Pri rôznych ochoreniach tráviaceho traktu je potrebné komplexné vyšetrenie. Ak sa vo výkaloch zistí baktéria Helicobacter pylori, diagnostikuje sa gastritída, vredy, duodenitída a iné závažnejšie ochorenia. Pri medikamentóznej terapii je potrebný aj pravidelný odber výkalov na stanovenie počtu patogénnych mikroorganizmov, aby bolo možné sledovať pozitívnu dynamiku terapie.
V akých situáciách sa predpisuje?
Je potrebné odobrať fekálne hmoty na analýzu s rôznymi patologickými poruchami v tráviacom systéme. Baktérie Helicobacter pylori sa určujú niekoľkými metódami, z ktorých každá sa používa na rôzne poruchy. PCR analýza výkalov na antigén by sa mala vykonať v týchto prípadoch:
- žalúdočný vred;
- tvorba erózie v dvanástniku a iných orgánoch gastrointestinálneho traktu;
- atrofický proces v sliznici;
- polypy a novotvary;
- gastroezofageálny reflux, charakterizovaný spätným tokom obsahu žalúdka do pažeráka;
- genetická predispozícia k rôznym patológiám brušných orgánov.
PCR štúdia výkalov je najpresnejšou metódou na monitorovanie stavu mikroflóry žalúdka počas liečby antibakteriálnymi liekmi.
Patogénna mikroflóra vyvoláva porušenie stolice.
Môžete tiež absolvovať imunologické vyšetrenie v týchto prípadoch:
- narušená stolica, pálenie záhy, nepohodlie a iné patologické prejavy dysfunkcie tráviaceho traktu;
- pred liečbou antibiotikami;
- anémia z nedostatku železa alebo trombocytopénia nejasného pôvodu;
- genetický faktor;
- prítomnosť infekcie v bezprostrednom prostredí.
Príprava: čo potrebujete vedieť?
Test na antigén v stolici na H. pylori môže poskytnúť falošné výsledky, ak sa nedodržia nasledujúce pokyny:
- Niekoľko dní pred laboratórnou manipuláciou odmietajú užívať antibakteriálne a laxatívne lieky. Ak sa terapia nedá zastaviť, lekári na to varujú.
- Materiál na vyšetrenie je potrebné zbierať do vopred umytej nádoby, je lepšie použiť sterilizovanú nádobu, ktorá je zakúpená v lekárni. Je prísne zakázané používať výkaly po klystíre alebo po použití liekov s laxatívnym účinkom na analýzu Helicobacter pylori. V takýchto prípadoch je spoľahlivosť výsledkov nízka.
- Odobratý materiál je doručený do laboratória najneskôr do 12 hodín po odbere. Ak nebolo možné okamžite vykonať analýzu na diagnostiku, materiál sa skladuje jeden deň pri teplote 2 až 8 stupňov.
- Opakovaná analýza výkalov na Helicobacter pylori sa podáva mesiac po liečbe antibiotikami.
Vlastnosti
PCR je hlavnou molekulárnou diagnostickou metódou
Molekulárno genetická diagnostika odhalí prítomnosť fragmentov bakteriálnej DNA.
Štúdium hmoty stolice pre polymerázovú reťazovú reakciu odhaľuje DNA a RNA baktérie Helicobacter pylori. Táto technika sa vzťahuje na molekulárnu biológiu, v dôsledku ktorej sa fragmenty DNA patogénneho mikroorganizmu znásobia vo veľkosti. Stolica sa analyzuje na PCR pomocou nasledujúcich nástrojov:
- Primer. Pomáha nájsť a označiť požadovaný fragment.
- Polymeráza. Enzým, ktorý kopíruje pevnú časť reťazca DNA.
- DNTP. Chemikálie potrebné na vytvorenie nového reťazca.
- Vzorka na analýzu.
