Organizácia prijímania, označovania a registrácie biomateriálu. Pravidlá pre odber, doručovanie, preberanie, evidenciu a evidenciu biologického materiálu

Herectvo

MU 4.2.2039-05

INŠTRUKCIE

4.2. KONTROLNÉ METÓDY. BIOLOGICKÉ A MIKROBIOLOGICKÉ FAKTORY

Technika zberu a prepravy biomateriálov na mikrobiologické účely
laboratóriách

Dátum zavedenia 2006-07-01

2. ODPORÚČANÉ NA SCHVÁLENIE Komisiou pre štátnu sanitárnu a hygienickú reguláciu v rámci Federálnej služby pre dohľad nad ochranou práv spotrebiteľov a ľudským blahobytom dňa 6. októbra 2005 (protokol č. 3).

3. SCHVÁLENÉ A UVEDENÉ DO ČINNOSTI vedúcim Federálnej služby pre dohľad nad ochranou práv spotrebiteľov a blahobytom ľudí, hlavným štátnym sanitárom Ruskej federácie G. G. Onishčenkom 23.12.2005

5. PRVÝ KRÁT PREDSTAVENÉ.

1 oblasť použitia

1 oblasť použitia

1.1. Usmernenia stanovujú pravidlá pre zber a prepravu biologických materiálov do mikrobiologických laboratórií s cieľom zlepšiť kvalitu výsledkov laboratórnych výskumov a organizovať protiepidemické a preventívne opatrenia, ako aj prevenciu nozokomiálnych nákaz u zdravotníckeho personálu a pacientov.

1.2. Pokyny sú určené na použitie orgánmi a organizáciami Federálnej služby pre dohľad nad ochranou práv spotrebiteľov a ľudským blahobytom a môžu ich použiť aj zdravotnícke orgány a organizácie.

2. Všeobecné ustanovenia

2.1. Získavanie spoľahlivých údajov o identifikácii zdrojov nákazy je nevyhnutné pre včasnú a efektívnu organizáciu protiepidemických a preventívnych opatrení, pre hodnotenie úrovne nákazy v populácii pri epidemiologickom dozore.

2.2. Vyvinutá technika zberu a transportu biologických materiálov do mikrobiologických laboratórií zníži mieru preanalytických chýb a zlepší kvalitu laboratórnej práce s cieľom objektivizovať výsledky.

2.4. Usmernenia možno použiť pri vykonávaní epidemiologického dozoru nad antimikrobiálnou rezistenciou patogénov izolovaných a identifikovaných v laboratóriu, pri optimalizácii používania antimikrobiálnych liekov a opatrení v oblasti prevencie, kontroly a obmedzenia rezistencie na miestnej, regionálnej a národnej úrovni.

3. Všeobecné požiadavky na odber vzoriek biologického materiálu na mikrobiologický výskum

3.1. Na ochranu zdravotníckeho personálu a pacientov pred infekciou pri odbere vzoriek biomateriálov a ich dodávaní do laboratória je potrebné:

nekontaminujte vonkajší povrch misiek počas odberu a dodávky vzoriek;

neznečisťujte sprievodné dokumenty (pokyny);

minimalizovať priamy kontakt vzorky biomateriálu s rukami zdravotníckeho pracovníka, ktorý ju odoberie a doručí do laboratória;

na odber, skladovanie a dodávanie vzoriek používať predpísaným spôsobom sterilné jednorazové alebo na tieto účely schválené nádoby (nádoby);

prepravovať vzorky v nosičoch alebo boxoch s oddelenými hniezdami;

dodržiavať aseptické podmienky, aby sa zabránilo infekcii pacienta v procese vykonávania invazívnych opatrení;

odber vzoriek do sterilných jednorazových alebo sklenených nádob (nekontaminovaných biomateriálom, nepoškodených prasklinami, odštiepenými hranami a inými defektmi)

3.2. Vzorky biomateriálu sa musia odoberať takto:

pred začiatkom antibiotickej terapie, pri absencii takejto príležitosti - bezprostredne pred opätovným zavedením (príjmom) liekov;

v množstve (hmotnosť, objem) potrebnom na rozbor, pretože nedostatočné množstvo biomateriálu na výskum vedie k falošným výsledkom;

s minimálnou kontamináciou materiálu normálnou mikroflórou, pretože jeho prítomnosť vedie k chybnej interpretácii získaných výsledkov napríklad pri vyšetrovaní spúta, vzoriek z nosa, hltana (hltanu), genitálií atď.

3.3. Pri odbere vzorky dbajte na to, aby sa v laboratóriu pri otvorení nádoby s biomateriálom nevytvoril aerosól: vzorky krvi a iných telesných tekutín sa opatrne prenesú zo striekačky bez penenia do suchého a/alebo naplneného média ( antikoagulačná) nádoba.

3.4. V smere štúdie uveďte: priezvisko, meno, patronymiu pacienta; rok narodenia; pobočka, v ktorej sa nachádza; číslo anamnézy (ambulantná karta); diagnóza; materiál zasielaný na výskum a výskumné ciele; dátum a čas prevzatia materiálu (hodiny); antibakteriálne (imunitné) lieky, ak sa vzorka odoberie na pozadí antibiotika a / alebo imunoterapie; priezvisko, meno, priezvisko ošetrujúceho lekára (konzultanta) odosielajúceho vzorku na výskum. Pri odkazovaní na biomateriály získané pri pitve sa uvádza aj oddelenie, na ktorom pacient zomrel.

3.5. Pred odberom vzorky, najmä pri použití invazívnych metód, sa zisťuje pravdepodobnosť rizika pre pacienta a prínos, ako aj význam tohto konkrétneho typu biomateriálu pre účely objektivizácie klinickej diagnózy a hodnotenia prebiehajúcich alebo plánovaných liečebných opatrení. do úvahy.

4. Všeobecné požiadavky na dodávku vzoriek biomateriálu do mikrobiologického laboratória

4.1. Všetky odobraté vzorky sa ihneď po prijatí zasielajú do mikrobiologického laboratória, s výnimkou prípadov použitia nádob s transportnými médiami schválenými na tieto účely v Ruskej federácii v súlade so stanoveným postupom.

Toto je potrebné pre:

zachovanie životaschopnosti patogénov a možnosť izolácie mikroorganizmov, ktoré vyžadujú špeciálne kultivačné podmienky (Haemophylus atď.);

zabránenie premnoženiu rýchlo rastúcich a aktívnych mikroorganizmov;

udržiavanie pomeru počiatočných koncentrácií izolátov v prítomnosti mikrobiálnych asociácií vo vzorke;

skrátenie doby kontaktu vzorky s niektorými lokálne používanými antiseptikami, ktoré môžu mať antibakteriálnu aktivitu;

objektivizácia klinickej diagnózy infekčného a zápalového ochorenia a hodnotenie výsledkov terapie.

4.2. Je povolené použiť alternatívne metódy na zvýšenie času doručenia biomateriálu do laboratória.

Vzorky skladujte v chladničke pri teplote 2-8°C, okrem prípadov uvedených nižšie.

4.2.1. Keď je vzorka uložená v špecializovanej prepravnej nádobe (prepravný systém), schválenej na použitie v súlade so zavedeným postupom, čo je sterilná skúmavka na jedno použitie s agarom alebo tekutým transportným médiom a tampónovou sondou vloženou do zátky a sterilne zabalenou spolu s rúrkou. V takýchto nádobách sa vzorky skladujú pri izbovej teplote (18-20 °C). Transportné médiá, špeciálne husté s aktívnym uhlím a bez neho, umožňujú zachovať životaschopnosť mikroorganizmov vyžadujúcich špeciálne kultivačné podmienky počas 48-72 hodín.

Pre vzorky na anaeróby a na fekálnu flóru sa používajú špeciálne nádoby s transportným médiom, skúmavky s médiami na izoláciu Campylobacter a Helicobacter, schválené na použitie predpísaným spôsobom. Takéto prostredie vytvára pre mikroorganizmy anabiotickú atmosféru, ktorá pomáha znižovať ich metabolizmus, brzdí rast, bráni ich vysychaniu a hromadeniu odpadových látok.

Každá vzorka zhromaždená v kvapalnom médiu sa dôkladne premieša s médiom.

4.2.2. Keď sa krv kultivuje v bujóne, potom sa po prijatí vzorka uchováva v termostate pri teplote 35-37 °C.

Ak sa vzorky odoberajú do špeciálnych nádob na následné vyšetrenie s dvojfázovým médiom, mali by sa skladovať pri izbovej teplote (18-20 °C).

4.2.3. Keď v prípade možnej prítomnosti teplotne závislých mikroorganizmov (Neisseria sp.), vzorky sa nechajú pri izbovej teplote (18-20°C).

4.3. Na prepravu vzoriek vyšetrovaných na prítomnosť aeróbov a fakultatívnych anaeróbov použite:

jednorazové sterilné suché skúmavky so zabudovanou tampónovou sondou (hľuzy) alebo nádoby s prepravným médiom schváleným na použitie na tieto účely v Ruskej federácii v súlade so stanoveným postupom; je povolené používať sterilné sklenené skúmavky uzavreté zátkou prepúšťajúcou plyn so zabudovanou tampónovou sondou, pripravené v laboratóriu;

jednorazové sterilné nádoby so skrutkovacím uzáverom (sklo so zátkou prepúšťajúcou plyn sú povolené) - na odber vzoriek moču, spúta, výkalov, bronchoalveolárnej laváže, bioptického (kúsky tkaniva) materiálu;

sterilné jednorazové so skrutkovacím uzáverom alebo sklenenými skúmavkami - na odber sterilných tekutín, bronchoalveolárny výplach oddelený od drénov alebo zoškrabov;

sterilné Petriho misky - na odber vzoriek vlasov alebo na prepravu škrabancov s označením na dne misky;

špeciálne sterilné nosohltanové a urogenitálne sondy-stery s hliníkovou osou (priemer osi - 0,9 mm) a malým bavlneným alebo viskózovým tampónom na špičke (priemer tampónu - 2,5 mm), upevnené v zátke, ktorá utesňuje sterilnú jednorazovú sklenenú tubu - napr. vzorky z nosohltanu na B. pertusis a z močovej rúry u mužov.

4.4. Na prepravu vzoriek skúmaných na prítomnosť anaeróbov sa používajú nádoby so špeciálnymi transportnými médiami a skúmavky s tioglykolovým médiom; skúmavky s médiom na izoláciu Campylobacter a Helicobacter, schválené na použitie na tieto účely v Ruskej federácii v súlade so stanoveným postupom. Vzorka zhromaždená v tekutom médiu sa s ňou dôkladne premieša. Na získanie vzoriek sa odporúčajú nasledujúce techniky:

výtok drénov používaných na aktívne odsávanie dutín sa odsaje sterilnou striekačkou s hustým piestom v objeme 2-4 ml; na naplnenú injekčnú striekačku sa nasadí sterilná ihla pokrytá sterilným vatovým tampónom, z injekčnej striekačky sa odstráni prebytočný vzduch; vatový tampón sa vloží do dezinfekčného roztoku; koniec ihly sa vstrekne do sterilnej gumenej zátky a v tejto forme sa injekčná striekačka s materiálom doručí do laboratória;

obsah ložísk infekcie a dutín získaných ich prepichnutím sa odoberá v objeme 2-4 ml pomocou 2-, 5-, 10-ml injekčných striekačiek s hustým piestom; prebytočný vzduch sa odstráni zo striekačky prekrytím ihly sterilným bavlneným tampónom, ktorý sa potom naleje do dezinfekčného roztoku; ihla sa dezinfikuje utretím tampónom navlhčeným v 70% etylalkohole; na utesnenie sa koniec ihly vstrekne do sterilnej gumenej zátky a v tejto forme sa injekčná striekačka s materiálom doručí do laboratória.

