Čeprav celota polimorfizem- zaradi razlik v zaporedju DNA se nekateri polimorfni lokusi raziskujejo s preverjanjem sprememb v proteinih, ki jih kodirajo ti aleli, in ne s proučevanjem razlik v zaporedju DNA samih alelov. Za vsakega posameznika se šteje, da je verjetno heterozigoten za alele, ki definirajo strukturno različne polipeptide pri približno 20 % vseh lokusov; če primerjamo posameznike iz različnih etničnih skupin, polimorfizem ugotovimo v še večjem deležu beljakovin.
Tako znotraj človeška vrsta v značilnostih encimov in drugih genskih produktov obstaja presenetljiva stopnja biokemične individualnosti. Poleg tega, ker produkti številnih biokemičnih poti medsebojno delujejo, je verjetno domnevati, da ima vsak posameznik, ne glede na zdravstveno stanje, edinstvene, genetsko določene biokemične lastnosti in se zato edinstveno odziva na okoljske, prehranske in farmakološke dejavnike.
Ta koncept kemije individualnost, ki ga je pred stoletjem prvi izpostavil izjemni britanski zdravnik Archibald Harrod, se je izkazalo za pravilno.
Tukaj bomo razpravljali o več polimorfizmi medicinskega pomena: krvne skupine ABO in Rh faktor (pomemben pri ugotavljanju kompatibilnosti za transfuzije krvi) in MHC (ki ima pomembno vlogo pri presaditvi organov in tkiv). Študije sprememb v beljakovinah, namesto v DNK, ki jih kodira, so resnično koristne; navsezadnje so različni proteinski produkti različnih polimorfnih alelov tisti, ki so pogosto odgovorni za različne fenotipe in zato določajo, kako genetske spremembe na lokusu vplivajo na interakcijo organizem-okolje.
Krvne skupine in njihovi polimorfizmi
Prvi primeri genetske vnaprej določene spremembe beljakovin so našli v eritrocitih, tako imenovane antigene krvnih skupin. V sestavinah človeške krvi je poznanih veliko število polimorfizmov, predvsem v ABO in Rh antigenih eritrocitov. Še posebej sta sistema ABO in Rh pomembna pri transfuziji krvi, presaditvi tkiv in organov ter pri hemolitični bolezni novorojenčka.
Sistem krvnih skupin ABO
človek krvi lahko spadajo v eno od štirih skupin, glede na prisotnost dveh antigenov, A in B, na površini rdečih krvničk, ter prisotnost dveh ustreznih protiteles, anti-A in anti-B, v plazmi. Obstajajo štirje glavni fenotipi: 0, A, B in AB. Ljudje s skupino A imajo antigen A na rdečih krvnih celicah, ljudje s skupino B imajo antigen B, ljudje s skupino AB imajo antigene A in B in končno ljudje s skupino 0 nimajo antigena.
Ena od značilnosti skupine ABO ne velja za druge sisteme krvnih skupin – gre za recipročno razmerje med prisotnostjo antigenov na eritrocitih in protiteles v serumu. Kadar antigena A na eritrocitih ni, serum vsebuje protitelesa anti-A; ko antigena B ni, serum vsebuje protitelesa proti B. Razlog za recipročno razmerje ni znan, vendar se domneva, da je tvorba protiteles anti-A in anti-B odgovor na prisotnost A- in B-podobnih antigenov v okolju (npr. v bakterijah).
Določa jih lokus na kromosomu 9. Aleli A, B in 0 na tem lokusu so klasičen primer multialelizma, ko se trije aleli, od katerih se dva (A in B) dedujeta kot kodominantna, tretji (0) pa kot recesivna lastnost, določa štiri fenotipe. Antigena A in B določata delovanje alelov A in B na površinski glikoprotein eritrocitov, imenovan antigen H.
Specifičnost antigenov določajo končni ogljikovi hidrati, dodani substratu H. Alel B kodira glikoziltransferazo, ki prednostno prepozna sladkor D-galaktozo in jo doda na konec oligosaharidne verige, ki jo vsebuje antigen H, in tako ustvari B Alel A kodira nekoliko drugačno obliko encima, ki prepozna in substratu doda N-acetilgalaktozamin namesto D-galaktoze, s čimer nastane antigen A. Tretji alel, 0, kodira mutirano različico transferaze, ki ne imajo transferazno aktivnost in ne vplivajo na substrat H.
Ugotovljene molekularne razlike v genu glikoziltransferaze, odgovoren za alele A, B in 0. Zaporedje štirih različnih nukleotidov, ki se razlikuje med aleloma A in B, vodi do aminokislinskih sprememb, ki spremenijo specifičnost glikoziltransferaze. Alel 0 ima delecijo enega samega nukleotida v kodirni regiji gena ABO, kar povzroči mutacijo premika okvirja in onemogoči aktivnost transferaze pri ljudeh s skupino 0. Zdaj, ko so zaporedja DNK znana, je mogoče združevanje ABO izvesti neposredno na ravni genotipa, ne fenotipa, še posebej kadar obstajajo tehnične težave pri serološki analizi, kar se pogosto dogaja v forenzični praksi ali pri ugotavljanju očetovstva.
Video prikazuje tehniko določanja krvne skupine s standardnimi serumi:Primarni medicinski pomen AVO sistemi- pri transfuziji krvi in presaditvi tkiv ali organov. V sistemu krvnih skupin ABO obstajajo združljive in nezdružljive kombinacije. Združljiva kombinacija je, ko eritrociti darovalca ne nosijo antigena A ali B, ki ustreza protitelesu v serumu prejemnika. Čeprav teoretično obstajajo "univerzalni" darovalci (skupina 0) in "univerzalni" prejemniki (skupina AB), bolnik prejme transfuzijo svoje skupine ABO, razen v nujnih primerih.
Stalna prisotnost anti-A in anti-B protiteles pojasnjuje neuspeh številnih zgodnjih poskusov transfuzije krvi, saj lahko ta protitelesa povzročijo hitro uničenje ABO-nezdružljivih celic. Pri presaditvi tkiv in organov je za uspešno presaditev potrebna združljivost darovalca in prejemnika v skupini ABO in HLA (opisano kasneje).
Rh sistem krvnih skupin
Glede na klinično vrednostni sistem Rh primerljiv s sistemom ABO zaradi njegove vloge pri razvoju hemolitične bolezni novorojenčka in pri nekompatibilnosti s transfuzijo krvi. Ime Rh izvira iz opic Rhesus, ki so bile uporabljene v poskusih, ki so pripeljali do odkritja sistema. Preprosto povedano, populacijo delimo na Rh-pozitivne posameznike, ki izražajo Rh D antigen, polipeptid, ki ga kodira gen (RHD) na kromosomu 1, v eritrocitih, in Rh-negativne posameznike, ki tega antigena ne izražajo. Negativni Rh fenotip je običajno posledica homozigotnosti za nefunkcionalni alel gena RHD. Pogostost Rh-negativnih posameznikov se med etničnimi skupinami zelo razlikuje. Na primer, 17 % belcev in 7 % Afroameričanov je Rh negativnih, medtem ko je le 0,5 % Japoncev.
Hemolitična bolezen novorojenčka in krvne skupine
Glavni klinični pomen sistema Rh- da Rh-negativni posamezniki zlahka tvorijo anti-Rh protitelesa ob srečanju z Rh-pozitivnimi eritrociti. To postane problem, ko Rh-negativna nosečnica nosi Rh-pozitiven plod. Običajno med nosečnostjo majhne količine fetalne krvi prečkajo placentno pregrado in vstopijo v materin krvni obtok. Če je mati Rh negativna in je plod Rh pozitiven, mati tvori protitelesa, ki potujejo nazaj do ploda in poškodujejo njegove rdeče krvne celice, kar povzroči hudo hemolitično bolezen novorojenčka.
pri Rh negativne nosečnice Tveganje imunizacije z Rh-pozitivnimi fetalnimi eritrociti je mogoče zmanjšati z dajanjem anti-Rh imunoglobulina v 28-32 tednih nosečnosti in dodatno kmalu po porodu. Humani imunoglobulin antirezus odstrani fetalne Rh-pozitivne celice iz krvnega obtoka matere, preden jo senzibilizirajo. Anti-Rh imunoglobulin se daje tudi po spontanih splavih, splavih ali invazivnih postopkih, kot sta CVS ali amniocenteza, v primerih, ko Rh-pozitivne fetalne celice vstopijo v materin obtok. Odkritje Rh sistema in njegove vloge pri nastanku hemolitične bolezni novorojenčka je pomemben prispevek genetike k medicini.
Krvne skupine.
Krvne skupine- normalni imunogenetski znaki krvi, ki vam omogočajo združevanje ljudi v določene skupine glede na
podobnost krvnih antigenov.
Poznavanje krvnih skupin je osnova doktrine transfuzije, presajanja organov in tkiv ter sodnomedicinskega pregleda.
Antigeni - snovi, ki pridejo v telo parenteralno in povzročijo specifično imunološko reakcijo, ki se kaže v nastajanju specifičnih protiteles.
Protitelesa - beljakovine globulinske frakcije krvnega seruma, ki nastanejo kot odgovor na vnos antigena in specifično interagirajo z antigeni, ki so povzročili njihovo tvorbo.
Obstaja več kot 250 izoantigenov, ki so genetsko povezani. V kliniki so pomembni:
1. Sistem ABO
3. Luteranski
4. Kell-Cellano
AVO sistem.
Začetek sistematičnega preučevanja krvnih skupin je bil postavljen leta 1901 z odkritjem Landsteinerja krvnih skupin sistema ABO.
V tem sistemu so človeški eritrociti razdeljeni po principu, da imajo tri različne antigenske lastnosti: A, B in AB (A + B). Antigenske lastnosti "O" ne obstajajo; v skrajnem primeru lahko govorimo o lastnini H pa specifičnih protitelesih proti - H imajo zelo majhen klinični pomen. Tako je krvna skupina osebe določena z antigenskimi lastnostmi rdečih krvničk.
V krvi novorojenčka praviloma ni protiteles sistema ABO. Otrok v prvem letu življenja razvije protitelesa proti tistim antigenom, ki jih v lastnih eritrocitih ni (izoantigeni, anti-A, anti-B). Po tem serum, na primer skupine O, vsebuje protitelesa anti-A in anti-B, serum skupine AB pa teh protiteles ne vsebuje.
Zdaj je ugotovljeno, da so v črevesju bakterije, ki nosijo enake antigenske determinante kot eritrociti: tako imenovane heterofilne antigene. Večina protiteles sistema ABO je tipa
imunoglobulini razreda M. Z 10 antigenskimi vezavnimi mesti so popolna protitelesa, ki lahko povzročijo aglutinacijo eritrocitov.
Dedovanje krvnih skupin.
Diploidni nabor kromosomov vsake osebe vsebuje 2 od treh alelnih genov - A, B in 0 (H), ki kodirajo lastnosti krvnih elementov.
Pokazalo se je, da sta lastnosti A in B dominantni, zato je krvna skupina 0 fenotipsko izražena le pri homozigotih. Ker lahko genotipa AO in BO povzročita fenotip A oziroma B, imajo lahko starši z eno od teh krvnih skupin otroka s krvno skupino 0. Alela A in B sta v kodominantnem razmerju: če sta oba geni so prisotni, vsak od njih je izražen in ne delujejo drug z drugim.
