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सबसे खराब श्रेष्ठ
एचआईवी संक्रमण के लिए परीक्षण के अधीन है:
2. संदेह या पुष्टि निदान वाले व्यक्ति: 13 वर्ष से कम उम्र के बच्चों में जीवाणु संक्रमण, एकाधिक और आवर्तक; अन्नप्रणाली, श्वासनली, ब्रांकाई या फेफड़ों की कैंडिडिआसिस; आक्रामक ग्रीवा कैंसर; प्रसारित या एक्स्ट्रापल्मोनरी कोक्सीडायोडोमाइकोसिस; एक्स्ट्रापल्मोनरी क्रिप्टोकॉकोसिस; 1 महीने या उससे अधिक समय तक दस्त के साथ क्रिप्टोस्पोरिडिओसिस; 1 महीने से अधिक उम्र के रोगियों में यकृत, प्लीहा, लिम्फ नोड्स को छोड़कर अन्य अंगों के साइटोमेगालोवायरस घाव; दृष्टि की हानि के साथ साइटोमेगालोवायरस रेटिनाइटिस; दाद संक्रमण जिसके कारण मल्टीफोकल अल्सर होते हैं जो 1 महीने के भीतर ठीक नहीं होते हैं, या ब्रोंकाइटिस, निमोनिया, ग्रासनलीशोथ; प्रसारित या एक्स्ट्रापल्मोनरी हिस्टोप्लाज्मोसिस; 1 महीने से अधिक समय तक दस्त के साथ आइसोस्पोरोसिस; तपेदिक व्यापक या अतिरिक्त फुफ्फुसीय; 13 वर्ष से अधिक उम्र के वयस्कों या किशोरों में फुफ्फुसीय तपेदिक; एक्स्ट्रापल्मोनरी तपेदिक; माइकोबैक्टीरिया के कारण होने वाली अन्य बीमारी एम। तपेदिक का प्रसार या एक्स्ट्रापल्मोनरी; न्यूमोसिस्ट के कारण होने वाला निमोनिया; प्रगतिशील मल्टीफोकल ल्यूकोएन्सेफालोपैथी; साल्मोनेला (साल्मोनेला टाइफी को छोड़कर) सेप्टीसीमिया, आवर्तक; 1 महीने से अधिक उम्र के बच्चों में मस्तिष्क के टोक्सॉयलेस-मोज़ेक; कपोसी के सारकोमा; 13 वर्ष से कम उम्र के बच्चों में लिम्फोइड इंटरस्टिशियल निमोनिया; बर्किट के लिम्फोमा; इम्युनोबलास्टिक लिंफोमा; प्राथमिक मस्तिष्क लिंफोमा; वेस्टिंग सिंड्रोम, हेपेटाइटिस बी, HBsAg कैरिज; संक्रामक मोनोन्यूक्लियोसिस; 60 वर्ष से अधिक उम्र के लोगों में आवर्तक दाद दाद; यौन संचारित रोगों।
अत्यधिक विशिष्ट प्रयोगशाला कार्य करती है:
ए) रक्त में परिसंचारी एंटीबॉडी, एंटीजन और प्रतिरक्षा परिसरों का निर्धारण; वायरस की खेती, इसकी जीनोमिक सामग्री और एंजाइम की पहचान;
बी) प्रतिरक्षा प्रणाली के सेलुलर लिंक के कार्यों का आकलन। मुख्य भूमिका एंटीबॉडी का निर्धारण करने के उद्देश्य से सीरोलॉजिकल डायग्नोस्टिक्स के तरीकों से संबंधित है, साथ ही साथ रक्त में रोगज़नक़ के एंटीजन और शरीर के अन्य जैविक तरल पदार्थ।
एचआईवी के प्रति एंटीबॉडी का परीक्षण निम्न के लिए किया जाता है:
ए) रक्त आधान और प्रत्यारोपण की सुरक्षा;
बी) एचआईवी संक्रमण के प्रसार की निगरानी के लिए निगरानी, परीक्षण और एक निश्चित आबादी में इसके प्रसार की गतिशीलता का अध्ययन;
ग) एचआईवी संक्रमण का निदान, यानी व्यावहारिक रूप से स्वस्थ लोगों या एचआईवी संक्रमण या एड्स के समान विभिन्न नैदानिक लक्षणों और लक्षणों वाले रोगियों के रक्त सीरम का स्वैच्छिक परीक्षण।
एचआईवी संक्रमण के प्रयोगशाला निदान की प्रणाली तीन चरणों के सिद्धांत पर बनाई गई है। पहला चरण - स्क्रीनिंग, एचआईवी प्रोटीन के प्रति एंटीबॉडी की उपस्थिति के लिए प्राथमिक रक्त परीक्षण करने के लिए डिज़ाइन किया गया है। दूसरा चरण संदर्भ एक है - यह स्क्रीनिंग चरण में प्राप्त प्राथमिक सकारात्मक परिणाम को स्पष्ट (पुष्टि) करने के लिए विशेष पद्धति तकनीकों का उपयोग करने की अनुमति देता है। तीसरा ईथेन - एक विशेषज्ञ एक, प्रयोगशाला निदान के पिछले चरणों में पहचाने गए एचआईवी संक्रमण मार्करों की उपस्थिति और विशिष्टता के अंतिम सत्यापन के लिए है। प्रयोगशाला निदान के कई चरणों की आवश्यकता मुख्य रूप से आर्थिक कारणों से है।
व्यवहार में, कई परीक्षणों का उपयोग किया जाता है जो पर्याप्त मात्रा में विश्वसनीयता के साथ एचआईवी संक्रमित की पहचान करना संभव बनाते हैं:
एलिसा (एलिसा) -टेस्ट (एंजाइम-लिंक्ड इम्युनोसॉरबेंट परख) पहले स्तर का पता लगाना, उच्च संवेदनशीलता की विशेषता है, हालांकि निम्न से कम विशिष्ट;
इम्यून ब्लॉट (वेस्टर्न-ब्लॉट), एचआईवी -1 और एचआईवी -2 के बीच अंतर करने के लिए एक बहुत ही विशिष्ट और सबसे अधिक इस्तेमाल किया जाने वाला परीक्षण;
P25 एंटीजेनमिया परीक्षण, संक्रमण के प्रारंभिक चरणों में प्रभावी;
पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन (पीसीआर)।
रक्त के नमूनों की बड़े पैमाने पर जांच के मामलों में, विषयों के एक समूह से सेरा के मिश्रण का परीक्षण करने की सिफारिश की जाती है, इस तरह से संकलित किया जाता है कि प्रत्येक नमूने का अंतिम कमजोर पड़ना 1: 100 से अधिक न हो। यदि सीरम-वर्तमान मिश्रण सकारात्मक है, तो प्रत्येक सीरम-सकारात्मक मिश्रण का परीक्षण किया जाता है। इस पद्धति से एलिसा और इम्युनोब्लॉट दोनों में संवेदनशीलता का नुकसान नहीं होता है, लेकिन यह श्रम लागत और प्रारंभिक परीक्षा की लागत को 60-80% तक कम कर देता है।
एचआईवी संक्रमण के प्राथमिक सेरोडायग्नोसिस में, स्क्रीनिंग स्क्रीनिंग परीक्षणों - एलिसा और एग्लूटिनेशन प्रतिक्रियाओं का उपयोग करके कुल एंटीबॉडी का निर्धारण किया जाता है। दूसरे (मध्यस्थता) चरण में, एक अधिक जटिल परीक्षण का उपयोग किया जाता है - एक इम्युनोब्लॉट, जो न केवल प्रारंभिक निष्कर्ष की पुष्टि या अस्वीकार करने की अनुमति देता है, बल्कि व्यक्तिगत वायरस प्रोटीन के लिए एंटीबॉडी का निर्धारण करने के स्तर पर भी ऐसा करने की अनुमति देता है।
लिंक्ड इम्युनोसॉरबेंट परख(एलिसा) एचआईवी के प्रति एंटीबॉडी के निर्धारण के लिए मुख्य और सबसे व्यापक रूप से इस्तेमाल की जाने वाली विधि है। लेकिन एचआईवी संक्रमण के सेरोडायग्नोसिस में एलिसा का उपयोग करने के नुकसान में बार-बार गलत-सकारात्मक परिणाम शामिल हैं। इस संबंध में, एलिसा का परिणाम विषय की एचआईवी सेरोपोसिटिविटी के बारे में निष्कर्ष निकालने का आधार नहीं है। यह गिट्टी प्रोटीन से इम्युनोसॉरबेंट की अपर्याप्त शुद्धि के कारण है; प्लास्टिक के लिए सीरम एंटीबॉडी का सहज बंधन, यदि इसके क्षेत्रों में इम्युनोसॉरबेंट का कब्जा नहीं है, तो अपर्याप्त रूप से अवरुद्ध या पूरी तरह से विशेष तटस्थ प्रोटीन द्वारा अवरुद्ध नहीं किया गया है; कुछ, अधिक बार ऑटोइम्यून रोग प्रक्रियाओं जैसे मल्टीपल स्केलेरोसिस, एसएलई, तपेदिक वाले व्यक्तियों के रक्त में मौजूद विभिन्न प्रोटीनों के इम्युनोसॉरबेंट के एचआईवी प्रोटीन के साथ क्रॉस-इंटरैक्शन; बार-बार दान के साथ, संक्रामक और ऑन्कोलॉजिकल रोग, जलन, गर्भावस्था, बार-बार रक्त आधान, अंग और ऊतक प्रत्यारोपण, साथ ही हेमोडायलिसिस पर लोग; रक्त में रुमेटी कारक की उपस्थिति के साथ, अक्सर एचआईवी-झूठी सकारात्मक प्रतिक्रियाओं को उत्तेजित करता है; एचआईवी गैग-प्रोटीन के एंटीबॉडी के जांच किए गए लोगों के रक्त में उपस्थिति और, सबसे पहले, पी 24 प्रोटीन के लिए (जाहिर है, एंटीबॉडी एक्सो- या अंतर्जात, अभी तक पहचाने गए रेट्रोवायरस नहीं बनते हैं)। चूंकि एंटी-पी24 को एचआईवी सेरोकोनवर्जन के शुरुआती चरणों में बिना असफलता के संश्लेषित किया जाता है, एचआईवी गैग प्रोटीन के प्रति एंटीबॉडी वाले व्यक्तियों के आगे प्रतिरक्षाविज्ञानी अवलोकन किया जाता है, साथ ही साथ उन्हें दान से हटा दिया जाता है।
एंजाइम से जुड़े इम्युनोसॉरबेंट परख की संवेदनशीलता और विशिष्टता लगातार बढ़ रही है। नतीजतन, चौथी पीढ़ी की एलिसा प्रतिरक्षा सोख्ता के लिए अपनी नैदानिक क्षमताओं में हीन नहीं है और इसका उपयोग न केवल स्क्रीनिंग में किया जा सकता है, बल्कि एचआईवी संक्रमण के निदान के पुष्टिकरण चरण में भी किया जा सकता है [स्मोल्स्काया टी.टी., 1997]।
immunoblottingसीरोलॉजिकल डायग्नोस्टिक्स की अंतिम विधि है, जिससे एचआईवी-सकारात्मकता या विषय की नकारात्मकता के बारे में अंतिम निष्कर्ष निकालना संभव हो जाता है।
इम्युनोब्लॉट और एलिसा में सेरा के अध्ययन के परिणामों के बीच एक स्पष्ट संबंध है - विभिन्न परीक्षण प्रणालियों के साथ एलिसा में दो बार सकारात्मक, 97-98% मामलों में सीरा फिर इम्युनोब्लॉटिंग में एचआईवी पॉजिटिव निकला। यदि सीरा एलिसा में केवल इस्तेमाल किए गए दो परीक्षण प्रणालियों में से एक में सकारात्मक था, तो इम्युनोब्लॉट में वे केवल 4% मामलों में सकारात्मक होते हैं। 5% मामलों में, सकारात्मक डेटा वाले व्यक्तियों में पुष्टिकरण अध्ययन करते समय, एलिसा-इम्यूनोब्लॉट "अनिश्चित" परिणाम दे सकता है, और उनमें से लगभग 20% मामलों में, "अनिश्चित" परिणाम एचआईवी -1 गैग प्रोटीन के एंटीबॉडी का कारण बनते हैं ( पी55, पी25, पी18)। केवल एचआईवी -1 गैग प्रोटीन के प्रति एंटीबॉडी की उपस्थिति एचआईवी -2 संक्रमण के लिए रक्त सीरम की अतिरिक्त जांच का कारण है।
इम्युनोब्लॉटिंग के परिणामों का मूल्यांकन परीक्षण प्रणाली से जुड़े निर्देशों के अनुसार कड़ाई से किया जाता है। निर्देशों में परिणामों की व्याख्या पर निर्देशों की अनुपस्थिति में, डब्ल्यूएचओ मानदंड का उपयोग किया जाना चाहिए।
एचआईवी संक्रमण के प्रयोगशाला निदान के संदर्भ चरण में अध्ययन के सकारात्मक परिणाम प्राप्त होने और प्रतिरक्षा सोख्ता की विधि द्वारा अध्ययन के नकारात्मक परिणाम प्राप्त होने पर, पहली परीक्षा के 6 महीने बाद एक अनिवार्य दोहराया विशेषज्ञ निदान किया जाता है।
यदि पहले नमूने के अध्ययन के 12 महीने बाद इम्युनोब्लॉटिंग के परिणाम नकारात्मक या अनिश्चित रहते हैं, तो जोखिम वाले कारकों, नैदानिक लक्षणों या एचआईवी संक्रमण से जुड़े अन्य कारकों की अनुपस्थिति में, विषय को डिस्पेंसरी अवलोकन से हटा दिया जाता है।
सीरोलॉजिकल तरीकों में, अनिश्चित परिणामों के मामले में, इम्युनोब्लॉट का उपयोग विशेषज्ञ निदान के रूप में किया जाता है। रेडियोइम्युनोप्रेजर्वेशन(फाड़ना)। यह रेडियोधर्मी आयोडीन के साथ लेबल किए गए वायरस प्रोटीन के उपयोग पर आधारित है, और बीटा काउंटरों का उपयोग करके अवक्षेप का पता लगाया जाता है। इस पद्धति के नुकसान में उपकरणों की उच्च लागत, विशेष कमरों में इन उद्देश्यों के लिए उपकरणों की आवश्यकता शामिल है।
एचआईवी संक्रमण से पीड़ित व्यक्तियों को हर 6 महीने में अनिवार्य प्रयोगशाला परीक्षा के साथ निरंतर गतिशील अवलोकन के अधीन किया जाता है।
पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन (पीसीआर) किसी दिए गए रोगज़नक़ के जीनोम के लिए विशिष्ट पूर्व-गुणा न्यूक्लियोटाइड अनुक्रमों का पता लगाता है। एक जीन या उसके टुकड़े का पृथक गुणन, जिसे एम्प्लीफिकेशन कहा जाता है, पीसीआर एंजाइम थर्मोस्टेबल डीएनए पोलीमरेज़ का उपयोग करके एक टेस्ट ट्यूब में करना संभव बनाता है। 2-3 घंटों में, पीसीआर आपको वायरस के एक विशिष्ट क्षेत्र की लाखों प्रतियां प्राप्त करने की अनुमति देता है। एचआईवी संक्रमण में, वायरस के आरएनए सहित सेलुलर आरएनए से, यदि इसे सेल में पुन: पेश किया गया है या इसके जीनोम में एकीकृत किया गया है, तो प्रोविरल डीएनए की पर्याप्त मात्रा रिवर्स ट्रांसक्रिप्शन और लेबल वाले ओलिगोन्यूक्लियोटाइड "प्रोब के साथ संकरण द्वारा प्राप्त की जाती है। "विश्लेषण के लिए, जिसका पता लगाया जाता है और मात्रा निर्धारित की जाती है, साथ ही एचआईवी जीनोम से संबंधित, रेडियोधर्मी या जांच के अन्य लेबल द्वारा, डीएनए और वायरस-विशिष्ट एमिनो एसिड अनुक्रमों की समरूपता की स्थापना। पीसीआर की संवेदनशीलता पांच हजार कोशिकाओं में से एक में वायरल जीन का पता लगाना है।
पीसीआर, मात्रात्मक सहित, का उपयोग केवल रोगी के लिए दवा उपचार शुरू करने या एंटीरेट्रोवाइरल दवाओं को बदलने के मुद्दे को हल करने के लिए प्लाज्मा पर वायरल लोड को निर्धारित करने के लिए किया जा सकता है। एचआईवी संक्रमण के निदान के लिए पीसीआर की सिफारिश नहीं की जा सकती है, क्योंकि इसके बयान और अभिकर्मकों के सबसे आधुनिक तरीकों से भी वायरल लोड को एक निश्चित स्तर से कम नहीं - 50 प्रतियां / एमएल निर्धारित करने की अनुमति मिलती है। और पीसीआर परीक्षण की जटिलता और इसकी उच्च लागत (लगभग $ 200) एचआईवी संक्रमण के दैनिक प्रयोगशाला निदान की एक विधि के रूप में इसके व्यापक उपयोग को नकारती है। इस प्रकार, रोगी चिकित्सा के मुद्दे को हल करने के लिए एचआईवी संक्रमण के पहले से स्थापित निदान वाले रोगियों में प्लाज्मा पर वायरल लोड का आकलन करने के लिए पीसीआर अनिवार्य है।
एचआईवी संक्रमण के प्रयोगशाला निदान के चरणों को योजनाबद्ध रूप से अंजीर में दिखाया गया है। 1.