Pri odbere veľkého objemu materiálu (3 ml alebo viac) môžu anaeróbne baktérie zostať životaschopné 24 hodín pri izbovej teplote (18-20 °C).

Ak je na oddelenie len niekoľko kvapiek, ihneď po prijatí sa prenesie z injekčnej striekačky do malej nádobky alebo do skúmavky s transportným médiom (nádoby s transportným médiom sa získajú v laboratóriu deň vopred).

Kúsky tkaniva (bioptický materiál), ak je podozrenie na anaeróbnu infekciu, sa odoberajú do sterilných jednorazových nádob so skrutkovacím uzáverom (povolené - do sklenených nádob so zabrúseným viečkom) a ihneď sa doručia do laboratória.

4.5. Na prepravu vzoriek vyšetrených na prítomnosť vírusov sa na uchovávanie vírusov používajú špeciálne nádoby s tekutým médiom.

5. Vzorky rôznych druhov biomateriálu a prostredia pacienta

stôl 1

Misky používané na dodávanie vzoriek do laboratória

Zdroj a typ klinického materiálu	Položky používané na doručenie vzorky
	Špeciálne prepravné kontajnery s médiom, s neutralizátormi antibiotík a činidlami, ktoré ničia krvné krvinky, alebo bez nich, schválené na použitie na tieto účely v Ruskej federácii v súlade so stanoveným postupom; dvojfázové médium v ​​liekovkách
centrálny nervový systém
Likér	Sterilné jednorazové skúmavky so skrutkovacím uzáverom; sterilné sklenené skúmavky s celulózovými alebo bavlnenými zátkami
Materiál na mozgové abscesy a bioptický materiál na zápalové procesy v centrálnom nervovom systéme	Injekčná striekačka s ihlou vloženou do sterilnej gumovej zátky; skúmavka s tioglykolovým médiom, uzavretá sterilnou gumenou zátkou; transportné nádoby s médiom na konzerváciu anaeróbov
Dolné dýchacie cesty
Bioptický materiál pľúc a priedušnice; spútum prirodzene vykašliavanie a vyvolané; škrabanie z priedušiek	Sterilná jednorazová nádoba so skrutkovacím uzáverom (na zber spúta); laboratórne pripravená sterilná sklenená nádoba
Tracheálny aspirát, bronchoalveolárna laváž, bronchiálna laváž	Sterilná jednorazová nádoba na zber spúta so skrutkovacím uzáverom; tesne priliehajúca sterilná sklenená trubica
Transtracheálny a pľúcny aspirát	Špeciálne prepravné nádoby s médiom pre anaeróby; injekčná striekačka s ihlou vsunutou do sterilnej gumenej zátky; nádoba s tioglykolovým médiom; sterilná jednorazová plastová nádoba so skrutkovacím uzáverom; tesne priliehajúca trubica
Horné dýchacie cesty
Výtery z nosa, hltana, nosohltanu, vonkajšieho ucha	Sterilný jednorazový tampón vložený do sterilnej suchej skúmavky (skúmavky) alebo prepravnej nádoby s vhodným médiom; prepravná nádoba na vírusy; sterilné sklo zostavené v laboratóriu
Výplach nosa, aspirát z nosa	Sterilná jednorazová nádoba so skrutkovacím uzáverom; nádoba na transport vírusu
Tekutina z tympanocentézy, sínusový aspirát, odsávanie ihlou	Striekačka s ihlou, dezinfikovaná po manipulácii s tampónom navlhčeným 70% etylalkoholom a zasunutá do sterilnej gumovej zátky; materiál zo striekačky môžete preniesť do sterilných jednorazových alebo sklenených skúmaviek alebo špeciálnej nádoby s médiom na prepravu anaeróbov
Tkanivo získané počas operácie nosa, hltana, ucha	Sterilná jednorazová nádoba so skrutkovacím uzáverom; skúmavka s tioglykolom alebo iným transportným médiom, tesne uzavretá sterilnou gumenou zátkou; tesne uzavretá sterilná jednorazová plastová alebo sklenená trubica
Škrabance zo spojovky kútika oka	Tampóny na sterilné podložné sklíčka bez tuku; materiál, ktorý sa odoberie do špeciálneho prepravného kontajnera s médiom alebo sa naočkuje do živného média
Vnútroočná tekutina	Tampóny na sterilné podložné sklíčka bez tuku; materiál, ktorý sa odoberie do špeciálneho prepravného kontajnera s médiom pre anaeróby alebo injekčná striekačka s ihlou vopred dezinfikovaná 70% etylalkoholom a vložená do sterilnej gumovej zátky
Odnímateľné, odobraté sterilnou sklenenou tyčinkou alebo sterilným vatovým tampónom zo sliznice dolného prechodného záhybu, z okraja viečok, s vredom - z rohovky (po anestézii), s uhlovou konjunktivitídou - z rohov očné viečka	Sterilná jednorazová alebo sklenená liekovka s cukrovým bujónom, v ktorej je namontovaná tampónová sonda, alebo sterilná sklenená tyčinka používaná na odber vzoriek; špeciálna prepravná nádoba s médiom na vírusy
Tajomstvo zo slzného vaku	Jednorazový sterilný tampón vložený do sterilnej suchej skúmavky (skúmavky) alebo sklenenej skúmavky
Genitourinárny systém
Priemerná časť voľne tečúceho moču; z ileálneho kanála používaného na vytvorenie umelého močového mechúra; z katétra u pacientov s resuscitáciou. Sčervenanie z močového mechúra. Vzorka získaná bilaterálnou uretrálnou katetrizáciou	Sterilná jednorazová nádoba na odber moču so skrutkovacím uzáverom alebo sterilná jednorazová skúmavka s uzáverom; alebo špeciálna jednorazová skúmavka na odber moču. Pri použití sterilnej sklenenej skúmavky s celulózovou alebo bavlnenou zátkou dbajte na to, aby ste zátku nenamočili materiálom (objem vzorky 10-20 ml)
Vzorka suprapubickej aspirácie	Sterilná injekčná striekačka bez ihly, uzavretá sterilnou gumenou zátkou; sterilná injekčná striekačka s ihlou vopred dezinfikovaná 70% etylalkoholom a vložená do gumovej zátky
Materiál zo ženských pohlavných orgánov
Tekutiny: amniotické, vajcovody, bartolínové	Špeciálny prepravný kontajner s médiom pre anaeróby; injekčná striekačka bez ihly, uzavretá sterilnou gumenou zátkou; injekčná striekačka s ihlou ošetrenou 70% alkoholom a zasunutá do sterilnej gumenej zátky (objem vzorky 1-2 ml)
Vzorky z cervikálneho kanála, močovej trubice, vagíny	Jednorazový sterilný tampón vložený do sterilnej suchej skúmavky (skúmavky) alebo prepravnej nádoby so špeciálnym médiom; tampónová sonda namontovaná v celulózovej alebo bavlnenej zátkou sterilnej sklenenej skúmavky. Sklíčko s pripraveným náterom na štúdium bakteriálnych pohlavne prenosných infekcií a vírusov. Skúmavka s aktívnym uhlíkovým transportným médiom na uchovanie gonokokov na 48 hodín alebo viac
Vzorky materiálu z endometria	Sterilný jednorazový kontajner so skrutkovacím uzáverom alebo skúmavkou alebo prepravný kontajner s médiom pre anaeróby; sterilné sklo
Materiál vonkajších genitálií	Sterilná injekčná striekačka bez ihly, uzavretá sterilnou gumenou zátkou; podložné sklíčko s náterom, prekryté krycím sklíčkom na stanovenie T. pallidum; tampónová sonda namontovaná v sterilnej jednorazovej (trubici) alebo sklenenej trubici; špeciálna transportná skúmavka s aktívnym uhlíkovým médiom na konzerváciu gonokokov a transportné nádoby na vírusy a chlamýdie; nátery na podložné sklíčka na detekciu iných patogénov sexuálne prenosných infekcií
Materiál mužských pohlavných orgánov
Výtery z močovej trubice	Tampónová sonda na hliníkovej osi (uretrálna tampónová sonda) namontovaná v sterilných jednorazových (tubesových) alebo sklenených skúmavkách; špeciálna transportná skúmavka s médiom s aktívnym uhlím na uchovanie gonokokov a transportných nádob pre vírusy a chlamýdie; nátery na podložné sklíčka na detekciu iných patogénov sexuálne prenosných infekcií
Ejakulát, spermie	Sterilná jednorazová nádoba so skrutkovacím uzáverom; sterilná skúmavka alebo skúmavka, jednorazová alebo sklenená
Materiál epididymis s epididymitídou	Špeciálny prepravný kontajner s anaeróbnym médiom alebo kontajner s tioglykolovým médiom; sterilný jednorazový obal so skrutkovacím uzáverom alebo sterilná sklenená trubica s celulózovou alebo bavlnenou zátkou
Lézia penisu	Injekčná striekačka bez ihly, uzavretá sterilnou gumenou zátkou; sklíčko s náterom na T. pallidum, prekryté krycím sklíčkom; tampónová sonda namontovaná v sterilnej jednorazovej (trubici) alebo sklenenej trubici; prepravné kontajnery na vírusy a chlamýdie; tampóny na zistenie iných pohlavne prenosných infekcií
Materiál pre podozrenie na kvapavku
Stery z konečníka, krčka maternice, močovej trubice, vagíny	Tampónová sonda namontovaná v sterilnej jednorazovej (skúmačke) alebo sklenenej skúmavke; špeciálna transportná skúmavka s médiom s aktívnym uhlím na uchovanie gonokokov po dobu 48 hodín a viac
Gastrointestinálny trakt
Ústna dutina	Tampónová sonda namontovaná v sterilnej jednorazovej (skúmačke) alebo sklenenej skúmavke; sterilná jednorazová alebo sklenená nádoba na zachytávanie výplachov z ústnej dutiny
Výplach žalúdka alebo výplachová tekutina; duodenálny aspirát; vzorka získaná sigmoidoskopiou; materiál na rektálnu biopsiu	Sterilná jednorazová nádoba so skrutkovacím uzáverom; špeciálna sterilná nádoba na zber spúta; sterilná sklenená nádoba; aspirát - v sterilnej injekčnej striekačke s ihlou, predtým dezinfikovanej a vloženej do sterilnej gumovej zátky
Rektálny náter	Jednorazový sterilný tampón vložený do sterilnej suchej skúmavky (skúmavky); alebo sterilná skúmavka so špeciálnym transportným médiom; tampón vyrobený z nehrdzavejúceho materiálu umiestnený v celulózovej alebo bavlnenej zátkou sterilnej sklenenej skúmavky
Feces pre črevné infekcie ("disgroup"), Helicobacter, Campylobacter	Sterilná skúmavka s tampónom vo fyziologickom roztoku s glycerínom; transportný kontajner s médiom pre anaeróby vo vzorkách stolice, so špeciálnym médiom s aktívnym uhlím a bez neho na izoláciu Campylobacter sp. a Helicobacter sp.; tampónová sonda v suchej sterilnej skúmavke na jedno použitie (skúmavka); sterilná sklenená trubica, upevnená tampónovou sondou na kovovom drôte z titánu, ocele, hliníka. Použitie tampónu s drevenou osou nie je povolené
Výkaly na prítomnosť dysbakteriózy podľa rodového a druhového zloženia mikróbov ("na flóre")	Špeciálny transportný kontajner s anaeróbnymi médiami vo vzorkách stolice, so špeciálnymi médiami s aktívnym uhlím a bez neho na izoláciu Campylobacter sp. a Helicobacter sp., schválené na použitie na tieto účely v Ruskej federácii v súlade so stanoveným postupom; tampónová sonda v skúmavke s fyziologickým roztokom s glycerínom v sterilnej jednorazovej alebo sklenenej skúmavke; špeciálna jednorazová sterilná nádoba so skrutkovacím uzáverom; laboratórne pripevnená sklenená nádoba
Výkaly na prítomnosť dysbiózy s kvantitatívnym popisom izolovaných a identifikovaných mikróbov ("pre dysbiózu")	Špeciálne sterilné jednorazové nádoby so skrutkovacím uzáverom a špachtľou na odber materiálu a odber vzorky na očkovanie, so štandardnou hmotnosťou; laboratórne pripevnená špeciálna sterilná sklenená nádoba
Koža a podkožné tkanivo
Vredy, uzliny (uzlinové zhrubnutia), plytké, povrchové rany (hnisavé; popáleniny); hlboké rany alebo abscesy, kosti	Špeciálne sterilné jednorazové nádoby so skrutkovacím uzáverom; sterilné 5 ml jednorazové alebo sklenené skúmavky so zátkou; nádoby so špeciálnymi médiami pre anaeróby
Exsudát subkutánnych a mäkkých tkanív; aspirát mäkkých tkanív	Sterilná injekčná striekačka bez ihly, uzavretá sterilnou gumenou zátkou; injekčná striekačka s ihlou vopred dezinfikovaná 70% etylalkoholom a vložená do gumovej zátky
Sterilné telesné tekutiny, okrem krvi, cerebrospinálnej tekutiny, moču (pozri vyššie)
Kvapaliny
Pleurálna, peritoneálna, ascitická, kĺbová, synoviálna	Sterilná jednorazová nádoba so skrutkovacím uzáverom; uzavretá injekčná striekačka bez ihly alebo s ihlou vopred dezinfikovaná 70 % etylalkoholom a vložená do sterilnej gumenej zátky
Biomateriál na diagnostiku PCR
Krv; iné telesné tekutiny	Sterilné jednorazové skúmavky s 1,5 ml zátkou s antikoagulantom. Skúmavka sa prevráti 3-5 krát, aby sa vzorka zmiešala s antikoagulantom. Dodanie do laboratória - v stojane vyrobenom z materiálov určených na sterilizáciu v autokláve
Bioptický materiál; škrabance; spútum a iné typy biomateriálov	Sterilné suché jednorazové skúmavky Eppendorf a iné podobné. Dodanie do laboratória - v špeciálnom stojane vyrobenom z materiálov určených na sterilizáciu v autokláve
Ukážky prostredia pacienta
Vzduch	Sterilné jednorazové Petriho misky (= 90 mm) alebo sklenené (= 100 mm) s pevným kultivačným médiom. Dodanie do laboratória v špeciálnych prepravných kontajneroch
Umýva sa z predmetov prostredia obklopujúceho pacienta
Testy sterility
Krv a zložky krvi z odberového oddelenia	Nádoby s pripraveným materiálom sú dodávané do laboratória v špeciálnych prepravných kontajneroch
Umývanie z lekárskych nástrojov, hadíc zariadení používaných na oddeleniach intenzívnej starostlivosti a anestéziológie, ako aj na operačných sálach; ruky zdravotníckeho personálu; bielizeň	Sterilné tampóny umiestnené v priehľadných skúmavkách s čírym, bezfarebným tekutým médiom. Vzorky sa dodávajú do laboratória v stojanoch z materiálov, ktoré sa majú sterilizovať v autokláve
Chirurgický materiál: tampóny, obrúsky, turundy, vatové tampóny na drevenej osi	Sterilné priehľadné skúmavky so zátkami s priehľadným bezfarebným tekutým médiom s 3-5 sterilnými sklenenými guľôčkami. Vzorky sa dodávajú do laboratória v stojanoch z materiálov, ktoré sa majú sterilizovať v autokláve
Materiál na šitie: katgut uložený na operačnej sále v alkoholovom roztoku jódu	Sterilná skúmavka (fľaša so zátkou) s neutralizačným roztokom (hyposulfit sodný)
Hodvábne, nylonové, monomérne syntetické nite uložené na operačnej sále v alkoholovom roztoku	Sterilná skúmavka so zátkou so sterilnou destilovanou vodou ako preplachovacou kvapalinou. Vzorky stehov sa dodávajú do laboratória v stojanoch na sterilizáciu v autokláve
Umýva sa z operačného poľa pacienta	Pred spracovaním poľa: do priehľadných skúmaviek naplnených priehľadným tekutým kultivačným médiom. Po spracovaní poľa: sterilná skúmavka (fľaša so zátkou) s neutralizačným roztokom (hyposulfit sodný). Dodávka materiálu do laboratória sa uskutočňuje v stojanoch na sterilizáciu v autokláve
Vzorky na stanovenie imunologických faktorov protiinfekčného obranného systému (systém protiinfekčnej odolnosti organizmu - CAIR)
Krv a iné telesné tekutiny na určenie humorálnych obranných faktorov	Jednorazové injekčné striekačky-skúmavky (vakutainery); sterilné jednorazové skúmavky so skrutkovacím uzáverom; sterilné sklenené skúmavky so sterilnými gumenými, celulózovými alebo bavlnenými zátkami. Vzorky sa dodávajú do laboratória v špeciálnom stojane vyrobenom z materiálov, ktoré sa majú sterilizovať v autokláve. Ak používate sklenené skúmavky so zátkami z bavlnenej gázy, počas prepravy ich nenamáčajte
Krv a iné telesné tekutiny na stanovenie faktorov bunkovej obrany	Sterilné jednorazové skúmavky so skrutkovacím uzáverom; sterilné sklenené skúmavky, tesne uzavreté sterilnou gumenou zátkou. Jednorazové skúmavky s antikoagulantom, podliehajúce centrifugácii. Dodanie do laboratória sa uskutočňuje v špeciálnom stojane vyrobenom z materiálov, ktoré sa majú sterilizovať v autokláve
Tampóny na detekciu bakteriálnych a vírusových antigénov (napríklad pri podozrení na pohlavne prenosnú infekciu)	Sterilné odmastené podložné sklo; pri T. pallidum by sa sklíčko malo prekryť krycím sklíčkom. Dodanie do laboratória sa vykonáva v jednorazovom kontajneri alebo sterilných jednorazových alebo sklenených Petriho miskách v špeciálnych kontajneroch