Če poznate ta načela dedovanja, lahko dobite nekaj informacij o starših glede na krvno skupino otroka. V forenzični praksi je splošno sprejeto, da moški s tipom AB ne more biti oče otroka s krvno skupino 0. Več ko je upoštevanih skupinskih dejavnikov, bolj zanesljivo je očetovstvo mogoče izključiti (trenutno je verjetnost 99 % mogoče doseči).
Krvna skupinaAMPAK razdeljeni v podskupini A1 in A2. Glavna razlika med tema podskupinama je v tem, da eritrociti A1 v mešanici s serumom anti-A aglutinirajo hitreje in v večji meri kot A2. Eritrociti skupine A2 imajo več H-struktur kot eritrociti A1. Približno 80% oseb s krvno skupino A spada v podskupino A1, preostalih 20% spada v podskupino A2. Ta delitev nima praktičnega pomena za transfuzijo krvi, saj so transfuzijske reakcije med podskupinama A1 in A2 blage in redke. Geografska porazdelitev krvnih skupin.
Več kot 40% prebivalcev srednje Evrope ima krvno skupino a, približno 40% - skupino 0; 10% ali več - skupina B in približno 6% - skupina AB. 90 % avtohtonih prebivalcev Amerike ima skupino 0. Več kot 20 % prebivalcev Srednje Azije ima krvno skupino in. Na podlagi podatkov o prisotnosti in razmerju različnih krvnih skupin v različnih delih sveta lahko antropologi sklepajo o izvoru in mešanju ljudstev.
Rhesus sistem (Rh).
Večina Evropejcev je Rh pozitivnih (Rh+). To pomeni, da če se njihova kri zmeša s serumom kuncev, ki so bili predhodno imunizirani z eritrociti Rhesus makaka, bo prišlo do aglutinacije. Če se aglutinacija ne pojavi, se kri šteje za Rh-negativno. Pri transfuziji Rh-pozitivne krvi Rh-negativnemu prejemniku se v telesu prejemnika postopoma več mesecev tvorijo aglutinini do Rh + eritrocitov. Rh faktor eritrocitov.
Interakcija eritrocitov s serumom anti-Rh je posledica prisotnosti več antigenov v različnih delih membrane (nepopolni antigeni). Najpomembnejši med njimi so C, D, E, c, e. Najbolj izrazite so antigenske lastnosti antigena D. Za poenostavitev se kri, ki vsebuje D-eritrocite, imenuje Rh-pozitivna (Rh + ali Rh); in kri brez takih eritrocitov je Rh-negativna (Rh - ali rh); 85 % Evropejcev ima Rh+ kri; 15% - Rh -. Fenotip Rh+ lahko ustreza genotipu DD ali Dd; in za fenotip Rh samo genotip dd.
Ena od razlik med sistemoma Rhesus in ABO, ki je zelo praktičnega pomena, je, da so aglutinini sistema ABO vedno v človeški krvi po prvih mesecih življenja, medtem ko se aglutinini Rh pojavijo šele po preobčutljivosti: stiku z Rh-negativna oseba z Rh-antigeni. Zato pri prvi transfuziji Rh-nezdružljive krvi običajno ne pride do očitne reakcije. Reakcije antigen-protitelesa se pojavijo le pri ponavljajočih se transfuzijah takšne krvi.
Druga razlika med obema sistemoma je, da je večina Rh aglutininov nepopolnih protiteles proti imunoglobulinom razreda G, ki so za razliko od velikosti popolnih aglutininov sistema ABO dovolj majhni, da preidejo placentno pregrado.
Rhesus nezdružljivost in nosečnost. Med nosečnostjo lahko majhne količine rdečih krvnih celic prodrejo iz krvi Rh-pozitivnega ploda v kri Rh-negativne matere. To povzroči nastanek aglutininov proti Rh + - eritrocitom. Običajno le med porodom velika količina (10-15 ml) fetalnih eritrocitov vstopi v materino kri. Ker titer protiteles v materini krvi narašča razmeroma počasi (več mesecev), v prvi nosečnosti običajno ni zapletov. Vendar pa lahko med drugo nosečnostjo Rh-negativne ženske z Rh-pozitivnim plodom titer protiteles v njeni krvi doseže tako visoko raven, da zaradi prodiranja aglutininov skozi posteljico pride do eritrocitov ploda. začeti razpadati. To vodi do resnih motenj v življenju ploda in celo do intrauterine smrti (fetalna eritroblastoza). Nastajanje protiteles v telesu Rh-negativne ženske lahko omejimo ali popolnoma zavremo s tako imenovano anti-D profilakso. Če takoj po porodu (vključno s prezgodnjim) ženski vbrizgamo anti-D-globulin, se bodo Rh-pozitivni eritrociti, ki so prodrli v njeno kri, uničili in s tem dejavnik, ki povzroči nastanek protiteles v imunskem sistemu. odpraviti. Reakcije antigen-protitelo se lahko pojavijo tudi, ko sta mati in plod nezdružljiva zaradi drugih skupinskih značilnosti (zlasti ABO), vendar so takšne reakcije običajno blage.
Transfuzija krvi.
Pravila transfuzije krvi:
1. Transfuzija krvi izoskupin.
2. Določitev pripadnosti skupini po sistemu ABO.
3. Določitev Rh-pripadnosti krvi.
4. Določitev individualne združljivosti krvi.
5. Izvedba biološkega testa.
Določanje krvne skupine po sistemu ABO.
1. Metoda standardni serumi - uporabljamo standardne serume prve, druge in tretje krvne skupine, ki vsebujejo protitelesa ustrezne skupine: zato v preiskovani krvi določamo antigene.
2. Metoda standardni eritrociti - uporabljajo se standardni eritrociti druge in tretje skupine, ki vsebujejo ustrezne antigene (A, B); zato v preiskovani krvi določimo protitelesa.
3. Metoda tsolikloni - uporabljajo se anti-A (alfa) zolikloni in
anti-B (beta), to so monoklonska protitelesa, določamo v krvi
antigeni. Določitev Rh-pripadnosti krvi.
1. Metoda serumi proti rezusu - uporabimo anti-rezusni serum, ki ga nanesemo vzdolž stene epruvete, sledi kapljica krvi, epruveta se stresa nekaj minut, nato se doda kapljica fiziološke raztopine, da se izključi lažna aglutinacija. Če pride do aglutinacije - je Rh pozitiven; v odsotnosti aglutinacije - Rh negativen.
2. Metoda tsolikloni - zoliklon anti-D-cynep Določitev individualne združljivosti krvi,
1. Krv darovalca se zmeša s serumom prejemnika. V prisotnosti aglutinacije je kri nezdružljiva; če ne, združljivo.
2. Kri prejemnika se zmeša s serumom darovalca. Ocena
rezultati so podobni. Izvajanje biološkega testa.
Prvih 45 ml krvi transfundiramo frakcijsko: po 3 minutah po 15 ml in spremljamo bolnikovo stanje. Pojavi nezdružljivosti:
občutek toplote po telesu, bledica kože, majhen in pogost utrip, znižanje krvnega tlaka; bolečine v trebuhu, glavi, spodnjem delu hrbta; rdeče-rjav urin: "mesne potoke."
ABO test protiteles- splošna klinična študija za odkrivanje alfa ali beta izohemaglutininov v krvi - naravna protitelesa razreda IgG proti manjkajočim antigenom A ali B. Določijo se v primeru nezdružljivosti matere in ploda glede na antigene sistema ABO . Odkrivanje protiteles proti skupinam v krvi nosečnice je potrebno za diagnozo medskupinskega konflikta in pravočasno izvajanje terapevtskih ukrepov za preprečevanje spontanega splava, prezgodnjega poroda, hemolitične bolezni ploda (novorojenčka). Kri se vzame iz vene. Raziskovalna metoda - reakcija aglutinacije. Običajno (z majhno verjetnostjo medskupinskega konflikta) je rezultat negativen. Pripravljenost rezultatov analize - en delovni dan.
Protitelesa po sistemu ABO ali protiskupinska protitelesa so imunoglobulini, ki nastanejo, ko se v krvi pojavi skupinsko nezdružljiv antigen. Krvna skupina je odvisna od posebnih beljakovin, ki so prisotne na zunanji strani membrane eritrocitov – aglutinogenov. V medicinski praksi se določijo aglutinogeni A, B in D. Pri ljudeh s krvno skupino I so eritrociti brez beljakovin A in B, v skupini II - z beljakovinami tipa A, v skupini III - z beljakovinami tipa B, v skupini IV. - s proteini tipa A in B. Prisotnost ali odsotnost aglutinogena D določa Rh pozitiven ali negativen. Protitelesa proti skupinam nastane v telesu, ko rdeče krvne celice z neznanimi aglutinogeni A ali B vstopijo v krvni obtok. Reakcija teh protiteles povzroči uničenje tujih rdečih krvnih celic.
Proizvodnja protiteles po sistemu ABO je možna s transfuzijo krvi, ko se pomešata kri ploda in matere. Teoretično se nezdružljivost krvnih skupin določi v naslednjih primerih: če ima prejemnik (mati) I ali III krvno skupino, darovalec (plod) pa II; če ima prejemnik (mati) I ali II krvno skupino, darovalec (plod) pa III; če ima prejemnica (mati) I, II ali III krvno skupino, darovalec (plod) pa IV. V praksi najpogosteje opazimo nastajanje protiteles proti skupini pri ženskah s krvno skupino I, saj ne vsebuje aglutinogenov A in B in je najpogostejša. Imunokonflikt med nosečnostjo lahko povzroči eritroblastozo novorojenčka, s transfuzijo krvi - do intravaskularne hemolize eritrocitov. Ogroženi so prejemniki po več transfuzijah, pa tudi nosečnice, ki so bile podvržene transfuziji krvi, umetnim in naravnim prekinitvam, ki imajo otroke s hemolitično boleznijo.
Za krvni test za protitelesa po sistemu ABO se kri vzame iz vene. Najpogostejša raziskovalna metoda je reakcija aglutinacije z uporabo difuznega gela. Rezultati se uporabljajo v porodništvu in ginekologiji pri načrtovanju in spremljanju nosečnosti ter v kirurgiji in reanimaciji pri izvajanju transfuzij krvi.
Indikacije
Krvni test za protitelesa po sistemu ABO je indiciran za ženske med nosečnostjo, če obstaja možnost razvoja konflikta imunološke skupine. Pri določanju tveganja se upošteva kombinacija krvnih skupin staršev. Prisotnost protiteles v krvi se najpogosteje določi pri nosečnicah s skupino I, če je bil II, III ali IV prenesen od očeta do otroka. Tudi kombinacije II materin + III ali IV očetov, III materin + II ali IV očetov so prav tako verjetnostno konfliktne. Pri predpisovanju analize se upoštevajo tudi drugi dejavniki tveganja: oslabljena prepustnost placente, abdominalna travma, invazivni diagnostični postopki (na primer amniocenteza). V vseh teh primerih je možen vstop fetalnih eritrocitov v materino kri, čemur sledi nastajanje protiteles proti skupinam. Nemogoče je klinično ugotoviti prisotnost takšnega imunološkega konflikta - ženska ne čuti nobenih sprememb. Če pa ne spremljate titra protiteles, obstaja tveganje za nastanek hemolitične bolezni pri otroku, ki se kaže z edemom, ikterusom, anemijo, povečano vranico in jetri, v hujših primerih pa tudi z zaostankom v razvoju.
