Пример за наблюдение на сероконверсия (N.Fleury, 2000) | |||||
| Момент на определяне | Антиген p24, pg / ml | Антитела за HIV протеини | |||
| ELISA, OP / OP KR ** | Имуноблотинг | ||||
| ХИВ. Дуо. | Ген. | Униформа | |||
| Пациент 1. | |||||
| Първичен | 17 | 1,24 | по-малко от 1. | по-малко от 1. | * |
| След 4 дни | 67 | 1,36 | 1,85 | по-малко от 1. | - |
| За 7 дни | * | 2,33 | 6,84 | по-малко от 1. | - |
| След 2 дни | * | 6,77 | 15,0 | 4,8 | gP160. |
| Пациент 2. | |||||
| Първичен | 400 | 13 | по-малко от 1. | по-малко от 1. | - |
| За 5 дни | 450 | 18 | 2,11 | по-малко от 1. | - |
| След 10 дни | * | 33 | 12,19 | 2,9 | gP160. |
| Забележка: * - Дефиницията не е извършена ** - съотношението на оптичната плътност на тестовата проба от серум към критична (праг) стойност на оптичната плътност |
|||||
При изследване на пациенти с HIV инфекция (HIV-инфектирана), използвайки тестови системи на имуноблонинг водещи фирми във всички случаи, антителата се откриват в GP160 и P24 / 25, към други протеини на антитела, в 38.8-93.3% от случаите (таблица. 9.4. [Show] ).
Трудностите при откриването на антитела при пациенти с HIV инфекция могат да възникнат по време на периоди на масивна виремия и антигенетност, когато наличните специфични антитела в кръвта са свързани с вирусни частици, а репликативният процес е пред производството на нови антивирусни антитела. Такава ситуация може да възникне и изчезне по време на инфекциозния процес.
При пациенти с първоначално отслабена имунна система, виремия и антигенетност изглеждат по-рано и се съхраняват на високо ниво преди заболяването. При такива пациенти има ниско съдържание на свободни антитела към ХИВ, поради две причини - недостатъчни продукти от антитела в лимфоцити и свързване на антитяло чрез вириони и разтворими HIV протеини, следователно, системи за изпитване с повишена чувствителност или модификация на методите за анализ на методите за анализ са необходими, осигуряващи фазата на освобождаване на антитела от имунните комплекси.
Най-често намаляването на съдържанието на антитела към ХИВ по посочените причини се осъществява в крайния етап, когато антителата към ХИВ в серумната куровини не могат да бъдат заснети с помощта на методите на имунумимален анализ, нито метода на imumumolet (Western blot). В допълнение към появата на специфични антитела към HIV, имунният отговор през първите 4 месеца се характеризира с намаляване на кръвното съдържание на заразено CD4 + - и увеличаване на CD8 + -Cells. След това съдържанието на CD4 и CD8 рецептори, носещи клетки, се стабилизира и остава непроменено за известно време. Увеличаването на съдържанието на CD8 лимфоцитите е защитна реакция, защото Клетъчната зависимостта на клетката се осъществява с CD8 + -LIMphocytes, които са насочени към унищожаване на HPV-инфектирани клетки. Първоначално цитотоксичните лимфоцити (CTLs) реагират на регулаторния протеин на NEF вируса, който играе важна роля за намаляване на вирусния (РНК) натоварване в плазмата на HIV-инфектираните през първите месеци. След това се образува CTL отговор и на други, вкл. Структурни, ХИВ протеини, получени в резултат на 12 месеца след инфекцията, зипотоксичният ефект се увеличава значително.
Лабораторни диагностични диаграми на HIV инфекцията
Като се има предвид динамиката на специфичните маркери за инфекция на ХИВ на практика, е препоръчително да се придържат към следните лабораторни диагностични схеми при възрастни (фиг. 9.8-9.10).
Схемите отразяват трите основни фази на първичната лабораторна диагностика на HIV инфекцията:
- Скрининг.
- Справка.
- Експерт.
Необходимостта от няколко етапа на лабораторната диагностика се дължи предимно на икономически съображения. Например, цената на имуноблотичния метод с помощта на вътрешни тестови системи на едно експертно проучване е до 40 долара, скринингът (IFA метод) е около 0.2, т.е. съотношението е 1: 200.
На първия етап (фиг. 9.8), изследваната се определя от определението за HIV антитела с единична система за изпитване на имуноанализ, предназначена за откриване на антитела към двата вида вирус - HIV-1 и HIV-2.
Производителите в предложените тестови системи, вирусни лизати, рекомбинантни протеини, синтетични пептиди се използват като антигенна основа. Всеки от изброените носители на антигенни детерминанти HIV има свои собствени предимства и недостатъци. Следователно, при избора на тестови системи с приблизително еднаква цена, трябва да предпочитате набори с най-голяма чувствителност (за предпочитане 100%). Сред тестовите системи със същата цена и чувствителност е препоръчително да се спре да има максимална специфичност.
Въз основа на вируса лизат, първите тестови системи бяха създадени за лабораторната диагностика на HIV инфекцията. През 80-те години тези тестови системи се характеризират с чувствителност по-малка от 100% и ниската специфичност, проявена с голямо количество (до 60%) от фалшиви положителни резултати.
При образуването на вириона в културата на лимфоцитите, неговата черупка се създава от външната мембрана и следователно съдържа антигени на основната хистосъвместимост I и II класове. Това обстоятелство определя фалшивите положителни реакции, ако антителата към алохената хистосъвместимост присъстват в кръвта на пациентите.