Poznámka. Vzorky hnisu, tekutiny a tkaniva by mali byť dodané do laboratória v špeciálnych sterilných nádobách na jedno použitie so skrutkovacím uzáverom. Výterové sondy - sušte v sterilných jednorazových skúmavkách (hľuzách) alebo v nádobách s transportným médiom, ak nie je možné materiál ihneď po odbere doručiť do laboratória. Na tieto účely možno použiť transportné médiá vr. v jednorazových skúmavkách zabalených spolu so sterilnou tampónovou sondou schválenou na použitie v Ruskej federácii v súlade so zavedeným postupom. Tampónové sondy sa vyrábajú (pripravujú) z množstva materiálov: pre samotný tampón (bavlna-gáza, bavlna, viskóza, dakron), pre os tampónovej sondy (drevo, plast, nerez - titán, oceľ, hliník) a husté agarové médiá: s aktívnym uhlím a bez neho pre anaeróby.


Mnohé klinicky významné anaeróby, napríklad Clostridium perfringens, Bacteroides fragilis, sú celkom tolerantné voči prítomnosti kyslíka a sú dobre zachované vo veľkom množstve hnisu, vzoriek tekutín a telesných tkanív, ako aj na tampónovej sonde v špeciálnej transportnej resp. tioglykolové médiá.

Citlivejšie na kyslík (napríklad fuzobaktérie) sú tiež dobre zachované vo vzorke biologického materiálu a ak je materiál zasiaty do 2-3 hodín od okamihu jeho odberu, nie je potrebné venovať osobitnú pozornosť spôsobu doručenia. Anaeróby vyžadujúce špeciálne kultivačné podmienky nezostanú životaschopné na tampónovej sonde v prepravnej nádobe s médiom, ktoré nie je určené na podávanie anaeróbov, s výnimkou nádob so špeciálnymi transportnými médiami alebo tioglykolovou.

Zároveň tieto mikroorganizmy rastú o 5-7 dní dlhšie, ako je čas, počas ktorého väčšina praktických laboratórií inkubuje misky naočkované materiálom na izoláciu a identifikáciu aeróbov a fakultatívne anaeróbov. Z tohto dôvodu sa v bežných praktických laboratóriách javí ako nevhodné rutinne testovať prítomnosť anaeróbov pomocou špeciálnych transportných anaeróbnych nádob s médiami a môžete sa obmedziť na skúmavky s tioglykolovým médiom.

Na odber a prepravu vzoriek sa používajú médiá, nádoby, nástroje a materiály povolené na použitie v Ruskej federácii v súlade so stanoveným postupom.

6. Pravidlá a techniky získavania vzoriek rôznych druhov biologického materiálu na mikrobiologický výskum

Každú vzorku, ktorá si vyžaduje použitie invazívnych metód, sa odporúča odobrať od pacienta lekárom (s výnimkou vzorky krvi, ktorú môže odobrať procedurálna sestra).

Ak je potrebné odobrať materiál tampónovou sondou na otvorenom operačnom povrchu alebo v prípade iného invazívneho zásahu, je prípustné použiť hotové tampónové sondy s medzinárodnou úrovňou bezpečnosti nie nižšou ako trieda IIA, schválené na použitie pre tieto účely v Ruskej federácii v súlade so stanoveným postupom.

6.1. Vzorky krvi

Vzorky na zistenie prítomnosti biologických agensov v krvi (bakterémia, virémia atď.) sa získavajú venepunkciou periférnych žíl (zvyčajne žíl lakťa), tepien alebo z päty u novorodencov.

Odber vzorky zo zavedeného intravenózneho alebo intraarteriálneho katétra je povolený len v prípadoch podozrenia na prítomnosť infekcie spojenej s katétrom alebo nemožnosti získať ju venepunkciou.

6.1.1. Pri akútnej sepse, meningitíde, osteomyelitíde, artritíde, akútnej neliečenej bakteriálnej pneumónii a pyelonefritíde sa pred začatím antibiotickej liečby odoberú 2 vzorky z dvoch ciev alebo dvoch častí cievy.

6.1.2. Ak máte podozrenie na prítomnosť endokarditídy a pomalej sepsy s malou (10-30 CFU / ml) koncentráciou patogénu v obehu:

v prípade akútneho procesu sa odoberú 2 vzorky z dvoch častí ciev (rôzne cievy) počas prvých 1-2 hodín zvýšenia telesnej teploty (nie na vrchole teploty!) a pred začiatkom terapia;

v prípade subakútneho alebo pomalého priebehu sa prvý deň odoberajú 3 vzorky s intervalom 15 a viac minút. Ak sú všetky vzorky negatívne, na druhý deň po zasiatí sa odoberú ďalšie 3;

u pacientov s endokarditídou, ktorí dostávajú antibiotiká, sa každý z troch dní odoberú 2 samostatné vzorky s pozitívnou klinickou dynamikou liečby;

na potvrdenie klinickej diagnózy „infekčná endokarditída“, ak nie je možné získať potrebný počet vzoriek krvi od pacienta na mikrobiologický rozbor alebo ak sú kultivačné výsledky negatívne, krvné vzorky sa posielajú na štúdium imunologických faktorov obranyschopnosti organizmu systém (systém protiinfekčnej odolnosti - CAIR); dodávka do laboratória sa vykonáva v sterilných sklenených alebo jednorazových skúmavkách s viečkom (zátkou) získaných deň vopred v laboratóriu;

ak pacient trpí vrodenou srdcovou chorobou (ICHS), treba mať na pamäti, že ICHS je prodrómom infekčnej endokarditídy a stanovenie imunologických faktorov CAIR je súčasťou vyšetrovacieho algoritmu takéhoto pacienta.

6.1.3. U pacientov, ktorých komplex terapie zahŕňa antibiotiká, sa odoberie 6 vzoriek do 48 hodín; vzorky sa musia odobrať bezprostredne pred zavedením (príjmom) ďalšej dávky lieku.