चावल। 1. एचआईवी संक्रमण के प्रयोगशाला निदान के चरण
एचआईवी संक्रमण के दौरान, "अंधेरे प्रयोगशाला खिड़की" की अवधि होती है जब एचआईवी के खिलाफ एंटीबॉडी की मात्रा परीक्षण प्रणालियों की संवेदनशीलता के लिए अपर्याप्त होती है। यह अवधि एचआईवी संक्रमण के क्षण से एक सप्ताह से तीन महीने तक होती है, जो परीक्षण प्रणाली की संवेदनशीलता के स्तर पर निर्भर करती है। इस घटना को ध्यान में रखते हुए, एचआईवी संक्रमण की उल्लिखित अवधि में व्यक्तियों से दान किए गए रक्त की जांच करते समय कठिनाइयां उत्पन्न होती हैं। इसलिए, दुनिया के अधिकांश देशों में, रक्त के इन खुराकों के दाताओं के एचआईवी संक्रमण के लिए अनिवार्य पुन: परीक्षण करने के लिए रक्त को 3-6 महीने तक संग्रहीत करने के बाद ही रक्त का उपयोग करने की एक प्रणाली शुरू की गई है। अवयव।
प्राथमिक अभिव्यक्तियों का चरण प्रतिकृति प्रक्रिया की गतिविधि की विशेषता है। परिणामी विरेमिया और एंटीजेनमिया विशिष्ट आईजीएम एंटीबॉडी के गठन का कारण बनते हैं: एंटी-पी 24, एंटी-जीपी41, एंटी-जीपी120। कुछ संक्रमितों में p24 एंटीजन को एलिसा द्वारा रक्त में संक्रमण के 2 सप्ताह बाद और 8 सप्ताह तक निर्धारित किया जा सकता है। इसके अलावा, एचआईवी संक्रमण के नैदानिक पाठ्यक्रम में, रक्त में p24 प्रोटीन की सामग्री में दूसरी वृद्धि होती है, जो एड्स चरण के गठन के दौरान होती है।
पूर्ण सेरोकोनवर्जन की उपस्थिति, जब एचआईवी जीपी41, पी24, जीपीएल20 के संरचनात्मक प्रोटीन के लिए आईजीजी वर्ग के विशिष्ट एंटीबॉडी का एक उच्च स्तर परिधीय रक्त में दर्ज किया जाता है, एचआईवी संक्रमण के निदान की सुविधा प्रदान करता है। अधिकांश व्यावसायिक किट ऐसे ही एंटीबॉडी को इंगित करने के लिए डिज़ाइन किए गए हैं।
एचआईवी संक्रमण वाले रोगियों में एंटीबॉडी का पता लगाने में कठिनाइयाँ बड़े पैमाने पर विरेमिया और एंटीजेनमिया की अवधि के दौरान उत्पन्न हो सकती हैं, जब रक्त में उपलब्ध विशिष्ट एंटीबॉडी वायरल कणों को बांधने पर खर्च किए जाते हैं, और प्रतिकृति प्रक्रिया नए एंटीवायरल एंटीबॉडी के उत्पादन से आगे होती है।
प्रारंभिक रूप से कमजोर प्रतिरक्षा प्रणाली वाले व्यक्तियों में, विरेमिया और एंटीजेनमिया पहले दिखाई देते हैं और रोग के परिणाम तक उच्च स्तर पर बने रहते हैं। इसी समय, ऐसे रोगियों में एचआईवी के लिए मुक्त एंटीबॉडी की कम सामग्री होती है, दो कारणों से - बी-लिम्फोसाइटों द्वारा एंटीबॉडी का अपर्याप्त उत्पादन और एंटीबॉडी द्वारा विषाणुओं और घुलनशील एचआईवी प्रोटीन का बंधन, इसलिए, संक्रमण का निर्धारण करने के लिए, परीक्षण प्रणाली के साथ बढ़ी हुई संवेदनशीलता या विश्लेषण विधियों में संशोधन की आवश्यकता है। प्रतिरक्षा परिसरों से एंटीबॉडी जारी करने का चरण।
एचआईवी संक्रमण के विशिष्ट मार्करों की प्रचुरता के बावजूद, सबसे अधिक बार निर्धारित किया जाता है कि एचआईवी प्रोटीन के लिए कुल एंटीबॉडी की उपस्थिति है। "कुल" शब्द का अर्थ है एंटीबॉडी के दो वर्गों (आईजीजी और आईजीएम) की उपस्थिति और विभिन्न, मुख्य रूप से संरचनात्मक, एचआईवी प्रोटीन के लिए एंटीबॉडी की एक विस्तृत श्रृंखला।
सीडी 4 कोशिकाओं का निर्धारण। एचआईवी संक्रमण के चरण का निदान करने के लिए मुख्य नैदानिक और प्रयोगशाला संकेतक, रोजमर्रा की जिंदगी में रोगियों में प्रतिरक्षा प्रणाली के विनाश की डिग्री सीडी 4 + लिम्फोसाइटों की सामग्री का निर्धारण था: 200 कोशिकाओं / मिमी 3 से नीचे के स्तर में कमी है एड्स के निदान के लिए मुख्य मानदंड। ऐसा माना जाता है कि सभी एचआईवी संक्रमित व्यक्ति जिनकी सीडी4 + लिम्फोसाइट संख्या 200 सेल्स/एमएम3 और उससे कम है, उन्हें एंटीवायरल थेरेपी और न्यूमोसिस्टिस न्यूमोनिया की रोकथाम दोनों की जरूरत है। और यद्यपि 1/3 एचआईवी-संक्रमित सी04 + लिम्फोसाइटों की संख्या 200 कोशिकाओं / मिमी 3 से कम में नैदानिक अभिव्यक्तियाँ नहीं हैं, अनुभव से पता चला है कि वे अगले 2 महीनों में लक्षण विकसित करते हैं, इसलिए उन सभी को एड्स के रोगी के रूप में माना जाता है। .
वर्तमान में, नई नैदानिक प्रौद्योगिकियां कई बीमारियों के एटियलॉजिकल और रोगजनक कारणों की पहचान करना संभव बनाती हैं और उपचार के परिणामों को मौलिक रूप से प्रभावित करती हैं। शायद इन तकनीकों को नैदानिक अभ्यास में शामिल करने के सबसे प्रभावशाली परिणाम प्रतिरक्षा विज्ञान और संक्रामक रोगों के निदान के क्षेत्र में प्राप्त हुए हैं।
एंजाइम इम्युनोसे और इम्यूनोकेमिलुमिनेसिसेंस विश्लेषण पर आधारित टेस्ट सिस्टम विभिन्न वर्गों के एंटीबॉडी का पता लगाने की अनुमति देते हैं, जो संक्रामक रोगों के निदान के लिए नैदानिक, विश्लेषणात्मक संवेदनशीलता और विशिष्टता के तरीकों की सूचना सामग्री को काफी बढ़ाता है। यह ध्यान दिया जाना चाहिए कि संक्रमण के निदान में सबसे महत्वपूर्ण प्रगति पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन विधि के प्रयोगशाला अभ्यास में परिचय के साथ जुड़ी हुई है, जिसे निदान और उपचार की प्रभावशीलता के मूल्यांकन में "स्वर्ण मानक" माना जाता है। संक्रामक रोगों की संख्या।
अनुसंधान के लिए विभिन्न जैविक सामग्री का उपयोग किया जा सकता है: सीरम, रक्त प्लाज्मा, स्क्रैपिंग, बायोप्सी, फुफ्फुस या मस्तिष्कमेरु द्रव (सीएसएफ)। सबसे पहले, संक्रमणों के प्रयोगशाला निदान के तरीकों का उद्देश्य वायरल हेपेटाइटिस बी, सी, डी, साइटोमेगालोवायरस संक्रमण, यौन संचारित संक्रमण (गोनोरियाल, क्लैमाइडियल, माइकोप्लाज्मा, यूरियाप्लाज्मा), तपेदिक, एचआईवी संक्रमण आदि जैसी बीमारियों की पहचान करना है।
एचआईवी संक्रमण मानव इम्युनोडेफिशिएंसी वायरस (एचआईवी) के कारण होने वाली बीमारी है, जो लिम्फोसाइट्स, मैक्रोफेज, तंत्रिका ऊतक की कोशिकाओं में लंबे समय तक बनी रहती है, जिसके परिणामस्वरूप शरीर की प्रतिरक्षा और तंत्रिका तंत्र को धीरे-धीरे प्रगतिशील क्षति होती है, जो माध्यमिक द्वारा प्रकट होती है। संक्रमण, ट्यूमर, सबस्यूट एन्सेफलाइटिस और अन्य रोग परिवर्तन।
संक्रमण के प्रेरक एजेंट - पहले और दूसरे प्रकार के मानव इम्युनोडेफिशिएंसी वायरस (एचआईवी -1, एचआईवी -2) - रेट्रोवायरस के परिवार से संबंधित हैं, जो धीमे वायरस के उपपरिवार हैं। विरियन गोलाकार कण होते हैं जिनका व्यास 100-140 एनएम होता है। वायरल कण में एक बाहरी फॉस्फोलिपिड लिफाफा होता है जिसमें एक निश्चित आणविक भार के साथ ग्लाइकोप्रोटीन (संरचनात्मक प्रोटीन) होता है, जिसे किलोडाल्टन में मापा जाता है। HIV-1 में, ये gpl60, gpl20, gp41 हैं। नाभिक को कवर करने वाले वायरस के आंतरिक लिफाफे को एक ज्ञात आणविक भार के साथ प्रोटीन द्वारा भी दर्शाया जाता है - p17, p24, p55 (HIV-2 में gpl40, gpl05, gp36, p16, p25, p55 शामिल हैं)।
एचआईवी जीनोम में आरएनए और रिवर्स ट्रांसक्रिपटेस एंजाइम (रिवर्स ट्रांसक्रिपटेस) शामिल हैं। रेट्रोवायरस जीनोम को होस्ट सेल जीनोम से जोड़ने के लिए, डीएनए को पहले वायरल आरएनए टेम्प्लेट पर रिवर्स ट्रांसक्रिपटेस का उपयोग करके संश्लेषित किया जाता है। फिर प्रोवायरस डीएनए को मेजबान सेल के जीनोम में डाला जाता है। एचआईवी में एक स्पष्ट एंटीजेनिक परिवर्तनशीलता है जो इन्फ्लूएंजा वायरस की तुलना में काफी अधिक है।
मानव शरीर में, एचआईवी का मुख्य लक्ष्य टी-लिम्फोसाइट्स हैं, जो सतह पर सबसे बड़ी संख्या में सीडी 4 रिसेप्टर्स ले जाते हैं। जब एचआईवी अपने आरएनए के पैटर्न का अनुसरण करते हुए रिवर्टेज की मदद से कोशिका में प्रवेश करता है, तो वायरस डीएनए को संश्लेषित करता है, जो मेजबान सेल (सीडी 4 लिम्फोसाइट्स) के आनुवंशिक तंत्र में एकीकृत होता है और जीवन के लिए एक प्रोवायरस अवस्था में रहता है। टी-हेल्पर लिम्फोसाइट्स के अलावा, मैक्रोफेज, बी-लिम्फोसाइट्स, न्यूरोग्लिया कोशिकाएं, आंतों के म्यूकोसा और कुछ अन्य कोशिकाएं प्रभावित होती हैं। टी-लिम्फोसाइटों (सीडी4 कोशिकाओं) की संख्या में कमी का कारण न केवल वायरस का प्रत्यक्ष साइटोपैथिक प्रभाव है, बल्कि असंक्रमित कोशिकाओं के साथ उनका संलयन भी है। एचआईवी संक्रमण वाले रोगियों में टी-लिम्फोसाइटों की हार के साथ, सभी वर्गों के इम्युनोग्लोबुलिन के संश्लेषण में वृद्धि के साथ बी-लिम्फोसाइटों का एक पॉलीक्लोनल सक्रियण होता है, विशेष रूप से आईजीजी और आईजीए, और बाद में प्रतिरक्षा के इस हिस्से की कमी। प्रणाली। प्रतिरक्षा प्रक्रियाओं का बिगड़ा हुआ विनियमन α-इंटरफेरॉन, β2-माइक्रोग्लोबुलिन के स्तर में वृद्धि और IL-2 के स्तर में कमी से भी प्रकट होता है। प्रतिरक्षा प्रणाली की शिथिलता के परिणामस्वरूप, विशेष रूप से जब टी-लिम्फोसाइट्स (सीडी 4) की संख्या 1 μl रक्त या उससे कम में 400 कोशिकाओं तक कम हो जाती है, तो अनियंत्रित एचआईवी प्रतिकृति के लिए स्थितियां उत्पन्न होती हैं, जिसमें विभिन्न प्रकार के विषाणुओं की संख्या में उल्लेखनीय वृद्धि होती है। शरीर के वातावरण। प्रतिरक्षा प्रणाली के कई हिस्सों की हार के परिणामस्वरूप, एचआईवी से संक्रमित व्यक्ति विभिन्न संक्रमणों के रोगजनकों के खिलाफ रक्षाहीन हो जाता है।
इम्यूनोसप्रेशन में वृद्धि की पृष्ठभूमि के खिलाफ, गंभीर प्रगतिशील बीमारियां विकसित होती हैं जो सामान्य रूप से काम कर रहे प्रतिरक्षा प्रणाली वाले व्यक्ति में नहीं होती हैं। ये वे रोग हैं जिन्हें विश्व स्वास्थ्य संगठन (WHO) ने AIDS या AIDS संकेतक रोगों के रूप में परिभाषित किया है।
एड्स संकेतक रोग
पहला समूह - केवल गंभीर इम्युनोडेफिशिएंसी (CD4 .) में निहित रोग<200). Клинический диагноз ставится при отсутствии анти-ВИЧ-антител или ВИЧ-антигенов.