По-късно, за да се получи вирус, беше предложено да се използва културата на макрофаги, при която вирусните частици се образуват главно вътреклетъчно, като не са от външната мембрана на клетката, но от мембраните на ендоплазмения ретикулум. Такава технология намалява броя на фалшивите положителни резултати.
Някои от най-добрите в най-важните характеристики - чувствителност и специфичност - ензимите се разпознават като комбинация от пречистен вирусен лизат със синтетични пептиди, които представляват най-антигенните сегменти на вирусните протеини или рекомбинантни протеини.
Чувствителността на тестовата система също зависи от характеристиките на други компоненти на множествата. По този начин тестовите системи, които използват конюгати, които разпознават антитела не само клас IgG, но и IgM, и IgA, ви позволяват да идентифицирате по-ранна фаза на сероконверсия. Използването на тестови системи е обещаващо, с което можете едновременно да определите антивирусните антитела и антиген P24, което прави дори по-ранната лабораторна диагностика на HIV инфекцията.
Първичният положителен резултат трябва да се проверява чрез преразглеждане на пробата в една и съща тестова система, но за предпочитане друга серия и друг лабораторен помощник. Ако по време на преразглеждането е получено отрицателен резултат, изследването се извършва за трети път.
След потвърждаване на положителния резултат е желателно да се преинсталирате кръвта и да го изследвате на HIV антитела като първични. Повтарящата се кръв ви позволява да предотвратите неточността на етикетирането на тръбите и попълване на формите на указанията.
Серопозитният кръвен серопогенен етап се изпраща към референтни изследвания, извършвани с помощта на две или три високо специфични IFA тестови системи. В случай на две положителни резултати, експертно проучване се извършва чрез имуноблотиране.
Приложение в референтната диагностика на имуноопимен тестови системи, с които можете да разграничите специфични антитела към HIV-1 и HIV-2, улеснява по-нататъшната работа и ви позволява да проучите положителна проба на експертен етап веднага, като използвате подходящото имуноблотиране (HIV-1 или HIV-2).
Лабораторното експертно мнение за инфекцията HIV се извършва само въз основа на положителния резултат от имуноблотирането (Western blot). При извършване на експертна диагностика е необходимо да се използва номенклатурата на гените на ген и HIV, предложени през 1990 г. (Таблица 9.5 [Show] ).
Специфичността на имуноблотните ленти трябва да се оценява много внимателно и внимателно да се използват резултатите от изпитването серум (положителни и отрицателни), които се извършват паралелно с изследването на експерименталните проби и пробата от имуноблот с обозначението на HIV протеините (прикрепен от производителя към тестовата система). Тълкуването на получените резултати следва да се извършва съгласно инструкциите, свързани с тестовата система. По правило, критерият за позитивност е задължителното присъствие на антитела към два протеина (предшественик, външен или трансмембран), кодиран от ген на ENV, и евентуалното присъствие на антитела към продуктите на два други структурни HIV гени - GAG и POL (Таблица 9.6. [Show] ).
| Таблица 9.6. Критерии за тълкуване на имуноблотизиращите резултати за HIV-1 и HIV-2 (кой, 1990) | |||
| В резултат | HIV-1. | HIV-2. | |
| Положителен | +/- лента Pol. +/- Band Gag. | 2 ивици (предшественик, външен GP или трансмембран) +/- лента Pol. +/- Band Gag. |
|
| Отрицателен | Няма HIV-1 специфични щрихи | Липсващи HIV-2 специфични ленти | |
| Несигурен | Други профили, които не се считат за положителни или отрицателни | ||
В случай на съмнителен резултат е необходимо да се ползват списък на препоръките за окончателното изясняване на резултатите от имуноблотирането (Таблица 9.7 [Show] ).
| Таблица 9.7. Препоръки за окончателното изясняване на несигурните резултати от имуноблат (СЗО 1990 г.) | |
| Наличието на ленти, съответстващи на HIV протеини | Интерпретация на резултата, допълнителни действия |
| HIV-1. | |
| Само P17. | |
| Само P24 и GP160 | Така че в началото на сероконверсия може да възникне необичайна картина. Трябва да се извърши незабавно преразглеждане на пробата. Ако се получи същия профил, е необходимо след 2 седмици след приемането на първата проба, за да вземете втора проба за тестване в имуноблотинг |
| Други профили | Тези профили (GAG и / или ROL без ENV) могат да показват сероконверсионни или не-комерски реакции |
| HIV-2. | |
| Само P16. | Могат да бъдат класифицирани като отрицателни, допълнителни дефиниции не изискват |
| Обръщам се в присъствието или отсъствието на GAG / ROL | Тя трябва да се проверява отново една и съща проба, но използвайки друга серия реагенти |
| Само P24 или GP140 | Този необичаен профил може да се появи в началото на сероконверсия. Трябва да се извърши незабавно преразглеждане на пробата. Ако се получи същия профил, 2 седмици след приема на 1-ва проба, е необходимо да се вземе втора проба за тестване в имуноблотинг |
| Други профили | Тези профили (GAG и / или ROL без ENV) могат да показват сероконверсия или неспецифични реакции. |
Относно препоръките на руския научен и методологически център за превенция и контрол на СПИН, резултатът е положителен в присъствието на антитела най-малко един от GP41, GP120 протеини в комбинация с антитела към други специфични протеини на HIV-1 или без антитела. Тези препоръки са направени на основата на опита на работа със серуми на деца от болничните огнища, които често са дефинирали антитела само за една от протеините на вирусната обвивка.