6.1.4. Ak má pacient horúčku neznámeho pôvodu, najskôr sa odoberú 2 vzorky z rôznych krvných ciev (dve časti cievy), potom po 24-36 hodinách sa odoberú ďalšie 2 vzorky na pozadí zvýšenia telesnej teploty ( nie na vrchole teploty!).

6.1.5. Technika na získanie vzorky krvi. Vzorky krvi na očkovanie odoberajú 2 osoby pri lôžku pacienta alebo v ošetrovni.

Ak chcete získať vzorku, postupujte takto:

dezinfikujte oblasť pokožky nad cievou vybranou na prepichnutie: ošetrite pokožku tampónom navlhčeným 70% etylalkoholom, potom ďalším tampónom navlhčeným 1-2% roztokom jódu alebo iným dezinfekčným prostriedkom schváleným na tieto účely účely predpísaným spôsobom, krúživým pohybom, začínajúc od stredu, do 30 s;

počkajte, kým ošetrovaná oblasť nezaschne. Po spracovaní kože pred vložením ihly nie je dovolené prehmatať cievu;

pri práci s injekčnými liekovkami s dvojitým médiom: odoberte 10 ml krvi dospelým sterilnou striekačkou a 5 ml deťom; otvorte fľašu nad plameňom liehoviny; pridajte krv do injekčnej liekovky zo striekačky po odstránení ihly; spáliť hrdlo a korok fľaše v plameni liehovej lampy, uzavrieť fľašu korkom; opatrne, aby sa nenamočil korok fľaše, krúživým pohybom premiešajte jej obsah.

Pri použití hotových fľaštičiek s médiom a činidlami, ktoré neutralizujú antibiotiká a ničia krvné telieska, alebo bez nich, schválených na tieto účely v Ruskej federácii v súlade so zavedeným postupom, dospelí dostanú 10-30 ml krvi, deti - 0,5- 3,0 ml.

kde:

súbežne s dezinfekciou oblasti pokožky na prepichnutie sú uzávery fliaš ošetrené 70% etylalkoholom (na spracovanie uzáverov pri práci s fľašami nie je povolené používať roztok jódu, napríklad Bactec, Vital a iné schválené schválené na použitie na tieto účely v Ruskej federácii v stanovenom poradí);

krv získaná od dospelých v rovnakých objemoch, prepichnutá korkom nádoby, sa zavedie do „aeróbnych“ a „anaeróbnych“ nádob; krv prijatá od detí - do špeciálnej "detskej" fľaše, prepichnutím korku nádoby.

6.1.6. Po venepunkcii a naočkovaní krvi do nádobky s médiom, aby sa predišlo možnému podráždeniu (popáleniu), sa zvyšky jódu z pokožky pacienta odstránia tampónom navlhčeným v 70% etylalkohole.

6.2. Vzorky na infekčné a zápalové procesy centrálneho nervového systému (CNS)

6.2.1. Likér. 4,0-5,5 ml cerebrospinálnej tekutiny získanej lumbálnou punkciou zo subarachnoidálneho priestoru medzi stavcami L3-L4, L4-L5 alebo L5-S1, ako aj punkciou laterálnych komôr mozgu, sa posiela na výskum do mikrobiologického laboratória.

Odber vzoriek sa vykonáva pomalým plnením troch skúmaviek tromi dávkami materiálu na výskum v laboratóriách. Používajte sterilné skúmavky s tesne priliehajúcimi viečkami (jednorazové so zátkou alebo sklo so sterilnou gumenou zátkou).

Z troch skúmaviek s materiálom získaným lumbálnou punkciou posielajte vždy skúmavku s najviac zakaleným obsahom, spravidla ide o druhú skúmavku v procese odberu.

Po prijatí materiálu punkciou postranných komôr mozgu sa čerstvo odobratý mozgovomiechový mok z injekčnej striekačky po odstránení ihly zavedie do sterilnej skúmavky nad plameňom alkoholovej lampy, hrdlom skúmavky a zátka sa vypáli v plameni liehovej lampy (pri práci so sklenenou skúmavkou uzavretou bavlnenou gázou alebo gumovou zátkou) a skúmavka sa uzavrie zátkou.

Vo všetkých prípadoch s podozrením na meningitídu sa okrem mozgovomiechového moku odoberá aj materiál z údajných ložísk infekcie: výtery z nosohltana, stredného ucha, vzorky krvi a spolu s likvorom sa posielajú do laboratória. Dobrým spôsobom, ako uchovať meningokoka na dlhú dobu (až 48 hodín), je odobrať materiál tampónom s tampónom a vložiť ho do skúmavky s transportným médiom s aktívnym uhlím alebo bez neho.

Likér na mikrobiologický výskum sa okamžite posiela do laboratória na vyhrievacej podložke, aby sa udržala teplota 35-37 °C. Pri absencii takejto príležitosti sa mozgovomiechový mok odoberie do nádoby s transportným médiom a nechá sa v chladničke (pri teplote 4-8 ° C) až do rána a potom sa odovzdá do laboratória.

Ak je potrebné vykonať virologické štúdie, vzorky CSF sa umiestnia do chladničky pri teplote 2 až 8 ° C alebo sa zmrazia alebo sa skladujú pri izbovej teplote pomocou nádob so špeciálnym tekutým médiom.

6.2.2. Materiál z mozgových abscesov. Vzhľadom na to, že v 90 % prípadov rastú vo vzorke anaeróby, materiál sa odsaje z ohniska a odošle sa do laboratória v nádobe s anaeróbnym médiom schváleným na tieto účely v Ruskej federácii v súlade so stanoveným postupom, príp. v injekčnej striekačke, ktorou bola vzorka odoberaná, po odstránení ihly a uzavretí injekčnej striekačky sterilnou gumenou zátkou.

Vzorka je doručená ihneď po prijatí.

6.2.3. Bioptický materiál. Vzorky sa odoberú počas operácie, umiestnia sa do nádoby s anaeróbnym médiom alebo do sterilnej skúmavky s tioglykolovým médiom, uzavretej sterilnou gumenou zátkou.

Materiál sa okamžite odošle do laboratória.

6.3. Vzorky na infekčné a zápalové očné procesy

Väčšinu vzoriek odobratých z oka odoberá oftalmológ. Tieto vzorky by sa mali naočkovať na živné médiá pri lôžku pacienta alebo v ošetrovni, prípadne v ambulancii lekára počas príjmu a naočkovaný materiál by sa mal preniesť do laboratória na kultiváciu, izoláciu, identifikáciu a stanovenie citlivosti patogénov na antibiotiká. . Vzorky odobraté invazívnymi a inými agresívnymi metódami sa odoberajú paralelne s výterom zo spojovky, ktorý v takýchto prípadoch slúži ako kontrola.

V predvečer, na 6-8 hodín (v noci), sú všetky lieky a procedúry zrušené.

V prípade špecifických klinických prejavov infekčného a zápalového procesu alebo podozrení lekára je nevyhnutné, aby sa pred anestéziou pripravili stery na stanovenie chlamýdií a vírusov a lieky sa poslali do laboratória. Pre zachovanie chlamýdií a vírusov sa materiál zbiera do nádob s transportnými médiami.

Výtok sa odoberá sterilnou sklenenou tyčinkou alebo sterilnou tampónovou sondou: dvoma alebo tromi pohybmi sa vykonáva pozdĺž sliznice dolného prechodného záhybu od okraja očných viečok; s vredom - z rohovky (po anestézii), s "uhlovou konjunktivitídou" - z rohov očných viečok.

Tajomstvo zo slzného vaku sa odoberá sterilným tampónom po jemnej masáži.

Materiál odobratý tyčinkou a/alebo tampónovou sondou sa vloží do nádoby s transportným médiom alebo do sterilnej sklenenej skúmavky s tekutým médiom a doručí sa do laboratória, pričom treba dbať na to, aby sa nenamočila celulózová alebo vatová gázová zátka. rúrka.

Pri použití tampónových sond je vhodnejšie použiť jednorazové nádoby s transportným médiom alebo sterilné sklenené skúmavky so zátkami z bavlnenej gázy naplnené sterilným médiom.

Najsprávnejšie informácie o pôvodcovi zápalového procesu možno získať z mikrobiologického rozboru zoškrabov.

6.3.1. Konjunktivitída a blefarokonjunktivitída. Deň predtým na 6-8 hodín (v noci) sú pacientom v nemocnici zrušené všetky lieky a procedúry.

Vzorky zo spojovky sa odoberajú pomocou sterilného, ​​vopred navlhčeného tampónu z viskózy alebo alginátu vápenatého do jednorazovej sterilnej skúmavky alebo sklenenej skúmavky. Vzorky z každého oka sa odoberajú samostatnými tampónmi dvoma alebo tromi krúživými pohybmi pozdĺž sliznice.

Hľuzy s ťahmi z každého oka označujú „vpravo“ a „vľavo“ a okamžite odoslaný do laboratória.

Pred zoškrabaním sa vstreknú 1-2 kvapky anestetika, napríklad hydrochloridu proparakaínu alebo iného, ​​ktorý je dostupný a schválený na použitie na tieto účely predpísaným spôsobom.

Pri dvoch alebo troch krátkych, ostrých pohyboch v jednom smere sa pomocou špeciálnej sterilnej špachtle odoberajú škrabky zo spojovky. Pri manipulácii musí byť oko otvorené.

Pri odbere vzorky treba dávať pozor, aby ste sa nedotkli mihalníc.

Pripravte si aspoň 2 tampóny z každého oka tak, že materiál nanesiete na čisté podložné sklíčko bez tuku krúživými pohybmi na plochu s priemerom 1 cm.

Nátery sa fixujú 5 minút v 95% metylalkohole v špeciálnej, tesne uzavretej nádobe.

Okamžite skúmavky so sondami, tampóny a okuliare so sterom sa prenesú do laboratória.

6.3.2. Bakteriálna keratitída. Deň predtým na 6-8 hodín (v noci) sú pacientom v nemocnici zrušené všetky lieky a procedúry.

Získajte 2 vzorky zo spojovky, ako je popísané v odseku 6.3.1, pretože výsledky ich kultivácie môžu byť užitočné pri určovaní zdroja kontaminácie rohovky (pri podozrení na hubovú infekciu sa použije jedna vzorka).

Pri podozrení na vírusovú infekciu sa spojovkový exsudát a zoškrabaný materiál umiestnia do špeciálneho transportného média pre vírusy.

Anestézia sa vykonáva tak, ako je uvedené v článku 6.3.1.

Zozbierajte 3 – 5 škrabancov metódou opísanou v bode 6.3.1.

Umiestnite zozbieraný materiál do malej (5 ml) sterilnej jednorazovej skúmavky so skrutkovacím uzáverom alebo sterilnej sklenenej skúmavky s gumenou zátkou naplnenej médiom.

Pripravte 2 – 3 nátery na podložnom sklíčku a po vysušení ich zafixujte tak, ako je opísané v bode 6.3.1.

Okamžite preniesť všetok materiál do laboratória.

6.3.3. Bakteriálna endooftalmitída. Jemnou ihlovou aspiráciou sa odoberie vzorka sklovcovej tekutiny (1-2 ml) a vzorka sa získa počas vitrektómie.

Potom postupujte takto:

Po vybratí ihly z injekčnej striekačky sa obsah umiestni do jednorazovej sterilnej nádoby so skrutkovacím uzáverom alebo do skúmavky tesne uzavretej gumovou zátkou;

vzorka materiálu môže byť ponechaná v injekčnej striekačke odstránením vzduchu a odstránením ihly, striekačka sa uzavrie sterilnou gumenou zátkou;

odoberte vzorku zo spojovky, ako je opísané v bode 6.3.1;

všetok materiál okamžite odoslaný do laboratória.

6.3.4. Preseptálna celulitída. Koža sa ošetrí 70% etylalkoholom a 1-2% roztokom jódu alebo jodoformom alebo iným dostupným dezinfekčným prostriedkom schváleným na použitie predpísaným spôsobom.