दूसरा समूह ऐसे रोग हैं जो गंभीर इम्युनोडेफिशिएंसी की पृष्ठभूमि के खिलाफ और कुछ मामलों में इसके बिना विकसित हो सकते हैं।
इसलिए, इन मामलों में, निदान की प्रयोगशाला पुष्टि आवश्यक है।
पहला समूह:
- अन्नप्रणाली, श्वासनली, ब्रांकाई की कैंडिडिआसिस;
- एक्स्ट्रापल्मोनरी क्रिप्टोकॉकोसिस;
- 1 महीने से अधिक समय तक दस्त के साथ क्रिप्टोस्पोरिडिओसिस;
- 1 महीने से अधिक उम्र के रोगी में यकृत, प्लीहा या लिम्फ नोड्स के अलावा विभिन्न अंगों के साइटोमेगालोवायरस घाव;
- दाद सिंप्लेक्स वायरस के कारण होने वाला संक्रमण, जो त्वचा और श्लेष्मा झिल्ली पर अल्सर द्वारा प्रकट होता है, जो 1 महीने से अधिक समय तक बना रहता है, साथ ही किसी भी अवधि के ब्रोंकाइटिस, निमोनिया या ग्रासनलीशोथ जो 1 महीने से अधिक उम्र के रोगी को प्रभावित करता है;
- 60 वर्ष से कम आयु के रोगियों में सामान्यीकृत कपोसी का सारकोमा;
- 60 वर्ष से कम आयु के रोगियों में सेरेब्रल लिंफोमा (प्राथमिक);
- 12 वर्ष से कम उम्र के बच्चों में लिम्फोसाइटिक इंटरस्टिशियल निमोनिया और / या फुफ्फुसीय लिम्फोइड डिस्प्लेसिया;
- त्वचा, ग्रीवा लिम्फ नोड्स, फेफड़ों की जड़ों के लिम्फ नोड्स में एक्स्ट्रापल्मोनरी स्थानीयकरण या स्थानीयकरण (फेफड़ों के अलावा) के साथ एटिपिकल माइकोबैक्टीरिया (माइकोबैक्टीरियम कॉम्प्लेक्स एम। एवियमइंट्रासेल्युलर) के कारण फैलने वाला संक्रमण;
- न्यूमोसिस्टिस निमोनिया;
- प्रगतिशील मल्टीफोकल ल्यूकोएन्सेफालोपैथी;
- 1 महीने से अधिक उम्र के रोगियों में मस्तिष्क का टोक्सोप्लाज़मोसिज़।
दूसरा समूह:
- जीवाणु संक्रमण, संयुक्त या आवर्तक, 13 वर्ष से कम उम्र के बच्चों में (अवलोकन के 2 वर्षों में दो से अधिक मामले): सेप्सिस, निमोनिया, मेनिन्जाइटिस, हड्डियों या जोड़ों को नुकसान, हीमोफिलिक छड़ के कारण फोड़े, स्ट्रेप्टोकोकी;
- प्रसारित coccidioidomycosis (एक्स्ट्रापल्मोनरी स्थानीयकरण);
- एचआईवी एन्सेफेलोपैथी (एचआईवी डिमेंशिया, एड्स डिमेंशिया);
- 1 महीने से अधिक समय तक लगातार दस्त के साथ हिस्टोप्लाज्मोसिस;
- 1 महीने से अधिक समय तक लगातार दस्त के साथ आइसोस्पोरोसिस;
- किसी भी उम्र में कपोसी का सरकोमा;
- किसी भी उम्र के व्यक्तियों में मस्तिष्क का लिंफोमा (प्राथमिक);
- अन्य बी-सेल लिम्फोमा (हॉजकिन की बीमारी के अपवाद के साथ) या अज्ञात इम्यूनोफेनोटाइप के लिम्फोमा: छोटे सेल लिम्फोमा (जैसे बर्किट का लिंफोमा, आदि); इम्युनोबलास्टिक सार्कोमा (लिम्फोमा इम्युनोब्लास्टिक, बड़े-कोशिका, फैलाना हिस्टियोसाइटिक, फैलाना अविभाज्य);
- त्वचा के फेफड़ों, ग्रीवा या हिलर लिम्फ नोड्स के अलावा घावों के साथ प्रसारित माइकोबैक्टीरियोसिस (तपेदिक नहीं);
- एक्स्ट्रापल्मोनरी ट्यूबरकुलोसिस (फेफड़ों के अलावा, आंतरिक अंगों को नुकसान के साथ);
- साल्मोनेला सेप्टीसीमिया, आवर्तक;
- एचआईवी डिस्ट्रोफी (थकावट, नाटकीय वजन घटाने)।
तालिका 1 (ऊपर स्रोत लिंक देखें) एड्स को परिभाषित करने वाली बीमारियों और उनके etiological एजेंटों को सूचीबद्ध करती है।
एड्स के कई वर्गीकरण हैं।
यूएस सेंटर फॉर डिजीज कंट्रोल (तालिका 2 - ऊपर स्रोत लिंक देखें) द्वारा प्रस्तावित नए वर्गीकरण के अनुसार, एड्स का निदान उन व्यक्तियों में किया जाता है, जिनकी सीडी 4 सेल की संख्या 200 / μL से कम है, यहां तक कि एड्स-परिभाषित रोगों की अनुपस्थिति में भी।
श्रेणी बी में विभिन्न सिंड्रोम शामिल हैं, जिनमें से सबसे महत्वपूर्ण हैं बेसिलरी एंजियोमैटोसिस, ऑरोफरीन्जियल कैंडिडिआसिस, आवर्तक वल्वोवागिनल कैंडिडिआसिस, इलाज में मुश्किल, सर्वाइकल डिसप्लेसिया, सर्वाइकल कार्सिनोमा, इडियोपैथिक थ्रोम्बोसाइटोपेनिक पुरपुरा, लिस्टरियोसिस, पेरिफेरल न्यूरोपैथी।
रक्त में एचआईवी -1 और एचआईवी -2 के एंटीबॉडीज
एचआईवी -1 और एचआईवी -2 के एंटीबॉडी आमतौर पर रक्त सीरम में अनुपस्थित होते हैं।
एचआईवी संक्रमण के प्रयोगशाला निदान के लिए एचआईवी के प्रति एंटीबॉडी का निर्धारण मुख्य तरीका है। विधि एंजाइम-लिंक्ड इम्युनोसॉरबेंट परख (एलिसा) पर आधारित है - संवेदनशीलता 99.5% से अधिक है, विशिष्टता 99.8% से अधिक है। एचआईवी के प्रति एंटीबॉडी संक्रमण के बाद 1 महीने के भीतर संक्रमित लोगों में से 90-95% में दिखाई देते हैं, 5-9% में - 6 महीने के बाद, 0.5-1% में - बाद की तारीख में। एड्स के चरण में, एंटीबॉडी की संख्या तब तक कम हो सकती है जब तक कि वे पूरी तरह से गायब नहीं हो जाते।
शोध परिणाम गुणात्मक रूप से व्यक्त किया जाता है: सकारात्मक या नकारात्मक।
एक नकारात्मक परीक्षण परिणाम रक्त सीरम में एचआईवी -1 और एचआईवी -2 के एंटीबॉडी की अनुपस्थिति को इंगित करता है। प्रयोगशाला अपनी तैयारी पर तुरंत एक नकारात्मक परिणाम जारी करती है। सकारात्मक परिणाम प्राप्त होने पर - एचआईवी के प्रति एंटीबॉडी का पता लगाना - प्रयोगशाला में झूठे सकारात्मक परिणामों से बचने के लिए, विश्लेषण को 2 बार दोहराया जाता है।
रक्त सीरम में एचआईवी वायरल प्रोटीन के प्रति एंटीबॉडी के लिए इम्युनोब्लॉटिंग
एचआईवी वायरल प्रोटीन के प्रति एंटीबॉडी आमतौर पर रक्त सीरम में अनुपस्थित होते हैं।
एचआईवी के प्रति एंटीबॉडी के निर्धारण के लिए एलिसा विधि एक स्क्रीनिंग विधि है। जब एक सकारात्मक परिणाम प्राप्त होता है, तो इसकी विशिष्टता की पुष्टि करने के लिए, इम्युनोब्लॉटिंग की विधि का उपयोग किया जाता है - वेस्टर्न-ब्लॉट - रोगी के रक्त सीरम में एंटीबॉडी के एक जेल में काउंटर वर्षा, विभिन्न वायरल प्रोटीन के साथ आणविक भार द्वारा इलेक्ट्रोफोरोसिस का उपयोग करके अलग किया जाता है और नाइट्रोसेल्यूलोज पर लागू होता है। वायरल प्रोटीन gp41, gpl20, gpl60, p24, pi8, p17, आदि के लिए एंटीबॉडी निर्धारित की जाती हैं।
एड्स की रोकथाम और नियंत्रण के लिए रूसी केंद्र की सिफारिशों के अनुसार, ग्लाइकोप्रोटीन gp41, gpl20, gpl60 में से एक में एंटीबॉडी का पता लगाना सकारात्मक परिणाम माना जाना चाहिए। यदि वायरस के अन्य प्रोटीनों के प्रति एंटीबॉडी का पता लगाया जाता है, तो परिणाम को संदिग्ध माना जाता है, ऐसे रोगी की दो बार जांच की जानी चाहिए - 3 और 6 महीने के बाद।
विशिष्ट एचआईवी प्रोटीन के प्रति एंटीबॉडी की अनुपस्थिति का अर्थ है कि एंजाइम इम्युनोसे ने गलत सकारात्मक परिणाम दिया। उसी समय, व्यावहारिक कार्य में, पश्चिमी सोख्ता की विधि के परिणामों का मूल्यांकन करते समय, कंपनी द्वारा उपयोग किए गए "किट फॉर वेस्टर्न ब्लॉटिंग" के लिए दिए गए निर्देशों द्वारा निर्देशित होना आवश्यक है।
एचआईवी संक्रमण के प्रयोगशाला निदान के लिए इम्युनोब्लॉटिंग विधि का उपयोग किया जाता है।
सीरम में P24 एंटीजन
रक्त सीरम में सामान्य रूप से p24 एंटीजन अनुपस्थित होता है।
p24 एंटीजन एचआईवी का एक न्यूक्लियोटाइड दीवार प्रोटीन है। एचआईवी संक्रमण के बाद प्राथमिक अभिव्यक्तियों का चरण प्रतिकृति प्रक्रिया की शुरुआत का परिणाम है। p24 एंटीजन संक्रमण के 2 सप्ताह बाद रक्त में प्रकट होता है और 2 से 8 सप्ताह की अवधि में एलिसा द्वारा इसका पता लगाया जा सकता है। संक्रमण के 2 महीने बाद, रक्त से p24 एंटीजन गायब हो जाता है। बाद में, एचआईवी संक्रमण के नैदानिक पाठ्यक्रम में, रक्त में p24 प्रोटीन की मात्रा में दूसरी वृद्धि देखी गई। यह एड्स के गठन की अवधि पर पड़ता है। p24 एंटीजन का पता लगाने के लिए मौजूदा एलिसा परीक्षण प्रणाली का उपयोग रक्त दाताओं और बच्चों में एचआईवी का शीघ्र पता लगाने, एड्स के पाठ्यक्रम का निर्धारण करने और एड्स रोगियों में चिकित्सा की निगरानी के लिए किया जाता है। एलिसा में एक उच्च विश्लेषणात्मक संवेदनशीलता है, जो 5-10 पीकेजी / एमएल और एचआईवी -2 - 0.5 एनजी / एमएल से कम, और विशिष्टता पर सीरम में एचआईवी -1 पी 24 एंटीजन का पता लगाने की अनुमति देती है। हालांकि, यह ध्यान दिया जाना चाहिए कि रक्त में p24 एंटीजन का स्तर अलग-अलग भिन्नताओं के अधीन है, जिसका अर्थ है कि संक्रमण के बाद प्रारंभिक अवधि में इस अध्ययन का उपयोग करके केवल 20-30% रोगियों का पता लगाया जा सकता है (रोज एनआर एट अल।, 1997)।
IgM और IgG वर्गों के p24 प्रतिजन के प्रति एंटीबॉडी दूसरे सप्ताह से रक्त में दिखाई देते हैं, 2-4 सप्ताह के भीतर चरम पर पहुंच जाते हैं और कई बार इस स्तर पर बने रहते हैं: IgM एंटीबॉडी - कई महीनों तक, संक्रमण के बाद एक वर्ष के भीतर गायब हो जाते हैं , और IgG एंटीबॉडी वर्षों तक रह सकते हैं।
एचआईवी संक्रमण के निदान के लिए एल्गोरिथ्म रोग के चरण पर निर्भर करता है और विभिन्न वर्गों के एंटीबॉडी का पता लगाने की गतिशीलता में बदलाव की विशेषता है (चित्र 1, 2 - ऊपर स्रोत का लिंक देखें)।
शोध परिणाम गुणात्मक रूप से व्यक्त किया जाता है - सकारात्मक या नकारात्मक। एक नकारात्मक परीक्षण परिणाम एचआईवी -1 और एचआईवी -2 और पी 24 एंटीजन के रक्त सीरम में एंटीबॉडी की अनुपस्थिति को इंगित करता है।
प्रयोगशाला अपनी तैयारी पर तुरंत एक नकारात्मक परिणाम जारी करती है। सकारात्मक परिणाम प्राप्त होने पर - एचआईवी -1 और एचआईवी -2 और / या एंटीजन पी 24 के एंटीबॉडी का पता लगाना - प्रयोगशाला में झूठे सकारात्मक परिणामों से बचने के लिए, विश्लेषण को 2 बार दोहराया जाता है।
प्राप्त परीक्षण परिणामों के बावजूद, रोगी के रक्त के नमूने और 3 परीक्षणों के परिणाम प्रयोगशाला द्वारा क्षेत्रीय एड्स केंद्र को सकारात्मक परिणाम की पुष्टि करने या एक अपरिभाषित परिणाम को सत्यापित करने के लिए भेजे जाते हैं। ऐसे मामलों में, क्षेत्रीय एड्स केंद्र इस सर्वेक्षण के लिए अंतिम उत्तर प्रदान करेगा।
पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन द्वारा एचआईवी का पता लगाना (गुणात्मक)
पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन द्वारा एचआईवी का पता लगाना - पीसीआर (गुणात्मक रूप से) निम्न क्रम में किया जाता है:
- इम्युनोब्लॉटिंग अध्ययन के संदिग्ध परिणामों को हल करना;
- एचआईवी संक्रमण के शीघ्र निदान के लिए;
- एंटीवायरल उपचार की प्रभावशीलता की निगरानी;
- एड्स रोग के चरण का निर्धारण (संक्रमण का रोग में संक्रमण)।
एचआईवी के साथ प्राथमिक संक्रमण के मामले में, पीसीआर पद्धति संक्रमण के 10-14 दिनों बाद पहले से ही रक्त में एचआईवी आरएनए का पता लगाने की अनुमति देती है।
शोध परिणाम गुणात्मक रूप से व्यक्त किया जाता है: सकारात्मक या नकारात्मक। एक नकारात्मक परीक्षा परिणाम रक्त में एचआईवी आरएनए की अनुपस्थिति को इंगित करता है।
एक सकारात्मक परिणाम - एचआईवी आरएनए का पता लगाना - इंगित करता है कि रोगी संक्रमित है।
पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन द्वारा एचआईवी का पता लगाना (मात्रात्मक)
एचआईवी आमतौर पर रक्त में अनुपस्थित होता है।
पीसीआर का उपयोग करके एचआईवी आरएनए की प्रत्यक्ष मात्रा का ठहराव एचआईवी से संक्रमित लोगों में एड्स के विकास की दर का अनुमान लगाने के लिए सीडी 4 कोशिकाओं की सामग्री को निर्धारित करने की तुलना में अधिक सटीक रूप से अनुमति देता है, इसलिए, उनके अस्तित्व का अधिक सटीक आकलन करने के लिए। उच्च वायरल पार्टिकल काउंट आमतौर पर गंभीर बिगड़ा हुआ प्रतिरक्षा स्थिति और कम सीडी 4 सेल काउंट के साथ सहसंबद्ध होते हैं। कम वायरल पार्टिकल काउंट आमतौर पर बेहतर प्रतिरक्षा स्थिति और उच्च सीडी 4 सेल काउंट के साथ सहसंबद्ध होते हैं। रक्त में वायरल आरएनए की सामग्री रोग के नैदानिक चरण में संक्रमण की भविष्यवाणी कर सकती है। जब एचआईवी आरएनए -1 सामग्री> 74 100 प्रतियां / एमएल है, तो लगभग सभी रोगियों में एड्स की नैदानिक तस्वीर विकसित होती है (सीनियर डी।, होल्डन ई।, 1996)।
एचआईवी -1 रक्त स्तर वाले व्यक्ति> 10,000 प्रतियां / एमएल एचआईवी -1 रक्त स्तर वाले लोगों की तुलना में एड्स विकसित होने की संभावना 10.8 गुना अधिक है<10 000 копий/мл. При ВИЧ-инфекции прогноз непосредственно определяется уровнем виремии. Снижение уровня виремии при лечении улучшает прогноз заболевания.
अमेरिकी विशेषज्ञों के एक समूह द्वारा एचआईवी के रोगियों के उपचार के लिए एक संकेत विकसित किया गया है। रक्त सीडी 4 सेल गिनती वाले रोगियों के लिए उपचार का संकेत दिया गया है<300/мкл или уровнем РНК ВИЧ в сыворотке >20,000 प्रतियां / एमएल (पीसीआर)। एचआईवी से संक्रमित व्यक्तियों में एंटीरेट्रोवाइरल थेरेपी के परिणामों का मूल्यांकन एचआईवी सीरम आरएनए के स्तर को कम करके किया जाता है।
प्रभावी उपचार के साथ, पहले 8 हफ्तों के दौरान विरेमिया का स्तर 10 गुना कम होना चाहिए और विधि (पीसीआर) की पहचान सीमा से कम होना चाहिए (<500 копий/мл) через 4-6 месяцев после начала терапии.