Основната част от първичните изследвани серопозитивни пациенти се отнася до фазата на персистираща генерализирана лимфаденопатия (PGL) или към асимптоматичната фаза. Следователно, при имуноблоз (нитроцелулозната лента, върху която се определя HIV протеини, върху правило, следната комбинация от антитела към HIV-1: антитела към протеините на обвивката GP160, GP120 и GP41, кодирани от генома на ENV, в комбинация При антитела към сърцевините P24 (протеин нуклеокапсид, кодиран от GAG генома) и р31 / 34 (ендонуклеаз, кодиран от генома на Pol).
Положителни реакции само с GAG и / или RL протеини могат да се появят в случай на ранна фаза на сероконверсия, както и да показват инфекция, причинена от HIV-2 или неспецифична реакция.
В случай на получаване на съмнителен резултат, използването на различни методологически техники може да бъде изяснено чрез факта на HIV инфекцията.
В зависимост от техническите възможности (наличието на диагностични комплекти и реагенти, оборудването на специално оборудване и обучение на персонала), експертна лаборатория провежда допълнителни диагностични изследвания (фиг. 9.10).
В някои случаи е препоръчително да се използват молекулни генетични методи, което позволява да се определят генетичните последователности на HIV в серум, в кръвни лимфоцити или лимфни възли. Проверка на спецификата на ДНК последователностите, получени в резултат на PCR, може да се извърши чрез хибридизация на нуклеинови киселини със специфични ДНК сонди.
Методите на радиоимунопреципитация (RIP) и индиректната имунофлуоресценция (IFL) могат също да бъдат използвани за окончателна проверка на серумите със съмнителни резултати в имуноблотинг.
Откриването на HIV РНК в кръвната плазма не е висококачествен или количествен метод не е значителен за диагностицирането на HIV инфекцията. Този резултат трябва да бъде потвърден чрез стандартни методи, като имуноблотинг, след 2-4 месеца след получаване на първичен съмнителен или отрицателен отговор.
Освобождаването на ХИВ в клетъчната култура е истината в последната инстанция. Въпреки това, методът е сложен, пътища и се извършва само в специално оборудвани изследователски лаборатории.
Съдържанието на CD4 +-клетки в кръвта е неспецифичен индикатор, но в противоречиви случаи (IFA + ", имуноблот" - ", наличието на клинични признаци на HIV инфекция / СПИН) може да се използва като ръководство за приемането на експертно решение. Ако лабораторията има способността да извършва само имуноблотиране, тогава трябва да се спазват препоръките, посочени в таблицата. 9.7 и на фиг. 9.9.
Лица, с експертен тест на серум, чиито съмнителни (несигурни) резултати, с изключение на случаите на откриване на антитела само до Р17 (HIV-1) или P16 (HIV-2), трябва да бъдат повторно тестване в продължение на 6 месеца (след 3 месеца ). В случай на истинска HIV инфекция след 3-6 месеца, "положителният" говорител се наблюдава в спектъра на антитела - допълнително образуване на антитела към други вирусни протеини. Лалната реакция се характеризира чрез запазване за дълго време на съмнителен модел на имунно попиване или изчезването на подозрителни ивици. Ако, след посочения период, резултатите от повторното имуноблотинг ще бъдат отрицателни или остават съмнителни, след това при липса на рискови фактори, клинични симптоми или други фактори, свързани с HIV инфекция, човек може да се счита за серонегативен за антитела към HIV-1 и HIV-2.
False-положителни резултати, дължащи се на кръвното съдържание на антитела към алоантигенната хистосъвместимост, която е част от HIV обвивката, се проявява върху имуноблота под формата на лента на ниво GP41 и GP31. Причините за други неспецифични реакции (например до P24, често срещани при хора с автоимунни процеси) все още не са изяснени.
Подобряването на производствената технология на имунодермена тестовите системи направи възможно постигане на висока чувствителност - до 99.99%, докато чувствителността на имуноблотинга метода е 97%. Следователно, отрицателният възпиращ в имуноблотинг при положителни резултати в IFA може да посочи първоначалния период на сероконверсия, характеризиращ се с ниско ниво на специфични антитела. Следователно е необходимо да се повтори проучването след 1.5-2 месеца., Т.е. този период, необходим за завършване на сероконверсия, постигане на концентрацията на специфични антитела в кръвта, достатъчна за откриване на метода на имуноблотиране.
Положителен резултат (резултати) на проучването на референтната или само скринингов етап на лабораторната диагностика на HIV инфекцията, т.е. положителен резултат в не-имуно-имуно-имуно-имунно тестова система, в резултат на това, не е потвърдено от експертни методи, интерпретирано като присъствие в кръвта на антителата на изследваните кръстосани реакции. Под кръстосаната реакция предполага свързването на неспецифични зони в протеини или HIV пептиди, използвани като антигенна основа в тестовата система, в която е получен положителен резултат.
При липса на имунодефицит и клинични признаци на HIV инфекция, такива лица се считат за серонегативни по отношение на HIV антитела и трябва да бъдат преустановени.