- Tlmivého roztoku. Pomocou kvapaliny sa vytvorí najpribližnejšia podmienka pre polymerázovú reťazovú reakciu.
Pomocou metódy PCR je možné exponenciálne akumulovať špecifické úseky DNA, výsledkom ktorých je viac ako 100 miliónov získaných z 1. molekuly. Pomocou takejto laboratórnej metódy na vyšetrenie výkalov je možné určiť prítomnosť Helicobacter pylori aj v malom objeme. Ak sa okruh počas diagnostiky nevytvorí, potom je výsledok testu negatívny.
Výhodou metódy PCR je jej automatizácia, pri ktorej sa človek na vyšetrení podieľa minimálne.
Kultúrna technika
Podstatou analýzy je vytvorenie živného média pre životne dôležitú aktivitu baktérie.
Helicobacter pylori sa dá zistiť bakteriologickou kultiváciou výkalov. Diagnostická metóda sa týka mikrobiologických metód. Výsledný materiál je umiestnený v špeciálnom prostredí, ktoré je priaznivé pre reprodukciu baktérií. Po určitom časovom období sa pestovaná kultúra študuje pomocou mikroskopu. V laboratórnej štúdii sa používa farbenie a iné metódy, ktoré pomáhajú správne identifikovať kolóniu. Okrem toho sa robí test citlivosti na antibiotiká, čo uľahčuje výber liečby proti Helicobacter pylori.
Baktéria Helicobacter pylori vedie k rozvoju nepohodlia a nepohodlia. Žije v črevách, ktoré sa nachádzajú medzi žalúdkom a dvanástnikom 12. Samotné baktérie vo vzduchu neprežijú. Ak sa počet baktérií stane veľmi veľkým, ochorenie sa vyvinie helicobacter pylori. S ním sa môže objaviť gastritída.
Prítomnosť baktérií sa môže vyskytnúť mnohými spôsobmi. Jedným z najúčinnejších je štúdium výkalov.
Metódy na analýzu výkalov na Helicobacter pylori
Existuje niekoľko hlavných spôsobov:
- metóda PCR;
- kultúrna analýza;
- imunologické.
PCR metóda
Ide o druh molekulovo genetickej diagnostiky, ktorá umožňuje identifikovať baktériu aj s malým množstvom fragmentov DNA v biomateriáli. Zvláštnosť metódy spočíva v opakovanom namnožení analyzovanej vzorky patogénu.
Na štúdium je potrebná špeciálna kombinácia, ktorá sa získa umelou syntézou fragmentov DNA. Počas takejto manipulácie sa vytvorí reťazec DNA, ak je baktéria prítomná v tele.
Počas štúdie sa pozorujú určité teplotné režimy a kyslosť. Na urýchlenie reakcie sa vykoná niekoľko desiatok cyklov.
kultúrne
V skutočnosti ide o bakteriologickú kultúru. Počas štúdie je biologický materiál umiestnený v špeciálnom prostredí. Po určitom čase sa skúma pod mikroskopom.
Na identifikáciu baktérie sa používajú špeciálne techniky farbenia.
V prípade potreby je možné vykonať test na zistenie účinku antibiotík na Helicobacter pylori.
To má pozitívny vplyv na rýchlosť zotavenia a účinnosť terapie.
Imunologické
Keď sa v tele objaví patogén, aktívne sa vytvárajú protilátky. Analýza umožňuje odhaliť ich prítomnosť v biomateriáli vďaka možnosti adhézie s antigénmi. Počas štúdie sa značené protilátky kombinujú s analyzovanou vzorkou stolice.
Zvláštnosťou tejto metódy je možnosť získať falošne pozitívny výsledok. Preto je predpísaný pred inštrumentálnymi metódami výskumu.
Indikácie
Štúdium výkalov sa vykonáva pomocou:
- a žalúdočné vredy
- atrofia slizníc.