इस प्रकार, आज तक, अन्य सभी वायरल संक्रमणों की तरह, एचआईवी संक्रमण के निदान के लिए नैदानिक अभ्यास में कई शोध विधियों को पेश किया गया है और उनका उपयोग किया गया है। इनमें सीरोलॉजिकल रिसर्च को प्रमुख भूमिका दी गई है। एचआईवी संक्रमण के निदान के लिए मुख्य तरीके तालिका 3 (ऊपर स्रोत का लिंक देखें) में प्रस्तुत किए गए हैं, जहां उन्हें चार स्तरों में वायरस का पता लगाने के लिए प्रत्येक विधि के महत्व के अनुसार विभाजित किया गया है:
- ए - आमतौर पर निदान की पुष्टि के लिए परीक्षण का उपयोग किया जाता है;
- बी - संक्रमण के कुछ रूपों के निदान के लिए कुछ परिस्थितियों में परीक्षण उपयोगी है;
- सी - परीक्षण का उपयोग शायद ही कभी नैदानिक उद्देश्यों के लिए किया जाता है, लेकिन महामारी विज्ञान सर्वेक्षणों के लिए इसका बहुत महत्व है;
- डी - परीक्षण आमतौर पर नैदानिक उद्देश्यों के लिए प्रयोगशालाओं द्वारा उपयोग नहीं किया जाता है।
चूंकि वायरल संक्रमण के निदान के लिए, इष्टतम विश्लेषण पद्धति को चुनने के अलावा, अनुसंधान के लिए बायोमटेरियल को सही ढंग से पहचानना और लेना कम महत्वपूर्ण नहीं है, तालिका 4 (उपरोक्त स्रोत का लिंक देखें) इष्टतम बायोमटेरियल चुनने के लिए सिफारिशें प्रदान करती है। एचआईवी संक्रमण पर शोध के लिए।
एचआईवी संक्रमित की निगरानी के लिए, किसी को प्रतिरक्षा स्थिति के व्यापक अध्ययन की क्षमताओं का उपयोग करना चाहिए - इसके सभी लिंक का मात्रात्मक और कार्यात्मक निर्धारण: सामान्य रूप से हास्य, सेलुलर प्रतिरक्षा और गैर-विशिष्ट प्रतिरोध।
आधुनिक प्रयोगशाला स्थितियों में, प्रतिरक्षाविज्ञानी स्थिति का आकलन करने के लिए बहु-चरण सिद्धांत में लिम्फोसाइटों, रक्त इम्युनोग्लोबुलिन के उप-जनसंख्या का निर्धारण शामिल है। संकेतकों का आकलन करते समय, यह ध्यान में रखा जाना चाहिए कि एचआईवी संक्रमण को सीडी 4 / सीडी 8 टी कोशिकाओं के अनुपात में 1 से कम की कमी की विशेषता है। सीडी 4 / सीडी 8 इंडेक्स 1.5-2.5 एक सामान्य स्थिति को इंगित करता है, 2.5 से अधिक अति सक्रियता को इंगित करता है। , कम 1.0 - इम्युनोडेफिशिएंसी को इंगित करता है। साथ ही, गंभीर सूजन में सीडी4/सीडी8 अनुपात 1 से कम हो सकता है।
एड्स रोगियों में प्रतिरक्षा प्रणाली का आकलन करते समय यह अनुपात मौलिक महत्व का है, क्योंकि एचआईवी चुनिंदा रूप से सीडी 4 लिम्फोसाइटों को संक्रमित और नष्ट कर देता है, जिसके परिणामस्वरूप सीडी 4 / सीडी 8 अनुपात 1 से काफी कम मूल्यों तक कम हो जाता है।
प्रतिरक्षात्मक स्थिति का आकलन सेलुलर और हास्य प्रतिरक्षा प्रणाली में सामान्य या "सकल" दोषों की पहचान पर भी आधारित है: हाइपरगैमाग्लोबुलिनमिया (आईजीए, आईजीएम, आईजीजी की बढ़ी हुई एकाग्रता) या टर्मिनल चरण में हाइपोगैमाग्लोबुलिनमिया; परिसंचारी प्रतिरक्षा परिसरों की एकाग्रता में वृद्धि; साइटोकिन्स के उत्पादन में कमी; एंटीजन और माइटोगेंस के लिए लिम्फोसाइटों की प्रतिक्रिया का कमजोर होना।
बी-लिम्फोसाइटों के कुल पूल में आबादी के अनुपात का उल्लंघन अपर्याप्त हास्य प्रतिरक्षा की विशेषता है। हालांकि, ये परिवर्तन एचआईवी संक्रमण के लिए विशिष्ट नहीं हैं और अन्य बीमारियों में भी हो सकते हैं। कई अन्य प्रयोगशाला मापदंडों के व्यापक मूल्यांकन में, यह ध्यान में रखा जाना चाहिए कि एचआईवी संक्रमण की भी विशेषता है: एनीमिया, लिम्फ और ल्यूकोपेनिया, थ्रोम्बोसाइटोपेनिया, β2-माइक्रोग्लोबुलिन और सी-रिएक्टिव प्रोटीन के स्तर में वृद्धि, ए रक्त सीरम में ट्रांसएमिनेस की गतिविधि में वृद्धि।
एचआईवी संक्रमण के नैदानिक और प्रयोगशाला निदानतीन दिशाएँ हैं:
- एचआईवी संक्रमण के तथ्य की स्थापना, एचआईवी संक्रमण का निदान।
- रोग के नैदानिक पाठ्यक्रम के चरण का निर्धारण और द्वितीयक रोगों की पहचान।
- रोग के नैदानिक पाठ्यक्रम की प्रगति की भविष्यवाणी, उपचार की प्रभावशीलता की प्रयोगशाला निगरानी और एंटीरेट्रोवाइरल दवाओं के दुष्प्रभाव।
1. एचआईवी संक्रमण की स्थापना, एचआईवी संक्रमण का निदान
एचआईवी संक्रमण का निर्धारण करने के लिए, निम्नलिखित विशिष्ट संकेतकों का उपयोग किया जाता है: एचआईवी, एचआईवी एंटीजन, एचआईवी आरएनए और प्रोवायरस डीएनए के प्रति एंटीबॉडी। एचआईवी के प्रति एंटीबॉडी का निर्धारण एंजाइम से जुड़े इम्युनोसॉरबेंट परख (एलिसा) या इम्युनोब्लॉटिंग द्वारा किया जाता है, जो अनिवार्य रूप से एलिसा का एक प्रकार है। एचआईवी के एंटीजन (प्रोटीन) एलिसा द्वारा निर्धारित किए जाते हैं। पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन (पीसीआर) और बीडीएनए, एचआईवी आरएनए और प्रोवायरस डीएनए के आणविक आनुवंशिक तरीकों का उपयोग करके निर्धारित किया जा सकता है। विशिष्ट डीएनए जांच के साथ न्यूक्लिक एसिड के संकरण की एक अतिरिक्त विधि का उपयोग पीसीआर के दौरान प्राप्त डीएनए अनुक्रमों की विशिष्टता की जांच करना संभव बनाता है। पीसीआर की संवेदनशीलता पांच हजार कोशिकाओं में से एक में वायरल जीन का पता लगाना है।
प्राथमिक संक्रमण के मामले में, संक्रमित लोगों के रक्त में एचआईवी मार्करों की निम्नलिखित गतिशीलता देखी जाती है। पहले महीने में, प्रतिकृति प्रक्रिया की सक्रियता के परिणामस्वरूप, वायरल लोड (प्लाज्मा में एचआईवी आरएनए की सामग्री) में तेज वृद्धि होती है, फिर, वायरस के प्रसार और लक्ष्य कोशिकाओं के बड़े पैमाने पर संक्रमण के कारण रक्त और लिम्फ नोड्स, अनंतिम डीएनए निर्धारित करना संभव हो जाता है। लक्ष्य सेल के जीनोम में एकीकृत प्रोवायरस डीएनए का पता लगाने का तथ्य सर्वोपरि नैदानिक मूल्य का है।
वायरल लोड संक्रमित कोशिकाओं में प्रतिकृति प्रक्रिया की तीव्रता को दर्शाता है। प्राथमिक संक्रमण की अवधि के दौरान, एचआईवी के विभिन्न उपप्रकारों से संक्रमित होने पर वायरल लोड का स्तर भिन्न होता है, लेकिन इसके परिवर्तनों की गतिशीलता लगभग समान होती है। इसलिए, जब उपप्रकार बी से संक्रमित होता है, उदाहरण के लिए, यदि संक्रमण के बाद पहले महीने में वायरल लोड का मूल्य 700 प्रतियां / एमएल है, तो दूसरे महीने में 600 की कमी होती है, तीसरे में - 100 तक, 4 में - 50 प्रतियां / एमएल तक। रक्त में एचआईवी के लिए विशिष्ट एंटीबॉडी की सामग्री में वृद्धि की पृष्ठभूमि के खिलाफ इस तरह की गतिशीलता देखी जाती है। एचआईवी संक्रमित रक्त मोनोन्यूक्लियर कोशिकाओं में प्रोवायरल डीएनए की सामग्री कुछ उपप्रकारों में मामूली उतार-चढ़ाव के साथ पहले 6 महीनों के दौरान सापेक्ष स्थिरता की विशेषता है। इस प्रकार, आरएनए और डीएनए भार समान नहीं हैं।
ऊष्मायन चरण के दौरान, कुछ समय के लिए, मौजूदा प्रयोगशाला विधियों द्वारा निर्धारण के लिए पर्याप्त मात्रा में एचआईवी के लिए विशिष्ट एंटीबॉडी का गठन नहीं होता है। एंटीबॉडी के पंजीकरण से पहले, नेफ प्रोटीन के रक्त में उपस्थिति, जो प्रतिकृति प्रक्रिया को दबाती है, और संरचनात्मक प्रोटीन पी 24, बहुत कम समय के लिए मनाया जाता है। p24 एंटीजन को रक्त में एंजाइम-लिंक्ड इम्युनोसॉरबेंट परख की विधि द्वारा संक्रमण के बाद 1-2 पेड तक पहचाना जा सकता है और 8 वें सप्ताह तक निर्धारित किया जा सकता है, फिर इसकी सामग्री में तेजी से कमी आती है। इसके अलावा, एचआईवी संक्रमण के नैदानिक पाठ्यक्रम में, रक्त में p24 प्रोटीन सामग्री में दूसरी वृद्धि होती है। यह एड्स के बनने पर पड़ता है। रक्त में मुक्त (एंटीबॉडी से बंधे नहीं) कोर प्रोटीन p24 का गायब होना और एचआईवी प्रोटीन के लिए विशिष्ट एंटीबॉडी की उपस्थिति सेरोकोनवर्जन की शुरुआत को चिह्नित करती है (चित्र 9.6)।
विरेमिया और एंटीजेनमिया विशिष्ट आईजीएम एंटीबॉडी (एंटी-पी 24, एंटी-जीपी41, एंटी-जीपी120, एंटी-जीपी160) के गठन का कारण बनते हैं। IgM और IgG वर्गों के p24 प्रोटीन के नि: शुल्क एंटीबॉडी दूसरे सप्ताह से शुरू हो सकते हैं, उनकी सामग्री 2-4 सप्ताह के भीतर बढ़ जाती है, एक निश्चित स्तर तक पहुंच जाती है, जिस पर यह महीनों (IgM) और वर्षों (IgG) (छवि 1) तक रहता है। 9.7)।
पूर्ण सेरोकोनवर्जन की उपस्थिति, जब एचआईवी p24, gp41, gp120, gp160 के संरचनात्मक प्रोटीन के लिए विशिष्ट IgG एंटीबॉडी का एक उच्च स्तर परिधीय रक्त में दर्ज किया जाता है, तो एचआईवी संक्रमण के निदान की सुविधा प्रदान करता है। एचआईवी के प्रति एंटीबॉडी संक्रमण के 3 महीने के भीतर संक्रमित लोगों में से 90-95% में दिखाई देते हैं, 5-9% में - संक्रमण के क्षण से 3 से 6 महीने की अवधि में और 0.5-1% में - बाद की तारीख में।
इस तथ्य के बावजूद कि एचआईवी के प्रति एंटीबॉडी अंतिम दिखाई देते हैं, आज तक का मुख्य प्रयोगशाला निदान संकेतक एलिसा और इम्युनोब्लॉटिंग द्वारा विशिष्ट एंटीबॉडी का पता लगाना है।
तालिका 9.2 में प्रस्तुत डेटा [प्रदर्शन] और 9.3 [प्रदर्शन] , एचआईवी के प्रति एंटीबॉडी के निर्धारण में आधुनिक एंजाइम-लिंक्ड इम्युनोसॉरबेंट परख प्रणालियों की उच्च संवेदनशीलता को स्पष्ट रूप से प्रदर्शित करता है, जो इम्युनोब्लॉटिंग की संवेदनशीलता से बेहतर है। कुछ मामलों में, एलिसा में प्राथमिक सकारात्मक परिणाम प्राप्त होने पर, केवल 2-3 सप्ताह के बाद ही इम्युनोब्लॉटिंग में इसकी पुष्टि की जा सकती है।
| तालिका 9.3। सर्कोनवर्जन की निगरानी का एक उदाहरण (एन। फ्लेरी, 2000 के अनुसार) | |||||
| संकल्प का क्षण | P24 एंटीजन, पीजी / एमएल | एचआईवी प्रोटीन के लिए एंटीबॉडी | |||
| एलिसा, ओपी गिरफ्तारी / ओपी करोड़ ** | immunoblotting | ||||
| HIV जोड़ी | सामान्य स्क्रीन | वर्दी | |||
| रोगी 1 | |||||
| प्रमुख रूप से | 17 | 1,24 | 1 से कम | 1 से कम | * |
| 4 दिनों के बाद | 67 | 1,36 | 1,85 | 1 से कम | - |
| 7 दिनों में | * | 2,33 | 6,84 | 1 से कम | - |
| 2 दिन बाद | * | 6,77 | 15,0 | 4,8 | जीपी160 |
| रोगी 2 | |||||
| प्रमुख रूप से | 400 | 13 | 1 से कम | 1 से कम | - |
| 5 दिनों में | 450 | 18 | 2,11 | 1 से कम | - |
| 10 दिनों के बाद | * | 33 | 12,19 | 2,9 | जीपी160 |
| नोट: * - निर्धारण नहीं किया गया ** - अध्ययन किए गए सीरम नमूने के ऑप्टिकल घनत्व का ऑप्टिकल घनत्व के महत्वपूर्ण (दहलीज) मान का अनुपात |
|||||
दुनिया की अग्रणी कंपनियों के इम्युनोब्लॉटिंग टेस्ट सिस्टम का उपयोग करते हुए एचआईवी संक्रमित रोगियों (एचआईवी संक्रमित) की जांच करते समय, सभी मामलों में जीपी160 और पी24/25 के प्रति एंटीबॉडी का पता लगाया जाता है, 38.8-93.3% मामलों में अन्य प्रोटीनों के प्रति एंटीबॉडी का पता लगाया जाता है (तालिका) 2). 9.4 [प्रदर्शन] ).
