Т-лимфоцити, или Т клетки (от лат. t.химус "Тимус") - лимфоцити, които се развиват в бозайници в Тимус от предшественици - преди да влезе в нея от червен костен мозък. Типовите Т-лимфоцити са диференцирани, придобити Т-клетъчни рецептори (TCR, английски TCR) и различни черецептори (повърхностни маркери). Играят важна роля в придобития имунен отговор. Осигуряване на признаване и унищожаване на клетки, носещи извънземни антигени, подсилвайки ефекта на моноцитите, NK клетките и също вземете участие в превключването на имуноглобулинови изотипове (в началото на имунния отговор на В-клетките синтезират IgM, по-късен превключвател към IgG, IgE, IgA продукти ).
Т-лимфоцитни типове
Т-клетъчните рецептори са основните повърхностни протеинови комплекси на Т-лимфоцити, отговорни за разпознаването на преработени антигени, свързани с молекулите на основния комплекс за хистосъвместимост (GKG, английски. Голям комплекс за хистосъвместимост (MHC)) На повърхността на антигените, представящи клетки. Т-клетъчен рецептор е свързан с друг полипептиден мембранно комплекс, CD3. Функцията на CD3 комплекса включва предаването на сигнали в клетка, както и стабилизиране на Т-клетъчния рецептор на повърхността на мембраната. Т-клетъчният рецептор може да бъде свързан с други повърхностни протеини, нейните черецептори. В зависимост от корисетора и функциите, извършени, се различават два основни типа Т клетки.
T-помощници
T-players (от английски. Помощник - асистент) - Т-лимфоцити, основната функция на която е укрепването на адаптивния имунен отговор. Т-убийци, В-лимфоцити, моноцити, NK клетки се активират с директен контакт, както и хуморал, подчертаващи цитокини. Основната характеристика на T-players е наличието на CD4 молекула на повърхността на клетката. T-Players разпознават антигените в взаимодействието на техния Т-клетъчен рецептор с антиген, свързан с молекулите на комплекса за хистосъвместимост на основния клас II (английски. Голям комплекс за хистосъвместимост II (MHC-II)).
Т-убийци
T-players и t-убийци образуват група ефекторни t-лимфоцитиПряко отговорен за имунния отговор. В същото време има друга група от клетки, регулаторни Т-лимфоцитиЧиято функция е да регулира активността на ефекторни Т-лимфоцити. Чрез модулиране на силата и продължителността на имунния отговор чрез регулиране на Т-ефекторните клетки, регулаторните Т клетки поддържат толерантността към собствените антигени на организма и предотвратяват развитието на автоимунни заболявания. Има няколко механизма на потискане: директно, с директен контакт между клетките и далечната, извършена на разстояние - например чрез разтворими цитокини.
γδ t-лимфоцити
Т-лимфоцитите са малка популация от клетки с модифициран Т-клетъчен рецептор. За разлика от повечето други Т-клетки, се оформя рецепторът α (displaySleyle apha) и β (displaySley beta) Субединици, Т-клетъчен рецептор γ Δ (displaySley gamma delta)Се образуват -лимфоцити γ (displessstyle gamma) и Δ (displessSley delta) Субединици. Тези субединици не взаимодействат с пептидни антигени, проектирани от протеини на GKG. Предполага се, че γ Δ (displaySley gamma delta) Т-лимфоцитите участват в разпознаването на липидните антигени.
T-супресори
Т-лимфоцити, осигуряващи централното регулиране на имунния отговор.
Диференциация в Тимус
Диференциационен етап t-лимфоцити
Всички Т-клетки произхождат от хемопоетичните стволови клетки на червения костен мозък, които мигрират в тимуса и диференцират в незрели timecytes. . Timus създава микросреждение, необходимо за разработване на напълно функционален репертоар на Т клетки, който е GKG-Limited и толерантен към себе си.
Тимоцитната диференциация е разделена на различни етапи в зависимост от експресията на различни повърхностни маркери (антигени). На най-ранния етап Timocytes не експресират CD4 и CD8 Coreptors и следователно са класифицирани като двойни отрицателни (инж. Двойно отрицателен (dn)) (CD4-CD8-). На следващия етап thimocytes експресират двата корецептора и се наричат \u200b\u200bдвойно положителни (инж. Двойно положително (dp) (CD4 + CD8 +). И накрая, на последния етап се появява клетъчен избор, който изразява само един от корицепторите (ENG. Единично положително (SP)): или (CD4 +) или (CD8 +).
Ранният етап може да бъде разделен на няколко части. Така, на стандартната DN1 (инж. Двойна отрицателна 1) Timecytes имат следната комбинация от маркери: CD44 + CD25 -CD117 +. Клетките с тази комбинация от маркери също се наричат \u200b\u200bранни лимфоидни предшественици (инж. Ранни лимфоидни доказателства (ELP)). Прогресирайки в своята диференциация, ELP се разделя активно и накрая губи способността си да се трансформира в други типове клетки (например в лимфоцити или миелоидни клетки). Включване към DN2 подлента (ENG. Double отрицателен 2), Timocytes Express CD44 + CD25 + CD117 + и стават предходни предмети на Т-клетки (английски. Ранни Т-клетъчни доказаности (ETP)). По време на DN3, SELUSARTY (ENG. Двойни отрицателни 3) ETP клетки имат комбинация от CD44 -CD25 + и влизат в процеса β-избор.
β-селекция
Т-клетъчните рецепторни гени се състоят от многократни сегменти, принадлежащи към три класа: v (инж. Променлива), d (инж. Многообразие) и J (инж. Свързване). В процеса на соматична рекомбинация генните сегменти, един от всеки клас, са свързани заедно (v (d) J-рекомбинация). Случайна комбинация от последователности от сегменти V (d) J води до появата на уникални последователности на променливи домени всяка от рецепторните вериги. Случайната природа на образуването на последователности на променливи домейни ви позволява да генерирате Т клетки, които могат да разпознаят голям брой различни антигени и в резултат на това да се осигури по-ефективна защита срещу бързо развиващите се патогени. Същият механизъм обаче често води до образуване на нефункционални подединици на Т клетъчния рецептор. Гените, кодиращи β-субединицата на рецептора, първо се подлагат на рекомбинация в DN3 клетки. За да се изключи възможността за образуване на нефункционален пептид, р-субединица образува комплекс с инверабел а-субединица на пред-Т-клетъчния рецептор, образувайки t. N. Пред-Т-клетъчен рецептор (Pre-TCR). Клетките не могат да образуват функционален предварителен TCR, да умрат в резултат на апоптоза. Timecytes, успешно преминаха β-селекция, отидете на DN4 подлента (CD44-CD25 -) и са обект на процес Положително размножаване.