Technika sa tiež vykonáva na štúdium účinnosti kontroly predpísaných antibakteriálnych liekov. Všetky tieto indikácie sú priame pre PCR.
Na stanovenie citlivosti patogénnej mikroflóry na predpísanú liečbu sa často predpisuje kultúrna analýza. Keďže je táto metóda drahšia, výsledky sú známe za týždeň a Helicobacter pylori nie je vždy predpísaný na detekciu.
Indikácie pre imunologické metódy sú príznaky gastrointestinálnych patológií, genetická predispozícia k anémii z nedostatku železa a infekcia bezprostredného okolia.
Aké sú výhody a nevýhody molekulárnej diagnostiky?
Medzi výhody PCR analýzy patrí možnosť priameho určenia patogénu.
Umožňuje určiť prítomnosť baktérií a ich množstvo. Metóda sa tiež vyznačuje vysokou špecifickosťou, pretože analýza odhaľuje jedinečný fragment DNA.
Medzi výhody patrí:
- vysoká citlivosť;
- dobrá rýchlosť dosahovania výsledkov;
- možnosť využitia technológie u detí a tehotných žien.
Keďže celý proces analýzy biomateriálov je automatizovaný, znižuje sa pravdepodobnosť ľudskej chyby v procese výskumu. Diagnostická hodnota metódy je pomerne vysoká.
Test nevyžaduje penetráciu alebo použitie invazívnych techník. Postup pri odbere biomateriálu je technicky jednoduchý a neohrozuje zdravie pacienta.
Medzi nevýhody patrí skutočnosť, že negatívny výsledok nevylučuje prítomnosť baktérií v tele.
Preto výsledky PCR nemôžu byť definitívne. Okrem toho je index citlivosti nižší v porovnaní so štúdiou vzorky tkaniva a bunkovej hmoty.
Školenie
Tri dni pred odberom biomateriálu je potrebné vysadiť antibiotiká, rôzne laxatíva a rektálne čapíky. Ak to nie je možné, bude potrebná konzultácia s lekárom.
Materiál sa zhromažďuje v sterilnej sklenenej nádobe. Je možné použiť plastové nádoby, ktoré sa predávajú v lekárni spolu so špeciálnou lyžicou.
Materiál by mal byť doručený rýchlo v prvý deň po prijatí. Nádobu uchovávajte až do okamihu dodania pri teplote 3-9 stupňov.
Pri vykonávaní štúdie na stanovenie účinnosti antibiotickej liečby je po približne 4 týždňoch predpísaná opätovná analýza. Pri skorších dátumoch môže vykazovať nespoľahlivý výsledok.
Kde podať?
Môžete prejsť v súkromných laboratóriách aj v lekárskych strediskách, bežných klinikách. Cena služby závisí od zvolenej techniky.
Najlepšie je zvoliť si licencované inštitúcie. Potom je vysoká pravdepodobnosť, že výsledok bude spoľahlivý a štúdium samotného biomateriálu sa uskutoční v súlade so všetkými pravidlami.
Dešifrovanie výsledkov a ukazovateľov normy
V číslach nie je uvedený výsledok analýzy. Môže byť negatívny alebo pozitívny. Analýza zahŕňa kvalitatívne a kvantitatívne hodnotenie baktérií v biomateriáli. Existujú 4 štádiá rastu baktérií:
- Najprv. V priaznivom prostredí sa rast baktérií uskutočňuje slabo a v pevnom prostredí sa nezistí.
- Po druhé. Reprodukcia a rast mikroflóry dosahuje 10 kolónií.
- Po tretie. Rast kolónií do 100 v pevnom médiu sa líši.
- Po štvrté. Rast baktérií je veľmi veľký.
Posledné dve fázy naznačujú vážny zápalový proces. Zároveň prítomnosť Helicobacter pylori vo výkaloch nemôže priamo naznačovať žiadne ochorenie.
cena
PCR s genotypizáciou bude stáť najviac, jednoduchá PCR bude stáť polovicu (asi 600 rubľov). Zvyšok testov bude stáť 400-800 rubľov.