Druga indikacija za krvni test za protitelesa po sistemu ABO so zapleti po transfuziji krvi. V skupinskem konfliktu se pogosto razvije akutna intravaskularna hemoliza - reakcija uničenja eritrocitov vbrizgane krvi. Kaže se kot pekoč občutek na mestu infundiranja, povišana telesna temperatura, mrzlica, bolečine v hrbtu in trupu, napadi panike. Pri spremljanju nosečnosti odločitev o izvedbi analize sprejme zdravnik ob upoštevanju kombinacije dejavnikov tveganja za razvoj skupinskega konflikta. Krvni test za protitelesa po sistemu ABO ni presejalni, za razliko od na primer testa za protitelesa proti eritrocitom. To je posledica dejstva, da se ta vrsta imunološkega konflikta razvije redko, hemolitična bolezen pa se pojavi v blagi obliki in se kaže predvsem z neonatalno zlatenico.
Priprava na analizo in zbiranje materiala
Material za testiranje na protitelesa po sistemu ABO je venska kri. Postopek vzorčenja se običajno izvaja zjutraj. Za pripravo ni posebnih zahtev, priporočljivo je darovati kri 4-6 ur po jedi. Zadnjih 30 minut je treba preživeti v mirnem okolju, brez fizičnega in čustvenega stresa. Odvzem krvi iz kubitalne vene poteka z vakuumskim sistemom brez antikoagulanta ali z aktivatorjem strjevanja krvi. Shranjeno pri 2 do 8°C, dostavljeno v laboratorij v 2-3 urah.
Protitelesa po sistemu ABO določamo v krvi z metodo aglutinacije. Raziskovalni postopek je sestavljen iz več faz. Najprej se testni vzorec doda v mikroepruvete s filtrirnim gelom. Nato jih za nekaj časa damo v inkubator, nato v centrifugo. Eritrociti, ki so vezani na protitelesa proti skupini, so večji in zato ne gredo skozi gel, ampak ostanejo na njegovi površini. Prosti eritrociti kot posledica centrifugiranja se usedejo na dno epruvete. Prisotnost protiteles v vzorcu ocenimo z razporeditvijo eritrocitov. Priprava rezultatov študije traja 1 dan.
Normalne vrednosti
Protitelesa sistema ABO so predstavljena z dvema vrstama - α in β. Prvi se proizvajajo v aglutinogenu A, drugi pa v aglutinogenu B. Obe vrsti protiteles sta lahko naravna in imunska, to je pridobljena kot posledica preobčutljivosti. Običajno je titer naravnih α-protiteles od 1:8 do 1:256, titer naravnih β-protiteles je od 1:8 do 1:128. Imunska protitelesa proti skupini običajno niso odkrita. Pri otrocih in starejših je mogoče ugotoviti fiziološko znižanje ravni naravnih protiteles.
Povečanje vrednosti
Razlog za povečanje vrednosti analize za protitelesa po sistemu ABO je preobčutljivost telesa, ki jo povzroči vnos antigena, ki je skupinsko nezdružljiv. V teh primerih se povečajo titri naravnih protiteles proti skupinam, včasih se določijo popolna in nepopolna imunska protitelesa proti skupinam. Najpogosteje se takšna odstopanja diagnosticirajo pri nosečnicah s krvno skupino I, saj eritrociti nimajo aglutinogena niti tipa A niti tipa B, pogostnost pojavljanja skupine pa je 45%.
Zmanjševanje vrednosti
Zmanjšanje vrednosti analize za protitelesa po sistemu ABO nima diagnostične vrednosti, nekatere patologije, na primer agamaglobulinemija, Hodgkinova bolezen, kronična limfocitna levkemija, lahko postanejo njeni vzroki. V odsotnosti izoimunizacije s specifičnimi dejavniki so imunska protitelesa proti skupinam odsotna in naravni titri so nizki.
Zdravljenje odstopanj od norme
Največjo prognostično vrednost pri spremljanju nosečnosti pri ženskah s krvno skupino I ima preiskava krvi na protitelesa po sistemu ABO. Njegovi rezultati omogočajo prepoznavanje stanja preobčutljivosti na skupinske dejavnike in preprečevanje razvoja imunološkega konflikta, ki vodi do eritroblastoze pri novorojenčku. Če se odkrije povečan titer naravnih protiteles proti skupini, se določijo imunska protitelesa, potem je potrebno poiskati nasvet porodničarja-ginekologa, ki vodi nosečnost. Odločitev o potrebi in taktiki terapije sprejme specialist individualno.
Praviloma je za osebo, ki ni povezana z medicino, to znanje dovolj, in za tiste, ki jih zanimajo značilnosti sistemske enote ABO in razlogi za razlike v skupinah, se lahko seznanite z dodatnim gradivom.
Načela delitve ABO
Sistem ABO krvne skupine temelji na različni vsebnosti aglutinogena A in B na površini eritrocitov ter na prisotnosti aglutininov a in b v plazmi.
Obstajajo 4 krvne skupine ABO in značilnosti vsake temeljijo na razmerju med aglutinogeni in aglutinini:
- I - eritrocit ne nosi aglutinogena na svoji površini, obe vrsti aglutininov pa sta v krvnem obtoku. V tem primeru je krvna skupina ab0 ali 0 (I). Menijo, da je to najbolj "starodavna" vrsta krvi.
- II - površina eritrocitov vsebuje komponento A, medtem ko je aglutinin b odkrit v plazmi, oznaka bo A (II).
- III - eritrocit je nosilec elementa B, medtem ko bo plazma vsebovala samo element B, ta pa bo označen kot B (III).
- IV - na površini eritrocitov so aglutinogeni A in B, vendar v plazmi ni aglutininov. Običajno je označena z AB (IV). Obstaja mnenje, da je to "najmlajša" kri.
Tako so lahko v človeški krvi prisotne kombinacije:
Toda kombinacije Aa ali Bb se nikoli ne pojavijo.
Znanstveniki gradijo teorije o tem, kako je ta sistem povezan s psihološkim tipom človeka, njegovo nagnjenostjo k določenim patologijam itd.
To je aglutinacija, ki povzroči hemotransfuzijski šok, ki se pojavi pri skupinski nezdružljivosti.
Nekaj o transfuzijskem šoku
Tudi po odkritju ABO sistema krvnih skupin so se pri transfuziji krvi precej pogosto pojavljali zapleti, saj v zgodnjih fazah niso upoštevali vrednosti aglutininov, temveč le aglutenogenski indeks. Prej je veljalo, da je transfuzija krvne skupine AB0 ali 0 (I) dovoljena vsem, medtem ko se lahko AB (IV) infundira samo za četrto skupino. To napačno prepričanje je bilo glavni vzrok zapletov po transfuziji krvi.
Postopoma v procesu laboratorijskih študij je bilo ugotovljeno, da aglutinogeni in aglutinini z istim imenom, ko se sprostijo v splošni krvni obtok, povzročijo naslednjo reakcijo:
- aglutinacija (lepljenje) eritrocitov;
- po aglutinaciji pride do hemolize (uničenja) eritrocita in močnega povečanja količine prostega hemoglobina v plazmi;
- sprememba krvne formule povzroči eritropenijo in splošno zastrupitev telesa zaradi presežne količine prostega hemoglobina.
To stanje se imenuje hemotransfuzijski šok in se pogosto konča s smrtjo bolnika zaradi dejstva, da je popolna oskrba tkiv s krvjo motena, telo pa doživi hudo hipoksijo zaradi pomanjkanja kisika. Prvič, vitalni organi - srce in možgani - trpijo zaradi pomanjkanja prehrane.
Preden so zdravniki odkrili in preučevali krvne skupine sistema ABO, pa tudi načela združljivosti, se je smrt bolnikov po transfuziji zgodila precej pogosto zaradi hemotransfuzijskega šoka, ki se je zgodil v ozadju velikega uničenja rdečih krvnih celic.
Več informacij o tveganjih transfuzije
Tudi popolna združljivost darovalca in prejemnika krvi po sistemu ABO ne daje 100-odstotnega zagotovila, da bo transfuzija krvi potekala brez zapletov.
Pojav zapletov je lahko povezan z naslednjim:
- Aglutinogeni ali aglutinini darovalca se po sestavi zelo razlikujejo od istoimenskih pri prejemniku in ob zaužitju povzročijo imunski odgovor. Kljub glavni delitvi na skupine je sestava krvi vsake osebe individualna, prav te posamezne značilnosti povzročajo imunološke reakcije med transfuzijo.
- Močna razlika v sestavi plazme. Laboratorijske študije preverjajo le razmerja glavnih biokemičnih komponent, številni kazalniki se ne upoštevajo. To neskladje lahko povzroči tudi akutni imunski odziv.
Toda obstajajo situacije, ko je transfuzija potrebna za vitalne znake.
Tej vključujejo:
- hude oblike anemije;
- obsežna izguba krvi zaradi poškodb ali operacij:
- zmanjšanje koagulabilnosti;
- onkološki procesi;
- hude opekline.
Sodobna medicina, odvisno od bolnikovega stanja, priporoča, da ne opravite popolne transfuzije krvi, ampak bolniku daste posamezne komponente krvi:
- eritrocitna masa. Pripravljen je iz krvi darovalca in vsebuje samo "oprane" eritrocite, ki nosijo minimalne informacije o darovalcu. Eritrocitna masa se uporablja za zdravljenje anemije, onkoloških procesov hematopoetskega sistema ali v primeru izgube krvi.
- trombocitna masa. V primeru motenj strjevanja krvi transfuzijo trombocitov neosebnega darovalca.
- levkocitna masa. Pomaga obnoviti število levkocitov pri onkoloških boleznih, povezanih z inhibicijo levkocitnega klica, in pri drugih stanjih, ki jih spremlja levkopenija.
- Plazma. Infuzijo plazme izvajamo predvsem pri hudih opeklinah, med drugimi boleznimi pa se transfuzija plazme redko uporablja.
Sistem ABO se uporablja tudi za izbiro kompatibilnih krvnih elementov, vendar so zapleti pri transfuziji krvi veliko manj pogosti.
V vseh drugih primerih kombinacija aglutininov in aglutinogenov ne vpliva na splošno zdravje osebe.
Dešifriranje sistema Avo
in mladostniška ginekologija
in na dokazih temelječa medicina
in zdravstveni delavec
Sistem krvnih skupin ABO je sestavljen iz dveh skupin aglutinogenov, A in B, ter dveh ustreznih plazemskih aglutininov, alfa (anti-A) in beta (anti-B). Različne kombinacije teh antigenov in protiteles tvorijo štiri krvne skupine: skupina 0(1) - oba antigena sta odsotna; skupina A (II) - na eritrocitih je le antigen A; skupina B(III) - na eritrocitih je le antigen B; skupina AB (IV) - na eritrocitih sta prisotna antigena A in B.
Edinstvenost sistema ABO je v tem, da so v plazmi neimuniziranih ljudi naravna protitelesa proti antigenu, ki jih ni na eritrocitih: pri osebah skupine 0 (1) - protitelesa proti A in B; pri osebah skupine A (II) - protitelesa proti B; pri osebah skupine B (III) - protitelesa proti A; osebe skupine AB(IV) nimajo protiteles proti antigenom sistema ABO.
V nadaljevanju bomo protitelesa anti-A in anti-B imenovali anti-A in anti-B.