Крайната диагностика на HIV инфекциозната се създава само въз основа на всички клинични, епидемиологични и лабораторни данни. Информирайте диагнозата на пациента на HIV инфекцията, която се занимава само с лекаря.
Основният метод за потвърждаване (експертна) лабораторна диагностика на HIV инфекцията е имуноблотинг. Въпреки това, като се има предвид по-ниската му чувствителност в сравнение с МФА, са предложени редица изследователи да се използва комбинация от няколко тестови системи за окончателното определяне на наличието на специфични антитела към ХИВ. Например, G. Van der Groen et al. Предлагат алтернативно имуноблотиране. Метод за проверка на положителните резултати на етапа на скрининг на лабораторната диагностика на HIV инфекцията. Тя включва проучването на материала паралелно в три тестови системи, които се основават на различни методи за откриване на специфични антитела към HIV (няколко варианта на ЕИФ, реакцията на аглутинация), използвайки антиген от различен характер. Авторите успяха да изберат такива комбинации от тестови системи, чието използване осигурява 100% чувствителност на N специфичност в сравнение с резултатите, получени при имуноблотинг.
Химитостта на този метод на експена е безспорно предимство, но липсата на информация, която по-специално вирусните протеини имат антитела в кръвта на пациента, не позволява да се оцени специфичността на реакцията във всеки отделен случай, както и път Промени в спектъра на антитела в ранен етап на сероконверсия.
Лабораторната диагностика на HIV инфекция при деца, родени от HIV-заразените майки, има свои характеристики. От момента на раждане за дълго време (до 15 месеца) в кръвта на такива деца могат да циркулират майчинските антитела на ХИВ. Само имуноглобулините на IgG класа са проникнали през плацентарната бариера, така че IgM и IgA-специфичните NMMMPoglobulins на IgM и IgA класовете позволяват да се потвърди инфекцията, но отрицателният резултат не може да покаже липсата на HIV.
При деца на възраст под 1 месец репликацията на HPV все още не е, а единственият метод за проверка е PCR. Определянето на антиген P24 при деца на възраст над 1 месец също е метод за потвърждение.
Липсата на антитела към ХИВ при новородените не означава, че вирусът не е проникнат през плацентарната бариера. Във всеки случай децата на заразените с ХИВ майки са обект на лабораторни и диагностични проучвания и наблюдение в рамките на 36 месеца от раждането.
Резултатите от лабораторните проучвания върху HIV маркерите изискват предпазливо тълкуване и трябва да се разглеждат само в съвкупност с данните за епидемиологични и клинични изследвания. От друга страна, трябва да се отбележи, че въпреки високата чувствителност на съвременните методи, отрицателните резултати от изследванията не могат напълно да премахнат наличието на HIV инфекция. Следователно, отрицателният резултат от изследването, например чрез имуноблотиране, може да бъде формулирано само като липса на специфични антитела към HIV-1 и HIV-2.
Диагностика на HIV инфекция при серонегативни пациенти
Всяка година се подобрява качеството на тестовите системи, използвани в лабораторната диагностика на инфекцията за ХИВ, тяхната чувствителност се увеличава. Въпреки това, високата вариабилност на ХИВ може да доведе до нови видове, антитела, към които може да не се признава от съществуващите тестови системи. В допълнение, има случаи на атипична хуморална реакция на имунната система на организма на гостоприемника към вируса. Така, че през 1996 г. съобщава за двама пациенти със СПИН, които през преди няколко години не са идентифицирани в кръвта на специфични антитела, диагнозата се прави въз основа на клинични данни и се потвърждава от лаборатория само за освобождаване на HPV- 1 в клетъчна култура. В такива случаи е необходимо да се използват препоръки, според които клиничната диагностика на HIV инфекцията при възрастни и деца е възможна в присъствието на един от 12 болести за индикатори на СПИН:
- кандидоза на хранопровода, трахеята, бронхите, белите дробове;
- екстравална криптококоза;
- cryptosporidia с диария повече от един месец;
- продукция на цитомегаловирус на всеки орган (с изключение на дроб, далак и лимфни възли при пациент по-стар от 1 месец):
- инфекцията, причинена от вирус на обикновена херпес, е постоянна повече от 1 месец на пациент по-стар от 1 месец;
- мозъчен лимфом при пациент под 60 години;
- лимфоцитна интерстициална пневмония при дете под 13 години;
- дисимерна инфекция, причинена от бактериите на микробактериалния авиум интрацелуларе или група M.Kansassii;
- пневматична пневмония;
- прогресивна многостепенна левцефалопатия;
- токсоплазмоза на централната нервна система при пациенти на възраст над 1 месец.
Наличието на едно от тези заболявания ви позволява да диагностицирате HIV инфекция при липса на лабораторно изследване на кръв за наличие на антитела към ХИВ или дори при получаване на серонегативен резултат.
Източник: Медицинска лабораторна диагностика, програми и алгоритми. Ед. проф. Karpischenko a.i., Санкт Петербург, Менедика, 2001
Диагнозата на HIV инфекцията включва два етапа: създаването на действителен факт на инфекция с HIV инфекция и определяне на етапа на заболяването. Определянето на етапа непреодолимо следва и намирането на естеството на хода на заболяването, а след това и формирането на прогнозата на този пациент, както и избор на тактика за лечение.
Както знаете, диагнозата на всяка инфекциозна болест се основава на сравнение на епидемиологични, клинични и лабораторни данни, а преувеличението на стойността на една от групите от тези данни може да доведе до диагностични грешки.