Po rozbore treba výsledky ukázať praktickému lekárovi alebo gastroenterológovi. Budú schopní predpísať správnu liečbu, v prípade potreby určiť citlivosť baktérií na rôzne druhy antibiotík.
Helicobacter pylori, antigén
Antigén Helicobacter pylori je jedným z indikátorov infekcie baktériou Helicobacter pylori, ktorá sa podieľa na vzniku peptických (pôsobením tráviacich štiav) vredov v žalúdku alebo dvanástniku.
Ruské synonymá
H. Pylori antigén, antigén pôvodcu helikobakteriózy.
Anglické synonymá
Helicobacter pylori antigénový test, Helicobacter pylori Ag, HpSA.
Metóda výskumu
Jednokroková imunochromatografická metóda.
Aký biomateriál možno použiť na výskum?
Ako sa správne pripraviť na výskum?
Nevyžaduje sa žiadna príprava.
Všeobecné informácie o štúdiu
Helikobakterióza je rozšírené infekčné ochorenie s orálnym, fekálno-orálnym a kontaktným prenosom patogénu, sprevádzané prevládajúcou léziou antra žalúdka, dvanástnika. Zdrojom infekcie je chorý človek alebo bakteriálny nosič a najcitlivejší sú naň ľudia s imunodeficienciou. Inkubačná doba je asi sedem dní.
Pôvodcom infekcie je Helicobacter pylori, špirálovitá gramnegatívna baktéria, ktorá môže infikovať žalúdok a dvanástnik. Helicobacter pylori však spôsobuje len predispozíciu k gastritíde a peptickému vredu a len s ďalšími faktormi - krvná skupina O (I), dedičná predispozícia, fajčenie, zneužívanie alkoholu, užívanie ulceróznych liekov, častý stres, podvýživa - vzniká vred.
V súčasnosti je dokázané, že infekcia Helicobacter pylori zvyšuje riziko rakoviny žalúdka. Viac ako polovica svetovej populácie je nositeľmi Helicobacter pylori, no väčšina prenášačov nemá žiadne príznaky a len asi 15 % má zápal žalúdka alebo peptický vred.
Stanovenie bakteriálneho antigénu v stolici je vysoko citlivá a špecifická metóda diagnostiky helikobakteriózy. Tento test je minimálne invazívny, ľahko použiteľný, jeho špecifickosť a senzitivita je asi 90 %.
Na čo slúži výskum?
Na diagnostiku infekcie Helicobacter pylori.
Určiť indikácie na vymenovanie anti-Helicobacter terapie a vyhodnotiť jej účinnosť.
Kedy je naplánované štúdium?
- So sťažnosťami, ktoré umožňujú podozrenie na peptický vred, gastritídu alebo duodenitídu: s nepríjemnými pocitmi v epigastrickej oblasti, poruchami trávenia, pocitom ťažkosti v žalúdku, nadúvaním, pálením záhy, nevysvetliteľnou stratou hmotnosti, nevoľnosťou, vracaním.
- Keď je potrebné monitorovať účinnosť liečby anti-Helicobacter a identifikovať možný relaps.
- Keď je potrebné potvrdenie úplnej eradikácie infekcie.
Čo znamenajú výsledky?
Referenčné hodnoty: negatívne.
Pozitívny výsledok
Infekcia Helicobacter pylori (respektíve vysoké riziko vzniku peptického vredu, gastritídy, duodenitídy alebo existujúceho ochorenia, zvýšené riziko vzniku rakoviny žalúdka).
Negatívny výsledok
Žiadna infekcia Helicobacter pylori.
Dôležité poznámky
- Pozitívny výsledok testu týždeň po priebehu liečby môže naznačovať jeho neúčinnosť a negatívny výsledok po 4 týždňoch naznačuje úplné zničenie infekcie.