Pri absencii otvorenej rany sa horné alebo dolné viečko prepichne, aby sa zhromaždil materiál.

V prítomnosti otvorenej rany sa vzorka hnisavého materiálu odoberie injekčnou striekačkou s ihlou.

Pripravte nátery na podložnom sklíčku podľa popisu v 6.3.1.

Odobratý materiál premiestnite do transportnej nádoby s médiom na anaeróby alebo ponechajte v injekčnej striekačke, ktorá sa po odstránení vzduchu a odstránení ihly uzavrie zátkou.

Zozbieraný materiál a ťahy okamžite odoslaný do laboratória.

6.3.5. Orbitálna celulitída. Odoberte aspirát z oblasti podľa metódy opísanej vyššie v bode 6.3.2.

Odoberte vzorku zo spojovky a pripravte nátery na podložné sklíčko, ako je uvedené v bode 6.3.1.

Na doručenie do laboratória použite materiály opísané v článku 6.3.3.

Odoberte pacientovi vzorky krvi podľa metódy opísanej v bode 6.1. Vzorky krvi, všetok odobratý materiál sa prenesie do laboratória.

6.3.6. Zápal slznej žľazy (dakryoadenitída).

Odoberte hnisavý obsah pomocou tampónovej sondy, ako je uvedené v bode 6.3.1.

Nepoužívajte metódu ihlovej aspirácie, aby ste nenarušili celistvosť slznej žľazy.

Sonda tampónu a sklíčka so sterom sa prenesú do laboratória.

6.3.7. Zápal slzného vaku (dakryocystitída). Získajte vzorku zo spojovky, ako je uvedené v bode 6.3.1.

Masírujte a zatlačte na slzný vak, aby ste získali vzorku exsudátu na očkovanie a prípravu náterov, alebo inou metódou odoberte exsudát injekčnou striekačkou s ihlou.

Umiestnite odobranú vzorku exsudátu do prepravných nádob, ako je opísané vyššie, a doručte do laboratória.

6.3.8. Kanalikulitída. Zatlačte na vnútornú stranu očného viečka, aby ste vytiahli hnis.

Ďalej sa práca vykonáva podľa metód opísaných vyššie v tejto časti.

Ak existuje špecializované oddelenie (klinika) v lekárskej a profylaktickej organizácii, všetky plodiny sa vyrábajú pri lôžku pacienta na živných médiách získaných v laboratóriu. Naočkovaný materiál spolu s pripravenými nátermi sa prenesie do laboratória.

6.4. Vzorky na infekčné a zápalové ušné procesy

6.4.1. Pri poškodení vonkajšieho ucha sa koža ošetrí 70% alkoholom, nasleduje výplach sterilným fyziologickým roztokom. Výtok z ohniska sa odoberá na sterilnú jednorazovú skúmavku s tampónom alebo skúmavkami s transportným médiom, alebo na tampón uložený v sterilnej sklenenej skúmavke, uzavretej zátkou, so špeciálnym médiom alebo bez neho. Tampón sa vloží do skúmavky a doručí sa do laboratória.

6.4.2. V prípade poškodenia stredného a vnútorného ucha sa zbierajú vpichy a iný materiál získaný počas operácie. Položky sa dodávajú do laboratória v uzavretej injekčnej striekačke s predtým odstráneným vzduchom. Vzorky tkaniva - v prepravnej nádobe s anaeróbnym médiom schváleným na tieto účely v Ruskej federácii v súlade so stanoveným postupom alebo v sterilnej nádobe na jedno použitie so skrutkovacím uzáverom. Je možné použiť sterilnú sklenenú tubu uzavretú sterilnou gumenou zátkou.

6.4.3. Tympanocentéza bubienka sa pri mikrobiologickej diagnostike zápalov stredného ucha vykonáva len v prípadoch, keď pacient nereaguje na predchádzajúcu terapiu alebo pri torpídnom priebehu katarálneho zápalu stredného ucha aj pri zrakovej absencii exsudátu vo vyčnievajúcej krvi (kultivácie nosohltanu sú pozitívny v menej ako 90 % prípadov).

Na získanie vzorky sa vonkajší kanál vyčistí tampónom navlhčeným v 70 % etylalkohole, po čom nasleduje ošetrenie sterilným fyziologickým roztokom.

Pomocou injekčnej striekačky sa tekutina odoberá z bubienkovej dutiny. Vzorka sa do laboratória dodáva v sterilnej nádobe na jedno použitie so skrutkovacím uzáverom alebo v uzavretej injekčnej striekačke s predvzdušneným vzduchom.

Ak je tympanická membrána poškodená, materiál sa odoberie tampónovou sondou pomocou zrkadla. Tampón sa vloží do sterilnej jednorazovej skúmavky (skúmavky) alebo nádoby s transportným médiom (je povolené použiť sterilnú sklenenú skúmavku s médiom alebo bez média) a v tejto forme sa dodáva do laboratória.

6.5. Vzorky na infekčné a zápalové procesy dýchacieho traktu

6.5.1. Horné dýchacie cesty. Pri podozrení pacienta na záškrt, čierny kašeľ, chlamýdie, mykoplazmózu, legionelózu, kvapavku sú pred dodaním vzorky informovaní pracovníci laboratória, aby sa pripravili na analýzu tohto typu materiálu.

6.5.1.1. Vzorka zo slizníc predných častí nosnej dutiny sa odoberie jedným sterilným tampónom so sondou namontovaným v sterilnej jednorazovej skúmavke (trubici) alebo špeciálne namontovaným v sterilnej sklenenej skúmavke:

zo skúmavky sa vyberie tampón, vloží sa do pravej nosnej dierky a rotačnými pohybmi sa odoberie materiál z krídel nosa a horného rohu nosového otvoru;

zopakujte manipuláciu pre ľavú nosnú dierku;

Vložte tampón do skúmavky a doručte ho do laboratória.

Takto získané vzorky sú použiteľné na stanovenie nosičstva Staphylococcus aureus u zdravotníckych pracovníkov, prítomnosti patogénov nozokomiálnych infekcií, ako aj na charakterizáciu dysbiotických porúch slizníc horných dýchacích ciest pri komplexnom klinickom a imunomikrobiologickom vyšetrení. pacientov vo vedeckých a praktických laboratóriách.

Ak sú v nosovej dutine ohniská zápalu alebo ulcerácie, na odber materiálu z ohniska (ohniská) sa používa samostatný tampón.

6.5.1.2. Aspiráty z nosohltanu sa odoberajú na určenie prenosu pyogénneho streptokoka, meningokoka, patogénov záškrtu a čierneho kašľa, ako aj počas epidemiologických štúdií antimikrobiálnej rezistencie S. pneumoniae a H. influenzae:

sací materiál z nosohltanu;

Preneste materiál do sterilnej jednorazovej nádoby so skrutkovacím uzáverom alebo špeciálnej sterilnej skúmavky s celulózovou alebo bavlnenou gázovou zátkou prepúšťajúcou plyn, pričom dbajte na to, aby ste ho nenasiakli vzorkou klinického materiálu.

6.5.1.3. Výter z nosohltanu. Materiál sa odoberá na určenie prenosu meningokoka a na diagnostiku čierneho kašľa.

Opatrnými rotačnými pohybmi pozdĺž dolného nosového priechodu striedavo v oboch nosových dierkach sa do nosohltana zavedie tampónová sonda z bavlny, viskózy alebo alginátu vápenatého do nosohltanu. Súčasne sú krídla nosa pritlačené k tampónu a nosnej priehradke pre bližší kontakt so sliznicou.

Tampón vložte do sterilnej skúmavky a doručte do laboratória.

6.5.1.4. Výplach nosa sa používa na zistenie prítomnosti nielen bakteriálnej, ale aj prevažne vírusovej infekcie.

Upozornite pacienta, aby počas procedúry neprehĺtal.

Hlava pacienta je umiestnená v polohe hore a dozadu pod uhlom približne 70 °, do každej nosovej dierky sa vstrekne 5 ml sterilného fyziologického roztoku, pacient by mal byť v tejto polohe 3-5 sekúnd.

Ak chcete zhromaždiť materiál, spustite hlavu pacienta dopredu, aby ste vypustili tekutinu z nosných dierok do sterilnej nádobky na jedno použitie, alebo tekutinu odsajte vložením gumenej drenáže do každej nosnej dierky.

Vložte rovnaký objem preplachu do nádoby s vírusovým transportným médiom alebo túto časť doručte do sterilnej nádoby na jedno použitie.

6.5.1.5. Sínusová punkcia. Špeciálne vyškolený, skúsený lekár alebo otolaryngológ pomocou techniky aspirácie injekčnou striekačkou získa materiál z maxilárnych frontálnych alebo iných dutín. Obsah striekačky sa umiestni do nádoby s transportným médiom pre anaeróby alebo do sterilnej skúmavky s tioglykolovým médiom. Materiál môžete nechať v injekčnej striekačke a so sterilnou gumenou zátkou doručiť do laboratória.

6.5.1.6. Príjem vzorky zo sliznice hltana (hltanu).

Nie je dovolené odoberať materiál z hltana (hltanu) so zapálenou epiglottis, pretože postup môže viesť k vážnej obštrukcii dýchania.

Pri odbere vzorky zo sliznice hltana (hltanu) sa tampónom nedotýkajte slizníc líc, jazyka, ďasien, pier a tiež neodoberajte sliny, pretože tento materiál charakterizuje sliznice ústnej dutiny, teda hornej časti gastrointestinálneho traktu.

Výter z hltana (hltanu) sa odoberá nalačno alebo 3-4 hodiny po jedle. Pred odberom vzorky by si mal pacient vypláchnuť ústa teplou prevarenou vodou.

Na získanie vzorky použite sterilnú špachtľu alebo tampón: vyberte viskózový tampón zo sterilnej jednorazovej skúmavky (skúmavky) alebo použite tampón pripravený v laboratóriu namontovaný v sterilnej sklenenej skúmavke. Použitie tampónovej sondy s viskózovou hlavicou je vhodnejšie, pretože viskóza absorbuje menej tekutiny a viac bunkového materiálu.

Jedna ruka tlačí na jazyk pacienta sterilnou špachtľou.

Druhou rukou sa odoberá materiál, pričom sa tampónom striedavo ošetruje pravá mandľa, pravý palatínový oblúk, ľavá mandľa, ľavý palatínový oblúk, jazylka, na úrovni čípky sa tampónom dotkneme zadnej časti hltana.

Takto získané vzorky sú použiteľné na zistenie prítomnosti pôvodcu nozokomiálnej nákazy, ako aj na charakterizáciu dysbiotických porúch slizníc horných dýchacích ciest pri komplexnom klinickom a imunomikrobiologickom vyšetrení pacientov realizovanom vo vedeckej a praktické laboratóriá.

Pri výskyte ložísk zápalu alebo ulcerácie na sliznici ošetrujú odber vzorky obzvlášť opatrne a samostatným tampónom odoberajú ďalší materiál z ohniska (ložiská).

Umiestnite tampón do sterilnej jednorazovej alebo sklenenej skúmavky a doručte do laboratória.

6.5.1.7. Ak existuje podozrenie na záškrt, laboratórni pracovníci sú informovaní, čo naznačuje diagnózu v smere.

V prípadoch prítomnosti respiračného patologického procesu sa materiál súčasne odoberá zo slizníc nosohltanu a hltana podľa metód uvedených vyššie.

Pri podozrení na kožnú formu záškrtu sa odoberie materiál z kože, ako aj slizníc hltana (hltanu) a nosohltana a všetky vzorky sa doručia do laboratória.