Епидемиологични критерии за HIV инфекция .
Първият етап от диагностиката на HIV инфекцията е да се събере епидемиологична история и други епидемиологични данни за изследваните пациенти. Липсата на епидемиологични данни може значително да възпрепятства диагностиката на HIV инфекцията и да възпрепятства антиепидемичните дейности.
Епидемиологичните критерии понякога могат да бъдат решаващи във формулирането на диагностицирането на HIV инфекцията, но може да има и спомагателна стойност. Критерият за високата вероятност за инфекция е откриването на лицето, изследваните такива фактори за риска от инфекция, като преливането на донорната кръв, получена от лицето, заразено с ХИВ, раждането на изследваната жена с HIV-инфектирано дете. Вероятността за инфекция е голяма в случай на раждане на HIV-инфектирана майка, сексуален контакт с лице, заразено с ХИВ, съвместно парентерално приемане на лекарство с лице, заразено с ХИВ. Известен риск от инфекция се открива с надеждни парентерални интервенции, които се извършват по инструменти, вероятно замърсени HIV (т.е. във вътрешните болници и подобни огнища на HIV инфекцията с парентерален чрез прехвърляне на ХИВ).
На забележим риск от инфекция може да се обсъди в случаите, когато изследваните отчитат сексуалните отношения или парентерално лечение на наркотици в области, в които ХИВ е разпределен значително между тази група на населението, за което принадлежи субектът.
В същото време сексуалните комуникации и приема на наркотици в райони с ниско разпространение на HIV инфекция не изключват HIV инфекцията.
Липса на надеждни рискови фактори за HIV инфекцията може да постави под въпрос лабораторните изследвания. В такива случаи се препоръчва да се повтарят лабораторните изследвания.
Клинични критерии ХИВ инфекция.
Ранната диагностика на HIV инфекцията осигурява своевременността на терапията на пациента и внедряването на превантивни мерки във фокуса, предупреждавайки непреднамереното предаване на вируса от заразена със здрав човек. И накрая, ранната диагностика позволява своевременно осъществяване на семинара, психологическа помощ, социална рехабилитация. Първите успехи в терапията на пациентите позволяват ранна диагноза да удължи значително живота на пациентите и дори надежда за лечение.
Сложността на ранната диагностика, основана на клиничната картина, е неспецифициран, полиморфизъм на симптомите в етап II, който вече не се споменава липсата на клиника в етап I. въпреки това във всички случаи на немотивираната умора, присъствието на нощни изпотявания, главоболие, Особено на фона на краткотрайна треска (3-10 дни) с температура от 38-38.50 ° С, придружена от тонзилит, удължен диария синдром, загуба на тегло за кратко време, тя е преди всичко необходимо за изключване на HIV инфекцията. Диагнозата в този период помага за идентифицирането на различни кожни обриви (петна, папули, розали, оръжия) или фурункулоза при обективно изследване. Наличието на лимфаденопатия, дори и в случаите на увеличаване на една група лимфни възли и все повече, с генерирана мнозинство, с по-голям дял от вероятността позволява да се подозира клинично HIV инфекция. За болестта, тя е особено характерна за увеличаване на задната, подмагняла, свръхпроводяща, аксиларни и лакътни лимфни възли. Като правило те увеличават размера до 2-5 см в диаметър, безболезнена, гъста еластична консистенция, понякога се сливат в конгломерат. Много е характерно за HIV инфекцията увеличение на повече от един възел, повече от една група (с изключение на ингвиналите), което е повече от 3 месеца.
Често в ранната фаза на заболяването, наличието на психо-неврологични симптоми: чувство за безпокойство, депресия, солена походка, намаляване на зрителната острота, конвулсивни припадъци с признаци на поражението на психо-емоционалната сфера (нарушение на паметта \\ t , забрава, неадекватност на поведението, тъпични емоции). Към най-характерните черти ранният етап на HIV инфекцията включва:
1. Намаляване на телесното тегло по-малко от 10%;
2. Промени върху кожата и лигавиците (себореален дерматит, фоликулит, пруриго, псориазис, гъбични мига на нокти, повтарящи се язви в устната кухина, некротичен гингивит);
3 . Херпес приюти на лица под 50-годишна възраст;
4. Повтарящи се инфекции на горните дихателни пътища;
В междинен етап Болестите, характеризиращи се с клиниката на внедрената суперинфекция, които се образуват в резултат на имунна недостатъчност, е най-характерната:
1 . Прогресивно намаляване на телесното тегло над 10%;
2 . Диария за неясни гени, продължавайки над 1 месец.
3 . Кандидоза на устната кухина;
4 . Левкоплакия;
5. Белодробна туберкулоза;
6. Периферна невропатия;
7. Локализирани форми на саркома Капос;
8. Разпространение на херпес;
9. Тежка, повтаряща се бактериална инфекция (пневмония, синузит, пиомиоза).
За късен етапДа се \u200b\u200bдиагностицира HIV инфекция или, във всеки случай, за извършване на диференциална диагностика включва:
1. Пневматична пневмония;
2 . Токсоплазмоза;
3. Криптококоза;
4. CMV инфекция;
5. Прост херпес;
6. Прогресивна многостепенна левкоензелопатия;
7. Хистоплазмоза;
8. Канудозен езофагит;
9. Mac-инфекция;
10. Солинелезе септицемия;
11. Екстравална туберкулоза;
12. Лимфом, саркома капос;
13. Кахексия;
14. ХИВ-енцефалопатия.