एचआईवी संक्रमण वाले रोगियों में एंटीबॉडी का पता लगाने में कठिनाइयाँ बड़े पैमाने पर विरेमिया और एंटीजेनमिया की अवधि के दौरान उत्पन्न हो सकती हैं, जब रक्त में मौजूदा विशिष्ट एंटीबॉडी वायरल कणों से जुड़े होते हैं, और प्रतिकृति प्रक्रिया नए एंटीवायरल एंटीबॉडी के उत्पादन से आगे निकल जाती है। संक्रामक प्रक्रिया के दौरान यह स्थिति उत्पन्न और गायब हो सकती है।
प्रारंभिक रूप से कमजोर प्रतिरक्षा प्रणाली वाले रोगियों में, विरेमिया और एंटीजेनमिया पहले दिखाई देते हैं और रोग के परिणाम तक उच्च स्तर पर बने रहते हैं। ऐसे रोगियों में, एचआईवी के लिए मुक्त एंटीबॉडी की कम सामग्री होती है, दो कारणों से - बी-लिम्फोसाइटों द्वारा एंटीबॉडी का अपर्याप्त उत्पादन और विषाणु और घुलनशील एचआईवी प्रोटीन द्वारा एंटीबॉडी का बंधन, इसलिए, संक्रमण का निर्धारण करने के लिए, संवेदनशीलता में वृद्धि के साथ परीक्षण प्रणाली या विश्लेषण विधियों में संशोधन जो एंटीबॉडी रिलीज के चरण के लिए प्रदान करते हैं, प्रतिरक्षा परिसरों से आवश्यक हैं।
अक्सर, इन कारणों से एचआईवी के प्रति एंटीबॉडी की सामग्री में कमी टर्मिनल चरण में होती है, जब सीरम में एचआईवी के प्रति एंटीबॉडी को एंजाइम से जुड़े इम्युनोसॉरबेंट परख विधियों या इम्युनोब्लॉटिंग (पश्चिमी धब्बा) की विधि का उपयोग नहीं किया जा सकता है। एचआईवी के लिए विशिष्ट एंटीबॉडी की उपस्थिति के अलावा, पहले 4 महीनों में प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया को रक्त में संक्रमित सीडी 4 + कोशिकाओं की सामग्री में कमी और सीडी 8 + कोशिकाओं में वृद्धि की विशेषता है। इसके अलावा, सीडी 4 और सीडी 8 रिसेप्टर्स को ले जाने वाली कोशिकाओं की सामग्री स्थिर हो जाती है और कुछ समय के लिए अपरिवर्तित रहती है। CD8-लिम्फोसाइटों की सामग्री में वृद्धि एक सुरक्षात्मक प्रतिक्रिया है, क्योंकि कोशिका-निर्भर साइटोटोक्सिसिटी सीडी 8 + लिम्फोसाइट्स द्वारा महसूस की जाती है, जिसका उद्देश्य एचपीवी-संक्रमित कोशिकाओं को नष्ट करना है। प्रारंभ में, साइटोटोक्सिक लिम्फोसाइट्स (सीटीएल) वायरस के नियामक प्रोटीन नेफ पर प्रतिक्रिया करते हैं, जो पहले महीनों में एचआईवी संक्रमित व्यक्ति के प्लाज्मा में वायरल (आरएनए) लोड को कम करने में महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है। फिर सीटीएल से प्रतिक्रिया दूसरों के लिए बनती है, सहित। संरचनात्मक, एचआईवी प्रोटीन, जिसके परिणामस्वरूप, संक्रमण के 12 महीने बाद, साइटोटोक्सिक प्रभाव काफी बढ़ जाता है।
एचआईवी संक्रमण के प्रयोगशाला निदान के लिए योजनाएं
व्यवहार में एचआईवी संक्रमण के विशिष्ट मार्करों की उपरोक्त गतिशीलता को ध्यान में रखते हुए, वयस्कों में निम्नलिखित प्रयोगशाला निदान योजनाओं का पालन करना उचित है (चित्र 9.8-9.10)।
आरेख एचआईवी संक्रमण के प्राथमिक प्रयोगशाला निदान के तीन मुख्य चरणों को दर्शाते हैं:
- स्क्रीनिंग।
- संदर्भ।
- विशेषज्ञ।
प्रयोगशाला निदान के कई चरणों की आवश्यकता मुख्य रूप से आर्थिक कारणों से है। इसलिए, उदाहरण के लिए, इम्युनोब्लॉटिंग विधि का उपयोग करके घरेलू परीक्षण प्रणालियों की मदद से एक विशेषज्ञ अध्ययन करने की लागत $ 40 तक है, स्क्रीनिंग (एलिसा विधि का उपयोग करके) - लगभग 0.2, अर्थात अनुपात 1: 200 है .
पहले चरण में (चित्र 9.8), दोनों प्रकार के वायरस - एचआईवी -1 और एचआईवी -2 के प्रति एंटीबॉडी का पता लगाने के लिए डिज़ाइन किए गए एक एंजाइम-लिंक्ड इम्युनोसॉरबेंट परख का उपयोग करके एचआईवी के प्रति एंटीबॉडी के लिए विषयों का परीक्षण किया जाता है।
प्रस्तावित परीक्षण प्रणालियों में निर्माता एंटीजेनिक आधार के रूप में वायरल लाइसेट, पुनः संयोजक प्रोटीन, सिंथेटिक पेप्टाइड्स का उपयोग करते हैं। एचआईवी के एंटीजेनिक निर्धारकों के सूचीबद्ध वाहकों में से प्रत्येक के अपने फायदे और नुकसान हैं। इसलिए, लगभग समान लागत की परीक्षण प्रणाली चुनते समय, उच्चतम संवेदनशीलता (अधिमानतः 100%) वाले किटों को प्राथमिकता दी जानी चाहिए। समान लागत और संवेदनशीलता की परीक्षण प्रणालियों में, अधिकतम विशिष्टता वाले लोगों पर ध्यान केंद्रित करना उचित है।
वायरस लाइसेट के आधार पर, एचआईवी संक्रमण के प्रयोगशाला निदान के लिए पहली परीक्षण प्रणाली बनाई गई थी। 1980 के दशक में, इस तरह की परीक्षण प्रणालियों को 100% से कम की संवेदनशीलता और कम विशिष्टता की विशेषता थी, जो झूठी सकारात्मक परिणामों की एक बड़ी संख्या (60% तक) द्वारा प्रकट हुई थी।
लिम्फोसाइटों की संस्कृति में एक विषाणु के निर्माण के दौरान, इसकी झिल्ली बाहरी झिल्ली से बनाई जाती है और इसलिए इसमें कक्षा I और II के मुख्य हिस्टोकोम्पैटिबिलिटी कॉम्प्लेक्स के एंटीजन होते हैं। यह परिस्थिति झूठी-सकारात्मक प्रतिक्रियाओं का कारण बनती है यदि रोगियों के रक्त में हिस्टोकोम्पैटिबिलिटी के एलोएंटिजेन्स के एंटीबॉडी मौजूद हैं।
बाद में, एक वायरस प्राप्त करने के लिए, मैक्रोफेज की एक संस्कृति का उपयोग करने का प्रस्ताव किया गया था, जिसमें वायरल कण मुख्य रूप से कोशिका के बाहरी झिल्ली से नहीं, बल्कि एंडोप्लाज्मिक रेटिकुलम की झिल्लियों से नवोदित होकर बनते हैं। इस तकनीक ने झूठी सकारात्मक की संख्या को कम कर दिया है।
सबसे महत्वपूर्ण विशेषताओं में से एक - संवेदनशीलता और विशिष्टता - मान्यता प्राप्त एंजाइम-लिंक्ड इम्युनोसॉरबेंट परख सिस्टम हैं, जो सिंथेटिक पेप्टाइड्स के साथ शुद्ध वायरल लाइसेट के संयोजन का उपयोग करते हैं, जो वायरस प्रोटीन के सबसे एंटीजेनिक रूप से महत्वपूर्ण भाग हैं, या पुनः संयोजक प्रोटीन।
परीक्षण प्रणाली की संवेदनशीलता किट के अन्य घटकों की विशेषताओं पर भी निर्भर करती है। इस प्रकार, परीक्षण प्रणालियाँ जिनमें संयुग्मों का उपयोग किया जाता है जो न केवल IgG वर्ग के एंटीबॉडी को पहचानते हैं, बल्कि IgM और IgA के भी, सेरोकोनवर्जन के पहले चरण का पता लगाने की अनुमति देते हैं। परीक्षण प्रणालियों का उपयोग आशाजनक लगता है, जिसकी मदद से एंटीवायरल एंटीबॉडी और पी 24 एंटीजन दोनों को एक साथ निर्धारित करना संभव है, जो पहले भी एचआईवी संक्रमण का प्रयोगशाला निदान करता है।
प्राथमिक सकारात्मक परिणाम को एक ही परीक्षण प्रणाली में नमूने की फिर से जांच करके, लेकिन अधिमानतः एक अलग बैच में और एक अलग प्रयोगशाला सहायक द्वारा दोबारा जांच की जानी चाहिए। यदि दूसरे अध्ययन के दौरान नकारात्मक परिणाम प्राप्त होता है, तो अध्ययन तीसरी बार किया जाता है।
सकारात्मक परिणाम की पुष्टि के बाद, यह सलाह दी जाती है कि रक्त को फिर से खींचा जाए और प्राथमिक रूप से एचआईवी के प्रति एंटीबॉडी के लिए उसका परीक्षण किया जाए। बार-बार रक्त का नमूना ट्यूबों के गलत लेबलिंग और रेफरल फॉर्म भरने के कारण होने वाली त्रुटियों को रोकता है।
सीरम जो स्क्रीनिंग चरण में सीरम पॉजिटिव होता है, उसे दो या तीन अत्यधिक विशिष्ट एलिसा परीक्षण प्रणालियों का उपयोग करके किए गए संदर्भ अध्ययन के लिए भेजा जाता है। दो सकारात्मक परिणामों के मामले में, इम्युनोब्लॉटिंग विधि का उपयोग करके एक विशेषज्ञ अध्ययन किया जाता है।
संदर्भ निदान में एंजाइम इम्युनोसे का उपयोग, जिसका उपयोग एचआईवी -1 और एचआईवी -2 के लिए विशिष्ट एंटीबॉडी को अलग करने के लिए किया जा सकता है, आगे के काम की सुविधा प्रदान करता है और आपको उपयुक्त इम्युनोब्लॉटिंग (एचआईवी -1) का उपयोग करके तुरंत विशेषज्ञ स्तर पर एक सकारात्मक नमूने का अध्ययन करने की अनुमति देता है। या एचआईवी-2)...
एचआईवी संक्रमण पर प्रयोगशाला विशेषज्ञ की राय केवल सकारात्मक पश्चिमी धब्बा परिणाम के आधार पर बनाई जाती है। विशेषज्ञ निदान करते समय, डब्ल्यूएचओ विशेषज्ञों के एक समूह द्वारा 1990 में प्रस्तावित एचआईवी जीन और जीन उत्पादों के नामकरण का उपयोग करना आवश्यक है (तालिका 9.5 [प्रदर्शन] ).
इम्युनोब्लॉट पर बैंड की विशिष्टता का आकलन बहुत सावधानी से और सावधानी से किया जाना चाहिए, नियंत्रण सीरा (सकारात्मक और नकारात्मक) के अध्ययन के परिणामों का उपयोग करके, जो प्रायोगिक नमूनों के अध्ययन के समानांतर किए जाते हैं, और इम्युनोब्लॉट के एक नमूने के साथ एचआईवी प्रोटीन का पदनाम (निर्माता द्वारा परीक्षण प्रणाली से जुड़ा हुआ)। प्राप्त परिणामों की व्याख्या परीक्षण प्रणाली से जुड़े निर्देशों के अनुसार की जानी चाहिए। एक नियम के रूप में, सकारात्मकता की कसौटी दो प्रोटीन (अग्रदूत, बाहरी या ट्रांसमेम्ब्रेन) के लिए एंटीबॉडी की अनिवार्य उपस्थिति है, जो एनवी जीन द्वारा एन्कोडेड है, और दो अन्य संरचनात्मक एचआईवी जीनों के उत्पादों के लिए एंटीबॉडी की संभावित उपस्थिति - गैग और पोल ( तालिका 9.6 [प्रदर्शन] ).
| तालिका 9.6। एचआईवी-1 और एचआईवी-2 के लिए इम्युनोब्लॉटिंग परिणामों की व्याख्या के लिए मानदंड (डब्ल्यूएचओ, 1990) | |||
| नतीजा | एचआईवी -1 | एचआईवी-2 | |
| सकारात्मक | +/- पोल धारियों +/- धारियाँ | 2 बैंड एनवी (अग्रदूत, बाहरी जीपी या ट्रांसमेम्ब्रेन जीपी) +/- पोल धारियों +/- धारियाँ |
|
| नकारात्मक | एचआईवी -1 विशिष्ट बैंड की कमी | एचआईवी-2 विशिष्ट बैंड की कमी | |
| ढुलमुल | अन्य प्रोफाइल को सकारात्मक या नकारात्मक के रूप में नहीं देखा गया | ||
एक संदिग्ध परिणाम प्राप्त करने के मामले में, इम्युनोब्लॉटिंग के परिणामों के अंतिम स्पष्टीकरण के लिए सिफारिशों की सूची का उपयोग करना आवश्यक है (तालिका 9.7) [प्रदर्शन] ).
| तालिका 9.7। अनिश्चित इम्युनोब्लॉट परिणामों के निश्चित स्पष्टीकरण के लिए सिफारिशें (डब्ल्यूएचओ, 1990) | |
| एचआईवी प्रोटीन के अनुरूप बैंड की उपस्थिति | परिणाम की व्याख्या, आगे की कार्रवाई |
| एचआईवी -1 | |
| केवल p17 | |
| केवल P24 और gp160 | यह असामान्य पैटर्न सेरोकोनवर्जन की शुरुआत में हो सकता है। सैंपल की तुरंत दोबारा जांच कराएं। यदि समान प्रोफ़ाइल प्राप्त की जाती है, तो पहला नमूना लेने के 2 सप्ताह बाद इम्युनोब्लॉटिंग में परीक्षण के लिए दूसरा नमूना लेना आवश्यक है। |
| अन्य प्रोफाइल | ये प्रोफाइल (गैग और / या बिना एनवी के पोल) सेरोकोनवर्जन या गैर-विशिष्ट प्रतिक्रियाओं का संकेत दे सकते हैं। |
| एचआईवी-2 | |
| केवल p16 | नकारात्मक के रूप में वर्गीकृत किया जा सकता है, कोई अतिरिक्त परिभाषा की आवश्यकता नहीं है |
| मैं गैग / पोल के साथ या बिना एनवी को लेन देता हूं | विभिन्न अभिकर्मकों का उपयोग करके एक ही नमूने का पुन: परीक्षण करें। |
| P24 या gp140 केवल | यह असामान्य प्रोफ़ाइल सेरोकोनवर्जन की शुरुआत में हो सकती है। सैंपल की तुरंत दोबारा जांच कराएं। यदि एक ही प्रोफ़ाइल प्राप्त की जाती है, तो पहला नमूना लेने के 2 सप्ताह बाद, दूसरा नमूना इम्युनोब्लॉटिंग में परीक्षण के लिए लिया जाना चाहिए। |
| अन्य प्रोफाइल | ये प्रोफाइल (गैग और / या बिना एनवी के पोल) सेरोकोनवर्जन या गैर-विशिष्ट प्रतिक्रियाओं का संकेत दे सकते हैं। |
एड्स की रोकथाम और नियंत्रण के लिए रूसी वैज्ञानिक और पद्धति केंद्र की सिफारिशों के अनुसार, एक सकारात्मक परिणाम माना जाता है यदि gp41, gp120, gp160 प्रोटीन में से कम से कम एक के साथ या अन्य विशिष्ट एचआईवी के एंटीबॉडी के साथ संयोजन में एंटीबॉडी हैं। -1 प्रोटीन। ये सिफारिशें नोसोकोमियल फॉसी से बच्चों के सीरा के अनुभव के आधार पर की जाती हैं, जिसमें एंटीबॉडी अक्सर वायरल लिफाफा प्रोटीन में से एक के लिए निर्धारित किए जाते थे।
एलिसा में शुरू में जिन रोगियों की जांच सेरोपोसिटिव की जांच की गई थी, वे लगातार सामान्यीकृत लिम्फैडेनोपैथी (पीजीएल) के चरण या स्पर्शोन्मुख चरण के हैं। इसलिए, एक इम्युनोब्लॉट (एक नाइट्रोसेल्यूलोज पट्टी जिस पर एचआईवी प्रोटीन स्थिर होते हैं) पर, एक नियम के रूप में, एचआईवी -1 के लिए एंटीबॉडी का निम्नलिखित संयोजन निर्धारित किया जाता है: env कोट प्रोटीन gp160, gp120 और gp41 के एंटीबॉडी, env द्वारा एन्कोडेड जीन, p24 कोर प्रोटीन (गैग जीन द्वारा एन्कोडेड प्रोटीन न्यूक्लियोकैप्सिड) और p31 / 34 (पोल जीन द्वारा एन्कोडेड एंडोन्यूक्लिज़) के एंटीबॉडी के साथ संयोजन में।
सर्कोनवर्जन के प्रारंभिक चरण के मामले में केवल गैग और / या पीओ प्रोटीन के साथ सकारात्मक प्रतिक्रियाएं हो सकती हैं, और एचआईवी -2 के संक्रमण या एक गैर-विशिष्ट प्रतिक्रिया का भी संकेत मिलता है।
एक संदिग्ध परिणाम प्राप्त करने के मामले में, एचआईवी संक्रमण के तथ्य को स्पष्ट करने के लिए विभिन्न कार्यप्रणाली तकनीकों का उपयोग करना संभव है।
तकनीकी क्षमताओं (नैदानिक किट और अभिकर्मकों की उपलब्धता, विशेष उपकरण और कर्मियों के प्रशिक्षण के साथ उपकरण) के आधार पर, विशेषज्ञ प्रयोगशाला अतिरिक्त नैदानिक अध्ययन करती है (चित्र 9.10)।
कुछ मामलों में, सीरम, रक्त लिम्फोसाइटों या लिम्फ नोड पंचर में एचआईवी के आनुवंशिक अनुक्रम को निर्धारित करने के लिए आणविक आनुवंशिक विधियों का उपयोग करने की सलाह दी जाती है। पीसीआर के परिणामस्वरूप प्राप्त डीएनए अनुक्रमों की विशिष्टता का सत्यापन विशिष्ट डीएनए जांच के साथ न्यूक्लिक एसिड के संकरण की विधि द्वारा किया जा सकता है।
इम्यूनोब्लॉटिंग में संदिग्ध परिणामों के साथ सीरा के अंतिम सत्यापन के लिए रेडियोइम्यूनोप्रेजर्वेशन (आरआईपी) और अप्रत्यक्ष इम्यूनोफ्लोरेसेंस (आईएफएल) के तरीकों का भी उपयोग किया जा सकता है।
एचआईवी संक्रमण के निदान के लिए गुणात्मक या मात्रात्मक विधि द्वारा रक्त प्लाज्मा में एचआईवी आरएनए का पता लगाना महत्वपूर्ण नहीं है। प्राथमिक संदिग्ध या नकारात्मक प्रतिक्रिया प्राप्त करने के 2-4 महीने बाद इस परिणाम की पुष्टि मानक तरीकों से की जानी चाहिए, जैसे कि इम्युनोब्लॉटिंग।
सेल कल्चर में एचआईवी का अलगाव अंतिम सत्य है। हालांकि, विधि जटिल, महंगी है, और केवल विशेष रूप से सुसज्जित अनुसंधान प्रयोगशालाओं में ही की जाती है।
सीडी 4 + - रक्त में कोशिकाओं की सामग्री एक गैर-विशिष्ट संकेतक है, लेकिन विवादास्पद मामलों में (एलिसा "+", इम्युनोब्लॉट "-", एचआईवी संक्रमण / एड्स के नैदानिक संकेतों की उपस्थिति), इसका उपयोग एक गाइड के रूप में किया जा सकता है एक विशेषज्ञ निर्णय लेना। यदि प्रयोगशाला में केवल इम्युनोब्लॉटिंग करने की क्षमता है, तो आपको तालिका में निर्धारित सिफारिशों का पालन करना चाहिए। 9.7 और अंजीर। 9.9.