Ak má pacient s negatívnym výsledkom testu príznaky žalúdočného alebo dvanástnikového vredu, gastritídy, duodenitídy, odporúča sa zopakovať túto analýzu po 2 týždňoch alebo vykonať ďalšie štúdie na Helicobacter pylori.
- Helicobacter pylori, IgA (kvantitatívne)
- Helicobacter pylori, IgG (kvantitatívny)
- DNA Helicobacter pylori [PCR v reálnom čase]
Kto objednáva štúdium?
Gastroenterológ, terapeut, špecialista na infekčné choroby, pediater, chirurg.
[09-053 ] DNA Helicobacter pylori [PCR v reálnom čase]
1025 rub.
objednať
Detekcia Helicobacter pylori (H. pylori), pri ktorej sa pomocou metódy real-time polymerázovej reťazovej reakcie (RT-PCR) stanovuje genetický materiál (DNA) mikroorganizmu vo vzorke biomateriálu.
Ruské synonymá
Helicobacter [polymerázová reťazová reakcia v reálnom čase].
Anglické synonymá
H. pylori, Helicobacter pyloridis, DNA.
Metóda výskumu
Polymerázová reťazová reakcia v reálnom čase.
Aký biomateriál možno použiť na výskum?
Biopsia, kal.
Všeobecné informácie o štúdiu
H. pylori je gramnegatívna pohyblivá baktéria, ktorá je odolná voči kyseline chlorovodíkovej a môže kolonizovať sliznicu žalúdka a dvanástnika. Primárna infekcia sa zvyčajne vyskytuje v detstve a je asymptomatická, ale u niektorých ľudí časom vedie k rozvoju závažných ochorení. H. pylori sa vyskytuje vo veľkej väčšine prípadov gastritídy a peptického vredu a okrem toho výrazne zvyšuje riziko vzniku adenokarcinómu a B-bunkového lymfómu žalúdka. Moderná diagnostika týchto ochorení nie je možná bez presnej a rýchlej identifikácie H. pylori.
H. pylori možno zistiť pomocou niekoľkých metód. Dnes sú dostupné neinvazívne diagnostické metódy s výhodou jednoduchosti a bezpečnosti odberu vzoriek na vyšetrenie (vyšetrenie stolice), čo má význam najmä pri vyšetrovaní starších ľudí, detí, ale aj v ambulantnom prostredí.
Helicobacter je veľmi citlivý na pôsobenie žlčových kyselín a znížený obsah kyslíka, preto pri prechode tráveniny cez dvanástnik a hrubé črevo sa počet baktérií výrazne zníži. Okrem toho aktívne špirálovité formy baktérie podliehajú morfologickým zmenám, ktoré poskytujú väčšiu odolnosť v nepriaznivých podmienkach. To má za následok nízku koncentráciu mikroorganizmov a prevahu kokálnych foriem vo výkaloch, čo by sa malo brať do úvahy pri výbere laboratórnej metódy na štúdium tohto biomateriálu. Medzi mnohými neinvazívnymi metódami zaujíma osobitné miesto štúdia využívajúca polymerázovú reťazovú reakciu v reálnom čase.
Polymerázová reťazová reakcia v reálnom čase (RT-PCR) je molekulárna diagnostická metóda, ktorá umožňuje detekciu fragmentov genetického materiálu (DNA) infekčného agens v biologickom materiáli (napríklad vo výkaloch). RT-PCR sa vyznačuje veľmi vysokou citlivosťou (93-95 %), čo je výhodou pri analýze stolice. Na rozdiel od bakteriologického výsevu vám táto štúdia umožňuje identifikovať špirálové aj kokálne (nekultivovateľné) formy H. pylori. Vzhľadom na to, že v reakcii je detekovaná DNA mikroorganizmu, štúdia sa nepoužíva na diferenciálnu diagnostiku súčasnej infekcie alebo anamnézy infekcie - výsledok analýzy bude pozitívny ešte nejaký čas po úplnej eradikácii H. pylori, čo je spôsobené detekciou fragmentov zničenej DNA mikroorganizmu.