Положителен избор
Клетките, експресиращи върху неговата повърхност Pre-TCR, все още са имунокомпетентни, тъй като те не могат да се свързват с молекулите на основния комплекс за хистосъвместимост. За да се разпознаят молекулите на GKG Т-клетъчния рецептор, е необходимо да има CD4 и CD8 ядра върху повърхността на тимоцитите. Образуването на комплекс между Pre-TCR и CD3 борда води до инхибиране на пренарежданията на β-субединните гени и в същото време причинява активиране на експресията на CD4 и CD8 гени. Така тимоцитите стават двойни положителни (dp) (CD4 + CD8 +). DP-Timocytes се мигрират активно към кортикалното вещество на Timus, където се появяват тяхното взаимодействие с кортикални епителни клетки, експресиращи протеини от класове GKG (MHC-I и MHC-II). Клетките, които не могат да взаимодействат с протеини на GKG кортикален епител, са изложени на апоптоза, докато клетките, които успешно са приложили такова взаимодействие, започват да участват активно.
Отрицателен избор
Timecytes, които са преминали положителна подбор, започват да мигрират към кортико медуларната граница на Тимус. Намирането в Medulla, Timecytes взаимодействат със собствените си антигени на тялото, представени в комплекс с GKG протеини върху медуларни тимични епителни клетки (MTEC). Тимоцитите активно взаимодействат със собствените си антигени, които са изложени на апоптоза. Отрицателната селекция предотвратява появата на самоактивиращи Т клетки, способни да причинят автоимунни заболявания, като важен елемент от имунологичната толерантност на тялото.
Съдържание на тема "CD8 лимфоцити. Антиген (AG) представляващи клетки. Класификация на антигените (AG).":Т-клетъчен рецептор. Т-клетките разпознават AG с помощта на два вида мембранни гликопротеини - Т-клетъчни рецептори и CD3. Т-клетъчен рецептор - хетеродимер, съдържащ А- и Р-вериги (приблизително 98% от всички Т клетки) или 5-вериги (около 1.5-2% от клетките) с молекулно тегло 40-50 kD. Т-клетъчният рецептор влиза в суперфамето на молекулите на клетъчната повърхност на клетъчната повърхност, включени в реакциите на разпознаване. Трансмембранните предавателни механизми от Т-клетъчния рецептор остават неизвестни; Предполага се, че те се причиняват от CD3, ненужно свързан с Т-лимфоцитни рецептори.
Активиране на Т-клетки
За активиране на Т клетки Необходими са два сигнала от макрофаги. Първият сигнал е представянето на AG, втората секреция на активиращия фактор (IL-1). Последният стимулира синтеза на IL-2 T-лимфоцити, активиращи тези клетки (регулиране на автократен). В същото време, мембраните на Т клетките увеличават експресията на рецепторите към IL-2 (CD25).
Субпопулации на Т-лимфоцити
Въз основа на повърхностните маркери разграничават няколко субпопулации на Т-лимфоцитиизвършване на различни функции. За t-клетъчна диференциация Нанесете набор от моноклонален при, откриване на повърхностен маркер CD -GG [от английски. Клъстер на диференциация, клъстер за диференциация]. Всички зрял Т клетки експресират повърхността cd3-gg; В допълнение към него, субпопулацията на Т-лимфоцитите също изразяват други компактдискове.
CD4 + лимфоцити
Мембранни молекули CD4. Различни клетъчни популации се извършват условно разделени на регулаторни (помощници) и ефектор (t gzt).
T-помощници [от английски. За да помогне, помощ] Специално разпознаване на AG и взаимодействие с макрофаги и в клетки по време на индуцирането на хуморален имунен отговор. Съотношението CD4 + / CD8 + -Cells е важен параметър за оценка на имунния статус; При нормални условия съотношението CD4 + / CD8 + е приблизително две и отразява доминиращия ефект върху имунния отговор на стимулиращите фактори. С някои имунодефицитни състояния, съотношението обратното (по-малко I, т.е. CD8 +--Cells), което показва преференциалния ефект на имуносупресивните ефекти; Тя се основава на патогенеза на много имунодефицит (например СПИН).
AG разпознаване на Т-лимфоцити "Разпознаване" на извънземния епитоп на вирусната или туморна хипертония в комплекса с MNC молекулата върху плазмената мембрана на целевите клетки. T gzt [t-ефектор на реакциите на свръхчувствителност на бавния тип (gzt)] медиира RZT реакциите.
Първото проучване винаги преброява левкоцитната формула (виж глава "Хематологични проучвания"). Оценени както относителни, така и абсолютни стойности на броя на периферните кръвни клетки.
Определяне на основните популации (Т-клетки, клетки, естествени убийци) и субпопулации на Т-лимфоцити (t-players, t-ctl). За основното изследване на имунния статус и идентифициране на изразената свалена имунна система Който препоръчва дефиницията на CD3, CD4, CD8, CD19, CD16 + 56, CD4 / CD8 съотношение. Проучването ви позволява да определите относителния и абсолютен брой основни лимфоцитни популации: Т клетки - CD3, B клетки - CD19, естествени убийци (NK) - CD3- CD16 ++ 56 +, субпопулация Т лимфоцити (T-Helpers CD3 + CD4 \\ t +, T-цитотоксично CD3 + CD8 + и тяхното съотношение).
Изследователски метод
Имунофенотипирането на лимфоцити се извършва с използването на моноклонални антитела към повърхностни диференциални ъгли на клетките на имунната система, като се използва течаща лазерна цитофлуорометрия при поточни цитофлуорометри.
Изборът на зоната на анализа на лимфоцитите се извършва в зависимост от допълнителния CD45 маркер, който е представен на повърхността на всички левкоцити.
Условия за вземане и съхранение на проби
Венозната кръв, взета от лакътната вена, сутрин, строго на празен стомах, във вакуумната система до етикета, посочена в епруветката. K2DTA се използва като антикоагулант. След приемане на епруветката с пробата бавно завъртете 8-10 пъти за разбъркване на кръвта с антикоагулант. Съхранение и транспортиране стриктно при 18-23 ° С във вертикално положение не повече от 24 часа.
Неспазването на тези условия води до неправилни резултати.
Тълкуване на резултатите
Т-лимфоцити (CD3 + клетки). Увеличеното количество показва имунитет хиперактивност, наблюдавана при остра и хронична лимфоненоза. Увеличението на относителния индикатор се намира в някои всеобхватни и бактериални инфекции в началото на заболяването, обостряне на хронични заболявания.
Намаляването на абсолютното количество Т-лимфоцити показва недостатъчността на клетъчния имунитет, а именно недостатъчността на клетъчната единица на имунитета. Получени с възпаление на различни етиология, злокачествени неоплазми, след нараняване, операции, инфаркт по време на пушене, приемане на цитостатици. Увеличаването на техния брой в динамиката на заболяването е клинично благоприятен знак.