6.5.2. Dolné dýchacie cesty. Mikrobiologická diagnostika zápalových procesov v dolných dýchacích cestách predstavuje vážne ťažkosti, pretože Počas odberu môže byť vzorka kontaminovaná mikroorganizmami, ktoré kolonizujú horné dýchacie cesty. Táto ekologická nika je pomerne hojne posiata oportúnnymi mikróbmi, najmä v prítomnosti dysbiózy (kvalitatívne – druhové zloženie a/alebo kvantitatívne – koncentrácia druhov prítomných v CFU/ml v oslabenom a/alebo imunokompromitovanom kontingente subjektov).

Z tohto dôvodu sa vzorky materiálu z dolných dýchacích ciest odoberajú obzvlášť opatrne, aby sa získali správne informácie o etiologickom pôvodcovi (látkach). Pri invazívnych metódach odberu vzorky (ak k tomu nedôjde pri operácii) prechádzajú použité nástroje hornými dýchacími cestami a je tu reálna možnosť výsevu hlbších ložísk mikroorganizmami - obyvateľmi horných dýchacích ciest.

6.5.2.1. Spútum.

Voľne oddeliteľné (expektorované) spúta- uprednostňuje sa ranné zhromaždenie.

Pred odberom vzorky by si mal pacient, ak je to možné, vyčistiť zuby a vypláchnuť ústa a hrdlo teplou prevarenou vodou, ak to pacient nie je schopný urobiť sám, záchod jeho ústnej dutiny vykonajú zdravotníci. .

Upozornite pacienta, aby nezbieral sliny alebo sekréty z nosohltanu do nádobky.

Vzorka spúta získaná v dôsledku hlbokého kašľa sa odoberie do špeciálnej sterilnej jednorazovej nádoby so skrutkovacím uzáverom alebo do špeciálne pripravenej sterilnej sklenenej nádoby.

Vzorka spúta sa odošle do laboratória.

Indukovaný spútum (odporúča sa hlavne pri podozrení na Mycobacterium tuberculosis a Pneumocystis yiroveci)- uprednostňuje sa ranné zhromaždenie.

Pred odberom vzorky by si mal pacient, ak je to možné, vyčistiť zuby a opláchnuť ústa a hrdlo teplou prevarenou vodou; ak to pacient nie je schopný urobiť sám, potom toaletu jeho ústnej dutiny vykonáva zdravotnícky personál.

Čistá zubná kefka sa pred zákrokom navlhčí teplou prevarenou vodou a prechádza po sliznici oboch líc, jazyka a ďasien.

Aktívne vypláchnite ústa pacienta teplou prevarenou vodou.

Pomocou inhalátora nechajte pacienta prehltnúť 20-30 ml 3-10% sterilného fyziologického roztoku.

Zachyťte indukovaný spútum do špeciálnej sterilnej jednorazovej nádobky so skrutkovacím uzáverom alebo do vhodne pripravenej sterilnej sklenenej nádoby.

Preneste vzorku do laboratória.

Súčasne so vzorkou spúta by laboratórium malo zaslať vzorku z hltana (hltanu) odobranú po ústnej toalete a bezprostredne pred odberom spúta, voľne oddelenú (expektorovanú) alebo indukovanú.

6.5.2.2. Tracheostómia a endotracheálne aspiráty. Tracheostómia je kolonizovaná mikroorganizmami už 24 hodín po intubácii pacienta, v dôsledku čoho majú výsledky kultivačnej štúdie malý klinický význam. Vzhľadom na vyššie uvedené sa musia výsledky kultivácie získané u intubovaných pacientov neustále porovnávať s klinickými údajmi (napríklad horúčka alebo výskyt infiltrátov na röntgenových snímkach).

Vzorky bronchoalveolárnej laváže alebo bronchoalveolárnej laváže sa odoberajú, ak je to možné, pred odberom zoškrabov alebo biopsií. Pravidlo je diktované potrebou vyhnúť sa nadmernej krvi vo výslednej tekutine, pretože krv môže zmeniť koncentráciu bunkových a nebunkových zložiek vzorky a ovplyvniť výsledok mikrobiologického rozboru.

Nasatú vzorku odoberte do sterilnej jednorazovej nádobky so skrutkovacím uzáverom alebo do vhodne pripevnenej sterilnej sklenenej nádobky alebo do sterilnej, jednorazovej sklenenej skúmavky so zátkou alebo dopravte do laboratória v uzavretej injekčnej striekačke s odstráneným vzduchom.

6.5.2.3. Vzorky získané pomocou bronchoskopu. Bronchoalveolárna laváž (vzorka voľby), výplachy z priedušiek (nízka citlivosť pri diagnostike pneumónie), škrabanie z priedušiek (výraznejšie ako preplachy), vzorky z transtracheálnej biopsie sa získavajú zavedením bronchoskopu transnazálne alebo transorálne neintubovanému pacientovi resp. cez endotracheálnu trubicu u intubovaného pacienta.

Na získanie vzorky výplachu z priedušiek alebo bronchoalveolárnej laváže:

sterilný nebakteriostatický (oficiálny) fyziologický roztok sa vstrekuje injekčnou striekačkou cez bioptický kanál bronchoskopu v oddelených častiach (celkový objem od 5-20 do 100 ml);

pred zavedením ďalšej dávky fyziologického roztoku opatrne odsajte zasunutú časť injekčnej striekačky do sterilnej jednorazovej nádobky so skrutkovacím uzáverom alebo do sterilnej jednorazovej alebo sklenenej skúmavky so zátkou, prípadne ju nechajte v uzavretej injekčnej striekačke po odstránení vzduchu ( zvyčajne 50-70 % injikovaného fyziologického roztoku sa nachádza vo výplachu);

každá časť, ktorá sa má odsať, sa zhromažďuje v samostatnej miske;

na konci postupu skombinujte vzorky získané z toho istého miesta. Vzorky z rôznych miest (napríklad z pravého horného laloku pľúc a pravého dolného laloka) by sa mali spojiť len po konzultácii s ošetrujúcim lekárom;

v smere uveďte celkový objem vstreknutého fyziologického roztoku.

Na získanie vzorky škrabania z priedušiek:

cez bioptický kanál bronchoskopu sa zavedie teleskopický dvojitý katéter s polyetylénglykolom (alebo iným vhodným činidlom) ošetreným distálnym koncom, aby sa zabránilo kontaminácii vzorky;

materiál odoberte do sterilnej jednorazovej nádoby so skrutkovacím uzáverom alebo do prepravnej nádoby s médiom pre anaeróby alebo do sterilnej skúmavky s tioglykolovým médiom, tesne uzavretej sterilnou gumenou zátkou;

odovzdať materiál do laboratória.

Na získanie transbronchiálnej biopsie sa vzorka odoberie cez bioptický kanál bronchoskopu a umiestnením do sterilnej jednorazovej nádobky so skrutkovacím uzáverom s malým množstvom (1-2 ml) nebakteriostatického (úradného) fyziologického roztoku resp. v skúmavke s tioglykolovým médiom, tesne uzavretej gumovou zátkou, prevezené do laboratórií

6.5.2.4. Vzorky aspirátu z pľúc. Na odber vzorky sa ihla zavedie cez hrudnú kosť do infiltrátu pľúc pod kontrolou CT skenera. Materiál sa odsaje z ohniska zápalu. Ak ide o veľkú infiltráciu alebo ich niekoľko, je potrebné získať niekoľko vzoriek z príslušných ohnísk alebo niekoľko vzoriek z jedného veľkého ohniska. Materiál sa do laboratória prenáša v transportnom kontajneri s anaeróbnym médiom alebo v sklenenej skúmavke s tioglykolovým médiom, prípadne v skrutkovacom jednorazovom kontajneri.

6.5.2.5. Vzorky biopsie pľúc. Ak je to možné, získajte kúsky tkaniva o veľkosti 1-3 cm.Ak je lézia veľká alebo niekoľko, odoberte niekoľko vzoriek. Vzorku vložte do sterilnej jednorazovej nádoby so skrutkovacím uzáverom alebo do prepravnej nádoby s médiom pre anaeróby, prípadne do nádoby (skúmavky) s tioglykolovým médiom, uzavretej sterilnou gumenou zátkou.

6.6. Vzorky na infekčné a zápalové procesy genitourinárneho systému

6.6.1. Vzorky moču.

6.6.1.1. Všeobecné pravidlá pre odber vzoriek:

nie je dovolené odoberať moč z podstielky alebo z vrecka na moč;

na analýzu moču počas prirodzeného močenia použite strednú rannú časť;

pred odberom vzorky je potrebné dôkladne opláchnuť vonkajšie pohlavné orgány a oblasť konečníka teplou prevarenou vodou; V tomto prípade je potrebné venovať osobitnú pozornosť liečbe otvorenia močovej trubice u mužov (predsiene vagíny - u žien), aby sa zabezpečilo, že počas procedúry nebude vzorka dodatočne kontaminovaná mikróbmi;

na spracovanie nie je dovolené používať dezinfekčné prostriedky, pretože keď sa zavedú do vzorky, môžu inhibovať rast mikroorganizmov;

vzorka sa prenesie do laboratória najneskôr do 2 hodín od okamihu odberu;

na odber a dodanie vzoriek do laboratória používajte sterilné jednorazové nádobky so skrutkovacím uzáverom alebo skúmavky (je možné použiť sterilné špeciálne upevnené sklenené skúmavky s plynopriepustnou zátkou z celulózy alebo bavlnenej gázy, ale osobitnú pozornosť treba venovať namočte korok);

dodanie aspirátových vzoriek získaných technikou suprapubickej punkcie močového mechúra do laboratória sa vykonáva v prepravnej nádobe so špeciálnym médiom pre anaeróby alebo v uzavretej injekčnej striekačke bez ihly;

pri podozrení na vírusovú infekciu sa vzorky doručia do laboratória v sterilnej nádobe na jedno použitie umiestnenej na roztopenom ľade (suchý ľad nie je povolený!);

akýkoľvek postup na získanie vzorky pomocou katétra (najmä u žien) sa vykonáva s dôkladným dodržiavaním pravidiel aseptiky, aby sa zabránilo ďalšej kontaminácii pacienta počas zavádzania katétra;

na mikrobiologický výskum nie je dovolené použiť vzorku z dennej m

6.6.1.2. Odber vzorky moču od žien počas prirodzeného močenia.

Použite strednú porciu ako prvý prechod moču by mal odstrániť komenzály, prípadne v močovej rúre. Vzorka odobratá v ďalších pasážach musí byť bez kontaminácie. Spoľahlivosť pozitívnych výsledkov takéhoto materiálu je 80% pri odbere jednej vzorky, 90% - pri dvoch po sebe nasledujúcich vzorkách a 100% - pri troch, ak všetky vzorky dávajú rovnaké výsledky.

Zdravotnícky pracovník, ktorý odoberá vzorku, by si mal umyť ruky mydlom, opláchnuť vodou a osušiť. Ak vzorku odoberá pacient sám, je mu podrobne vysvetlené, ako sa to robí, berúc do úvahy vyššie uvedenú prípravu, a je upozornený na to, čo sa môže stať, ak poruší pravidlá:

mali by ste dôkladne opláchnuť otvor močovej trubice a oblasť vestibulu vagíny, ako aj perineum a oblasť konečníka mydlovou vodou alebo tekutým mydlom, opláchnuť teplou prevarenou vodou, osušiť sterilná gázová tkanina;

otvor vagíny musí byť uzavretý sterilným vatovým tampónom;

držte vonkajšie pysky ohanbia oddelené počas močenia;

počas močenia vypustite malé množstvo moču do špeciálnej nádoby na likvidáciu;

Strednú časť moču (10-20 ml) odoberte do špeciálnej jednorazovej nádobky so skrutkovacím uzáverom alebo sterilnej sklenenej nádobky špeciálne namontovanej v laboratóriu.

6.6.1.3. Odber vzorky moču od mužov počas prirodzeného močenia.

U mužov je potrebná jedna porcia moču na mikrobiologické vyšetrenie, pretože je u nich podstatne nižšia pravdepodobnosť kontaminácie ako u žien.