Določanje krvne skupine ABO poteka z identifikacijo specifičnih antigenov in protiteles (dvojna ali navzkrižna reakcija). Anti-A in anti-B dokazujemo v krvnem serumu s standardnimi A(II) in B(III) eritrociti. Prisotnost ali odsotnost antigenov A in B na eritrocitih ugotavljamo z uporabo monoklonskih ali poliklonskih protiteles (standardni hemaglutinacijski serumi) ustrezne specifičnosti.
Določitev krvne skupine se izvaja dvakrat: primarna študija - v medicinskem oddelku (kina za odvzem krvi); potrditvena študija - v laboratorijskem oddelku. Algoritem za izvajanje imunohematoloških laboratorijskih testov med transfuzijo krvi je prikazan na sl. 18.1.
Rezultat določitve krvne skupine se zabeleži v zgornjem desnem kotu sprednjega lista anamneze ali v dnevniku (kartonu) darovalca z navedbo datuma in podpisom zdravnika, ki je opravil določitev.
Na severozahodu Rusije je porazdelitev krvnih skupin sistema ABO v populaciji naslednja: skupina 0 (I) - 35%; skupina A(II)%; skupina B(III)%; skupina AB (IV)%.
Opozoriti je treba, da obstajajo različne vrste (šibke različice) tako antigena A (v večji meri) kot antigena B. Najpogostejši vrsti antigena A sta A 1 in A 2. Prevalenca antigena A 1 pri posameznikih skupin A (II) in AB (IV) je 80%, antigena A 2 pa približno 20%. Vzorci krvi z A 2 lahko vsebujejo protitelesa proti A 1, ki medsebojno delujejo s standardnimi rdečimi krvnimi celicami skupine A (II). Prisotnost anti-A 1 ugotavljamo z navzkrižnim določanjem krvnih skupin in med testom individualne kompatibilnosti.
Za diferencirano določanje variant antigena A (A 1 in A 2) je treba uporabiti specifične reagente (fitohemaglutinine ali monoklonska protitelesa anti-A 1). Bolnike skupin A 2 (II) in A 2 B (IV) je treba transfuzijo hemokomponent, ki vsebujejo eritrocite, skupin A 2 (II) in A 2 B (IV) Lahko se priporočijo tudi transfuzije opranih eritrocitov: 0 (I) - za bolnike s krvno skupino A 2 (II); 0 ( I) in B (III) - za bolnike s krvno skupino A 2 B(II).
Določanje krvne skupine po sistemu ABO
Krvne skupine določamo s standardnimi serumi (enostavna reakcija) in standardnimi eritrociti (dvojna ali navzkrižna reakcija).
Krvno skupino določimo s preprosto reakcijo z dvema serijama standardnih izohemaglutinacijskih serumov.
- Napredek definicije [pokaži] .
Določanje krvne skupine se izvaja pri dobri svetlobi in temperaturi od + 15 do + 25 ° C na tabletah. Na levi strani tablice vpišite 0 (1), na sredini - A (II), na desni strani - B (III). Na sredini zgornjega roba tablice je zapisano ime darovalca ali številka krvi, ki se testira. Uporabite aktivne standardne serume treh skupin (O, A, B) s titrom vsaj 1:32, dve seriji. Serumi so nameščeni v posebnih stojalih v dveh vrstah. Vsak serum ustreza označeni pipeti. Serumska skupina AB(IV) se uporablja kot dodatna kontrola.
Na tableto nanesemo eno ali dve kapljici standardnih serumov v dveh vrstah: serum skupine 0(1) - levo, serum skupine A(II) - v sredini, serum skupine B(III) - desno.
Kapljice krvi iz prsta ali epruvete nanesemo s pipeto ali stekleno paličico blizu vsake kapljice seruma in premešamo s palčko. Količina krvi mora biti 8-10-krat manjša od seruma. Po mešanju ploščo ali tableto nežno stresemo v roke, kar prispeva k hitrejši in jasnejši aglutinaciji eritrocitov. Ko pride do aglutinacije, vendar ne prej kot po 3 minutah, kapljicam seruma z eritrociti, kjer je prišlo do aglutinacije, dodamo eno kapljico 0,9% raztopine natrijevega klorida in opazujemo do preteka 5 minut. Po 5 minutah odčitajte reakcijo v prepustni svetlobi.
Če je aglutinacija nejasna, se mešanici seruma in krvi doda še ena kapljica 0,9% raztopine natrijevega klorida, po kateri se sklepa o skupinski pripadnosti (tabela 18.4).
- Odsotnost aglutinacije v vseh treh kapljicah pomeni, da v testni krvi ni aglutinogena, to pomeni, da kri spada v skupino 0(I).
- Začetek aglutinacije v kapljicah s seruma 0(I) in B(III) pomeni, da je v krvi aglutinogen A, to pomeni, da kri pripada skupini A(II).
- Prisotnost aglutinacije v kapljicah s serumi skupine 0 (I) in A (II) kaže, da testna kri vsebuje aglutinogen B, to je kri skupine B (III).
- Aglutinacija v vseh treh kapljicah kaže na prisotnost aglutinogena A in B v preiskovani krvi, to pomeni, da kri spada v skupino AB (IV). Vendar pa je v tem primeru, glede na to, da je zaradi nespecifične reakcije možna aglutinacija z vsemi serumi, treba na ploščo ali ploščico nanesti dve ali tri kapljice standardnega seruma AB(IV) in dodati 1 kapljico testa. kri za njih. Serum in kri se zmešata in v 5 minutah se opazuje rezultat reakcije.
Če do aglutinacije ni prišlo, se krvna preiskava nanaša na skupino AB(IV). Če se pojavi aglutinacija s serumom skupine AB (IV), potem je reakcija nespecifična. V primeru šibke aglutinacije in v vseh dvomljivih primerih se kri ponovno testira s standardnimi serumi iz drugih serij.
Določanje krvne skupine ABO z dvojno reakcijo
(glede na standardne serume in standardne eritrocite)
Standardni eritrociti so 10-20 % suspenzija svežih nativnih eritrocitov (ali testnih celic, opranih od konzervansa) skupin 0 (I), A (II) in B (III) v 0,9 % raztopini natrijevega klorida ali citratno-fiziološki raztopini. Nativne standardne eritrocite lahko porabimo v 2-3 dneh, če jih hranimo v izotonični fiziološki raztopini pri +4°C. Konzervirane standardne eritrocite hranimo 2 meseca pri +4°C in jih pred uporabo speremo z raztopine konzervansa.
Ampule ali stekleničke s standardnimi serumi in standardnimi eritrociti so postavljene v posebne nosilce z ustreznimi oznakami. Za delo s tipizirajočimi reagenti se uporabljajo suhe, čiste pipete, ločene za vsak reagent. Za pranje steklenih (plastičnih) palic in pipet pripravimo kozarce z 0,9% raztopino natrijevega klorida.
Za določitev skupine vzamemo 3-5 ml krvi v epruveto brez stabilizatorja. Kri naj stoji 1,5-2 ure pri temperaturi + 15-25 ° C.
- Napredek definicije [pokaži] .
Na tableto nanesemo dve kapljici (0,1 ml) standardnih serumov skupin 0(I), A(II), B(III) dveh serij. V skladu s tem v vsako skupino serumov damo eno majhno kapljico (0,01 ml) standardnih eritrocitov skupin 0(I), A(II), B(III). Standardnim serumom dodamo eno kapljico testirane krvi, standardnim eritrocitom pa dve kapljici testiranega seruma. Količina krvi mora biti 8-10-krat manjša od seruma. Kapljice mešamo s stekleno paličico in s stresanjem tablete v rokah 5 minut spremljamo začetek aglutinacije. Če je aglutinacija mehka, se zmesi seruma in krvi dodatno doda kapljica 0,9% raztopine natrijevega klorida (0,1 ml), po kateri se sklepa o skupinski pripadnosti (tabela 18.4).
- Prisotnost aglutinacije s standardnimi eritrociti A in B ter odsotnost aglutinacije v treh standardnih serumih dveh serij pomeni, da sta v testnem serumu prisotna oba aglutinina, alfa in beta, v testnih eritrocitih pa ni aglutinogena, tj. , kri spada v skupino 0 (I) .
- Prisotnost aglutinacije s standardnimi serumi skupin 0(I), B(III) in s standardnimi eritrociti skupine B(III) kaže, da je v preiskovanih eritrocitih prisoten aglutinogen A, v preiskovanem serumu pa aglutinin beta. Zato kri spada v skupino A(II).
- Prisotnost aglutinacije s standardnimi serumi skupin 0 (I), A (II) in s standardnimi eritrociti skupine A (II) kaže, da preučevani eritrociti vsebujejo aglutinogen B, preiskovani serum pa vsebuje aglutinin alfa. Zato kri spada v skupino B(III).
- Prisotnost aglutinacije z vsemi standardnimi serumi in odsotnost aglutinacije z vsemi standardnimi eritrociti kaže, da sta v proučevanih eritrocitih prisotna oba aglutinina, to pomeni, da kri spada v skupino AB(IV).
Določitev krvne skupine
z uporabo koliklonov anti-A in anti-B
Zolikloni anti-A in anti-B (monoklonska protitelesa proti antigenoma A in B) so namenjeni določanju krvne skupine človeškega sistema ABO namesto standardnih izohemaglutinacijskih serumov. Za vsako krvno skupino se uporabi ena serija reagentov anti-A in anti-B.
- Napredek definicije [pokaži] .
Ena velika kapljica anti-A in anti-B tsoliklonov (0,1 ml) se nanese na tableto (ploščo) pod ustreznimi napisi: "Anti-A" ali "Anti-B". Zraven kanemo eno majhno kapljico preiskovane krvi (razmerje krvnega reagenta je 1:10), nato reagent in kri zmešamo in z rahlim zibanjem plošče ali ploščice spremljamo potek reakcije.
Aglutinacija s kolikloni anti-A in anti-B običajno nastopi v prvih 5-10 sekundah. Opazovanje je treba izvajati 2,5 minute zaradi možnosti poznejšega začetka aglutinacije z eritrociti, ki vsebujejo šibke različice antigenov A ali B.
Če obstaja sum na spontano aglutinacijo pri osebah s krvno skupino AB(IV), se izvede kontrolna študija z 0,9% raztopino natrijevega klorida. Odgovor mora biti negativen.
Zolikloni anti-A (roza) in anti-B (modri) so na voljo v naravni in liofilizirani obliki v ampulah z 20, 50, 100 in 200 odmerki, pri čemer je vsaki ampuli priloženo vehiklo, 2, 5, 10, 20 ml oz. .
Dodaten nadzor pravilnosti določanja krvne skupine ABO z reagenti anti-A in anti-B je monoklonski reagent anti-AB ("Hematolog", Moskva). Priporočljivo je, da reagent anti-AB uporabljate vzporedno z imunskimi poliklonskimi serumi in monoklonskimi reagenti. Kot posledica reakcije z anti-AB reagentom se razvije aglutinacija eritrocitov skupin A (II), B (III) in AB (IV); eritrociti skupine 0(I) nimajo aglutinacije.
NAPAKE PRI DOLOČANJU SKUPINSKIH PRIPOMOČKOV
Napake pri določanju krvnih skupin so lahko odvisne od treh razlogov:
- tehnični;
- inferiornost standardnih serumov in standardnih eritrocitov;
- biološke značilnosti proučevane krvi.