В-лимфоцити (CD19 + клетки) Спадът се наблюдава при физиологични и вродени хипогаммаглобулинемии и агамаглобулинемия, с неоплазми на имунната система, лечение с имуносупресори, остри вирусни и хронични бактериални инфекции, държавата след отстраняване на далака.
NK лимфоцити с CD3-CD16 ++ 56 + фенотип 56 + Естествените убийци (NK клетки) са популация от големи гранулирани лимфоцити. Те са способни да лъжат целеви клетки, заразени с вируси и други вътреклетъчни антигени, туморни клетки, както и други клетки от алогенен и ксеногенен произход.
Увеличаването на количеството на НК клетки е свързано с активирането на имунитета на антитрансплантацията, в някои случаи се наблюдава в бронхиална астма, тя се среща при вирусни заболявания, увеличава с злокачествени неоплазми и левкемия, в периода на повторно обновяване.
T-лимфоцити за помощ с фенотип CD3 + CD4 + Увеличаването на абсолютно и относително количество се наблюдава при автоимунни заболявания, може би с алергични реакции, някои инфекциозни заболявания. Това увеличение показва стимулирането на имунната система на антигена и служи като потвърждение на хиперреактивни синдроми.
Намаляването на абсолютното и относителното количество Т клетки показва хипореактивен синдром с нарушение на регулаторния елемент на имунитета, е патогнешен знак за HIV инфекция; Среща се при хронични заболявания (бронхит, пневмония и др.), Твърди тумори.
Т-цитотоксични лимфоцити с фенотип CD3 + CD8 + Увеличението се открива от почти всички хронични инфекции, вирусни, бактериални, протозойни инфекции. Характерно е за HIV инфекцията. Намаляването се наблюдава при вирусен хепатит, херпес, автоимунни заболявания.
CD4 + / CD8 + съотношение Изследването на съотношението CD4 + / CD8 + (CD3, CD4, CD8, CD4 / CD8) се препоръчва само за наблюдение на HIV инфекцията и контролиране на ефективността на ARV терапията. Позволява ви да определите абсолютното и относително количество T-лимфоцити, субпопулации на T-помощници, CTL и тяхното съотношение.
Обхват на стойностите - 1.2-2.6. Намалението се наблюдава в вродена имунодефицитна недостатъчност (ди-Джордж синдром, Nehhhelofa, Viscott-Oldrich), с вирусни и бактериални инфекции, хронични процеси, ефектите на радиация и токсични химикали, множествен миелом, стрес, намалява с възрастта, с ендокринни заболявания, \\ t Твърди тумори. Това е патогномен знак за HIV инфекция (по-малко от 0,7).
Повишена стойност над 3 - с автоимунни заболявания, остра Т-лимфобластна левкемия, тимомома, хронична т-левкемия.
Промяната на съотношението може да бъде свързана с броя на помощниците и CTL в този пациент. Например, намаляването на количеството на CD4 + Т-клетките в остра пневмония в началото на заболяването води до намаляване на индекса и CTL може да не се променя по едно и също време.
За допълнителни изследвания и идентифициране на промените в имунната система в патологиите Необходими оценки на наличието на остър или хроничен възпалителен процес и степента на активност се препоръчва да се включва преброяване на броя на активираните Т-лимфоцити с фенотип на CD3 + HLA-DR + и TNK клетки с CD3 + CD16 + + 56 + фенотип.
Т-активирани лимфоцити с фенотип CD3 + HLA-DR + Късен маркер за активиране, непосредствена индикатор за хиперреактивност. Според изразяването на този маркер е възможно да се прецени тежестта и силата на имунния отговор. Се появява на Т-лимфоцити след 3-тия ден на остро заболяване. С благоприятен курс на заболяването, той се свежда до нормата. Увеличаването на експресията върху Т-лимфоцитите може да бъде с много заболявания, свързани с хронично възпаление. Неговото увеличение при пациенти с хепатит С, пневмония, HIV инфекция, твърди тумори, автоимунни заболявания.
TNK лимфоцити с фенотип CD3 + CD16 ++ CD56 +Т-лимфоцити, носещи по повърхността му CD16 ++ CD 56 + маркери. Тези клетки имат свойства както на Т- и НК клетки. Проучването се препоръчва като допълнителен маркер при остри и хронични заболявания.
Намаляването на периферната кръв може да се наблюдава при различни специфични за органите заболявания и системни автоимунни процеси. Увеличението е отбелязано с възпалителни заболявания на различна етиология, туморни процеси.
Изследване на ранни и късни маркери за активиране на Т-лимфоцити (CD3 + CD25 +, CD3-CD56 +, CD95, CD8 + CD38 +) Освен това, предписано за оценка на промените в ПР по време на остри и хронични заболявания, за диагностика, прогноза, наблюдение на хода на заболяването и терапията.
Т-активирани лимфоцити с фенотип CD3 + CD25 +, повтарящ се към IL2 CD25 + - ранен маркер за активиране. Функционалното състояние на Т-лимфоцитите (CD3 +) показва броя на експресионните рецептори към IL2 (CD25 +). С хиперактивни синдроми, броят на тези клетки се увеличава (остри и хронични лимфоли, тимомери, отхвърляне на трансплантата), в допълнение, увеличението им може да покаже ранния етап на възпалителния процес. В периферната кръв те могат да бъдат разкрити през първите три дни на заболяването. Намаляване на броя на тези клетки може да се наблюдава при вродени имунодефицитни средства, автоимунни процеси, HIV инфекции, гъбични и бактериални инфекции, йонизиращо лъчение, стареене, отравяне с тежки метали.
Т-цитотоксични лимфоцити с фенотип CD8 + CD38 + Наличието на CD38 + върху CTL лимфоцити се отбелязва при пациенти с различни заболявания. Информационен индикатор за HIV инфекция, болест на изгаряне. Увеличаването на броя на CTL с CD8 + CD38 + фенотип се наблюдава при хронични възпалителни процеси, онкологични и някои ендокринни заболявания. При провеждане на терапия индикаторът се намалява.
Субпопулация на естествени убийци с фенотип CD3- CD56 + Молекулата на CD56 е адхезивна молекула, широко представена в нервната тъкан. В допълнение към естествените убийци, изразени на много видове клетки, включително върху Т-лимфоцити.
Увеличаването на този индикатор показва разширяването на активността на специфичен клон на убийствени клетки, които имат по-малко цитолитична активност от NK клетки с фенотип CD3-CD16 +. Количеството на тази популация се увеличава с хематологични тумори (лимфом-клетъчен или Т-клетъчен лимфом, плазмен клетъчен миелом, апластичен ламиниращ лимфом), хронични заболявания, някои изчерпателни инфекции.
Намаляването се отбелязва в първична имунна недостатъчност, вирусни инфекции, системни хронични заболявания, стрес, цитостатично лечение и кортикостероиди.