Na žalúdočnej sliznici môžu byť prítomní aj iní zástupcovia rodu Helicobacter (H. suis, H. baculiformis). Hoci ich význam v rozvoji gastrointestinálnych ochorení ešte nie je úplne stanovený, zohrávajú úlohu pri identifikácii H. pylori. Napríklad laboratórne štúdie založené na detekcii antigénu spoločného pre všetky druhy Helicobacter budú charakterizované veľkým počtom falošne pozitívnych výsledkov testov na H. pylori v dôsledku detekcie iných druhov (ako je to v prípade ELISA). Toto je v štúdii RT-PCR prakticky vylúčené, pretože reakcia je založená na detekcii fragmentu DNA špecifického pre H. pylori.
Diagnóza helikobakteriózy u detí predstavuje určité ťažkosti. Je to spôsobené tým, že dieťa nevykonalo dýchací manéver pri použití ureázového dychového testu, ako aj potrebou anestézie pri použití invazívnych metód. Štúdium výkalov pomocou RT-PCR je dobrou alternatívou k týmto metódam, a preto sa dá úspešne aplikovať v pediatrickej praxi.
Vysoký obsah anorganických solí (fosfáty, vápnik), gastrointestinálne enzýmy, polysacharidy, žlčové kyseliny a soli, rastlinná vláknina, hlien a ďalšie zložky stolice môžu inhibovať RT-PCR, takže príprava na test si vyžaduje náležitú pozornosť pacienta a lekára . Interpretácia výsledku analýzy sa vykonáva s prihliadnutím na ďalšie laboratórne a inštrumentálne údaje.
Na čo slúži výskum?
Na diagnostiku chorôb spôsobených H. pylori:
- atrofická alebo antrálna gastritída;
- vredy žalúdka a dvanástnika.
Kedy je naplánované štúdium?
- Ak máte podozrenie na gastritídu alebo peptický vred u detí a starších ľudí.
- Keď nie je možné použiť invazívne metódy na identifikáciu H. pylori u pacientov v akomkoľvek veku.
Čo znamenajú výsledky?
Referenčné hodnoty: negatívne.
Pozitívny výsledok:
- súčasná infekcia H. pylori;
- Infekcia H. pylori v anamnéze.
Negatívny výsledok:
- absencia infekcie H. pylori.
Čo môže ovplyvniť výsledok?
- Prítomnosť krvi, žlče, nadbytočných anorganických solí a iných zložiek vo vzorke stolice môže viesť k falošne negatívnemu výsledku.
- Liečba tetracyklínom, penicilínom (aminopenicilíny), makrolidmi (klaritromycín, azitromycín) a metronidazolom môže viesť k falošne negatívnym výsledkom.
Dôležité poznámky
Moderné diagnostické metódy nám umožňujú dozvedieť sa veľa o stave ľudského zdravia z jeho biologických tekutín: krvi, moču, výkalov.
Vyšetrením výkalov môžete zistiť, či sa usadil v tele, je schopný spôsobiť gastritídu a vyprovokovať onkopatológiu.
Výkaly na prítomnosť alebo neprítomnosť tohto mikróbu možno študovať tromi spôsobmi: kultivačným, imunologickým a najspoľahlivejšou a najbežnejšou metódou polymerázovej reťazovej reakcie (PCR).
Samotná baktéria je extrémne vzácna vo výkaloch vo svojom zvyčajnom S-tvare ako celok. Hrubé črevo a výkaly nie sú pre mikroorganizmus priaznivým prostredím, a preto, keď sa do nich dostane, môže nadobudnúť okrúhly kokálny tvar, ktorý sa v tejto forme občas vyskytuje vo výkaloch.