Tehnične napake vključujejo:
- a) nepravilna razporeditev serumov na ploščici;
- b) nepravilna količinska razmerja serumov in eritrocitov;
- c) uporaba nezadostno čistih tablet in drugih predmetov v stiku s krvjo. Za vsak serum mora obstajati posebna pipeta; za pranje pipet je treba uporabiti samo 0,9% raztopino natrijevega klorida;
- d) nepravilno snemanje preučevane krvi;
- e) neupoštevanje časa, določenega za reakcijo aglutinacije; v primeru naglice, ko se reakcija upošteva pred iztekom 5 minut, lahko pride do aglutinacije, če so v testni krvi šibki aglutinogeni; če je reakcija preosvetljena več kot 5 minut, se lahko kapljice z robov izsušijo in simulirajo aglutinacijo, kar bo prav tako vodilo do napačnega zaključka;
- f) pomanjkanje aglutinacije zaradi visoke (nad 25 °C) temperature okolja. Da bi se izognili tej napaki, je priporočljivo uporabljati posebej pripravljene serume za delo v vročih podnebjih; za določanje krvnih skupin na krožniku ali plastičnem pladnju, katerega zunanjo površino dna spustimo v hladno vodo.
- g) nepravilno centrifugiranje: nezadostno centrifugiranje lahko privede do lažno negativnega rezultata, čezmerno centrifugiranje pa do lažno pozitivnega rezultata.
Napake glede na uporabo okvarjenih standardnih serumov in standardnih eritrocitov:
- a) šibki standardni serumi s titrom, manjšim od 1:32 ali potečenim, lahko povzročijo pozno in šibko aglutinacijo;
- b) uporaba neustreznih standardnih serumov ali eritrocitov, ki so bili pripravljeni nesterilno in nezadostno konzervirani, povzroči nastanek nespecifične "bakterijske" aglutinacije.
Napake glede na biološke značilnosti preizkušane krvi:
Napake glede na biološke značilnosti proučevanih eritrocitov:
- a) pozno in šibko aglutinacijo pojasnjujejo "šibke" oblike antigenov, eritrocitov, pogosteje - prisotnost šibkega aglutinogena A 2 v skupinah A in AB. Hkrati lahko v primeru določanja krvne skupine brez preiskave seruma za prisotnost aglutininov (preprosta reakcija) opazimo napake, zaradi katerih je kri skupine A 2 B opredeljena kot skupina B (III) , in kri A 2 - kot skupina 0 (I). Zato je treba, da bi se izognili napakam, določanje krvne skupine tako dajalcev kot prejemnikov opraviti s standardnimi eritrociti (dvojna ali navzkrižna reakcija). Za identifikacijo aglutinogena A 2 je priporočljivo ponoviti študijo z drugimi vrstami (serijami) reagentov z uporabo druge laboratorijske steklene posode s povečanjem časa registracije reakcije.
Specifični reagenti za razjasnitev krvne skupine v prisotnosti šibkih variant antigena A (A 1, A 2, A 3) z metodo neposredne aglutinacijske reakcije so anti-A sl in anti-A reagent).
Krvno skupino med "panaglutinacijo" lahko določimo po trikratnem izpiranju eritrocitov. Da bi odpravili nespecifično aglutinacijo, damo tableto v termostat pri +37°C za 5 minut, po tem nespecifična aglutinacija izgine, prava pa ostane. Priporočljivo je ponoviti določanje z monoklonskimi protitelesi, Coombsov test.
V primeru, da pranje eritrocitov ne daje želenega rezultata, je potrebno ponovno odvzeti vzorec krvi v predhodno segreto epruveto, vzorec postaviti v termo posodo za vzdrževanje temperature +37 ° C in dostaviti v laboratorij na analizo. Določanje krvne skupine je treba opraviti pri temperaturi +37 ° C, za katero se uporabljajo predhodno segreti reagenti, fiziološka raztopina in tableta.
Napake glede na biološke značilnosti preučevanega seruma:
- a) odkrivanje protiteles drugačne specifičnosti med rutinskim testiranjem je posledica predhodne senzibilizacije. Priporočljivo je določiti specifičnost protiteles in izbrati tipizirane eritrocite brez antigena, na katerega je bila dokazana imunizacija. Imunizirani prejemnik mora individualno izbrati združljivo kri dajalca;
- b) pri odkrivanju tvorbe "kovancev" standardnih eritrocitov v prisotnosti testnega seruma je priporočljivo potrditi nenormalni rezultat s standardnimi eritrociti skupine 0 (I). Za razlikovanje "kolonov" od pravih aglutinatov dodajte 1-2 kapljici izotonične raztopine natrijevega klorida in stresajte tableto, medtem ko se "koloni" uničijo;
- c) odsotnost protiteles anti-A ali anti-B. Morda pri novorojenčkih in bolnikih z zatrto humoralno imunostjo;
- d) aglutinacija standardnih eritrocitov, vključno s skupino 0(I) v prisotnosti testnega seruma, je povezana s prisotnostjo specifičnih in nespecifičnih protiteles proti prehladu. Izginotje aglutinacije med študijo pri temperaturi +37 ° C potrjuje nespecifične hladne aglutinine. Če testni serum interagira z nekaterimi vzorci eritrocitov skupine 0(I), to kaže na prisotnost specifičnih protiteles proti prehladu v serumu. Za ugotavljanje specifičnosti protiteles se testiranje izvaja s ploščo eritrocitov, tipiziranih po sistemih P, MNS itd.
- Imunološka selekcija darovalca in prejemnika pri transfuziji krvi, njenih sestavin in presaditvi kostnega mozga / Comp. Shabalin V.N., Serova L.D., Bushmarina T.D. in drugi - Leningrad, 1979. - 29 str.
- Kaleko S. P., Serebryanaya N. B., Ignatovich G. P. et al Alosenzibilizacija pri terapiji s hemokomponentami in optimizacija izbire histokompatibilnih parov darovalec-prejemnik v vojaških zdravstvenih ustanovah / Metoda. priporočila - Sankt Peterburg, 1994. - 16 str.
- Praktična transfuziologija / Ed. Kozinets G.I., Biryukova L.S., Gorbunova N.A. itd. - Moskva: Triada-T, 1996. - 435 str.
- Vodnik po vojaški transfuziologiji / Ed. E. A. Nečajev. - Moskva, 1991. str.
- Vodnik po transfuzijski medicini / Ed. E. P. Svedencova. - Kirov, 1999.- 716s.
- Rumyantsev A. G., Agranenko V. A. Klinična transfuziologija.- M.: GEOTAR MEDICINA, 1997.- 575 str.
- Shevchenko Yu.L., Zhiburt E.B., Varna transfuzija krvi: Vodnik za zdravnike.- Sankt Peterburg: Peter, 2000. - 320 str.
- Shevchenko Yu.L., Zhiburt E.B., Serebryanaya N.B. Imunološka in infekcijska varnost hemokomponentne terapije - Sankt Peterburg: Nauka, 1998. - 232 str.
- Schiffman F.J. Patofiziologija krvi / Per. iz angleščine - M. - Sankt Peterburg: Založba BINOM - Nevsko narečje, 2000. - 448 str.
- Transfuzija krvi v klinični medicini / Ed. P. L. Mollison, C. P. Engelfriet, M. Contreras.- Oxford, 1988. str.
Vir: Medicinsko laboratorijska diagnostika, programi in algoritmi. Ed. prof. Karpishchenko A.I., Sankt Peterburg, Intermedica, 2001
Opomba! Diagnostika in zdravljenje se ne izvajata virtualno! Razpravljamo le o možnih načinih ohranjanja zdravja.
Cena 1 ure (od 02:00 do 16:00, moskovski čas)
Od 16:00 do 02:00/uro.
Pravi svetovalni sprejem je omejen.
Prej prijavljeni pacienti me najdejo po njim znanih podrobnostih.
obrobne opombe
Kliknite na sliko -
Prosimo, da prijavite nedelujoče povezave do zunanjih strani, vključno s povezavami, ki ne vodijo neposredno do želenega gradiva, zahtevate plačilo, zahtevate osebne podatke itd. Za učinkovitost lahko to storite prek obrazca za povratne informacije, ki se nahaja na vsaki strani.
3. zvezek ICD je ostal nedigitaliziran. Kdor želi pomagati, se lahko prijavi na našem forumu
Na spletnem mestu je trenutno v pripravi polna HTML različica ICD-10 – Mednarodna klasifikacija bolezni, 10. izdaja.
Kdor želi sodelovati, se lahko prijavi na našem forumu
Obvestila o spremembah na spletnem mestu lahko prejmete prek razdelka foruma "Zdravstveni kompas" - Knjižnica spletnega mesta "Otok zdravja"
Izbrano besedilo bo poslano uredniku spletnega mesta.
se ne sme uporabljati za samodiagnozo in zdravljenje ter ne more nadomestiti osebnega zdravniškega svetovanja.
Uprava spletnega mesta ni odgovorna za rezultate, pridobljene med samozdravljenjem z uporabo referenčnega materiala spletnega mesta
Ponatis gradiva spletnega mesta je dovoljen pod pogojem, da je postavljena aktivna povezava do izvirnega gradiva.
Avtorske pravice © 2008 Blizzard. Vse pravice pridržane in zaščitene z zakonom.
Krvna skupina ABO
Krvna skupina ABO je sistem, ki odraža prisotnost ali odsotnost antigenov na površini rdečih krvničk in protiteles v krvni plazmi. Določanje krvne skupine je zelo pomembno pri transfuziji krvi in njenih sestavin.
Krvna skupina, opredelitev krvne skupine.
Razvrščanje po skupinah ABO, krvna skupina, krvna skupina, krvna skupina.
Kateri biomaterial se lahko uporabi za raziskave?
Kako se pravilno pripraviti na raziskavo?
- 24 ur pred študijo iz prehrane izločite mastno hrano.
- Ne kadite 30 minut pred darovanjem krvi.
Splošne informacije o študiju
Krvna skupina ABO je sistem, ki odraža prisotnost ali odsotnost antigenov na površini rdečih krvničk in protiteles v krvni plazmi. ABO (izgovarja se "a-be-zero") je najpogostejši sistem krvnih skupin v Rusiji.
Eritrociti na svoji površini nosijo signalne molekule - antigene - aglutinogene. Dva glavna antigena, vgrajena v molekulo eritrocitov, sta A in B. Glede na prisotnost ali odsotnost teh antigenov se določijo krvne skupine. Kri ljudi, ki imajo na eritrocitih antigen A, spada v drugo skupino - A (II), kri tistih, ki imajo na eritrocitih antigen B, pa v tretjo skupino - B (III). Če sta na eritrocitih prisotna tako antigen A kot antigen B, je to četrta skupina – AB (IV). Zgodi se tudi, da noben od teh antigenov ni določen v krvi na eritrocitih - potem je to prva skupina - O (I).
Običajno telo proizvaja protitelesa proti tistim antigenom (A ali B), ki jih ni na rdečih krvničkah – to so aglutinini, ki jih najdemo v krvni plazmi. To pomeni, da pri osebah z drugo krvno skupino - A (II) - na eritrocitih obstajajo antigeni A, plazma pa bo vsebovala protitelesa proti antigenom B - označena so kot anti-B (beta-aglutinin). Ker istoimenski antigeni (aglutinogeni) na površini eritrocitov in aglutinini v plazmi (A in alfa, B in beta) reagirajo med seboj in povzročijo "lepljenje" eritrocitov, ne morejo biti v krvi ene osebe. .