Osoba, ktorá odoberá vzorku, by si mala umyť ruky mydlom, opláchnuť vodou a osušiť. Ak si pacient odoberá vzorky sám, je potrebné mu podrobne vysvetliť, ako sa to robí, berúc do úvahy prípravu opísanú nižšie, a upozorniť na to, čo sa môže stať, ak dôjde k porušeniu pravidiel:
[e-mail chránený], prídeme na to.

Vykonávanie štúdií metódou PCR je povolené na základe existujúcich laboratórií za predpokladu, že v laboratóriu sú organizované nezávislé alebo oddelené pracovné oblasti, ktoré zodpovedajú štádiám analýzy PCR.

Laboratórium PCR by malo zahŕňať nasledujúci minimálny súbor pracovných oblastí:

• príjem, registrácia, analýza a primárne spracovanie materiálu;
• izolácia DNA / RNA;
• príprava reakčných zmesí a PCR;
• detekcia produktov amplifikácie elektroforézou alebo GiFA.

Je dôležité poznamenať, že ak sa metóda použije, nie je potrebné detegovať produkty amplifikácie elektroforézou. Pracovný priestor v laboratórnej miestnosti na elektroforézu možno preto vynechať.

V laboratóriách PČR je potrebné zabezpečiť aj pomocné priestory: archív (na účtovné doklady), zborovňu, kanceláriu vedúceho, šatne pre zamestnancov, jedáleň, sociálne miestnosti (WC, technické miestnosti). (sklad).

V ideálnom prípade je potrebné mať autokláv na dezinfekciu testovaného materiálu. Možno ho zdieľať s ostatnými časťami inštitúcie za predpokladu, že sú splnené požiadavky biologickej bezpečnosti.

Miestnosti na vykonávanie prác vo fázach analýzy PCR musia byť zaškatuľkované (škatule s predškatuľkami). V oblasti príjmu, evidencie, analýzy a prvotného spracovania materiálu prijímajú materiál, prípravu vzorky (triedenie, označovanie, odstreďovanie a pod.), skladovanie a primárnu inaktiváciu zvyškov biomateriálu dezinfekčnými prostriedkami. Priestor na príjem, registráciu, analýzu a primárne spracovanie materiálu sa nachádza v miestnosti na príjem materiálu alebo v samostatnej krabicovej miestnosti. Môžete tu tiež prijímať a spracovávať vzorky na výskum inými metódami (napr. imunológia), za predpokladu, že je vyčlenené samostatné vybavené pracovisko na analýzu PCR.

Oblasť extrakcie DNA/RNA umiestnené v samostatnej miestnosti. Pri organizovaní laboratória PCR na základe existujúceho laboratória je povolené izolovať DNA / RNA v miestnostiach, v ktorých sa vykonávajú iné typy výskumu, s výnimkou prác genetického inžinierstva. V tomto prípade je v miestnosti organizovaný pracovný priestor na extrakciu DNA / RNA, v ktorom je umiestnený PCR box alebo biologický bezpečnostný box. V boxe PCR na izoláciu DNA / RNA nevykonávajte iné typy prác!

V zóne prípravy reakčných zmesí a PCR príprava PCR zmesi, zavedenie izolovaných preparátov DNA / RNA alebo cDNA do skúmavky pre PCR, reverzná transkripcia RNA a amplifikácia DNA alebo cDNA. Miestnosť na prípravu reakčných zmesí a PCR by mala byť oddelená. Príprava reakčných PCR zmesí sa uskutočňuje v PCR boxe.

V prípade potreby je možné v tej istej miestnosti spojiť fázu extrakcie DNA / RNA s fázou prípravy reakčných zmesí a uskutočňovania PCR za prítomnosti samostatných boxov PCR v nej - na prípravu reakčných PCR zmesí a na izoláciu DNA / RNA.

Oblasť detekcie produktov amplifikácie umiestnené v samostatnej miestnosti, podľa možnosti vybavenej PCR boxom. Ak je potrebné súčasne použiť metódu elektroforézy a metódu hybridizačnej analýzy na detekciu produktov amplifikácie, mala by byť v detekčnej miestnosti pridelená samostatná pracovná plocha pre hybridizačnú analýzu. V tomto prípade sú zariadenia a príslušenstvo pre každý typ detekcie označené pre každú zónu. Na hybridizačnú analýzu nie je dovolené používať pipety a misky určené na elektroforézu.

Plánovacie riešenia a umiestnenie zariadení by mali zabezpečiť tok pohybu skúmaného materiálu. Výmena vzduchu medzi miestnosťou na detekciu produktov zosilnenia a inými miestnosťami by mala byť úplne vylúčená.

Laboratórium PCR je vybavené tečúcou vodou, kanalizáciou, elektrinou a kúrením. Všetky priestory laboratória PCR sú zabezpečené dostatočným prirodzeným a umelým osvetlením.

Pri výstavbe nových alebo rekonštrukcii existujúcich laboratórií PCR sú priestory vybavené prívodnou a odsávacou alebo odsávacou ventiláciou. Rozdiel v tlaku vzduchu v priestoroch laboratória PCR sa dosahuje v dôsledku rozdielov vo frekvencii výmeny vzduchu v nich. Výmenný kurz vzduchu musí zodpovedať hodnotám uvedeným v tabuľke:

V prípade potreby je možné v laboratóriu PCR nainštalovať klimatizácie.

Vnútorná výzdoba priestorov sa vykonáva v súlade s ich funkčným účelom. Povrchy stien, podláh a stropov v laboratórnych miestnostiach by mali byť hladké, bez trhlín, ľahko spracovateľné, odolné voči pôsobeniu čistiacich a dezinfekčných prostriedkov. Podlahy by nemali byť šmykľavé. Laboratórny nábytok by mal mať náter, ktorý je odolný voči pôsobeniu čistiacich a dezinfekčných prostriedkov. Povrch stolov musí byť bez trhlín a švov. Priestory laboratória musia byť nepriepustné pre hlodavce a hmyz. Laboratórium PCR je vybavené hasiacimi prostriedkami.

Optimálny čas na vyšetrenie krvi je v intervale od 1 do 4 hodín po odbere.V intervale od 5 do 30 minút sa krvné doštičky dočasne prispôsobujú antikoagulantu a agregujú, čo môže viesť k ich falošnému poklesu vo vzorke krvi.

Je nežiaduce vyšetrovať krv neskôr ako 8 hodín po odbere, pretože menia sa niektoré charakteristiky buniek: zmenšuje sa objem leukocytov, zväčšuje sa objem erytrocytov, čo v konečnom dôsledku vedie k chybným výsledkom merania a nesprávnej interpretácii výsledkov. Počas dňa skladovania krvi zostáva stabilná iba koncentrácia hemoglobínu a počet krvných doštičiek.

Krv nesmie byť zmrazená. Kapilárna krv s K2EDTA by sa mala skladovať pri izbovej teplote a analyzovať do 4 hodín po odbere.

Na zabezpečenie kvalitného výsledku výskumu je potrebné prísne kontrolovať čas a podmienky skladovania vzoriek pred analýzou.

Ak je potrebné vykonať oneskorený rozbor (prevoz na veľké vzdialenosti, technická porucha prístroja a pod.), vzorky krvi sa uchovávajú v chladničke (4 o - 8 o C) a vyšetrí sa do 24 hodín. Treba si však uvedomiť, že dochádza k opuchu buniek a zmene parametrov spojených s ich objemom. U prakticky zdravých ľudí nie sú tieto zmeny kritické a neovplyvňujú kvantitatívne parametre, ale v prítomnosti patologických buniek sa tieto môžu zmeniť alebo dokonca zničiť v priebehu niekoľkých hodín od momentu odberu krvi.

Bezprostredne pred štúdiou by sa krv mala dôkladne premiešať niekoľko minút, aby sa zriedil antikoagulant a rovnomerné rozloženie vytvorených prvkov v plazme. Dlhodobé neustále miešanie vzoriek až do momentu ich skúmania sa neodporúča z dôvodu možného poranenia a rozpadu patologických buniek.

Krvný test na automatickom analyzátore sa vykonáva pri izbovej teplote. Krv skladovaná v chladničke sa musí najskôr zahriať na izbovú teplotu, pretože pri nízkych teplotách sa viskozita krvi zvyšuje a tvarované prvky majú tendenciu sa zlepovať, čo následne vedie k poruche miešania a neúplnej lýze. Štúdium studenej krvi môže spôsobiť "alarmy" v dôsledku kompresie histogramu leukocytov.

Pri vykonávaní hematologických štúdií v značnej vzdialenosti od miesta odberu krvi nevyhnutne vznikajú problémy spojené s nepriaznivými prepravnými podmienkami. Vplyv mechanických faktorov (trasenie, vibrácie, miešanie atď.), teplotné podmienky, pravdepodobnosť rozliatia a kontaminácie vzoriek môže ovplyvniť kvalitu analýz. Na odstránenie týchto dôvodov sa pri preprave skúmaviek s krvou odporúča používať hermeticky uzavreté plastové skúmavky a špeciálne prepravné izotermické nádoby. Počas prepravy nie je povolený kontakt vzorky (s natívnym materiálom) a odporúčacieho formulára v súlade s pravidlami biologickej bezpečnosti.

^ 4.3. Preberanie a evidencia biologického materiálu

Skúmavky so vzorkami venóznej krvi sa dodávajú do laboratória v deň odberu v stojanoch v špeciálnych vakoch na dodávku biologického materiálu, v ktorých musia byť skúmavky vo vzpriamenej polohe a pri preprave na veľkú vzdialenosť v špeciálnych kontajneroch.

Zamestnanec laboratória prijímajúci materiál musí skontrolovať:

Správnosť odoslania: odporúčací list obsahuje údaje vyšetrovaného (priezvisko, meno a priezvisko, vek, anamnéza alebo ambulancia, oddelenie, diagnóza, vykonaná terapia);

Označovanie skúmaviek so vzorkami krvi (musia byť označené kódom alebo priezviskom pacienta, zhodným s kódom a priezviskami vo formulári na odoslanie materiálu na výskum). Laborant musí zaznamenať dodaný materiál, poznačiť si počet skúmaviek.

^ 4.4 Výpočet bunkového zloženia krvi na hematologickom analyzátore

Výpočet bunkového zloženia krvi na hematologickom analyzátore by sa mal vykonávať v prísnom súlade s pokynmi pre zariadenie.

Pri práci na hematologickom analyzátore by ste mali:

Použite krv stabilizovanú K-2 EDTA v odporúčanom pomere pre špecifickú soľ a jednorazové skúmavky na hematologické štúdie (jednoduché alebo vákuové);

Pred analýzou skúmavku opatrne, ale dôkladne premiešajte s krvou (na tento účel sa odporúča použiť zariadenie na miešanie vzoriek krvi - rotomix);

Používajte reagencie registrované predpísaným spôsobom; pri výmene činidiel za produkty iného výrobcu by sa mal prístroj skontrolovať a nakalibrovať;

Spustite zariadenie, sledujte všetky fázy splachovania, dosahujte nulové hodnoty (na pozadí) indikátorov pre všetky kanály;

Venujte pozornosť hláseniam prístroja o pravdepodobných systematických chybách: nezabudnite, že zvýšenie MCSN vyššie ako normálne hodnoty je spravidla výsledkom chyby merania;

Ak sa zistí chyba, je nevyhnutné odstrániť príčinu, nepracujte na chybnom zariadení;

Dodržujte postup kontroly kvality podľa príslušného programu. s hodnotením získaného výsledku;

Pracujte zmysluplne, porovnávajte získané výsledky s klinickými charakteristikami vzoriek pacienta;

Po ukončení meraní analyzátor dôkladne opláchnite;

Pri dlhšom odstavení zariadenia je nevyhnutné vykonať všetky konzervačné postupy (ak je to možné, v spolupráci so servisným technikom);

Ak máte technické problémy, mali by ste využiť pomoc servisného technika zo spoločnosti, ktorá má licenciu na údržbu; neverte neškolenému personálu pri práci.