Kultivačná metóda znamená zasiať časť skúmaného materiálu na živné médium, v ktorom sa baktéria bude cítiť dobre a začne sa množiť.
Touto cestou:
Rastú kolónie, ktoré sa analyzujú, farbia sa špeciálnymi činidlami a skúmajú sa pod mikroskopom. Týmto spôsobom sa doslova pestujú patogénne mikróby za účelom ich ďalšieho štúdia.
Okrem detekcie samotnej baktérie vám metóda umožňuje stanoviť citlivosť patogénu na konkrétne antibiotikum. Ak sa po pridaní lieku zachová rast kolónie - H. pylori je odolný voči antibakteriálnemu činidlu a ak mikroorganizmy odumrú - má zmysel predpísať tento liek pacientovi za účelom liečby a eradikácie, baktérie sú na to citlivé.
Kultivačná metóda je veľmi spoľahlivá, ale len vtedy, ak sa v odobratom biologickom materiáli nachádza S-forma mikróba. Metóda má svoje nevýhody a z tohto dôvodu nie je príliš bežná:
- Termíny štúdie trvajú od 6 do 12 dní
- Drahé médium na pokovovanie Helicobacter
- Špecifické podmienky pre rastové médiá kolónií, ktoré sa ťažko replikujú v laboratóriu
- Zriedkavý výskyt esovitých foriem baktérie vo výkaloch vhodných na rast za podmienok výživy (kokálne formy sa neskúmajú)
Stanovenie antigénu Helicobacter pylori vo výkaloch imunologickou metódou
Výkaly pacienta môžu byť podrobené imunologickej štúdii, ktorá umožňuje identifikovať nie samotný mikroorganizmus, ale jeho časti - antigény.
Pre to:
Špeciálne protilátky sa používajú na detekciu cudzieho antigénu - časti baktérie, jej metabolických produktov, genetického materiálu.
Pri interakcii s cudzorodým činidlom tvoria protilátky špecifický komplex, ktorý sa stanoví enzýmovou imunoanalýzou.
Táto metóda štúdia výkalov sa v Rusku používa zriedka, nie je veľa laboratórií vybavených potrebnými činidlami a potrebnými testami.
Ale v budúcnosti je možné zahrnúť túto metódu detekcie Helicobacter pylori ako skríningové testy: štúdie veľkých skupín populácie na infekciu baktériou.
PCR analýza stolice na Helicobacter pylori
Toto je najbežnejšia metóda skúmania stolice na túto baktériu s vysokou presnosťou.
Podstata metódy je nasledovná:
Z biologického materiálu pacienta sa izoluje časť DNA baktérie, ktorá sa potom na špeciálnom prístroji mnohokrát umelo duplikuje, čím sa obnoví genetický kód H. pylori.
Keď genómový fragment mikróba dosiahne dostatočnú veľkosť, porovná sa s referenčným a urobí sa záver o skúmanom mikroorganizme: či ide o Helicobacter alebo iný patogén.
Pozitívna PCR analýza znamená prítomnosť infekcie Helicobacter pylori v ľudskom tele: baktéria je prítomná v žalúdku, jej fragmenty DNA sa našli vo výkaloch a zhodovali sa s referenčnými.
Výhody metódy PCR:
- Vysoká presnosť: aj malé množstvo genetického materiálu stačí na štúdiu s vysokým percentom istoty blížiacou sa 99 %.
- Rýchlosť výskumu. Na analýzu stačia 2 dni, ale existujú expresné metódy, ktoré vám umožnia stanoviť diagnózu za niekoľko hodín.
- Bezbolestnosť. Metóda je atraumatická, neinvazívna. Umožňuje vyšetrenie malých detí, starších, oslabených pacientov, ktorí sú kontraindikovaní na EGD s biopsiou a inými endoskopickými manipuláciami.