Odkritje sistema skupin ABO je omogočilo razumevanje, zakaj so bile transfuzije krvi včasih uspešne in včasih povzročajo hude zaplete. Oblikovan je bil koncept združljivosti krvnih skupin. Če na primer osebi z drugo krvno skupino - A (II), ki vsebuje protitelesa proti antigenu B, transfundiramo tretjo krvno skupino - B (III), bo prišlo do reakcije med antigeni in protitelesi, kar bo povzročilo lepljenje in uničenje rdečih krvničk in ima lahko resne posledice vse do smrti. Zato morajo biti krvne skupine med transfuzijo združljive.
Krvno skupino določimo s prisotnostjo ali odsotnostjo aglutinacije eritrocitov z uporabo serumov, ki vsebujejo standardne antigene in protitelesa.
V transfuzijskih centrih so vreče s krvjo ali krvnimi komponentami, prejetimi od dajalcev, označene z »O (I)«, »A (II)«, »B (III)« ali »AB (IV)«, kar omogoča hitro iskanje krvi prave vrste, kadar je to potrebno.
Za kaj se uporabljajo raziskave?
Ugotoviti, kakšno kri lahko varno transfuziramo bolniku. Izjemno pomembno je zagotoviti, da je darovana kri združljiva s krvjo prejemnika – osebe, ki ji jo bomo transfuzirali. Če kri darovalca ali njene sestavine vsebujejo protitelesa proti antigenom, ki jih vsebujejo eritrociti prejemnika, se lahko razvije huda transfuzijska reakcija, ki jo povzroči uničenje eritrocitov v žilni postelji.
Kdaj je predviden študij?
- Pred transfuzijo krvi – tako za tiste, ki jo potrebujejo, kot za dajalce.
Transfuzija krvi in njenih sestavin je najpogosteje potrebna v naslednjih situacijah:
- huda anemija,
- krvavitev med operacijo ali po njej
- huda poškodba,
- velika izguba krvi katerega koli izvora,
- rak in neželeni učinki kemoterapije,
- motnje strjevanja krvi, zlasti hemofilija.
- Pred operacijo.
Rezultati kažejo, da kri osebe spada v eno od štirih skupin, odvisno od prisotnosti antigenov na rdečih krvničkah in protiteles, ki so prisotna v krvi.
Protiteles α in β ne bo
Kaj lahko vpliva na rezultat?
Hemoliza v serumu lahko povzroči nezanesljivost rezultatov.
Kdo naroča študijo?
Terapevt, splošni zdravnik, hematolog, transfuziolog, kirurg.
Sistem krvnih skupin Avo
Nauk o krvnih skupinah je nastal iz potreb klinične medicine. Pri transfuziji krvi z živali na človeka ali s človeka na človeka so zdravniki pogosto opazili hude zaplete, ki so se včasih končali s smrtjo prejemnika.
Z odkritjem krvnih skupin dunajskega zdravnika K. Landsteinerja (1901) je postalo jasno, zakaj so v nekaterih primerih transfuzije krvi uspešne, v drugih pa se za bolnika končajo tragično. K. Landsteiner je prvi odkril, da lahko plazma ali serum nekaterih ljudi aglutinira (zlepi skupaj) eritrocite drugih ljudi. Ta pojav se imenuje izohemaglutinacija. Temelji na prisotnosti antigenov v eritrocitih, imenovanih aglutinogeni in označenih s črkama A in B, v plazmi pa naravnih protiteles ali aglutininov, imenovanih a in b. Aglutinacijo eritrocitov opazimo le, če obstajata aglutinogen in aglutinin istega imena: A in α, B in β.
Ugotovljeno je bilo, da imajo aglutinini kot naravna protitelesa (AT) dva vezavna centra, zato lahko ena molekula aglutinina tvori most med dvema eritrocitoma. V tem primeru lahko vsak od eritrocitov s sodelovanjem aglutininov stopi v stik s sosednjim, zaradi česar nastane konglomerat (aglutinat) eritrocitov.
V krvi iste osebe ne more biti istoimenskih aglutinogenov in aglutininov, saj bi v nasprotnem primeru prišlo do množične aglutinacije eritrocitov, kar je nezdružljivo z življenjem. Možne so samo štiri kombinacije, v katerih ne nastopajo istoimenski aglutinogeni in aglutinini, oziroma štiri krvne skupine: I - 0 (αβ), II - A (β), III - B (α), IV - AB (0). ).
Poleg aglutininov, plazme ali seruma kri vsebuje hemolizine, prav tako so dveh vrst in jih tako kot aglutinine označujemo s črkama α in β. Ob srečanju istoimenskega aglutinogena in hemolizina pride do hemolize eritrocitov. Delovanje hemolizinov se kaže pri temperaturi 37-40°C. Zato pri transfuziji nezdružljive krvi pri osebi že pride do hemolize eritrocitov. Pri sobni temperaturi, če se pojavijo aglutinogeni in aglutinini z istim imenom, pride do aglutinacije, vendar hemolize ni opaziti.
V plazmi ljudi z II, III, IV krvnimi skupinami so antiaglutinogeni, ki so zapustili eritrocite in tkiva. Označeni so, tako kot aglutinogeni, s črkama A in B.
Serološka sestava glavnih krvnih skupin (sistem ABO)
Plazma, plazma ali serum
hemoaglutinini in hemolizini
Kot je razvidno iz spodnje tabele, krvna skupina I nima aglutinogenov, zato je po mednarodni klasifikaciji označena kot skupina 0, II - se imenuje A, III - B, IV - AB.
Za rešitev vprašanja združljivosti krvnih skupin se uporablja naslednje pravilo: okolje prejemnika mora biti primerno za življenje eritrocitov dajalca (osebe, ki daruje kri). Plazma je tak medij, zato mora prejemnik upoštevati aglutinine in hemolizine v plazmi, darovalec pa aglutinogene v eritrocitih. Za rešitev vprašanja združljivosti krvnih skupin se testna kri zmeša s serumom ljudi z različnimi krvnimi skupinami. Aglutinacija se pojavi, ko se serum skupine I pomeša z eritrociti skupin II, III in IV, serum skupine II - z eritrociti skupin III in IV, serum skupine III - z eritrociti skupin 11 in IV.
Zato je krvna skupina I združljiva z vsemi drugimi krvnimi skupinami, zato človeka, ki ima krvno skupino I, imenujemo univerzalni darovalec. Po drugi strani pa eritrociti
IV krvne skupine ne smejo povzročati aglutinacijskih reakcij pri mešanju s plazmo (serumom) ljudi s katero koli krvno skupino, zato ljudi s IV krvno skupino imenujemo univerzalni prejemniki.
Zakaj pri odločanju o kompatibilnosti ne upoštevajo aglutininov in hemolizinov darovalca? To je posledica dejstva, da se aglutinini in hemolizini pri transfuziji z majhnimi odmerki krvi (ml) razredčijo v velikem volumnu plazme (ml) prejemnika in jih vežejo njeni antiaglutinini, zato ne bi smeli predstavljati nevarnosti. na eritrocite.
V vsakdanji praksi se za rešitev vprašanja vrste transfuzirane krvi uporablja drugačno pravilo: transfuzijo krvi ene skupine in le iz zdravstvenih razlogov, ko je oseba izgubila veliko krvi. Samo v odsotnosti enoskupinske krvi je mogoče z veliko previdnostjo transfuzirati majhno količino združljive krvi. To je razloženo z dejstvom, da ima približno 10-20% ljudi visoko koncentracijo zelo aktivnih aglutininov in hemolizinov, ki jih antiaglutinini ne morejo vezati niti v primeru transfuzije majhne količine krvi druge skupine.
Zapleti po transfuziji včasih nastanejo zaradi napak pri določanju krvnih skupin. Ugotovljeno je bilo, da aglutinogeni A in B obstajajo v različnih variantah, ki se razlikujejo po strukturi in antigenski aktivnosti. Večina jih je dobila digitalno oznako (A 1 , A 2 , A 3 itd., B 1 , B 2 itd.). Višja kot je serijska številka aglutinogena, manjša je njegova aktivnost. Čeprav sta aglutinogena A in B razmeroma redka, ju pri določanju krvnih skupin morda ne bodo zaznali, kar lahko privede do nekompatibilnih transfuzij krvi.
Upoštevati je treba tudi, da večina človeških eritrocitov nosi antigen H. Ta antigen se pri ljudeh s krvno skupino 0 vedno nahaja na površini celičnih membran, prisoten pa je kot latentna determinanta tudi na celicah ljudi s krvnimi skupinami. A, B in AB. H je antigen, iz katerega nastaneta antigena A in B. Pri ljudeh s krvno skupino 1 je antigen na voljo delovanju protiteles anti-H, ki so precej pogosta pri ljudeh s krvno skupino II in IV, pri ljudeh pa relativno redka. s skupino III. Ta okoliščina lahko povzroči zaplete pri transfuziji krvi pri transfuziji krvi skupine 1 ljudem z drugimi krvnimi skupinami.
Koncentracija aglutinogenov na površini membrane eritrocitov je izjemno visoka. Torej en eritrocit krvne skupine A 1 vsebuje povprečno 00.000 antigenskih determinant ali receptorjev za istoimenske aglutinine. S povečanjem atomskega števila aglutinogena se število takih determinant zmanjša. Eritrociti skupine A² imajo le 0000 antigenskih determinant, kar pojasnjuje tudi manjšo aktivnost tega aglutinogena.
Trenutno se sistem ABO pogosto imenuje AVN, namesto izrazov "aglutinogeni" in "aglutinini" pa se uporabljajo izrazi "antigeni" in "protitelesa" (na primer antigeni AVH in protitelesa AVH).
Za nadaljevanje prenosa morate zbrati sliko.
Ta sistem je glavni, ki določa združljivost ali nezdružljivost transfuzirane krvi. Vključuje dva gensko določena pomembna antigena: A in B - in dve vrsti protiteles proti njim, aglutinine a in b. Kombinacije aglutinogenov in aglutininov določajo 4 skupine sistema ABO. Ta sistem je edini, pri katerem imajo neimuni posamezniki v plazmi naravna protitelesa proti manjkajočemu antigenu. Aglutinogen A je pri večini ljudi dobro izražen (ima veliko antigensko moč): s protitelesi anti-A (a) daje izrazito reakcijo aglutinacije eritrocitov. Približno 12% posameznikov antigena skupin A(11) in AB(IV) ima šibke antigenske lastnosti, označen je kot antigen A2. Tako obstaja skupina antigenov A: A1 (močan) in šibkejši A2, A3, A4 itd. Pri določanju krvnih skupin je treba upoštevati obstoj šibkih antigenov A, saj so eritrociti s takšnimi antigeni sposobni proizvajati le pozno in blaga aglutinacija, ki lahko povzroči napake. Šibke različice antigena B so zelo redke. Protitelesa ABO sistema a (anti-A) in b (anti-B) so normalna lastnost krvne plazme, ki se v življenju človeka kakovostno ne spremeni, in b pa so popolna, hladna protitelesa. V večini primerov jih pri novorojenčkih ne najdemo in se pojavijo v prvih treh mesecih življenja ali celo v enem letu. Skupinski aglutinini dosežejo polni razvoj do 18. leta, v starosti pa se njihov titer (raven) zmanjša, kar opazimo tudi pri imunsko pomanjkljivih stanjih. Poleg običajno obstoječih (naravnih) skupinskih antigenov in v nekaterih primerih obstajajo imunska protitelesa anti-A in anti-B. Najpogostejši vzrok za to je nosečnost, v kateri imata mati in plod različno krvno skupino, pogosteje, če je mati 1(0), plod 11(A) ali III(B). Določanje krvne skupine je bistvenega pomena za kompatibilno transfuzijo krvi. V tem primeru se je treba držati pravila: eritrociti darovalca ne smejo vsebovati antigena, ki ustreza prejemnikovim protitelesom, to je A in a, B in b, sicer bodo vbrizgane eritrocite močno uničile bolnikova protitelesa - hemoliza. , kar lahko privede do smrti prejemnika. Protitelesa donorske skupine lahko zanemarimo, saj jih razredči prejemnikova plazma. Zato lahko O(I) kri, ki ne vsebuje aglutinogena, transfuziramo ljudem s katero koli krvno skupino. Posamezniki s krvno skupino 0(1) se štejejo za "univerzalne darovalce". Kri skupine A(P) lahko transfuziramo prejemnikom skupine A(P) in skupine AB(IV), ki nimajo plazemskih aglutininov. Krvno skupino B(III) lahko transfuziramo osebam s skupino B(III) in AB(IV).