CD95 + рецептор - един от рецепторите на апоптоза. Апоптозата е сложен биологичен процес, необходим за отстраняване на повредени, стари и заразени клетки от тялото. CD95 рецепторът се експресира върху всички клетки на имунната система. Той играе важна роля за контролиране на функционирането на имунната система, тъй като е един от рецепторите на апоптоза. Изразът му върху клетките определя готовността на клетките към апоптоза.
Редукцията на пациента CD95 + -LIMPHOCYTE определя нарушение на ефективността на последния етап на дефектните и инфектираните клетъчни клетки, които могат да доведат до рецидив на заболяването, хронизацията на патологичния процес, развитието на автоимунни заболявания и Увеличете вероятността от трансформация на тумора (например рак на маточната шийка при папиломотозна инфекция). Определянето на експресията на CD95 има прогностично значение на човешки и лимфопролиферати заболявания.
Увеличаването на интензивността на апоптозата се наблюдава при вирусни заболявания, септични условия, при употребата на наркотични вещества.
Активирани лимфоцити CD3 + CDHLA-DR +, CD8 + CD38 +, CD3 + CD25 +, CD95. Тестът отразява функционалното състояние на Т-лимфоцитите и се препоръчва за наблюдение на хода на заболяването и контрола на имунотерапията при възпалителни заболявания на различна етиология.
За някои бактерии (патогени на туберкулоза, проказа, чума) макрофагите са "местообитание". В резултат на фагоцитоза в фагеликозомите, патогените стават защитени както от антитела, така и от цитотоксични Т-лимфоцити.
Потискане на активността на лизозомните ензими, тези бактерии активно се размножават в клетката и по този начин се превръщат в причина за остър инфекциозен процес. Болестта не е случайно наричана пример за конкретни опасни инфекции.
Тази доста сложна ситуация в тялото въпреки това има сили, които предотвратяват разпространението на патогените и са свързани предимно с CD4 Т-клетки на възпаление.
Участието на този тип лимфоцити в организацията на имунния отговор се осъществява чрез активиране на макрофагите. Активираните макрофаги не само се справят с вътреклетъчните патогени, но и придобиват в някои случаи допълнителни свойства, които не са свързани с антибактериален ефект, например, способността да се унищожат раковите клетки.
За да активирате макрофагите, се изискват два сигнала.
Първият от тях е интерферон-гама (ако гама). Това е най-характерният цитокин, произведен от CD4 Т-клетки на възпаление. Helper T-клетките не се секретират от този цитокин и не могат да активират макрофаги по обичайния начин.
Вторият сигнал за активиране на макрофаги е повърхностната TNF алфа, която се индуцира за експресия след разпознаване чрез Т-клетки на възпаление на имуноген върху макрофагната мембрана. Антителата към TFF \u200b\u200bAlpha отменят действието на втория сигнал.
CITOTOXIC Т клетките стават активни веднага след разпознаването на антигена, осъществявайки потенциалната готовност на молекулярния апарат до разрушаване на целевите клетки чрез процеса на апоптоза или некроза. Обратно, CD4 Т-клетките на възпалението след разпознаването на антигена върху повърхността на макрофагите прекарват часове на синтеза на де Ново медиатори, активиращи макрофаги. Ново синтезираните цитокини, събрани в микровълните проникват в макрофагите в точката на контакт с Т клетки. Такава директен път, както в случая на цитотоксични Т-лимфоцити, е най-икономичен и е функционално оправдан, защото не засяга съседните, неинфектирани клетки.
При макрофаги, активирани чрез контакт с възпалителни Т клетки и в резултат на секрецията на IF-гама се инициират редица биохимични промени, които осигуряват тези клетки със силни антибактериални свойства (фиг. 16). При условията на взаимодействие на макрофаги с възпалителни Т клетки, по-ефективно сливане на педагосите, които са заловени бактерии, с лизозоми - пазителите на протеолитични ензими, които унищожават вътреклетъчни патогени. Процесът на фагоцитозата е придружен от така наречената кислородна експлозия - образуването на кислородни радикали и азотен оксид, които имат бактерицидна активност.
При условията на Kostimulation на TNF алфа и IF-гама този процес е много по-активен. В допълнение, активираните макрофаги повишават експресията на молекулите на II клас II и Fn-алфа рецептора, който води до участието на допълнителни наивни Т-клетки. Всичко това набор от събития осигурява достатъчно трайна бариера от вътреклетъчни патогени.
Възпалителният взаимодействащ с макрофаги не само допринася за укрепването на интрахимични биохимични процеси, но в същото време самите те са активирани и действат като организатори на многостранен имунен отговор към антигена.
Фиг. шестнадесет.
Функционална активност на CD4 Т-клетки на възпаление.
Основната цел на действието на CD4 възпаление Т клетки е заразено с макрофаги. В резултат на разпознаването на имуногенен комплекс на макрофагите на CD4 Т-клетъчен възпаление, той се експресира върху повърхността му некрозисния фактор на тумор-алфа (TNF-алфа) и подобрява продуктите на интерферон-гама (IF-гама (ако-гама) ). Съвместното действие на цитокините осигурява по-ефективно образуване на фагликоза, натрупването на кислородни радикали и азотен оксид, които имат бактерицидни свойства, повишаване на експресията на молекулите на MNS клас II, увеличавайки продуктите на туморния фактор на некроза-алфа. Такова активиране на биохимичните процеси в макрофагите не само допринася за вътреклетъчното разрушаване на бактериите, но също така определя допълнителното включване на Т-клетките в имунния отговор.
Инфекциозният процес, провокиран чрез възпроизвеждане на патогени, отразява борбата на двете сили - действителният патоген и имунната система на собственика. Например, причинителят на Yerseania Pestis чума има способността да индуцира синтеза на висок поликонизиран протеин I, който започва да експресира върху клетъчната стена с кисела рН стойност. Известно е, че на мястото на контакт на патогена с макрофага има локална подкисляване. Той провокира синтеза и експресията на протеин I. Този протеин, притежаващ силни адхезивни свойства, допринася за по-ефективно проникване на причинителя в клетката. В допълнение, той помага на причинителя, за да се избегне действието на лизозомните ензими. Киселите условия на фагелизоса се поддържат чрез синтеза на този защитен за причинителя на протеин.
Макрофагите, хронично заразени с вътреклетъчни бактерии, могат да загубят способността си да се активира от Т-клетки. Масовото включване в процеса на нови макрофаги се осъществява, когато патогените се освобождават под влиянието на синергичен ефект върху инфектираните клетки на Fn-бета (лимфотоксин) и ако гама- продукти от активирани CD4 Т-клетки на възпаление (Фиг. 17).
Фиг. 17.
CD4 t-клетки на възпаление, като организатори на интегриран имунен отговор.