जिन व्यक्तियों की सीरम विशेषज्ञ परीक्षा में केवल p17 (HIV-1) या p16 (HIV-2) एंटीबॉडी का पता लगाने के मामलों को छोड़कर, संदिग्ध (अनिश्चित) परिणाम मिले हैं, उन्हें 6 महीने (3 महीने के बाद) के भीतर दोबारा जांचा जाना चाहिए। सच्चे एचआईवी संक्रमण के मामले में, 3-6 महीनों के बाद, एंटीबॉडी के स्पेक्ट्रम में एक "सकारात्मक" प्रवृत्ति देखी जाती है - वायरस के अन्य प्रोटीनों के लिए एंटीबॉडी का अतिरिक्त गठन। एक झूठी प्रतिक्रिया लंबे समय तक एक संदिग्ध प्रतिरक्षा धब्बा पैटर्न की दृढ़ता या संदिग्ध बैंड के गायब होने की विशेषता है। यदि, निर्दिष्ट अवधि के बाद, बार-बार इम्युनोब्लॉटिंग के परिणाम नकारात्मक हैं या संदिग्ध रहते हैं, तो जोखिम वाले कारकों, नैदानिक लक्षणों या एचआईवी संक्रमण से जुड़े अन्य कारकों की अनुपस्थिति में, एक व्यक्ति को एचआईवी -1 और एचआईवी के एंटीबॉडी के लिए सेरोनिगेटिव माना जा सकता है। -2।
रोगियों के रक्त में हिस्टोकम्पैटिबिलिटी के एलोएंटिजेन्स के रक्त में सामग्री के कारण झूठे सकारात्मक परिणाम, जो एचआईवी लिफाफे का हिस्सा हैं, जीपी41 और जीपी31 के स्तर पर बैंड के रूप में इम्युनोब्लॉट पर दिखाई देते हैं। अन्य गैर-विशिष्ट प्रतिक्रियाओं के कारण (उदाहरण के लिए, p24, जो अक्सर ऑटोइम्यून प्रक्रियाओं वाले व्यक्तियों में पाया जाता है) को अभी तक स्पष्ट नहीं किया गया है।
एंजाइम से जुड़े इम्युनोसॉरबेंट परख प्रणालियों की उत्पादन तकनीक में सुधार ने उच्च संवेदनशीलता प्राप्त करना संभव बना दिया - 99.99% तक, जबकि इम्युनोब्लॉटिंग विधि की संवेदनशीलता 97% है। इसलिए, एलिसा में सकारात्मक परिणामों के साथ इम्युनोब्लॉटिंग में एक नकारात्मक परिणाम सेरोकोनवर्जन की प्रारंभिक अवधि का संकेत दे सकता है, जो विशिष्ट एंटीबॉडी के निम्न स्तर की विशेषता है। इसलिए, 1.5-2 महीनों के बाद अध्ययन को दोहराना आवश्यक है, अर्थात्, सेरोकोनवर्जन के पूरा होने के लिए आवश्यक समय की अवधि, रक्त में विशिष्ट एंटीबॉडी की एकाग्रता तक पहुंचने के लिए इम्युनोब्लॉटिंग द्वारा पता लगाने के लिए पर्याप्त है।
एचआईवी संक्रमण के प्रयोगशाला निदान के संदर्भ या केवल स्क्रीनिंग चरण में एक अध्ययन के सकारात्मक परिणाम (परिणाम), यानी किसी एंजाइम से जुड़े इम्यूनोसॉर्बेंट परख में सकारात्मक परिणाम, जिसे अंततः विशेषज्ञ विधियों द्वारा पुष्टि नहीं की गई थी, के रूप में व्याख्या की जाती है परीक्षण किए गए एंटीबॉडी के रक्त में क्रॉस-रिएक्टिंग एंटीबॉडी की उपस्थिति। क्रॉस-रिएक्टिंग एचआईवी प्रोटीन या पेप्टाइड्स पर एंटीबॉडी द्वारा गैर-विशिष्ट साइटों के बंधन को संदर्भित करता है जो परीक्षण प्रणाली में एंटीजेनिक आधार के रूप में उपयोग किया जाता है जिसमें सकारात्मक परिणाम प्राप्त होता है।
एचआईवी संक्रमण के प्रतिरक्षाविहीनता और नैदानिक लक्षणों के अभाव में, ऐसे व्यक्तियों को एचआईवी के प्रति एंटीबॉडी के लिए सेरोनिगेटिव माना जाता है और उन्हें रजिस्टर से हटा दिया जाना चाहिए।
एचआईवी संक्रमण का अंतिम निदान केवल सभी नैदानिक, महामारी विज्ञान और प्रयोगशाला डेटा के आधार पर स्थापित किया जाता है। केवल उपस्थित चिकित्सक को एचआईवी संक्रमण के निदान के बारे में रोगी को सूचित करने का अधिकार है।
एचआईवी संक्रमण के पुष्टिकरण (विशेषज्ञ) प्रयोगशाला निदान की मुख्य विधि इम्युनोब्लॉटिंग है। हालांकि, एलिसा की तुलना में इसकी कम संवेदनशीलता को देखते हुए, कई शोधकर्ताओं ने एचआईवी के लिए विशिष्ट एंटीबॉडी की उपस्थिति के अंतिम निर्धारण के लिए कई परीक्षण प्रणालियों के संयोजन का उपयोग करने का सुझाव दिया। उदाहरण के लिए, जी वैन डेर ग्रोएन एट अल। एचआईवी संक्रमण के प्रयोगशाला निदान के स्क्रीनिंग चरण के सकारात्मक परिणामों की जाँच के लिए इम्युनोब्लॉटिंग विधि के विकल्प का प्रस्ताव किया। इसमें तीन परीक्षण प्रणालियों में समानांतर में सामग्री का अध्ययन शामिल है, जो विभिन्न प्रकृति के एंटीजन का उपयोग करके एचआईवी (कई एलिसा वेरिएंट, एग्लूटिनेशन टेस्ट) के लिए विशिष्ट एंटीबॉडी का पता लगाने के लिए विभिन्न तरीकों पर आधारित हैं। लेखकों ने परीक्षण प्रणालियों के ऐसे संयोजनों को खोजने में कामयाबी हासिल की, जिनका उपयोग इम्युनोब्लॉटिंग में प्राप्त परिणामों की तुलना में 100% संवेदनशीलता और विशिष्टता प्रदान करता है।
विशेषज्ञ निदान की इस पद्धति की सस्ताता एक निस्संदेह लाभ है, हालांकि, इस बारे में जानकारी की कमी है कि वायरस के विशिष्ट प्रोटीन में रोगी के रक्त में एंटीबॉडी होते हैं, प्रत्येक व्यक्तिगत मामले में प्रतिक्रिया की विशिष्टता का आकलन करने की अनुमति नहीं देते हैं, साथ ही ट्रैकिंग भी करते हैं। सेरोकोनवर्जन के प्रारंभिक चरण में एंटीबॉडी के स्पेक्ट्रम में परिवर्तन।
एचआईवी संक्रमित माताओं से पैदा हुए बच्चों में एचआईवी संक्रमण के प्रयोगशाला निदान की अपनी विशेषताएं हैं। जन्म के क्षण से, एचआईवी के लिए मातृ एंटीबॉडी लंबे समय तक (15 महीने तक) ऐसे बच्चों के रक्त में फैल सकती हैं। केवल आईजीजी वर्ग के इम्युनोग्लोबुलिन प्लेसेंटल बाधा में प्रवेश करते हैं, इसलिए, एक बच्चे में आईजीएम और आईजीए कक्षाओं के एचपीवी-विशिष्ट एनएममुपोग्लोबुलिन का पता लगाने से संक्रमण की पुष्टि होती है, लेकिन एक नकारात्मक परिणाम एचआईवी की अनुपस्थिति का संकेत नहीं दे सकता है।
1 महीने से कम उम्र के बच्चों में अभी तक एचपीवी प्रतिकृति नहीं है, और सत्यापन का एकमात्र तरीका पीसीआर है। 1 महीने से अधिक उम्र के बच्चों में p24 एंटीजन का निर्धारण भी एक पुष्टिकरण विधि है।
नवजात शिशुओं में एचआईवी के प्रति एंटीबॉडी की अनुपस्थिति का मतलब यह नहीं है कि वायरस प्लेसेंटल बाधा में प्रवेश नहीं कर पाया है। किसी भी मामले में, एचआईवी संक्रमित माताओं के बच्चों को जन्म से 36 महीने के भीतर प्रयोगशाला निदान परीक्षा और अवलोकन के अधीन किया जाता है।
एचआईवी संक्रमण के मार्करों के लिए प्रयोगशाला परीक्षणों के परिणामों की सावधानीपूर्वक व्याख्या की आवश्यकता होती है और इसे केवल महामारी विज्ञान और नैदानिक सर्वेक्षणों के डेटा के संयोजन में माना जाना चाहिए। दूसरी ओर, यह ध्यान दिया जाना चाहिए कि आधुनिक तरीकों की उच्च संवेदनशीलता के बावजूद, नकारात्मक शोध परिणाम एचआईवी संक्रमण की उपस्थिति को पूरी तरह से बाहर नहीं कर सकते हैं। इसलिए, एक नकारात्मक परीक्षा परिणाम, उदाहरण के लिए, इम्युनोब्लॉटिंग द्वारा, केवल एचआईवी -1 और एचआईवी -2 के लिए विशिष्ट एंटीबॉडी की अनुपस्थिति के रूप में तैयार किया जा सकता है।
सेरोनिगेटिव रोगियों में एचआईवी संक्रमण का निदान
एचआईवी संक्रमण के प्रयोगशाला निदान में उपयोग की जाने वाली परीक्षण प्रणालियों की गुणवत्ता में हर साल सुधार हो रहा है, उनकी संवेदनशीलता बढ़ रही है। हालांकि, एचआईवी की उच्च परिवर्तनशीलता नए प्रकारों के उद्भव का कारण बन सकती है, एंटीबॉडी जिन्हें मौजूदा परीक्षण प्रणालियों द्वारा पहचाना नहीं जा सकता है। इसके अलावा, वायरस के लिए मेजबान की प्रतिरक्षा प्रणाली की असामान्य हास्य प्रतिक्रिया के मामले हैं। इसलिए, एल। मॉन्टैग्नियर ने 1996 में दो एड्स रोगियों के बारे में बताया, जिनमें पिछले कई वर्षों से रक्त में विशिष्ट एंटीबॉडी का पता नहीं चला था, निदान केवल एचपीवी -1 के अलगाव द्वारा पुष्टि किए गए नैदानिक डेटा और प्रयोगशाला के आधार पर किया गया था। सेल संस्कृति में। ऐसे मामलों में, डब्ल्यूएचओ की सिफारिशों का उपयोग करना आवश्यक है, जिसके अनुसार 12 एड्स-संकेतक रोगों में से एक की उपस्थिति में वयस्कों और बच्चों में एचआईवी संक्रमण का नैदानिक निदान संभव है:
- अन्नप्रणाली, श्वासनली, ब्रांकाई, फेफड़ों की कैंडिडिआसिस;
- एक्स्ट्रापल्मोनरी क्रिप्टोकॉकोसिस;
- एक महीने से अधिक समय तक दस्त के साथ क्रिप्टोस्पोरिडिओसिस;
- किसी भी अंग का साइटोमेगालोवायरस घाव (1 महीने से अधिक उम्र के रोगी में यकृत, प्लीहा और लिम्फ नोड्स को छोड़कर):
- दाद सिंप्लेक्स वायरस के कारण होने वाला संक्रमण जो 1 महीने से अधिक उम्र के रोगी में 1 महीने से अधिक समय तक बना रहता है;
- 60 वर्ष से कम उम्र के रोगी में मस्तिष्क का लिंफोमा;
- 13 साल से कम उम्र के बच्चे में लिम्फोसाइटिक इंटरस्टिशियल निमोनिया;
- माइक्रोबैक्टीरियम एवियम इंट्रासेल्युलर या एम। कान्सेसी समूह के बैक्टीरिया के कारण फैलने वाला संक्रमण;
- न्यूमोसिस्टिस निमोनिया;
- प्रगतिशील मल्टीफोकल ल्यूकोएन्सेफालोपैथी;
- 1 महीने से अधिक उम्र के रोगियों में केंद्रीय तंत्रिका तंत्र का टोक्सोप्लाज्मोसिस।
इन बीमारियों में से एक की उपस्थिति एचआईवी के लिए एंटीबॉडी की उपस्थिति के लिए एक प्रयोगशाला रक्त परीक्षण करने की संभावना के अभाव में एचआईवी संक्रमण का निदान करना संभव बनाती है, या भले ही एक सेरोनिगेटिव परिणाम प्राप्त हो।
एक स्रोत: चिकित्सा प्रयोगशाला निदान, कार्यक्रम और एल्गोरिदम। ईडी। प्रो कार्पिशेंको ए.आई., सेंट पीटर्सबर्ग, इंटरमेडिका, 2001
एचआईवी संक्रमण के निदान में दो चरण शामिल हैं: एचआईवी संक्रमण के वास्तविक तथ्य को स्थापित करना और रोग के चरण का निर्धारण करना। रोग के पाठ्यक्रम की प्रकृति के स्पष्टीकरण के बाद चरण का निर्धारण अविभाज्य रूप से किया जाता है, और फिर किसी दिए गए रोगी में रोग का निदान होता है, साथ ही साथ उपचार की रणनीति का विकल्प भी होता है।
जैसा कि आप जानते हैं, किसी भी संक्रामक रोग का निदान महामारी विज्ञान, नैदानिक और प्रयोगशाला डेटा की तुलना पर आधारित होता है, और इन आंकड़ों के समूहों में से किसी एक के मूल्य का अतिशयोक्ति निदान त्रुटियों को जन्म दे सकता है।
एचआईवी संक्रमण के लिए महामारी विज्ञान मानदंड .