През 1988 г., който предложи да проведе клинична диагностика оценка на блестящите симптомиСъществуващо в предполагаемата за инфекция на ХИВ на пациента:
Постоянство обобщена лимфаденопатия 0
Промени на кожата и лигавиците 1
Намаляване на телесната маса 1
Изразена умора 1.
Обикновено херпес 2.
Диария за повече от 1 месец. четири
Треска с продължителност над 1 месец. четири
Намаляване на телесното тегло над 10% 4
Белодробна туберкулоза 5.
Повтаряща се бактериална инфекция 5
Левкоплакия перорална кухина 5
Стомацит, устна чаша 5
Локализиран Саркома Капоши 8
Кахексия 12.
В същото време количеството точки от 0 до 3 се оценява като вероятност за HIV инфекция много малка, 4 -11 пункта - болестта вероятно е 12 и е много вероятно.
Като цяло клиничната диагноза на HIV инфекцията е преди всичко диагнозата на спектъра на свързаната с СПИН патология при пациент с вторична имунна недостатъчност. Тъй като HIV-индикаторните заболявания включват 23 нозологични форми, синдромният подход към диагнозата е най-подходящ. Той почти винаги е взимал пациент с обща интоксикация (немотивирана слабост, летаргия, бърза умора), развиваща се на фона на дълъг субфобрист или треска от неясен генезис, по-често през нощта и сутрин, придружен от изобилие. Постоянен синдром на немотивираната обобщена периферна лимфаденопатия, която е 20%, придружена от хепато спленомегалия с различна степен на тежест. Един от водещите синдроми на болестите е синдромът на бронхо-белодробната патология, как дълбоките лезии на белодробната тъкан под формата на пневмония се развиват във ферми на заболяването, за пневмоцистоза се развива на фона на дълбока имунна недостатъчност. Но с продължителност над 1 месец, синдромът на немотивираната диария се отнася до ранно появяване, характеризира се с резистентност към лекарствена терапия. Един от синдромите на HIV инфекцията е вълнообразната текуща артралгия на неясна етиология. Синдромът на лезиите и лигавиците също трябва да се припише на характерните прояви на заболяването, което се проявява чрез неспецифичен макуло-пръстен обрив, устойчив на терапия със стероиди с екзема, стафилококов импетиго. Дерматологичните прояви включват също повтарящи се гъбични (микиза, кандидоза, бактериални (фоликулити, фурункулоза, хидравлични), вирусни (херпес) лезии на кожата и лигавиците. Накрая, HIV инфекцията се характеризира с неоплазми, главно под формата на Caposhi и лимфом саркома , както и някои други видове тумори.
Наличието на пациент най-малко две клинични и две клинични и лабораторни (левдо-лек-неутропения, хипогаммлобулинемия) от горните симптоми позволява с висока степен на доверие да се диагностицира HIV инфекцията с висока степен на доверие. Но в същото време, в случай на идентифициране на две от тях много често намерени при пациенти със синдроми, като треска и лимфаденопатия, която остава за един месец и повече, устойчива немотивирана диария, намаление на телесното тегло с повече от това 10% или изобилни нощни изпотявания дават основания за определяне на диагноза и внимателни лабораторни изследвания.
В етапи 2а.заболяването може да бъде подозирано само чрез симптоматизиране на генерализирана лимфаденопатия при пациент от рискова група или в присъствието на епиданамнес.
В етапи 2б. (ранно или слабо изразходвано) соматично благополучие продължава, нормална дейност. Лезиите на кожата и лигавиците не са важни, рецидивиращите инфекции на дихателните пътища не се генерират, загубата на телесно тегло не надвишава 10%.
Според препоръките на СЗО, надеждна клинична диагноза на HIV инфекция при възрастни и деца са възможни в присъствието на един от 12-те заболявания на СПИН: 1) на каудидозата на хранопровода, трахеята, бронхите, белите дробове; 2) екстрагалска криптококоза; 3) Cryptosporidia с диария повече от един месец; 4) поражение на цитомегаловирус на всеки орган (с изключение и освен черния дроб, далака и лимфните възли при пациент над 1 месец); 5) инфекция, причинена от прост вирус на херпес, постоянни повече от 1 месец на пациент по-стар от 1 месец; 6) Саркома на Капоши при пациент под 60 години; 7) лимфом на мозъка при пациент под 60 години; 8) лимфоцитна интерстициална пневмония при дете до 13 години, 9) разпространява инфекция, причинена от бактериите на микробактериалния авиум интрацелуларе или група M.Kansassii; 10) пневматична пневмония; 11) прогресивна многостепенна лейкроентефалофалопатия; 12) Токсоплазмоза на централната нервна система при пациенти на възраст над 1 месец. Наличието на една от тези заболявания позволява да се диагностицира HIV инфекция при липса на серологичен имуноферментен тест за кръв или дори при получаване на серонегативен резултат.
Диференциализмът на фазите на заболяването не е труден, т.е. Разграничаване на етапите на клинични критерии. Според специалистите по CDC (САЩ) най-обективният критерий е броят на T-помощниците, а не клиничните прояви, защото много от тези държави често се срещат при хора, които не са заразени с ХИВ. През 1991 г. Центърът установи, че диагнозата на СПИН може да бъде в случаите, ако: а) в заразения е един от 23-те страни, свързани със СПИН, или б) е заразена с HIV и има по-малко от 200 CD4 + клетки / mm.