CD4 Т-клетки на възпаление Когато взаимодействат с макрофаги, не само активират макрофагите, но и сами са активирани. При производството на цял комплект цитокини те са организатори на интегриран имунен процес. Макрофаги (1, 2, 5, 6), Т клетки (3), прекурсорите на линия на диференциране на моноцитий-макрофаги (4) са макрофаги (1, 2, 5, 6), Т-клетки (3). Намаляване: IF-гама - интерферон-гама, LT (TNF-бета) - лимфотоксин (фактор на некроза на тумор-бета), IL-2 - интерлевкин-2, IL-3 - интерлевкин-3, GM-CSF - гранулоцитично \\ t Macrophageal ColonySecondi фактор, MHF - макрофагум хемотаксиален фактор (хемотаксис на макрофаги), митът е инхибиращ фактор на макрофаг (фактор за инхибиране на макрофаг).
Тази комбинация от цитокини също е ефективна за смъртта на фибробласти - основните компоненти на съединителната тъкан, което осигурява проникването на имунокомпетентни клетки към местоположението на инфекцията. Ясно е, че при мобилизирането на имунния отговор ефекторните Т клетки трябва да се поддържат на високо ниво. Активираните възпалителни Т-клетъчни макрофаги включват допълнителни ефектори чрез IL-2, насърчаваща пролиферацията и диференцирането на антигенспецифични Т клетки.
В допълнение към t-ефекта, самите макрофаги се назначават. Това се изпълнява по два начина:
Първо, чрез индуциране на диференциацията на макрофагите в костния мозък, под влиянието на IL-3 и гранулоцит-макрофагеалния колонистимулиращ фактор (GM-CSF);
Второ, новосформираните макрофаги под влиянието на лимфотоксин и хемотактичния фактор на макрофага започват да мигрират от кръвния поток във фокуса на локализацията на инфекцията, където те се установяват, изпитвайки действието на макрофагинизиращ фактор, който намалява тяхната мобилност.
Набор от цитокини, произведени чрез активирани CD4 Т-клетки на възпаление след специфично разпознаване на патоген, осигурява мултидисциплинарно развитие на клетъчен имунен отговор. Така клетките на разглежданата субпопулация действат като организатори на адекватна имунна реакция.
Под активирането на клетките те разбират прехода им от състоянието на почивка във функционално активно състояние - макрофагите произвеждат активни форми на кислород, затлъстели клетки изхвърлят гранулите, мускулните клетки са намалени и т.н. В случай на лимфоцит, активирането също така означава изход от състоянието на почивка (G0), но в малко различен смисъл лимфоцитът е извън клетъчния цикъл и неговото активиране означава свързване на цикъла. Тази последица от активирането на лимфоцитите е дълбоко функционална, тъй като всяко проявление на функцията на лимфоцитите трябва да предшества тяхното възпроизвеждане (тъй като първоначалният брой клетки във всеки клон е малък). Това не се отнася за естествени убийци - лимфоцити, чието население няма клонова структура. Активирането на NK клетки не е свързано с пролиферация и означава преход към цитотоксична функция на готово за виждане.
Молекулярни основи на T-клетъчни активиране
Клетъчното активиране, включително лимфоцитите, винаги се свързва с изразяването на много гени. В случай на лимфоцити, активирането трябва първо да доведе до експресията на гени, осигуряващи пролиферативно разширяване на клонинга. Същността на получаването на Т клетки към пролиферация се състои главно в експресия на гени на автокринния растежен фактор - IL-2 и неговия рецептор, или по-скоро верига на този рецептор, който осигурява постигането на необходимото ниво на афинитет към цитокин, \\ t което служи като условие за рецептора на неговите функции. И двата от тези гена са индуцируеми, т.е. В състояние на почивка те са изключени, но се изразяват в отговор на предизвикване на ефекти. Сигналът към включването на гена идва от неговия регулаторен (промотор) сайт, в който се намират местата от специфично взаимодействие с определени протеини - транскрипционни фактори. Някои от техните такива протеини първоначално са представени в клетка в активна форма, но повечето липсват и могат да бъдат синтезирани от de novo или да бъдат активирани чрез фосфорилиране или премахване на инхибиторната субединица. Така молекулярната основа на активирането е образуването на необходимите транскрипционни фактори, които гарантират включването на индуцируеми гени.
Активиращите ефекти се активират чрез активиращи ефекти на Т-лимфоцитите. При физиологични условия този индуктор е антигенен стимул. Сама по себе си, антигенното разпознаване в контакт с T-Helper, с AIC не може да повлияе на активността на гена поради пространственото разединение на мембранния рецептор и гените, локализирани в ядрото. TCR прониква в клетката след свързване с антигена, но не и да мигрира в ядрото и да повлияе на активността на гена, но за да бъде разделен. Въпреки това, при свързване на антигенен комплекс с TCR в комбинация с бозимулант, сигнал, който достига ядрото и регулиращия експресия на гени. Предаването на сигнала се извършва съгласно каскаден принцип. На различни етапи от предаването на сигнала се провежда чрез ензимни молекули (главно протеинови кинази, активиращи протеини при всеки обикновен етап на предаване на сигнала), както и адаптер и свързващи протеини на GTF. Сигналът първоначално е двоен, тъй като предаването му се извършва едновременно от TCR и CD28. Тогава тези пътеки се пресичат и се разделят отново в няколко клона. Крайният резултат от предаването на сигнала за всеки път за сигнализация е образуването на транскрипционния фактор. На фиг. 3.90 представя типична верига на вътреклетъчното предаване на сигнала, завършването на образуването на транскрипционни фактори и активирането на гените. За да активирате Т клетки, се изисква образуването на три транскрипционни фактори - NF-AT, NF-KB и AP-1. След това помислете за прилагането на вътреклетъчното предаване на сигнала върху примера на активиране на T-помощници при разпознаване на антиген-проектирани дендритни клетки.
Свързването на комплекса MHC-II-пептид води до конформационни промени в TCR молекулата и свързаните с тях молекули за проникване на CD4. Досега все още не е известно дали е само промяна в конформацията на рецепторите или те са олигомеризират. Такива промени се активират чрез тирозин кинази, свързани с рецептора и сърцевината - LCK (P56LCK), свързани с CD4, и FYN (P59FYN), свързан с CD3. Тези тирозин кинази се наричат \u200b\u200bрецептор или проксимален, поради факта, че те са непосредствено до рецептора, влизат в рецепторния комплекс. И двете споменати кинази се отнасят до семейството на SRC-киназа. Киназите на това семейство съдържат домейни SH1, SH2 и SH3 (SH - от SRC-хомология) (фиг. 3.91). Първият домейн има ензимна активност, останалите взаимодействат с други кинази и адаптерни протеини. Функцията Тирозин киназа се състои във фосфорилиране върху остатъка от тирозинови протеинови цели, което е необходимо за тяхното активиране и проявление на функции, включително ензимотив. Целта на рецепторните кинази са многобройни. Те включват самите FyN и LCK молекули (които причиняват тяхното автофосфорилиране), както и TCR полипептидни вериги и други кинази. Особено разнообразна цел на LCK киназа.