एचआईवी संक्रमण के निदान में पहला कदम एक महामारी विज्ञान के इतिहास और रोगी की जांच के बारे में अन्य महामारी विज्ञान डेटा एकत्र करना है। महामारी विज्ञान के आंकड़ों की कमी एचआईवी संक्रमण के निदान को काफी जटिल कर सकती है और महामारी विरोधी उपायों के कार्यान्वयन में बाधा उत्पन्न कर सकती है।
एचआईवी संक्रमण का निदान करने में महामारी विज्ञान के मानदंड कभी-कभी निर्णायक हो सकते हैं, लेकिन वे गौण महत्व के भी हो सकते हैं। संक्रमण की उच्च संभावना के लिए मानदंड, एचआईवी संक्रमित व्यक्ति से प्राप्त दाता रक्त के संक्रमण, जांच की गई महिला द्वारा एचआईवी संक्रमित बच्चे के जन्म के रूप में संक्रमण के लिए ऐसे जोखिम कारकों का परीक्षण व्यक्ति में पता लगाना है। एचआईवी संक्रमित मां से जांच किए गए व्यक्ति के जन्म, एचआईवी संक्रमित व्यक्ति के साथ यौन संपर्क, एचआईवी संक्रमित व्यक्ति के साथ संयुक्त पैरेंट्रल ड्रग के उपयोग के मामले में संक्रमण की संभावना अधिक होती है। संक्रमण का एक निश्चित जोखिम विश्वसनीय पैरेंट्रल हस्तक्षेप के साथ पाया जाता है जो एचआईवी से दूषित होने की संभावना वाले उपकरणों के साथ किया जाता है (यानी, पैरेंट्रल एचआईवी ट्रांसमिशन के साथ एचआईवी संक्रमण के नोसोकोमियल और समान फॉसी में)।
संक्रमण के एक उल्लेखनीय जोखिम पर उन मामलों में चर्चा की जा सकती है जहां विषय उन क्षेत्रों में यौन संभोग या पैरेन्टेरल ड्रग के उपयोग की रिपोर्ट करता है जहां एचआईवी उस जनसंख्या समूह के बीच काफी आम है जिससे विषय संबंधित है।
साथ ही, एचआईवी संक्रमण के कम प्रसार वाले क्षेत्रों में संभोग और नशीली दवाओं का उपयोग एचआईवी संक्रमण की संभावना को बाहर नहीं करता है।
एचआईवी संक्रमण के लिए विश्वसनीय जोखिम कारकों की अनुपस्थिति प्रयोगशाला के आंकड़ों पर संदेह पैदा कर सकती है। ऐसे मामलों में, प्रयोगशाला परीक्षणों को दोहराने की सिफारिश की जाती है।
एचआईवी संक्रमण के लिए नैदानिक मानदंड।
एचआईवी संक्रमण का शीघ्र निदान रोगी के समय पर उपचार और प्रकोप में निवारक उपायों की तैनाती को सुनिश्चित करता है, जिससे संक्रमित व्यक्ति से स्वस्थ व्यक्ति में वायरस के अनजाने संचरण को रोका जा सके। अंत में, शीघ्र निदान समय पर चिकित्सा परीक्षा, मनोवैज्ञानिक सहायता और सामाजिक पुनर्वास की अनुमति देता है। रोगियों के उपचार में पहली सफलता, शीघ्र निदान के साथ, रोगियों के जीवन को महत्वपूर्ण रूप से विस्तारित करने और यहां तक कि इलाज की आशा करने की अनुमति देती है।
नैदानिक तस्वीर के आधार पर प्रारंभिक निदान की जटिलता चरण II में लक्षणों की गैर-विशिष्टता, बहुरूपता में निहित है, चरण I में क्लिनिक की अनुपस्थिति का उल्लेख नहीं करना है। फिर भी, अमोघ थकान के सभी मामलों में, रात के पसीने की उपस्थिति, सिरदर्द , विशेष रूप से अल्पकालिक बुखार की पृष्ठभूमि के खिलाफ ( 3-10 दिन) 38-38.50 सी के तापमान के साथ, टॉन्सिलिटिस के साथ, लंबे समय तक डायरिया सिंड्रोम, थोड़े समय में वजन कम होना, सबसे पहले एचआईवी संक्रमण को बाहर करना आवश्यक है . इस अवधि के दौरान निदान एक वस्तुनिष्ठ परीक्षा के दौरान विभिन्न प्रकार के त्वचा पर चकत्ते (धब्बे, पपल्स, गुलाबोला, फोड़े) या फुरुनकुलोसिस की पहचान करने में मदद करता है। लिम्फैडेनोपैथी की उपस्थिति, यहां तक कि लिम्फ नोड्स के एक समूह के विस्तार के मामलों में, और इससे भी अधिक सामान्यीकृत लोगों के साथ, नैदानिक रूप से एचआईवी संक्रमण का संदेह होने की अधिक संभावना है। रोग विशेष रूप से पश्च ग्रीवा, सबमांडिबुलर, सुप्रा- और सबक्लेवियन, एक्सिलरी और उलनार लिम्फ नोड्स में वृद्धि की विशेषता है। एक नियम के रूप में, वे आकार में 2-5 सेमी व्यास तक बढ़ते हैं, दर्द रहित होते हैं, घनी लोचदार स्थिरता के होते हैं, और कभी-कभी एक समूह में विलीन हो जाते हैं। एचआईवी संक्रमण के लिए एक से अधिक नोड, एक से अधिक समूह (वंक्षण के अपवाद के साथ) का 3 महीने से अधिक समय तक बढ़ना बहुत विशिष्ट है।
अक्सर, रोग के प्रारंभिक चरण में, मनो-न्यूरोलॉजिकल लक्षणों की उपस्थिति: चिंता, अवसाद, चाल की अस्थिरता, दृश्य तीक्ष्णता में कमी, मनो-भावनात्मक क्षेत्र को नुकसान के संकेतों के साथ दौरे (स्मृति हानि, विस्मृति, अपर्याप्त व्यवहार) भावनाओं का सुस्त होना)। सबसे विशिष्ट विशेषताओं के लिए एचआईवी संक्रमण के प्रारंभिक चरणों में शामिल हैं:
1. शरीर के वजन में 10% से कम की कमी;
2. त्वचा और श्लेष्मा झिल्ली में परिवर्तन (सेबोरीक जिल्द की सूजन, फॉलिकुलिटिस, प्रुरिगो, सोरायसिस, फंगल नाखून संक्रमण, आवर्तक मौखिक अल्सर, नेक्रोटाइज़िंग मसूड़े की सूजन);
3 ... 50 वर्ष से कम उम्र के लोगों में हरपीज ज़ोस्टर;
4. आवर्तक ऊपरी श्वसन पथ के संक्रमण;
वी मध्यवर्ती चरणइम्युनोडेफिशिएंसी के परिणामस्वरूप बनने वाले व्यापक सुपरिनफेक्शन के क्लिनिक की विशेषता वाली बीमारी सबसे अधिक विशेषता है:
1 ... 10% से अधिक शरीर के वजन में प्रगतिशील कमी;
2 ... अज्ञात मूल का दस्त, 1 महीने से अधिक समय तक रहना ..;
3 ... मौखिक कैंडिडिआसिस;
4 ... ल्यूकोप्लाकिया;
5. फेफड़े का क्षयरोग;
6. परिधीय न्यूरोपैथी;
7. कपोसी के सारकोमा के स्थानीयकृत रूप;
8. हरपीज ज़ोस्टर का प्रसार;
9. गंभीर, आवर्तक जीवाणु संक्रमण (निमोनिया, साइनसिसिस, पायोमायोसिटिस)।
के लिये देर से मंच, एचआईवी संक्रमण का निदान करने की अनुमति देना, या, किसी भी मामले में, विभेदक निदान करने के लिए, इसमें शामिल हैं:
1. न्यूमोसिस्टिस निमोनिया;
2 ... टोक्सोप्लाज्मोसिस;
3. क्रिप्टोकरंसी;
4. सीएमवी संक्रमण;
5. दाद सिंप्लेक्स;
6. प्रगतिशील मल्टीफोकल ल्यूकोएन्सेफालोपैथी;
7. हिस्टोप्लाज्मोसिस;
8. कैंडिडल एसोफैगिटिस;
9. मैक संक्रमण;
10. साल्मोनेला सेप्टीसीमिया;
11. एक्स्ट्रापल्मोनरी तपेदिक;
12. लिम्फोमा, कपोसी का सारकोमा;
13. कैशेक्सिया;
14. एचआईवी एन्सेफैलोपैथी।
1988 में, WHO ने नैदानिक निदान के उद्देश्य के लिए प्रस्तावित किया लक्षण स्कोरएचआईवी संक्रमण के संदिग्ध रोगी के लिए उपलब्ध:
लगातार सामान्यीकृत लिम्फैडेनोपैथी 0
त्वचा और श्लेष्मा झिल्ली में परिवर्तन 1.
वजन घटाना 1
गंभीर थकान 1
हरपीज सिंप्लेक्स 2
1 महीने से अधिक समय तक चलने वाला दस्त। 4
1 महीने से अधिक समय तक चलने वाला बुखार 4
10% से अधिक वजन घटाना 4
फुफ्फुसीय तपेदिक 5
आवर्तक जीवाणु संक्रमण 5
मौखिक ल्यूकोप्लाकिया 5
Stomatitis, मुंह का छाला 5
स्थानीयकृत कपोसी का सारकोमा 8
कैशेक्सिया 12
साथ ही, 0 से 3 तक के अंकों के योग का आकलन किया जाता है क्योंकि एचआईवी संक्रमण की संभावना बहुत कम है, 4-11 अंक - रोग की संभावना है, और 12 और अधिक - बहुत संभावना है।
सामान्य तौर पर, एचआईवी संक्रमण का नैदानिक निदान, सबसे पहले, माध्यमिक इम्युनोडेफिशिएंसी वाले रोगी में एड्स से संबंधित विकृति के स्पेक्ट्रम का निदान है। चूंकि एचआईवी-संकेतक रोगों में 23 नोसोलॉजिकल रूप शामिल हैं, निदान के लिए एक सिंड्रोमिक दृष्टिकोण सबसे समीचीन है। लगभग हमेशा रोगी को सामान्य नशा (अनमोटेड कमजोरी, सुस्ती, तेजी से थकान) का एक सिंड्रोम होता है, जो लंबे समय तक सबफ़ब्राइल स्थिति या अज्ञात मूल के बुखार की पृष्ठभूमि के खिलाफ विकसित होता है, अधिक बार रात और सुबह में, विपुल पसीने के साथ। अनमोटेड सामान्यीकृत परिधीय लिम्फैडेनोपैथी का सिंड्रोम स्थिर है, 20% में अलग-अलग गंभीरता के हेपेटोसप्लेनोमेगाली के साथ। रोग के प्रमुख सिंड्रोम में से एक ब्रोंकोपुलमोनरी पैथोलॉजी का सिंड्रोम है, हालांकि न्यूमोसिस्टिस निमोनिया के रूप में फेफड़े के ऊतकों के गहरे घाव रोग के उन्नत मामलों में विकसित होते हैं, क्योंकि न्यूमोसिस्टोसिस गहरी इम्युनोडेफिशिएंसी की पृष्ठभूमि के खिलाफ विकसित होता है। लेकिन 1 महीने से अधिक समय तक, अनमोटेड डायरिया का सिंड्रोम जल्दी प्रकट होने को संदर्भित करता है, यह ड्रग थेरेपी के प्रतिरोध की विशेषता है। एचआईवी संक्रमण के सिंड्रोम में से एक अस्पष्ट एटियलजि का तरंग जैसा गठिया है। रोग की सबसे विशिष्ट अभिव्यक्तियों में त्वचा और श्लेष्मा झिल्ली के घावों का सिंड्रोम शामिल है, जो एक गैर-विशिष्ट मैकुलोपापुलर दाने द्वारा प्रकट होता है, स्टेरॉयड थेरेपी के लिए प्रतिरोधी, एक्जिमा, स्टेफिलोकोकल इम्पेटिगो। त्वचा संबंधी अभिव्यक्तियों में आवर्तक कवक (माइकोसिस, कैंडिडिआसिस, बैक्टीरियल (फॉलिकुलिटिस, फुरुनकुलोसिस, हाइड्रोडेनाइटिस), त्वचा और श्लेष्मा झिल्ली के वायरल (दाद) घाव शामिल हैं। अंत में, एचआईवी संक्रमण की विशेषता नियोप्लाज्म भी होती है, मुख्य रूप से कापोसी के सारकोमा के रूप में और लिम्फोमा, और कुछ अन्य प्रकार के ट्यूमर भी।
एक रोगी में उपरोक्त लक्षणों में से कम से कम दो नैदानिक और दो नैदानिक प्रयोगशाला (ल्यूकोलीफोनयूट्रोपेनिया, हाइपोगैमाग्लोबुलिनमिया) की उपस्थिति उच्च स्तर के आत्मविश्वास के साथ एचआईवी संक्रमण का निदान करना संभव बनाती है। लेकिन एक ही समय में, यदि दो सिंड्रोम जो रोगियों में बहुत आम हैं, जैसे कि बुखार और लिम्फैडेनोपैथी, एक महीने या उससे अधिक समय तक बनी रहती है, लगातार अनमोटेड डायरिया, शरीर के वजन में 10% से अधिक की कमी या विपुल रात का पसीना देता है निदान और पूरी तरह से प्रयोगशाला परीक्षा के लिए वृद्धि।
वी चरण 2कजोखिम वाले रोगी में या महामारी विज्ञान के इतिहास की उपस्थिति में लगातार सामान्यीकृत लिम्फैडेनोपैथी के लक्षण से ही रोग का संदेह किया जा सकता है।
वी चरण 2बी(शुरुआती या कमजोर रूप से व्यक्त) दैहिक भलाई, सामान्य गतिविधि अभी भी संरक्षित है। त्वचा और श्लेष्मा झिल्ली के घाव गंभीर नहीं होते हैं, श्वसन पथ के आवर्तक संक्रमण सामान्यीकृत नहीं होते हैं, शरीर के वजन में कमी 10% से अधिक नहीं होती है।
डब्ल्यूएचओ की सिफारिशों के अनुसार, 12 एड्स-संकेतक रोगों में से एक की उपस्थिति में वयस्कों और बच्चों में एचआईवी संक्रमण का विश्वसनीय नैदानिक निदान संभव है: 1) अन्नप्रणाली, श्वासनली, ब्रांकाई, फेफड़ों की कैंडिडिआसिस; 2) एक्स्ट्रापल्मोनरी क्रिप्टोकॉकोसिस; 3) एक महीने से अधिक समय तक दस्त के साथ क्रिप्टोस्पोरिडिओसिस; 4) किसी भी अंग का साइटोमेगालोवायरस घाव (1 महीने से अधिक उम्र के रोगी में यकृत, प्लीहा और लिम्फ नोड्स को छोड़कर); 5) दाद सिंप्लेक्स वायरस के कारण होने वाला संक्रमण जो 1 महीने से अधिक उम्र के रोगी में 1 महीने से अधिक समय तक बना रहता है; 6) 60 वर्ष से कम उम्र के रोगी में कपोसी का सारकोमा; 7) 60 वर्ष से कम उम्र के रोगी में सेरेब्रल लिंफोमा; 8) 13 साल से कम उम्र के बच्चे में लिम्फोसाइटिक इंटरस्टिशियल निमोनिया, 9) माइक्रोबैक्टीरियम एवियम इंट्रासेल्युलर या एम। कान्सेसी समूह के बैक्टीरिया के कारण फैलने वाला संक्रमण; 10) न्यूमोसिस्टिस निमोनिया; 11) प्रगतिशील बहुपक्षीय ल्यूकोएन्सेफालोपैथी; 12) 1 महीने से अधिक उम्र के रोगियों में केंद्रीय तंत्रिका तंत्र का टोक्सोप्लाज्मोसिस। इन बीमारियों में से एक की उपस्थिति सेरोलॉजिकल एंजाइम-लिंक्ड इम्युनोसॉरबेंट परख की अनुपस्थिति में या यहां तक कि एक सेरोनिगेटिव परिणाम प्राप्त होने पर भी एचआईवी संक्रमण का निदान करना संभव हो जाता है।
रोग के चरणों का अंतर करना भी कम कठिन नहीं है, अर्थात। नैदानिक मानदंडों के अनुसार चरणों का भेदभाव। सीडीसी (यूएसए) के विशेषज्ञों के अनुसार, सबसे उद्देश्य मानदंड टी-हेल्पर्स की संख्या है, न कि नैदानिक अभिव्यक्तियाँ, क्योंकि इनमें से कई स्थितियां अक्सर उन लोगों में पाई जाती हैं जो एचआईवी से संक्रमित नहीं हैं। 1991 में, केंद्र ने निर्धारित किया कि एड्स का निदान किया जा सकता है यदि: a) संक्रमित व्यक्ति को 23 एड्स से संबंधित स्थितियों में से एक है, या b) वह एचआईवी संक्रमित है और उसके पास 200 सीडी4 + सेल / मिमी से कम है।
एचआईवी संक्रमण के लिए प्रयोगशाला मानदंड।
एचआईवी संक्रमण के लिए परीक्षण मुख्य रूप से इसके अधीन है:
2 ... कैंडिडिआसिस एसोफैगिटिस, ब्रोंची और फेफड़ों के कैंडिडिआसिस के क्लिनिक वाले व्यक्ति, प्रसारित या एक्स्ट्रापल्मोनरी कोक्सीडियोइडोमाइकोसिस, न्यूमोसिस्टिस न्यूमोनिया, एक्स्ट्रापल्मोनरी क्रिप्टोकॉकोसिस, क्रिप्टोस्पोरिडिओसिस डायरिया के साथ 1 महीने से अधिक समय तक चलने वाले, यकृत, प्लीहा के अलावा आंतरिक अंगों के साइटोमेगालोवायरस घाव, पुराने रोगी। 6 लिम्फ नोड्स। दृष्टि की हानि के साथ रेटिनाइटिस, 1 महीने से अधिक समय तक चलने वाले मल्टीफोकल अल्सर के साथ हर्पेटिक संक्रमण, ब्रोंकाइटिस, निमोनिया या ग्रासनलीशोथ, आवर्तक दाद दाद, डेसीमिनेटेड या एक्स्ट्रापल्मोनरी हिस्टोप्लास्मोसिस, फुफ्फुसीय या एक्स्ट्रापल्मोनरी तपेदिक, 1 से अधिक या एक्स्ट्रापल्मोनरी डायरिया के साथ आइसोस्पोरियासिस। संक्रमण, प्रगतिशील मल्टीफोकल ल्यूकोएन्सेफालोपैथी, मस्तिष्क का टोक्सोप्लाज्मोसिस, साल्मोनेला सेप्टीसीमिया, कापोसी का सारकोमा, लिम्फोमा, लिम्फोइड इंटरस्टिशियल निमोनिया (बच्चों में)
वर्तमान में, एचआईवी, एचआईवी एंटीजन और जीन सामग्री का पता लगाने के विभिन्न तरीकों के साथ-साथ एचआईवी के प्रति एंटीबॉडी का पता लगाने के तरीकों का उपयोग एचआईवी संक्रमण के प्रयोगशाला निदान के लिए किया जाता है। इन सभी विधियों की अलग-अलग प्रभावशीलता है, विभिन्न उपकरणों और कर्मियों के प्रशिक्षण के विभिन्न स्तरों की आवश्यकता होती है। इन अध्ययनों के परिणामों के लिए सक्षम व्याख्या की आवश्यकता है।
... किसी भी संक्रामक रोग का निदान महामारी विज्ञान, नैदानिक और प्रयोगशाला डेटा की तुलना पर आधारित होता है, और इन आंकड़ों के समूहों में से किसी एक के मूल्य का अतिशयोक्ति निदान त्रुटियों को जन्म दे सकता है।
एचआईवी संक्रमण के निदान में दो चरण शामिल हैं:
मैंमंच - एचआईवी संक्रमण के वास्तविक तथ्य की स्थापना
;
द्वितीयमंच - रोग के चरण का निर्धारण
.