Določanje krvnih skupin sistema ABO se izvaja z naslednjimi metodami.
I. Določanje krvne skupine s standardnimi izohemaglutinacijskimi serumi. S to metodo se ugotovi prisotnost ali odsotnost aglutinogena v krvi in na podlagi tega se sklepa o skupinski pripadnosti proučevane krvi.
2. Določanje krvne skupine na navzkrižni način, to je sočasno s standardnimi izohemaglutinacijskimi serumi in standardnimi eritrociti. S to metodo, tako kot s prvo, ugotavljamo prisotnost ali odsotnost aglutinogenov in poleg tega s standardnimi eritrociti ugotavljamo prisotnost ali odsotnost skupinskih aglutininov.
3. Določanje krvne skupine z uporabo monoklonskih protiteles (KOLIKLON).
NAPAKE PRI DOLOČANJU KRVNIH SKUPIN
Tehnične napake. Kršitev zgornjih pravil za določanje krvnih skupin lahko privede do napačne ocene rezultatov reakcije. Odstopanja od pravil so lahko:
Uporaba nizkokakovostnih standardnih serumov ali eritrocitov (pretečen rok uporabe, kontaminacija z njimi, sušenje serumov);
Mešanje vzorcev preučevane krvi;
Napačna razporeditev standardnih serumov ali focitov v stojalih;
Napačen vrstni red nanosa standardnih reagentov na ploščo;
Napačno razmerje seruma in rdečih krvničk (ne 10:1);
Raziskava pri temperaturi nižji od 15 ° C (pojavi se hladna aglutinacija) ali več kot 25 ° C (aglutinacija se upočasni);
Neupoštevanje časa, potrebnega za reakcijo (5 min);
Ne izvajajte dodajanja fiziološke raztopine, ki mu sledi zibanje plošče;
Ne uporabljajte kontrolne reakcije s serumom skupine ABo(IV);
Uporaba kontaminiranih ali mokrih pipet, paličic, plošč.
V vseh primerih nejasnega ali dvomljivega rezultata je treba ponoviti določanje krvne skupine s križno metodo z uporabo standardnih serumov iz drugih serij.
Napake, povezane z biološkimi značilnostmi proučevane krvi.
Napačna definicija skupine A 2 in A 2 B. Eritrociti s šibkim antigenom A z antiserumom tvorijo majhne, počasi nastajajoče aglutinate. Reakcijo lahko upoštevamo kot negativno, to je, da je skupina A 2 pomotoma registrirana kot O (1), A 2 B - kot V (Sh). Tveganje za takšno napako je še posebej veliko ob hkratni prisotnosti tehničnih napak (razmerje seruma in eritrocitov je 10:1, temperatura je nad 25 °C, rezultati se zabeležijo prej kot v 5 minutah).
Napake, povezane s prisotnostjo nespecifične aglutinabilnosti proučevanih eritrocitov. Ta pojav opazimo pri bolnikih z malignimi tumorji, levkemijo, sepso, opeklinami, cirozo jeter, avtoimunsko hemolitično anemijo in je posledica disproteinemije. Zazna prisotnost nespecifične kontrole aglutinacije s serumsko skupino ABo (IV). V teh primerih je potrebno ponovno ugotavljanje skupinske pripadnosti z navzkrižno metodo. V kapljice, kjer opazimo aglutinacijo, lahko dodamo fiziološko raztopino, segreto na 37 °. Če je potrebno, lahko proučevane eritrocite speremo s toplo (37 °) fiziološko raztopino in ponovno določimo krvno skupino.
Napake, povezane s prisotnostjo ekstraaglutininov. V krvnem serumu oseb skupin A2 (P) in A2B (IV) se v približno 1% primerov odkrijejo protitelesa proti antigenu A1 - a1. To otežuje določanje krvne skupine z navzkrižno metodo, saj serum takih posameznikov aglutinira standardne eritrocite skupine A (P), tj. Manifestira se kot serum skupine 0 (1).
Pri nekaterih boleznih se zmanjša aglutinabilnost eritrocitov, zlasti skupine A (P).
Pri stanjih imunske pomanjkljivosti pri starejših opazimo zmanjšanje ravni skupinskih aglutininov.
V vseh primerih dvomljivega rezultata je treba določitev krvne skupine ponoviti s križno metodo z uporabo serumov z večjo aktivnostjo.
18. Antigeni sistema Rhesus. Skupine sistema Rhesus. klinični pomen. Metode določanja Rh antigenov in možne napake.
Rh antigeni so drugi najpomembnejši v transfuzijski praksi po krvnih skupinah sistema ABO.V obdobju aktivnega uvajanja transfuzije krvi v kliniko se je število posttransfuzijskih zapletov po ponavljajočih se transfuzijah krvi, združljive z antigeni ABO, znatno povečalo. Sistem Rhesus vključuje šest antigenov, za označevanje katerih se vzporedno uporabljata dve nomenklaturi: Wiener (Rh 0 , rh", rh", Hr 0 , hr", hr"); Fisher in Reis (D, C, E, d, c, e).
Rh 0 - D, rh "- C, rh" - E, Hr 0 - d, hr "- c, hr" - e.
Ker je antigen Rho(D) najbolj aktiven v tem sistemu, ga imenujemo Rh faktor. Glede na prisotnost ali odsotnost tega dejavnika se ljudje delijo na Rh-pozitivne (Rh +) in Rh-negativne (Rh-). Ta delitev je sprejemljiva le v zvezi s prejemniki. Antigena rh "(C) in rh" (E) sta manj aktivna kot Rho (D), vendar proti njim lahko nastanejo protitelesa tudi pri ljudeh, ki v eritrocitih ne vsebujejo antigenov C in E. Zato so zahteve za eritrocite Rh-negativnih darovalcev strožje. Eritrociti ne smejo vsebovati ne samo antigena D, temveč tudi C in E. Za antigene Hro (d), hr "(c), hr" (e) je značilna nizka aktivnost, čeprav lahko protitelesa hr "(c) povzročijo izoimunološke konflikti Pri 1-3% Rh-pozitivnih posameznikov v eritrocitih ima šibko različico antigena D-D, ki določa prisotnost majhne, vprašljive aglutinacije pri določanju Rh faktorja. V teh primerih je Rh kri prejemnika ali nosečnice označena kot Rh-negativna (Rh-), Rh kri darovalca pa kot Rh-pozitivna (Rh+). Rh-negativnim prejemnikom ni dovoljeno dajati krvi z angenom D u. Rh antigeni nastanejo v 8-10 tednih embriogeneze, njihova antigenost pa lahko celo preseže aktivnost antigenov pri odraslih. Sistem Rh za razliko od sistema ABO nima naravnih protiteles. Protitelesa proti rezusu se pojavijo šele po imunizaciji Rh-negativnega organizma zaradi transfuzije Rh-pozitivne krvi ali nosečnosti z Rh-pozitivnim plodom. V telesu senzibiliziranih posameznikov protitelesa proti antigenom Rh vztrajajo več let, včasih vse življenje. V večini primerov se titer protiteles proti rezusu postopoma zmanjšuje, vendar se spet močno poveča, ko Rh-pozitivna kri ponovno vstopi v telo. Rh protitelesa se razlikujejo po specifičnosti (anti-D, an-III C itd.) in po seroloških lastnostih (popolna in nepopolna). Skupna protitelesa povzročijo aglutinacijo rdečih krvnih celic v fiziološkem mediju pri sobni temperaturi. Za manifestacijo aglutinacije pod delovanjem nepopolnih protiteles so potrebni posebni pogoji: povišana temperatura, koloidni medij (želatina, sirotkine beljakovine). Popolna protitelesa (IgM) se sintetizirajo zgodaj v imunskem odzivu in kmalu izginejo iz krvi. Nepopolna protitelesa (IgG, IgA) se pojavijo kasneje, se sintetizirajo dolgo in so vzrok za nastanek hemolitične bolezni pri novorojenčkih, saj prehajajo skozi placento in poškodujejo celice ploda.
Določitev Rh-pripadnosti krvi
Metoda določanja Rh faktorja je odvisna od oblike Rh protiteles v standardnem serumu in načina njegove izdelave. Anti-Rhesus serumu je priloženo spremno navodilo z opisom metode, za katero je ta serija izdanega seruma namenjena.
V vsaki študiji je treba za preverjanje specifičnosti in aktivnosti anti-rezusnega seruma postaviti kontrolo. Za kontrolo se uporabljajo standardni Rh pozitivni eritrociti skupine 0 (1) ali iste skupine kot preizkušana kri, standardni Rh negativni eritrociti pa so nujno iste skupine kot preizkušana kri.
Pri določanju Rh, ki pripada dvema serijama standardnih serumov v primerih, ko se uporabljajo z različnimi metodami, se rezultat upošteva kot resničen, če sovpada v obeh serijah študij po preverjanju kontrolnih vzorcev, ki potrjujejo specifičnost in aktivnost vsake serije anti-rezusni serum, to je v odsotnosti aglutinacije s standardnimi Rh-negativnimi eritrociti iste skupine in prisotnosti aglutinacije s standardnimi Rh-pozitivnimi eritrociti iste skupine ali skupine 0(1) in v kontrolnih vzorcih brez anti-rezusnega seruma. (reagent). Če med določanjem Rh pripadnosti opazimo šibko ali dvomljivo reakcijo, je treba kri te osebe ponovno pregledati z isto in drugo serijo anti-Rh seruma in je zaželeno vključiti serum, ki vsebuje popolna protitelesa. Če hkrati tudi vse serije serumov, ki vsebujejo nepopolna protitelesa, dajejo šibko ali dvomljivo reakcijo, pri popolnih protitelesih pa je reakcija negativna, to pomeni, da eritrociti vsebujejo šibko različico Rh antigena, tako imenovani faktor D u. . V teh primerih je Rh-pripadnost krvi bolnika ali nosečnice označena kot Rh-negativna (Rh-), Rh-pripadnost krvi darovalca pa kot Rh-pozitivna (Rh+), kar preprečuje transfuzijo. njegove krvi Rh-negativnim prejemnikom.
Določanje Rh faktorja se lahko izvede tudi z naslednjimi metodami.