Въпреки това, първоначалното условие за активиране на рецепторните кинази е, напротив, тяхното дефосфорилиране, което гарантира
преминаването от хиперфосфорията в нормално състояние. Факт е, че доменът на LCK киназа SH2 е в сгъната форма, дължаща се на фосфорилирането на С-терминален остатък от тирозин Y505 конститутивно активирана CSK киназа. Фосфорилиран Y505 взаимодейства с помощта на фосфатна група с тирозинов остатък в SFFI домена, към който C-края на молекулата е затегнат. В тази форма ензимът не е активен, тъй като не може да бъде фосфорен функционално важен остатък Y394 в домейна SH1. За да се отстрани такава функционална блокада, е необходима дефосфорилиране, последвана от разгръщането на молекулата, която се извършва с участието на тирозин фосфатас. Основната роля при прехвърлянето на рецепторни кинази в състоянието "работещи" извършва CD45 молекулата, цитоплазменият домен на който има активността на тирозин фосфатаза. Преди това бе споменато, че тази голяма молекула, която предотвратява образуването на близък контакт между дендритната клетка и Т-хелпер, първо се отстранява от зоната на имунната синапс и след това част от молекулите се връща в тази зона, за да изпълни функцията си - дефосфорилиране на рецепторни тирозинови киназни молекули. След като балансът на Y394 е наличен за фосфорилиране, LCK може да прояви активността на тирозин киназа.
При генериране на сигнали, предадени от полипептидните вериги на комплекса TCR-CD3, присъствието в цитоплазмената част на U-, 5-, E- и Z-вериги на активационната последователност на ITAM, която вече е споменато многократно. Структурата на този мотив е както следва: YXXI / L / VX (6-8) YXXI / L / V (където Y - тирозин, X - всеки остатък, I / L / V е изолевцин, левцин или валин) (фиг. 3.92). Фосфорилиране на тирозинови остатъци
Фиг. 3.92. Сравнение на характеристиките на активирането и инхибиторните мотиви (ITAM и ITIM)
в ITAM прави това място достъпно за разпознаване на подобни зони на сигналните молекули, разположени по-дистално. Сред веригите за полипептидни вериги на TCR са най-важни за предаването на сигнала на Z-веригата. За разлика от Y-, 5 и E-веригите на TCR, с единичен ITAM секция, 3 ITAM последователности са разположени в цитоплазмената част на Z веригата, взаимодействие с тирозин тирозин киназни остатъци (от Z-свързан протеин - ^ - Свързан протеин; маса 70 kDa) - ключов фактор при предаване на сигнала от TCR, когато се свързва с лиганд. Фосфорилирането на Z-веригата е най-отговорното и в същото време най-уязвимата стъпка на активиране на Т клетки. Смята се, че е необходимо да се осигури фосфорилирането на всички ITAM мотиви на тази молекула, е необходимо да се продължи да се поддържа контакт на Т-лимфоцити и дендритни клетки. В Z-веригата на предпазлив Т-клетъчен фосфорилиран 1 остатък от тирозин; Липсата на фосфорилиране води до развитие на апоптоза (фиг. 3.93). След взаимодействието на Z-веригата и zap-kinase се стартира
Фиг. 3.94. Сигнална верига с активиране на Т-клетки. Разпознаването на молекулна молекула с антигенен епитоп в комбинация с костен разтвор предизвиква пускането на сигнали, предадени на ядрото, като се използват 5 каскади, които осигуряват образуването на 3 транскрипционни фактора, необходими за активирането на клетката. В мастния контур факторите, за които е показана високата степен на зависимост от цитимулацията.
пълният процес под формата на няколко паралелни пътища за предаване на сигнала за активиране (фиг. 3.94).
Молекулата ZAP-70 се отнася до тирозин киназите на семейството на SYK. Съдържа тандема от два домейна SH2. Състоянието на взаимодействието с сблъсък е предварителна фосфорилиране на тирозинови остатъци в ITAM FCPPI. След фосфорилиране, 2-ри тирозин остатъкът в мотивите на ITAM FCPI взаимодейства с тирозин S ^-ободлюданията на киназата ZAP-70. В резултат на това групата на фосфат тирозин фосфат става често срещана с молекула тирозин SFFI домена ZAP-70. Това следва фосфорилирането на тирозинови остатъци в ензимния домен на молекулата ZAP-70, провеждана от тирозина LCK и евентуално, FYN, която води до включване на ензимната (киназа) на активността на молекулата.
По-нататъшното предаване на сигнала се дължи на взаимодействието на ZAP-70 с основния си субстрат - адаптерният протеин лат (от линкер за активиране на Т-клетки - Т-клетъчен линкер). Този протеин е свързан с мембраната и е част от саловете. След като Phosphorylation катализирана ZAP-70 придобива способността да се свързват сигналните молекули, включени в допълнително предаване на сигнала: SLP-76, Adapter протеини на GRB2, VAV фактор и ензими - PLCY1 и PI3K. Активирането на някои от тези протеини зависи от лат не е пряко, но непряко. Така че чрез SH3 домейни
адаптерните протеини на GRB2 семейството към сигналната пътека са свързани с факторите SLP-76 и SOS. SLP-76 от своя страна медиира връзката с пътя на плановете1 и Ras Gtfases. Активирането на PLCY1 се появява с участието на ITK тирозин киназа, свързана с семейството на БТК - третата (след SRC и SYK) семейство Тирозин кинази, участващи в вътреклетъчното предаване на сигнала по време на активирането на лимфоцитите. Всички фактори за сигнализация, включени в процеса на активиране с пряко и непряко участие на лат, се назначават в клетъчната мембрана и взаимодействат със своите фосфоинозитиращи компоненти. Комплексът, образуван от взаимодействието на SLP-76, VAV и NCK реагира с протеините на PAK и Wasp цитоскелет, сервиране на реконструиране на медиатори в цитоскера на активирани клетки.
Активирано PLCY1 катализира разделянето на фосфатидилинодилинюлеотол 4.5-бифосфат за образуване на диацилглицерол (DAG), който остава свързан с мембраната и инозитол-1,4,5-трифосфат (Фиг. 3.95). Инозитол трифосфатът влиза в цитоплазмата и взаимодейства с рецептори на повърхността на ендоплазмения ретикулум, което причинява изхода на СА2 + йони от вътреклетъчното съхранение. Изпразването на последния води до откриване на Ca2 + -Ивърски канали в клетъчната мембрана, чрез която са получени Ca2 + йони от извънклетъчното пространство. В резултат на това концентрацията на свободни Ca2 + йони в цитоплазмата на клетката се увеличава. Ca2 + йони се активират от фосфатазния калциневрин, дефосфорилиращият цитоплазмен компонент на NF-при транскрипционен фактор (ядрен фактор на активирани Т-клетки е ядрен фактор на активирани Т клетки) (Фиг. 3.96). Това определя движението на коефициента в сърцевината, взаимодействието с ядрения компонент и образуването на зряла форма на NF-при молекула, способна да взаимодейства с ДНК в промоторните части на гените, участващи в активирането на Т клетки (IL2 , IL2R и т.н.).