- Pre presný výsledok nie je potrebné presne detegovať fragmenty DNA v tvare S alebo špirály, na analýzu sú vhodné aj časti kokálnych mikróbov (najčastejšie sa vyskytujú vo výkaloch).
PCR diagnostika má oveľa viac plusov ako mínusov. Medzi nevýhody patrí:
- Relatívne vysoké náklady na analýzu.
- Zachovanie fragmentov mikrobiálnej DNA v stolici a po eradikácii. Aj keď je liečba úspešne ukončená a baktéria v tele chýba, po určitom čase sa v biologickom materiáli nájdu fragmenty DNA a test stolice na Helicobacter pylori môže poskytnúť pozitívny výsledok. Preto sa na kontrolu vyliečenia odporúča diagnostika PCR najskôr 1 mesiac po ukončení terapie.
- Špeciálne drahé high-tech zariadenie, ktoré si na obsluhu vyžaduje vyškolený a vyškolený personál.
Analýza výkalov na antigén Helicobacter pylori in vitro
Všetky diagnostické štúdie vykonané s výkalmi pacienta sa týkajú manipulácií in vitro - "in vitro", "v skle", mimo ľudského tela.
Majú dostatočne vysokú presnosť a informačný obsah, ak sledujú cieľ odhaliť mikrób.
Ale nie všetky procesy prebiehajúce "in vivo" - vo vnútri ľudského tela, môžu byť znovu vytvorené "in vitro" s rovnakou spoľahlivosťou. Napríklad stanovenie citlivosti na antibiotiká, analyzované kultúrnou metódou.
Pri štúdiu antibakteriálnej citlivosti mikrobiálnych kolónií na živných kultúrach sa zistilo, že najvhodnejšie prípravky na baktérie in vitro „nefungovali“, sa ukázali ako neúčinné pri liečbe pacienta.
Výsledky in vitro štúdií citlivosti na antibiotiká nie sú vždy presné.
Ako prejsť testom stolice na Helicobacter pylori
Spoľahlivosť analýzy výkalov na Helicobacter
PCR - diagnostika výkalov je najspoľahlivejšia zo všetkých troch vyššie uvedených metód, je do určitej miery nižšia len ako bioptické endoskopické vyšetrenie.
PCR analýza výkalov zriedkavo poskytuje falošne pozitívne výsledky, má vysokú špecifickosť, umožňuje skúmať materiál DNA najbežnejších kokových foriem Helicobacter pylori v stolici.
Spoľahlivosť kultivačnej a imunologickej metódy je nižšia ako PCR. Tieto metódy „hrešia“ objavením sa falošne pozitívnych výsledkov, no v kombinácii s inými metódami na zistenie Helicobacter pylori sú výborným nástrojom na stanovenie diagnózy.
antigén H. pylori v stolici
Ak sa vo výkaloch nájde antigén Helicobacter pylori alebo fragment DNA študovaného mikroorganizmu, znamená to, že:
- Osoba je infikovaná H. pylori.
- Eradikačná terapia nie je dostatočne účinná a mikrób nezmizol zo sliznice tráviaceho traktu.
- Po terapii neuplynul ani mesiac a vo výkaloch zostávajú antigény mŕtvych patogénov.
Aby sa vylúčil falošne pozitívny výsledok po absolvovaní liečebného režimu proti Helicobacter (keď je analýza pozitívna a ľudské telo neobsahuje H. pylori), nemali by ste sa ponáhľať so zisťovaním účinnosti liečby, ale počkať najmenej jeden mesiac po jeho ukončení.
Ak sa to úspešne vykoná, 1 mesiac po eradikácii sa antigény a DNA mikróbov nezistia vo výkaloch. Výsledok testu je negatívny.
Ak sa pri prvotnej analýze zistia antigény, lekár odporučí pacientovi podstúpiť špeciálnu terapiu zameranú na zničenie H. pylori.