Določanje Rh faktorja Rh 0 (D) z reakcijo konglutinacije z uporabo želatine (v epruveti, segreti na 46-48 ° C).
Določanje Rh faktorja Rho(D) z reakcijo konglutinacije v serumskem mediju na segreti ravnini.
Določanje Rh faktorja Rh 0 (D) z reakcijo aglutinacije v slanem mediju v majhnih epruvetah. Aglutinacijski test s fiziološko raztopino je primeren samo za uporabo s serumom, ki vsebuje popolna Rh protitelesa.
Določanje Rh faktorja Rh 0 (D) z uporabo monoklonskih protiteles.
Določanje Rh faktorja Rho(D) s posrednim Coombsovim testom.
19 Slabokrvnost. Razvrstitev in kratek opis. Etiologija in patogeneza anemije. Anemija (iz grške anemije - brezkrvnost) je velika skupina bolezni, za katero je značilno zmanjšanje količine hemoglobina ali hemoglobina in rdečih krvnih celic na enoto volumna krvi. Anemije so različne po etiologiji, mehanizmih razvoja, klinični in hematološki sliki, zato obstaja veliko različnih klasifikacij, ki pa niso dovolj popolne. L. I. Idelson je predlagal delovno klasifikacijo anemije za klinike: 1) akutna posthemoragična anemija; 2) anemija zaradi pomanjkanja železa; 3) anemija, povezana z oslabljeno sintezo ali uporabo porfirinov (sideroblastična); 4) anemija, povezana s kršitvijo sinteze DNA, RNA (megaloblastna); 5) hemolitična anemija; 6) anemija, povezana z zaviranjem proliferacije celic kostnega mozga (hipoplastična, aplastična); 7) anemija, povezana z zamenjavo hematopoetskega kostnega mozga s tumorskim procesom (metaplastični).
Anemija je lahko neodvisna bolezen in sočasni simptom ali zaplet nekaterih notranjih bolezni, nalezljivih in onkoloških bolezni. Obstajajo večfaktorske anemije, to je mešane geneze, na primer: hemolitična anemija s pomanjkanjem železa, aplastična anemija s hemolitično komponento itd.
Odvisno od:
1) vrednosti barvnega indeksa razlikujejo anemijo:
Normochromic (barvni indeks 0,9-1,1);
Hipokromni (barvni indeks manjši od 0,85);
Hiperkromni (barvni indeks večji od 1,15);
2) povprečni premer eritrocitov:
Normocitni (povprečni premer eritrocitov 7,2-7,5 mikronov)
Mikrocitni (povprečni premer rdečih krvnih celic je manjši od 6,5 mikronov),
Makrocitni (povprečni premer eritrocitov je več kot 8,0 mikronov),
megalocitni (povprečni premer eritrocitov je več kot 12 mikronov);
3) vrednost povprečne prostornine eritrocitov v femtolitrih (fl, 1 fl je enak 1 mikronu 3):
Normocitni (povprečni volumen eritrocitov 87±5 fl);
Mikrocitni (povprečni volumen eritrocitov je manjši od 80 fl);
Makrocitni (povprečni volumen eritrocitov je več kot 95 fl);
4) raven retikulocitov v periferni krvi.
Regenerativni (število retikulocitov 0,5-5%);
Hiperregenerativna (število retikulocitov je več kot 5%);
Hipo- in regeneracija (število retikulocitov se zmanjša ali jih ni, kljub hudemu poteku anemije).
Raven retikulocitov je pokazatelj regenerativne funkcije kostnega mozga v povezavi z eritropoezo.
Normokromne anemije vključujejo akutno posthemoragično (v prvih dneh po izgubi krvi), hipo- in aplastično, nesferocitno hemolitično, avtoimunsko hemolitično, metaplastično (z levkemijo, multiplim mielomom itd.), Pa tudi anemijo, ki se razvije z endokrinimi. motnje (hipofunkcija nadledvične žleze), bolezni ledvic, kronične okužbe.
Hipokromne anemije vključujejo anemijo pomanjkanja železa, sideroblastno, nekatere mielotoksične, hemolitične (talasemija).
B12-(fol)-pomanjkanje, nekatere hemolitične anemije so hiperkromne (dedna mikrosferocitoza, če med eritrociti v razmazu prevladujejo mikrosferociti). Včasih je anemija zaradi pomanjkanja vitamina B1 2 normokromna.
Normocitne vključujejo akutno posthemoragično, aplastično, avtoimunsko hemolitično anemijo itd.
Mikrocitne vključujejo anemijo zaradi pomanjkanja železa, sideroblastno anemijo, makrocitne - anemijo zaradi pomanjkanja vitamina B12-(folne) itd.
Regenerativna vključuje posthemoragično anemijo; do hiperregenerativne - hemolitične anemije, zlasti stanja po hemolitični krizi; do hipo- in regenerativne - hipoplastične, aplastične anemije.
Kostni mozeg reagira na razvoj pomanjkanja železa, hemolitične anemije z draženjem, hiperplazije rdečega klica. Pri hipoplastični anemiji pride do postopnega upada eritropoeze do njene popolne izčrpanosti.
20. Laboratorijska diagnostika z železom nasičene in z železom nenasičene anemije. Anemija zaradi pomanjkanja železa. Vrste pomanjkanja železa. Laboratorijski testi, ki odražajo pomanjkanje železa v telesu. Slika periferne krvi in kostnega mozga pri IDA. Laboratorijska diagnoza sideroblastne anemije. Presnova in vloga železa v telesu
Železo je zelo pomembno za telo, je del hemoglobina, mioglobina, dihalnih encimov. Razdeljen je med glavne sklade.
hemoglobinski sklad. Železo v hemoglobinu predstavlja 60-65% celotne vsebnosti železa v telesu.
Rezervni sklad. To je železo feritina in hemosiderina, ki se odlagata v jetrih, vranici, kostnem mozgu in mišicah. Predstavlja 30-40 % ravni železa v telesu. Feritin je v vodi topen kompleks železovega železa in beljakovine apoferitina, ki vsebuje 20% železa. Je labilna frakcija rezervnega sklada železa. Po potrebi se zlahka uporablja za potrebe eritropoeze. Hemosiderin je v vodi netopen protein, po sestavi podoben feritinu, vendar vsebuje več železa - 25-30%. Je stabilen, trdno fiksiran del zalog železa v telesu.
Transportni sklad predstavlja železo, povezano s transportnim proteinom transferinom. Predstavlja 1 % vsebnosti železa v telesu.
Tkivni sklad predstavljajo encimi, ki vsebujejo železo (citokromi, peroksidaza itd.), Mioglobin. Predstavlja 1 % vsebnosti železa v telesu.
Skupna vsebnost železa v telesu odrasle osebe je 4-5 g, vstopi v telo s hrano. Vsebujejo ga izdelki živalskega in rastlinskega izvora (meso, zlasti govedina, jetra, jajca, stročnice, jabolka, suhe marelice itd.). Železo se veliko bolje absorbira iz živalskih proizvodov kot rastlinskih, saj se v njih nahaja v obliki hema. Tako se 20-25% absorbira iz mesa, 11% iz rib, 3-5% železa, ki ga vsebujejo, iz rastlinskih izdelkov. Askorbinska kislina, organske kisline (citronska, jabolčna itd.) prispevajo k absorpciji železa, zavirajo absorpcijo tanina in visoka vsebnost maščob v prehrani. Absorpcija železa iz hrane je omejena. Čez dan se absorbira 2-2,5 mg železa, kratek čas po hudi krvavitvi se lahko absorbira do 3 mg železa. Glavna količina železa se absorbira v dvanajstniku in v začetnem delu jejunuma. Majhna količina železa se lahko absorbira v vseh delih tankega črevesa.
Absorpcija železa poteka v dveh fazah: 1) črevesna sluznica zajame železo iz hrane; 2) železo iz črevesne sluznice preide v kri, se naloži na transferin in dostavi na mesta uporabe in v depo. Transferin prav tako transportira železo iz svojih bazenov in celic fagocitnega mononuklearnega sistema, v katerem pride do uničenja eritrocitov, v kostni mozeg, kjer se delno uporablja za sintezo hemoglobina in delno deponira kot zaloge železa, pa tudi na druga mesta skladiščenja železa. Običajno se 1/3 transferina veže na železo. Imenuje se železo, vezano na transferin ali serumsko železo. Običajno je serumska vsebnost železa pri moških in ženskah 13-30 oziroma 12-25 µmol/l. Del transferina, ki ni vezan na železo, se imenuje prosti transferin ali nenasičena, latentna serumska sposobnost vezave železa. Največja količina železa, ki bi jo transferin lahko vezal na svojo nasičenost, se imenuje skupna serumska sposobnost vezave železa (TIBC) (običajno 30-85 µmol / l). Razlika med TIBC in serumskim železom odraža latentno sposobnost vezave železa, razmerje med serumskim železom in TIBC, izraženo v odstotkih, pa odraža odstotek nasičenosti transferina z železom (normalno 16-50 %). Za presojo količine zalog železa in telesa opravite:
Preiskava ravni feritina v serumu z radioimunskimi metodami;
Desferalni test. Desferal (desferoxamine) je kelat, ki se po vnosu v telo selektivno veže na zaloge železa, to je feritinsko železo, in ga izloči z urinom. Pacientu enkrat intramuskularno injiciramo 500 mg Desferala, zberemo dnevni urin in v njem določimo vsebnost železa. Po zaužitju desferala se z urinom normalno izloči od 0,8 do 1,2 mg železa, pri bolnikih z anemijo zaradi pomanjkanja železa ali ob latentnem pomanjkanju železa pa se količina izločenega železa z urinom močno zmanjša;
Štetje števila sideroblastov v punktatu kostnega mozga in siderocitov v periferni krvi. Sideroblasti so normoblasti, t.j. jedrne celice rdeče vrste, v citoplazmi katerih so odkrite modre granule zalog železa - feritin. Običajno je 20-40 % normoblastov sideroblastov. Siderociti so eritrociti, v katerih se nahajajo feritinska zrnca. Običajno v periferni krvi: do 1% siderocitov. Zrnca feritina v sideroblastih in siderocitih zaznamo s posebnim barvanjem s prusko modrim.
Za telo je značilna fiziološka izguba železa z urinom, blatom, žolčem, odluščenimi celicami črevesne sluznice, z znojem, pri striženju las in nohtov. Ženske izgubijo železo z menstruacijo.
Pred razvojem anemije zaradi pomanjkanja železa je latentno (latentno) pomanjkanje železa. Bolniki imajo težave in klinične znake, ki so značilni za piemijo pomanjkanja železa, vendar manj izraziti (šibkost, zmerna bledica kože in vidnih sluznic, glavoboli, palpitacije, pogosto perverznost okusa in vonja, suha koža, lomljivi nohti itd.). ). Pregled še ni pokazal sprememb vsebnosti hemoglobina, eritrocitov in drugih kazalcev periferne krvi. Vendar se odkrijejo motnje v presnovi železa: železo v serumu se zmanjša, skupna in latentna sposobnost seruma za vezavo železa se poveča, odstotek nasičenosti transferina se zmanjša in raven zalog železa se zmanjša. To je sideropenija brez anemije. Latentno pomanjkanje železa se lahko razvije v kateri koli starosti, zlasti pri ženskah, mladostnikih in otrocih. Če se latentna pomanjkljivost železa ne kompenzira, ampak se poglobi, se anemija pomanjkanja železa ogreje.