Диацилглицерол традиционно се счита за фактор, активиращ протеинказа с (PKC) - повече от веднъж споменати по-рано серин /
Фиг. 3.96. CA2 + зависима връзка активиране на Т-клетки и неговата блокада на циклоспорин А. Пътят на сигнала, зависим от инозитатрипосфата, води до мобилизиране в ядрото на NF-при транскритонен фактор. Този път може да бъде блокиран чрез циклоспорин А, способен да инактивира с инактивиране на циклотин чрез фосфатазен калциньрин, отговарящ за дефоферилирането на цитоплазмен фактор NF-AT (който служи като условие за своята миграция в ядрото)
onin киназа, разпознат от един от ключовите фактори на активирането на Т-клетките. Обаче се оказа, че RCC изоформата, активирана чрез диацил-глицерол, не е свързана с активирането на Т клетки. Тя включва изофорт 0 от RCC, появявайки се в имунния синапс на върха на неговия "зрялост". Набирането му в имунните силови зависи от активността на P13K и VAV (последният фактор е свързан с цитоскелета, ролята на който в транспорта RCS0 е много важна). Тъй като активирането на VAV зависи от алармата не само чрез TCR, но и чрез CD28, и CD28-зависимата пътека се осъществява с участието на Pi3K (тя е свързана с CD28 - виж по-долу), става очевиден, че е очевиден VAV представя различни стъпки на един път на сигнала и Vav и по този начин участието в активирането на RCS0 молекулата зависи от бостимулацията чрез CD28. В същото време няма съмнение за активирането на сигналите на RCS0, идващи от TCR, тъй като RX0 фосфорилатите (и, следователно активирана) LCK киназа. Разширено при активиране на RCS0 и други фактори, включително диацилглицерол, но тези влияния са незначителни. Активирането на PKC0 е необходимо за предотвратяване на апоптоза на активираните клетки и включването на два от трите критични транскрипционни фактора, необходими за експресията на IL2 и IL2R гени - AR-1 и NF-KB. RCS0-зависим AP-1 активиране се осъществява чрез RAC / JNK-клон на каскадата на картата (той ще бъде споменат по-долу). Пътят, водещ до активирането на NF-KB транскрипционния фактор съдържа като
междинните връзки се активират последователно (с участието на PKC0) фактори на Carma-1, BCL-10 и малц-1, IKK. IKK фосфорилира NF-KB инхибиращата субединица - IKK, което му дава възможност да се свърже с убиквитин, което предопределя последващото му разграждане. В същото време активната NF-KB субединица се освобождава, мигрираща в ядрото и действа като транскрипционен фактор - един от трите необходими за експресията на T-клетъчни активи за активиране. По-горе се счита, че NF-KB транскрипционният фактор, който играе ключова роля за активиране на клетките на вроден имунитет (вж. Раздел 2.2.4).
Колкото и клетъчно активиране се използва друг път на сигнала, стартиран при активиране на Т-лимфоцити - каскада или модула на картата (от митоген-активирани кинази - кинази, активирани от MITEN ген). Неговата роля се състои главно в индуцирането на транскрипционния фактор AR-1 (C-Jun / C-FOS димер). Има 3 клона на тази каскада, водещи до образуването на три вида карта Kinaz (Map ^ - ERK1 / ERK2 (от извънклетъчни регулирани кинази - кинази, регулируеми чрез извънклетъчни сигнали), P38 и JNK (от C-Jun NH2 (от C-Jun NH2 -Terminal Kinases - C -JUN NH2-END кинази). Какади, водещи до активиране на киназите на картата, са включени с участието на адаптерни протеини и нискомолекулно тегло GTFAS. Един от адаптерните протеини - GRB2 (протеин с рецептор на растежен фактор 2) се активира, когато взаимодейства с лат фактор. Активираният GRB2 спонтанно се свързва с друг лат-активиран SLP-76 протеин и SOS фактор (от син на Severless). SOS е фактор на Guinnocleotide: Той определя заместването на GDF на GTF в GTF Следователно съставът на малки G-протеини (т.е. протеини, свързващи гуаниннуклеотиди), SLP-76 / GRB2 / SOS се определя чрез активиране на Ras G-протеин, завъртайки свързания GDF в GTF. RAS-GTF активира RAF серията / Treonino Kinase (киназа киназа Kinase - ICRC). Next следва каскада от реакции: R. AF активира MEK (MAP KINASE - ICC) и MEK активира гореспоменатите кинази на ERK1 и ERO. Активирането на клона на JNK на картата-каскада инициира гореспоменатия VAV фактор (зависим от лат и свързан с активирането на цитоскелета, както и RCS0, виж по-горе). Това води до GTF преход към GTF в комплекса с G-протеин (семейство RHO). RAC GTF активира Mecca киназа (действащ като ICRC), той активира JNKK киназа (MKK), която на свой ред активира JNK карта-киназа. Третият път на модула на картата, който води до образуването на карта Kinase P38, също зависи от G-протеините на семейството на RHO. Тя е сходна по принцип с два други начина, но проучва по-малко подробности.
Активирането на Kinases ERK1 / ERK2, JNK и P38 се извършва чрез фосфорилиране на треонин и тирозинови остатъци в TXY MOTIVEN и роля X в три вида кинази извършват различни остатъци (съответно, Glu, Pro и Gly). Тези кинази определят образуването на транскрипционни фактори, включени в много клетъчни процеси. ERK1 / ERK2 причинява образуването на транскрипционни фактори AR-1 и ELK-1, JNK - фактори ATF2, ELK-1 и C-Jun (компонент AR-1), P38 - фактори ATF2, ELK-1 и MEF-2C.
Стартирането на сигналните пътеки, обсъждано по-горе по време на активирането на Т клетки, се появява с паралелно свързване на TCR и кълболимулация чрез молекула CD28. Диференцирането на сигналните пътеки, включени през тези мембранни молекули, както и декодиране на взаимодействието на тези пътища до края не е завършено. Въпреки това, общата картина се проявява съвсем ясно, за да се разберат молекулярните основи на бостимулацията. При свързване на TCR, координирано със свързването на червеника, се появява промяна в конформацията на комплекса TCR-CD3, CD4 причинява активиране на финал и LCK рецепторни тирозин кинази, както и CD45 фосфатази. Крайният резултат от "проксималните" събития е фосфорилиране на Z веригата на рецепторния комплекс и прехвърлянето на сигнала за активиране към ZAP-70 киназа. След това, с участието на адаптерни протеини LAT, SLP-76 и VAV, площта, включена в предаването на сигнала, е значително разширяваща се, включително мембранни кинази, цитоскелета и малки G-протеини. Пътят на сигнала, който води (чрез активиране на plcyl, образуването на иноситатрифосфат и калциневритин активиране) към мобилизирането на СА2 + и активира транскрипционния фактор NF-AT, очевидно, се осъществява без пряко участие на сигналите, генерирани от калерчето. Другите пътеки са повече или по-малко зависими от болимулаторния сигнал.