Лабораторни критерии за HIV инфекция.
Проучването на HIV инфекцията е основно подложено на:
2 . Лица с клиники на партньорски езофагит, бронхиални клонове и бели дробове, разпространена или екстрахираща кокцидомикоза, пневматична пневмония, криптококоза, криптоспоридиоза с инвентара диария над 1 месец, цитомегаловирус щети вътрешни органи, с изключение на черния дроб, далак, лимфни възли при пациенти на възраст над 6 месеца, cytmegalovirngo \\ t Ретинит със загуба на зрение, наименование с многостепенни язви с продължителност повече от 1 месец., Бронхит, пневмония или езофагит, повтарящ се херпес, актив или екстрапорестистична хистоплазза, белодробна туберкулоза или екстрапултурална, епорозиоза с диария продължителност над 1 месец , обща или екстрапулмонарна макфекция, прогресивна мултифокси леуобзалофалофалопатия, мозъчна токсоплазмоза, салинелезе септицемия, саркома капсис, лимфом, лимфоидна интерстициална пневмония (при деца) \\ t
В момента се използват различни методи за откриване на HIV, антиген и HIV гени, както и методи за откриване на антитела към ХИВ, се използват за лабораторна диагностика на HIV инфекцията. Всички тези методи имат различна ефективност, изискват различно оборудване и различно ниво на обучение на персонала. Резултатите от тези проучвания изискват компетентно тълкуване.
... диагнозата на всяка инфекциозна болест се основава на сравнение на епидемиологични, клинични и лабораторни данни, а преувеличението на стойността на една от тези групи данни може да доведе до диагностични грешки.
Диагностика на HIV инфекцията включва два етапа:
I. Сцена - установяване на факта на инфекция на HIV инфекция
;
II. Сцена - определяне на етапа на заболяването
.
Установяване на факта на инфекция с HIV инфекция
Създаването на действителния факт на инфекция с HIV инфекция (т.е. идентифицирането на HIV-инфектира) от своя страна включва и два етапа:
I Етап- свързан имуносорбентен анализ(ELISA): Методът IFA е скрининг (квалифициран) - подбор на предполагаемо заразени лица, т.е. неговата цел е да идентифицира подозрителни лица и да премислят здрави индивиди; ХИВ антитела откриват с други антитела към изкуствените антитела (антитела срещу други антитела). Тези "спомагателни" антитела ще бъдат ензим. Всички скрининг тестове трябва да бъдат силно чувствителни, за да не пропуснат пациента. Поради това тяхната специфичност не е много висока, т.е. ELISA може да даде положителен отговор ("вероятно болен") в неинфектирани хора (например при пациенти с автоимунни заболявания: ревматизъм, системен червен лупус и др.). Честотата на фалшивите положителни резултати при използване на различни тестови системи варира от 0.02 до 0.5%. Ако човешкият ELISA е дал положителен резултат, тогава трябва да се изследва фактът, че инфекцията за ХИВ трябва да бъде разгледана. При провеждане на ELISA в 3 - 5% от случаите са възможни фалшиви отрицателни резултати - ако инфекцията е настъпила сравнително наскоро и нивото на антитела е все още много ниско, или в крайния етап на заболяването, характеризиращ се с тежко увреждане на имунната система с дълбоко нарушение на процеса на антитялото. Следователно, в наличието на данни, свидетелстват за контакт с заразения HIV обикновено извършват многократни проучвания след 2 - 3 месеца.
Етап II. - имуноблотинг (в модификацията на Western blot, Western blot): Това е по-сложен метод и служи за потвърждаване на факта на инфекция. Този метод разкрива не-сложни антитела към HIV, но антитяло към отделни структурни протеини (P24, GP120, GP41 и др.). Резултатите от имуноблотирането се считат за положителни, ако антителата са открити най-малко до три протеини, единият от които е кодиран от гените на ENV, а другият - гените на GAG, третия - Pol гени. Ако антителата се открият в един или два протеина, резултатът се счита за съмнително и изисква потвърждение. В повечето лаборатории, диагнозата на HIV инфекцията се повишава, ако антителата се разкриват едновременно към протеините P24, P31, GP4L и GPL20 / GP160. Същността на метода: вирусът се разрушава върху компонентите (антигени), които се състоят от йонизирани аминокиселинни остатъци и следователно всички компоненти имат зората се различават един от друг; След това, с помощта на електрофореза (електрически ток), антигените се разпределят на повърхността на лентата - ако има антитела към ХИВ в тестовия серум, те ще взаимодействат с всички групи антигени и това може да бъде разкрито.
Трябва да се помниТова, че HIV антителата се появяват в 90-95% заразени в рамките на 3 месеца след инфекцията, в 5-9% от заразените антитела към HIV се появяват след 6 месеца и в 0.5-1% от заразените антитела към ХИВ се появяват в по-късни дати. В етапа на СПИН, количеството антитела може да намалее, до пълно изчезване.
В имунологията има такова нещо като "Серологичен прозорец" - периода от инфекция преди появата на такъв брой антитела, които могат да бъдат разкрити. За ХИВ този период обикновено продължава от 2 до 12 седмици, в редки случаи по-дълъг. По време на периода на "серологичния прозорец" на анализи, човек е здрав, но всъщност е заразено ХИВ. Установено е, че ДНК ХИВ може да бъде в човешкия геном най-малко три години без признаци на активност и антитела към HIV (HIV-инфекциозни маркери) не се появяват.