एचआईवी संक्रमण के तथ्य की स्थापना
एचआईवी संक्रमण के वास्तविक तथ्य को स्थापित करना (अर्थात एचआईवी संक्रमित की पहचान करना), बदले में, इसमें दो चरण भी शामिल हैं:
स्टेज I- लिंक्ड इम्युनोसॉरबेंट परख(यदि एक): एलिसा विधि एक स्क्रीनिंग (स्क्रीनिंग) विधि है - संभावित रूप से संक्रमित व्यक्तियों का चयन, यानी इसका उद्देश्य संदिग्ध व्यक्तियों की पहचान करना और स्वस्थ व्यक्तियों को बाहर निकालना है; एचआईवी के प्रति एंटीबॉडी का पता लक्ष्य एंटीबॉडी (अन्य एंटीबॉडी के खिलाफ एंटीबॉडी) के लिए अन्य एंटीबॉडी का उपयोग करके लगाया जाता है। इन सहायक एंटीबॉडी को एक एंजाइम के साथ लेबल किया जाता है। सभी स्क्रीनिंग टेस्ट अत्यधिक संवेदनशील होने चाहिए ताकि किसी मरीज की कमी न हो। इस वजह से, उनकी विशिष्टता बहुत अधिक नहीं है, अर्थात, एलिसा असंक्रमित लोगों में एक सकारात्मक उत्तर ("शायद बीमार") दे सकती है (उदाहरण के लिए, ऑटोइम्यून बीमारियों वाले रोगियों में: गठिया, प्रणालीगत ल्यूपस एरिथेमेटोसस, आदि)। विभिन्न परीक्षण प्रणालियों का उपयोग करते समय झूठे सकारात्मक परिणामों की आवृत्ति 0.02 से 0.5% तक होती है। यदि किसी व्यक्ति का एलिसा परीक्षण सकारात्मक है, तो एचआईवी संक्रमण के तथ्य की पुष्टि करने के लिए, आगे की जांच करना आवश्यक है। एलिसा का संचालन करते समय, 3 - 5% मामलों में झूठे नकारात्मक परिणाम संभव हैं - यदि संक्रमण अपेक्षाकृत हाल ही में हुआ है और एंटीबॉडी का स्तर अभी भी बहुत कम है, या रोग के अंतिम चरण में, प्रतिरक्षा प्रणाली को गंभीर क्षति की विशेषता है एंटीबॉडी उत्पादन की प्रक्रिया में गहरा व्यवधान के साथ। इसलिए, एचआईवी संक्रमित के साथ संपर्क का संकेत देने वाले डेटा की उपस्थिति में, आमतौर पर 2 से 3 महीने के बाद बार-बार जांच की जाती है।
द्वितीय चरण - immunoblotting(पश्चिमी धब्बा संशोधन में, पश्चिमी धब्बा): एक अधिक जटिल विधि है और संक्रमण के तथ्य की पुष्टि करने का कार्य करती है। यह विधि एचआईवी के लिए जटिल एंटीबॉडी का पता नहीं लगाती है, लेकिन व्यक्तिगत संरचनात्मक प्रोटीन (p24, gp120, gp41, आदि) के प्रति एंटीबॉडी का पता लगाती है। इम्युनोब्लॉटिंग के परिणामों को सकारात्मक माना जाता है यदि कम से कम तीन प्रोटीनों के प्रति एंटीबॉडी का पता लगाया जाता है, जिनमें से एक एनवी जीन द्वारा एन्कोड किया जाता है, दूसरा गैग जीन द्वारा और तीसरा पोल जीन द्वारा। यदि एक या दो प्रोटीनों के प्रति एंटीबॉडी का पता लगाया जाता है, तो परिणाम को समान माना जाता है और पुष्टि की आवश्यकता होती है। अधिकांश प्रयोगशालाओं में, एचआईवी संक्रमण का निदान किया जाता है यदि p24, p31, gp4l, और gpl20 / gp160 प्रोटीन के एंटीबॉडी का एक साथ पता लगाया जाए। विधि का सार: वायरस घटकों (एंटीजन) में नष्ट हो जाता है, जिसमें आयनित अमीनो एसिड अवशेष होते हैं, और इसलिए सभी घटकों की एक अलग सुबह होती है; फिर, वैद्युतकणसंचलन (विद्युत प्रवाह) का उपयोग करते हुए, एंटीजन को पट्टी की सतह पर वितरित किया जाता है - यदि परीक्षण सीरम में एचआईवी के लिए एंटीबॉडी हैं, तो वे एंटीजन के सभी समूहों के साथ बातचीत करेंगे, और इसका पता लगाया जा सकता है।
याद रखना चाहिएकि एचआईवी एंटीबॉडी 90-95% संक्रमित लोगों में संक्रमण के 3 महीने के भीतर दिखाई देते हैं, 5-9% संक्रमित एचआईवी एंटीबॉडी 6 महीने के बाद दिखाई देते हैं और 0.5-1% संक्रमित एचआईवी एंटीबॉडी बाद में दिखाई देते हैं। एड्स के चरण में, एंटीबॉडी की संख्या पूरी तरह से गायब होने तक घट सकती है।
इम्यूनोलॉजी में, इस तरह की एक अवधारणा है सीरोलॉजिकल विंडो - संक्रमण से लेकर एंटीबॉडी की इतनी मात्रा के प्रकट होने तक की अवधि जिसका पता लगाया जा सकता है। एचआईवी के लिए, यह अवधि आमतौर पर 2 से 12 सप्ताह तक रहती है, दुर्लभ मामलों में अधिक समय तक। "सीरोलॉजिकल विंडो" की अवधि के दौरान, विश्लेषण के अनुसार, एक व्यक्ति स्वस्थ है, लेकिन वास्तव में वह एचआईवी से संक्रमित है। यह स्थापित किया गया है कि एचआईवी डीएनए मानव जीनोम में कम से कम तीन साल तक गतिविधि के संकेतों के बिना हो सकता है और एचआईवी (एचआईवी संक्रमण के मार्कर) के एंटीबॉडी प्रकट नहीं होते हैं।
इस अवधि के दौरान ("सीरोलॉजिकल विंडो"), एचआईवी संक्रमित व्यक्ति की पहचान करना संभव है, और संक्रमण के 1-2 सप्ताह बाद भी, इसकी मदद से संभव है पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन(पीसीआर)।यह एक अत्यंत संवेदनशील तरीका है - सैद्धांतिक रूप से प्रति 10 मिलीलीटर माध्यम में 1 डीएनए का पता लगाना संभव है। विधि का सार इस प्रकार है: पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन का उपयोग करके, एक न्यूक्लिक एसिड की कई प्रतियां प्राप्त की जाती हैं (एक वायरस एक न्यूक्लिक एसिड है - डीएनए या आरएनए - एक प्रोटीन लिफाफे में), जो तब लेबल एंजाइम या आइसोटोप का उपयोग करके पता लगाया जाता है। , साथ ही साथ उनकी विशिष्ट संरचना द्वारा। पीसीआर एक महंगी निदान पद्धति है, इसलिए इसका उपयोग स्क्रीनिंग और नियमित रूप से नहीं किया जाता है।
रोग के चरण की परिभाषा
एड्स के विकास के केंद्र में निहित है, सबसे पहले, टी-हेल्पर लिम्फोसाइटों का विनाश, मोनोक्लोनल एंटीबॉडी के साथ चिह्नित - विभेदन क्लस्टर - जैसे सीडी 4। इस संबंध में, टी-हेल्पर्स के उप-जनसंख्या की निगरानी के बिना रोग की प्रगति का निदान और निगरानी असंभव है, जो कि लेजर सेल सॉर्टर का उपयोग करके सबसे आसानी से किया जाता है।
हल्के एचआईवी संक्रमण के साथटी-लिम्फोसाइटों की संख्या एक अत्यंत परिवर्तनशील संकेतक है। सामान्य तौर पर, कम से कम एक साल पहले एचआईवी से संक्रमित लोगों में सीडी 4 कोशिकाओं (पूर्ण और रिश्तेदार) की संख्या में कमी पाई जाती है। दूसरी ओर, संक्रमण के शुरुआती चरणों में, परिधीय रक्त और बढ़े हुए लिम्फ नोड्स दोनों में टी-सप्रेसर्स (CD8) की संख्या अक्सर तेजी से बढ़ जाती है।
गंभीर एड्स के साथअधिकांश रोगियों में टी-लिम्फोसाइट्स की कुल संख्या कम होती है (सीडी 4 लिम्फोसाइटों सहित रक्त के 1 μl में 1000 से कम - 1 μl में 22 से कम, जबकि सीडी 8 सामग्री का पूर्ण मूल्य सामान्य सीमा के भीतर रहता है)। तदनुसार, सीडी4/सीडी8 अनुपात तेजी से गिरता है। मानक प्रतिजनों और माइटोगेंस के लिए इन विट्रो टी-लिम्फोसाइट प्रतिक्रिया अपेक्षाकृत कम सीडी 4 गिनती के अनुसार सख्त रूप से कम हो जाती है।
एड्स के अंतिम चरणों के लिएसामान्य लिम्फोपेनिया, न्यूट्रोपेनिया, थ्रोम्बोसाइटोपेनिया (क्रमशः, लिम्फोसाइटों, न्यूट्रोफिल और प्लेटलेट्स की संख्या में कमी), एनीमिया द्वारा विशेषता। ये परिवर्तन वायरस द्वारा हेमटोपोइएटिक अंगों को नुकसान के साथ-साथ परिधि में सेलुलर उप-जनसंख्या के ऑटोइम्यून विनाश के कारण हेमटोपोइजिस के केंद्रीय निषेध का परिणाम हो सकते हैं। इसके अलावा, आईजीजी सामग्री में प्रमुख वृद्धि के साथ गामा ग्लोब्युलिन की मात्रा में मध्यम वृद्धि एड्स की विशेषता है। एड्स के गंभीर लक्षणों वाले मरीजों में अक्सर IgA का स्तर बढ़ जाता है। रोग के कुछ चरणों में, 1-माइक्रोग्लोबुलिन, एसिड-स्थिर इंटरफेरॉन, 1-थाइमोसिन जैसे एड्स के मार्करों का स्तर काफी बढ़ जाता है। ऐसा ही मैक्रोफेज के मेटाबोलाइट मुक्त नियोप्टेरिन के स्राव के साथ होता है। सूचीबद्ध परीक्षणों में से प्रत्येक के सापेक्ष महत्व का आकलन करना अभी तक संभव नहीं है, जिनकी संख्या लगातार बढ़ रही है। इसलिए, उन्हें इम्यूनोवायरोलॉजिकल और साइटोलॉजिकल प्रकृति दोनों के एचआईवी संक्रमण के मार्करों के साथ बातचीत में माना जाना चाहिए। एक नैदानिक रक्त परीक्षण के लिए, ल्यूकोपेनिया, लिम्फोपेनिया (क्रमशः, ल्यूकोसाइट्स और लिम्फोसाइटों की संख्या में कमी) विशेषता है।
चरण 1 - " ऊष्मायन चरण»
- एचआईवी के प्रति एंटीबॉडी का अभी तक पता नहीं चला है; इस स्तर पर एचआईवी संक्रमण का निदान महामारी विज्ञान के आंकड़ों के आधार पर किया जाता है और रोगी के रक्त सीरम में मानव इम्युनोडेफिशिएंसी वायरस, इसके एंटीजन, एचआईवी न्यूक्लिक एसिड का पता लगाने के द्वारा प्रयोगशाला की पुष्टि की जानी चाहिए;
चरण 2 - " प्राथमिक अभिव्यक्तियों का चरण»
- इस अवधि में, पहले से ही एंटीबॉडी का उत्पादन होता है :;
स्टेज 2ए - " स्पर्शोन्मुख»
- एचआईवी संक्रमण केवल एंटीबॉडी के उत्पादन से प्रकट होता है;
स्टेज 2बी - " माध्यमिक रोगों के बिना तीव्र एचआईवी संक्रमण»
- वाइड-प्लाज्मा लिम्फोसाइट्स - "मोनोन्यूक्लियर कोशिकाएं" रोगियों के रक्त में पाई जा सकती हैं और अक्सर सीडी 4-लिम्फोसाइटों के स्तर में एक क्षणिक कमी होती है (पहले 3 में 50-90% संक्रमित व्यक्तियों में तीव्र नैदानिक संक्रमण देखा जाता है) संक्रमण के महीनों बाद, तीव्र संक्रमण की अवधि की शुरुआत, एक नियम के रूप में, सेरोकोनवर्जन से आगे निकल जाती है, यानी एचआईवी के प्रति एंटीबॉडी की उपस्थिति);
स्टेज 2बी - " माध्यमिक रोगों के साथ तीव्र एचआईवी संक्रमण»
- सीडी 4 लिम्फोसाइटों के स्तर में कमी और परिणामस्वरूप इम्युनोडेफिशिएंसी की पृष्ठभूमि के खिलाफ, विभिन्न एटियलजि के माध्यमिक रोग दिखाई देते हैं (एनजाइना, बैक्टीरियल और न्यूमोसिस्टिस निमोनिया, कैंडिडिआसिस, दाद संक्रमण, आदि);
चरण 3 - " अव्यक्त»
- इम्युनोडेफिशिएंसी की प्रगति के जवाब में, सीडी 4 कोशिकाओं के अत्यधिक प्रजनन के रूप में प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया को संशोधित किया जाता है, इसके बाद सीडी 4 लिम्फोसाइटों के स्तर में धीरे-धीरे कमी आती है, औसतन प्रति वर्ष 0.05-0.07x109 / एल की दर से। ; एचआईवी के प्रति एंटीबॉडी रक्त में पाए जाते हैं;
चरण 4 - " माध्यमिक रोगों का चरण»
- सीडी 4 आबादी के लिम्फोसाइटों की कमी, वायरस के प्रति एंटीबॉडी की एकाग्रता में काफी कमी आई है (माध्यमिक रोगों की गंभीरता के आधार पर, चरण 4 ए, 4 बी, 4 बी प्रतिष्ठित हैं);
चरण 5 - " टर्मिनल चरण»
- आमतौर पर 0.05x109 / l से नीचे CD4 कोशिकाओं की संख्या में कमी; वायरस के प्रति एंटीबॉडी की सांद्रता काफी कम हो जाती है या एंटीबॉडी का पता नहीं लगाया जा सकता है।