Най-прякото последствие от бостимулация чрез CD28 е активирането на PI3K мембранния ензим, физически свързан с CD28 молекулата. Този ензим катализира образуването на фосфатидилозитол 4, 5-бифосфат, който сервира източника на иноситатрипосфат. Това събитие обаче не е пряко свързано с активирането и може да се третира като подготвително. При активиране на фосфатидалтид-спектрофосфатната клетка активира Vav - възловаразяващ фактор, отговорен за включването на процеса на активиране на цитоскелета и участва в набирането и активирането на PKC0 протеин киназа. Този ензим е важен за функционирането на сигналната пътека, водеща до образуването на транскрипционни фактори NF-KB и AR-1. И в двата случая ролята на PKC0 се проявява най-вече в включването на RAS / JNK-клон на каскадата на картата. RAF / ERK и RAC / P38-клонът на картата-каскада е по-малко зависим от PKC0 и следователно от костната импулация. По този начин, молекулярната основа на бабиимулацията е участието в активирането на T-Helper сигналните пътища, прилагани с участието на три ключови фактора - Pi3K, VAV фактор и изоформи 0 протеинзаза от три ключови транскрипционни фактора, които пускат T-клетъчна активация Гените, експресията на два (AP-1 и NF-KB) зависи от костната импулация и само за производството на NF-на дирекцията не се изисква.
По този начин, в резултат, 3 транскрипционен фактор се образува в Т клетката - NF-AT, NF-KB AP-1. Образуването на тези фактори се случва по различни начини. Active NF-AT се образува в резултат на монтаж на димер, съдържащ цитоплазмения и ядрените подкомпоненти на NF-AT - NF-ATC и NF-ATN. Ако NF-ATN е конститутивен фактор, който винаги присъства в Т-клетъчното ядро, NF-ATC трябва да се активира за миграция в ядрото, което се постига чрез нейната дефосфорилиране, катализирана чрез калциневрин (виж по-горе). NF-KB транскрипционният фактор се активира чрез разцепване от IKB инхибиторната IKB инхибираща система от комплекса IKB-NF-KB. Както бе споменато по-горе, това се случва, когато IKB IKK фосфорилирането е активирано с участието на RCS0. Фосфорилирана субединица става достъпна за разграждане
на веблитиновия път. AR-1 фактор е димер на протеинови продукти от два индуцируеми протонакогени - C-FOS и C-Jun. За експресията на тези гени и синтез на протеини са необходими подходящи транскрипционни фактори, а именно ELK-1 (за C-FOS) и JNK (за C-Jun). Както бе споменато по-горе, ELK-1 и JNK са крайните продукти на различните клонове на каскадата на картата. C-FOS и C-Jun синтезирани de novo образуват хомо- и хетеродимери, образуващи AR-1 транскрипционен фактор.
Необходими са три фактора (NF-AT, NF-KB и AP-1) за индуциране на активиращите гени на Т клетки - предимно IL2 и IL2R. IL2 промоторната част съдържа 9 транскрипционни свързващи места (Фиг. 3.97). Сред тях са 2 секции на свързване на октомври Окт, който не ограничава процеса на генна индукция. От трите ключови транскрипционни фактори NF-KB взаимодействат с промотора на един сайт, независимо от други транскрипционни фактори. Два други фактора - NF-AT и AP-1 - взаимодействат с промотора, както отделно един от друг (1 места за свързване) и в комплекса (3 сайт за свързване). Попълване на всички сайтове с подходящи транскрипционни фактори, водещи до индуциране на гена, служи като крайния резултат от предаването на сигнала, когато Т клетките са активирани.
Над сигналните пътеки, включени в активирането на T-помощниците, бяха разгледани подробно. Активирането на цитотоксични Т клетки се извършва съгласно подобни механизми.
3.5.2.2. Прояви на активиране на Т-клетки
Активирането на CD4 + Т клетки (както и всяка Т-лимфоцити) води до експресията на голям брой гени, сред които IL2 и IL2R и IL2R гените, кодиращи IL-2 цитокин и веригата на неговия рецептор са играе най-голямата роля в прилагането на основни екзористични събития. Изявлението на IL2 гена се появява за около 1 час след получаване на стимулиращия сигнал. Секрецията на IL-2 протеина, стимулирана in vitro Т клетки, се открива след 3-4 часа; Той достига връх след 8-12 часа и спира след 24 часа. In vivo секрецията IL-2 започва след 1-3 дни след въвеждането на антигена
Фиг. 3.98. Временна динамика на експресията на молекулите на Т-клетъчна активация. На графиката
kE представлява времето за експресия на молекулите на ключовете след стимулиране на Т клетки
(Имунизация) и продължава в рамките на 7-12 дни. Изявлението на IL-2 рецептора А-2 се появява малко по-късно и продължава по-дълго - in vitro се открива 4 часа след стимулиране; Той достига максимум 2-3 дни и спира след 5 дни (фиг. 3.98).
Едновременно с IL2 гена в най-краткия възможен момент след действието на стимулатора (във физиологични състояния - антигенен комплекс на пептид-МНС), се изразяват C-MYC и N-MYC гените, наречени ранни активи за активиране. Те участват в приготвянето на клетки до Mitoz. След 2-3 часа, CD69 се появява на повърхността на Т-клетката - най-ранният антиген за активиране, частично мобилизиран от вътреклетъчен депо и частично изразява де Ново. Изразът му продължава до малко повече от ден. Скоро след CD69, на клетъчната повърхност се появява още един ранен маркер за активиране - CD25, който представлява вече споменатата верига на рецептора за IL-2. Изразът на редица цитоклински гени и синтеза на ограничени количества от съответните цитокини (IFNY, IL-4, IL-5, IL-6) се откриват леко.
Следните прояви на активиране се наблюдават след ден след действието на стимулатора, когато се експресира рецепторната молекула за транс-ферит (CD71). Този фактор играе важна роля в разпространението, тъй като за нейното прилагане са необходими железни йони. В следващите дни (3-6 дни) се експресират MHC-II молекули, приписвани на късни маркери на Т-клетъчна активация, и след това - P1 интегрини, обозначени като много късни активиращи антигени - VLA (много късни активиращи антигени) и хемокини) и хемокини се секретират. Тези късни прояви на клетъчно активиране се комбинират с пролиферативен процес.