В този период ("серологичен прозорец") за идентифициране на HIV-инфектирани и дори 1-2 седмици след възможен инфекция с полимеразна верижна реакция(PCR). Това е изключително чувствителен метод - теоретично, можете да разкриете 1 ДНК върху 10 ml среда. Същността на метода е следната: с помощта на полимеразна верижна реакция се получават много копия на нуклеинова киселина (вирусът е нуклеинова киселина -funk или РНК - в протеиновата обвивка), която след това открива с белязани ензими или изотопи, както и в съответствие с характерната структура. PCR е скъп диагностичен метод, следователно, когато скринингът не се използва в планиран начин.
Определяне на етапа на заболяването
Разработването на СПИН се основава наНа първо място, разрушаването на T-лимфоцитни помощници, маркирани с моноклонални антитела - диференцирани клъстери - като CD4. В това отношение диагнозата и мониторингът на прогресирането на заболяването е невъзможен, без да контролират субпопулацията на T-помощниците, която най-удобно се извършва с помощта на лазерен клетъчен сорт.
С слабо изразена HIV инфекцияброят на Т-лимфоцитите е изключително променлив индикатор. Като цяло, намаляването на броя на CD4 клетките (абсолютно и относително) се открива при хора, HIV инфекцията е възникнала най-малко преди година. От друга страна, в ранните етапи на инфекцията често има рязко увеличен брой t-супресори (CD8) както в периферната кръв, така и в увеличените лимфни възли.
С изразени помощиабсолютното мнозинство от пациентите имат намален обща Т-лимфоцит (по-малка от 1000 в 1 ul кръв, включително CD4 лимфоцити - по-малко от 22 в 1 μl, докато абсолютната стойност на съдържанието на CD8 остава в нормален диапазон). Съответно, съотношението CD4 / CD8 е драстично намалено. In vitro t-лимфоцити отговор на стандартни антигени и митогените намаляват при стриктно съответствие с относително намален брой CD4.
За по-късен етап помощ Обща лимфопия, неутропения, тромбоцитопения (съответно, намаление на броя на лимфоцитите, неутрофилите и тромбоцитите), анемия е характерна. Тези промени могат да бъдат следствие от централното потискане на образуването на кръв поради увреждането на кръвообращените органи от вируса, както и автоимунното унищожаване на клетъчни субпопулации върху периферията. В допълнение, за СПИН се характеризира умерено увеличение на броя на гамабулините с доминиращо увеличение на съдържанието на IgG. Пациентите с тежки симптоми на СПИН често имат увеличено ниво на IGA. На някои етапи на заболяването, нивото на такива маркери за СПИН се увеличава значително като 1-микроглобулин, киселинен стикер-интерферон, 1-тимозин. Същото се случва същото с секрецията на свободното неоптерина - Macrophage Metabolite. Не е възможно да се оцени относителната важност на всеки от изброените тестове, чийто брой непрекъснато се увеличава. Следователно те трябва да се разглеждат в сътрудничество с HIV маркери както на имуновирологичния, така и на цитологичния характер. За клиничен анализ на кръвта се характеризира левкопения, лимфопения (съответно намаляването на броя на левкоцитите и лимфоцитите).
1 етап - " етап на инкубация»
- антитела за ХИВ все още не са открити; Диагнозата на HIV инфекцията на този етап се повишава въз основа на епидемиологични данни и лабораторията трябва да бъде потвърдена чрез откриване на човешкия имунодефицитен вирус, неговите антигени, HIV нуклеинови киселини;
2 етап - " етап на първични прояви»
- в този период вече се генерират антитела:;
2А Етап - " асимптоматичен»
- HIV инфекцията се проявява само чрез производството на антитела;
2б етап - " остра ХИВ инфекция без вторични заболявания»
- в кръвта на пациентите, могат да бъдат намерени електронни лимфоцити - "мононуклеи" и преходно намаляване на нивата на CD4-лимфоцитите (остра клинична инфекция се наблюдава при 50-90% от заразените лица през първите 3 месеца след инфекцията; началото на a Периодът на остра инфекция обикновено е пред сероконверсия, т.е. появата на антитела към ХИВ);
2b етап - " остра ХИВ инфекция с вторични заболявания»
- На фона на намаляване на нивото на CD4 лимфоцити и вторичните заболявания на различни етиологии (Alarg, бактериална и пневматична пневмония, кандидат, херпес инфекция и др.) В резултат на тази имунна недостатъчност.
3 етап - " латент»
- в отговор на прогресията на имунодефицит, модифициране на имунен отговор се модифицира под формата на прекомерно възпроизвеждане на CD4 клетки, последвано от постепенно намаляване на нивото на CD4 лимфоцити, средно със скорост 0.05-0.07x109 / годишно; в кръвта са открити антитела към ХИВ;
4 етап - " етап на вторични заболявания»
- изчерпването на LIMFOCYTES на CD4 популация, концентрацията на антитела към вируса е значително намалена (в зависимост от тежестта на вторичните заболявания, етапи 4а, 4Ь, 4Ь);
5 етап - " етап на терминала»
- обикновено, намаляването на количеството на CD4 клетките е по-ниско от 0.05x109 / L; Концентрацията на антитела към вируса е значително намалена или антитела не могат да бъдат определени.