Pri začatí práce na hematologickom analyzátore je potrebné vziať do úvahy limity linearity merania analyzovaných parametrov. Vyhodnotenie vzoriek s hodnotami analyzovaných parametrov presahujúcimi medzu linearity merania môže viesť k chybným výsledkom. Vo väčšine prípadov pri analýze vzoriek s hypercytózou analyzátor namiesto hodnoty nameraného parametra zobrazí „D“ (riediť), čo indikuje potrebu nariedenia vzorky a opätovného merania. Riedenie sa musí vykonávať dovtedy, kým sa nedosiahnu podobné konečné výsledky pri ďalších dvoch riedeniach.

^ PRÍKLAD Analýza vzorky pacienta s hyperleukocytózou na troch rôznych hematologických analyzátoroch je uvedená v tabuľke.

Tabuľka 3

¦Počty hyperleukocytózy vykonané na troch rôznych hematologických analyzátoroch

^ Hematologické analyzátory	Riedenie vzorky				Celková hodnota
	^ Plná krv	1:1	1:3	1:4	WBC
1	D	274,5	274,5	143,1	715,5
2	322,6	253,2	177,7	141,8	709,0
3	D	D	168,3	139,1	695,5

Tabuľka ukazuje, že pri analýze plnej krvi len jeden analyzátor (2.) udával digitálnu hodnotu počtu leukocytov, ďalšie dva indikovali potrebu riedenia vzorky. Následné postupné meranie vzorky v troch riedeniach umožnilo na všetkých zariadeniach dosiahnuť podobné konečné výsledky len pri riedení 1:3 a 1:4. Celkový počet leukocytov bol teda 700,0 - 710,0 x 10 9 / l, čo je viac ako 2-krát viac ako počiatočná hodnota získaná v plnej krvi na 2. analyzátore a 1,5-krát pri riedení 1:1 na 1. a 2. analyzátory.

1. 
   ^ Kalibrácia hematologických analyzátorov

Kalibrácia znamená postup nastavenia analyzátora ako výsledok

Ktorý dosiahne nulovú odchýlku systematickej zložky chyby (nulová odchýlka) alebo potvrdí, že odchýlka je nulová, berúc do úvahy chybu kalibrácie. Kalibráciu hematologických analyzátorov možno vykonať dvoma hlavnými spôsobmi:

Plná krv;

Na základe stabilizovaných vzoriek krvi s certifikovanými hodnotami.

^ 5.1 Kalibrácia plnej krvi

Kalibráciu plnej krvi možno vykonať porovnaním s referenčným analyzátorom, ktorého kalibrácia bola overená a možno ju považovať za referenčnú.

Na kalibráciu porovnaním s referenčným analyzátorom sa používa 20 vzoriek venóznej krvi od pacientov, náhodne vybraných z denného výskumného programu laboratória s referenčným analyzátorom. Krv by sa mala odoberať do vákuových skúmaviek s antikoagulantom K 2 EDTA. Po analýze na referenčnom analyzátore sa skúmavky s krvou doručia do laboratória na analýzu na kalibrovanom zariadení. Čas medzi meraniami na referenčnom a kalibrovanom analyzátore by nemal presiahnuť 4 hodiny. Analýza kalibračných vzoriek na kalibrovanom prístroji by sa mala vykonávať rovnakým spôsobom ako analýza vzoriek pacientov. Získané výsledky sa zapíšu do tabuľky vo forme uvedenej v prílohe 1. Tieto výsledky sa použijú na určenie zodpovedajúcich kalibračných faktorov, ktoré sa číselne rovnajú koeficientom strmosti kalibračných priamok prechádzajúcich počiatkom v grafe.

Kalibračné faktory sa vypočítavajú na počítači pomocou programu EXCEL, ktorý je súčasťou balíka Microsoft OFFICE akejkoľvek verzie. Na výpočet kalibračných faktorov v tomto programe sa vytvorí rozptylový diagram, kde sa namerané hodnoty vynesú pozdĺž osi X, referenčné hodnoty sa vynesú pozdĺž osi Y, nastaví sa regresná čiara cez začiatok súradnice. Program nakreslí kalibračnú čiaru a určí jej strmosť, čo je požadovaný kalibračný faktor. Ak sa zistia hrubé chyby - body, ktoré sú na grafe výrazne vzdialené od kalibračnej priamky, je potrebné ich z výpočtu odstrániť (vymazať celý riadok v tabuľke EXCEL). Výsledný kalibračný faktor sa zapíše do tabuľky v prílohe 1 a použije sa na manuálne nastavenie kalibrácie zariadenia v súlade s jeho návodom na obsluhu.

1. 
   ^ Kalibrácia so stabilizovanými vzorkami krvi s certifikovanými hodnotami

Táto metóda kalibrácie je založená na komerčných kalibračných a kontrolných materiáloch, ktoré sú umelou zmesou stabilizovaných ľudských erytrocytov a fixovaných ľudských alebo zvieracích buniek, ktoré napodobňujú leukocyty a krvné doštičky. Vzhľadom na výrazný rozdiel v biologických vlastnostiach zložiek týchto materiálov z prírodnej krvi závisia certifikované hodnoty hematologických parametrov od konkrétneho typu analyzátora.

Kedykoľvek je to možné, mali by sa použiť kalibrátory, ktoré sú špecificky navrhnuté výrobcom na kalibráciu špecifického typu analyzátora. Neistoty nastavených hodnôt v moderných hematologických kalibrátoroch sú vo všeobecnosti v súlade s medicínskymi požiadavkami. Nie všetky typy analyzátorov však majú takéto kalibrátory. Navyše, vzhľadom na obmedzenú trvanlivosť (zvyčajne nie viac ako 45 dní), nie je vždy možné dostať vzorky, ktoré nie sú exspirované.

Kontrolné materiály nie sú výrobcom určené na kalibračné účely: tolerancie hodnôt sú oveľa širšie, metódy kvalifikácie a kontroly výroby nie sú také prísne ako u kalibrátorov. Pri vykonávaní kalibrácie je možné použiť kontrolné materiály len ako jeden zo zdrojov informácií o metrologických vlastnostiach zariadenia.

Treba však mať na pamäti, že keď sa na kalibračné účely použijú kontrolné materiály aj kalibrátory, špecifiká prípravy vzorky a prevádzky analyzátorov majú významný vplyv na zložky systematickej chyby. Tieto ovplyvňujúce faktory nemožno brať do úvahy pri kalibrácii s komerčnými materiálmi. V dôsledku toho musí byť vykonaná kalibrácia vo všetkých prípadoch overená analýzou štatistík výsledkov získaných vo vzorkách pacientov (indexy erytrocytov, intervaly normálnych hodnôt).

5.2.1 Frekvencia kalibrácie hematologických analyzátorov

Požiadavky na kalibračné intervaly sa zvyčajne nachádzajú v návode na použitie analyzátora. Kalibrácia sa vo všeobecnosti vyžaduje po opravách alebo keď sa v interných laboratórnych postupoch kontroly kvality zistí významný posun.

5.2.2 Postup kalibrácie

Postup kalibrácie sa vykonáva v súlade s návodom na použitie analyzátora.

5.2.3 Kontrola výsledku kalibrácie

Táto kontrola spočíva v analýze kalibračnej vzorky ihneď po vykonaní kalibrácie. Vykonaná kalibrácia je akceptovaná, ak výsledky analýzy zodpovedajú kalibračným hodnotám, berúc do úvahy analytickú odchýlku analyzátora.

5.2.4 Overenie kalibrácie pomocou indexov erytrocytov

Táto metóda kontroly a spresňovania kalibrácie využíva skutočnosť, že priemerné hodnoty erytrocytových indexov - MCHS, MCH a MCV pre pacientov majú pomerne malú odchýlku, a preto sa dajú efektívne použiť na kontrolu kalibrácie a ďalšiu kontrolu kvality. Odporúčaný počet vzoriek na spriemerovanie je 20. Na stanovenie priemernej MCHS je možné použiť akékoľvek vzorky od pacientov, pričom na stanovenie priemernej hodnoty MCH a MCV by sa mali vylúčiť pacienti s anémiou.

Mnohé moderné hematologické analyzátory majú zabudované programy na výpočet aktuálneho priemeru, čo značne zjednodušuje spracovanie údajov.

Cieľové hodnoty indexov erytrocytov spriemerované z 20 vzoriek od pacientov vo veku 18 až 60 rokov bez ohľadu na pohlavie sú uvedené v tabuľke 4.

Tabuľka 4

Cieľové hodnoty indexov erytrocytov

Ak sú získané priemerné hodnoty mimo kontrolnej tolerancie, znamená to, že je potrebné opraviť kalibráciu MCV alebo Hgb alebo RBC.

Pri určovaní dôvodov neuspokojivej kalibrácie na základe výsledkov štúdie parametrov erytrocytov s použitím komerčných kalibračných/kontrolných materiálov by sa malo brať do úvahy nasledovné posúdenie spoľahlivosti certifikovaných hodnôt materiálov:

Najpresnejším a najstabilnejším parametrom v čase je koncentrácia erytrocytov;

Hgb je stabilný parameter, ale môže závisieť od použitých činidiel (napríklad kyanid alebo bezkyanid);

Najnestabilnejším parametrom je MCV. Hodnota MCV má tendenciu meniť sa počas celej doby skladovania materiálu v pomerne širokom rozsahu hodnôt. Pri spresňovaní kalibrácie MCV majú údaje získané z analýzy priemerných erytrocytových indexov prednosť pred certifikovanými hodnotami v stabilizovaných vzorkách krvi.

Za predpokladu, že kalibrácia RBC je správna, tabuľka 5 uvádza možné dôvody, prečo priemerné hodnoty indexov presahujú toleranciu kontroly.

Tabuľka 5

Dôvody prekročenia priemerných hodnôt indexov erytrocytov

Erytrocytové indexy	Priemerná hodnota indexu	Priemerná hodnota indexu	Priemerná hodnota indexu	Priemerná hodnota indexu
MCHC	Pod hranicou	Nad hranicou	Nad hranicou	Pod hranicou
MCH	V medziach tolerancie	V medziach tolerancie	Nad hranicou	Pod hranicou
MCV	Nad hranicou	Pod hranicou	V medziach tolerancie	V medziach tolerancie
Príčina	Predražené MCV	Podhodnotené MCV	Predražený Hgb	Znížené Hgb

Príklad štandardného operačného postupu pre príjem biomateriálu do lekárskeho laboratória.

NÁZOV INŠTITÚCIE
Typ dokumentu	Štandardný operačný postup (SOP)
	Zápis do Jednotného registra laboratórnej dokumentácie	SOP-PA-01-2014
	Inštancia
	Celkový počet strán
	Predstavený
	Platnosť
Názov dokumentu	Pravidlá pre prijímanie a registráciu biomateriálu v laboratóriu.

		pozícia
Vyvinutý:
Skontrolované:
Dohodnuté:

Priebežný názov:

	názov
	Oblasť použitia
	Organizácia procesu prepravy biomateriálu kuriérom
	Akceptácia biomateriálu v laboratóriu
	Presun biomateriálu a odporúčania na príslušné oddelenia laboratóriách
	Registrácia objednávkových formulárov operátormi.
	Príloha č.1 Bloková schéma
	Príloha č. 2 Druhy nezrovnalostí a ich odstránenie
	Príloha č. 3 Snímač teploty chladiaceho stroja
	Príloha č. 4 Smer-tlač
	Príloha č. 5 List oboznamovania zamestnanca so SOP

1 oblasť použitia

Tento štandardný prevádzkový poriadok (ďalej len SOP) definuje postup pre príjem, registráciu biomateriálu prichádzajúceho do laboratória z ošetrovne NÁZOV INŠTITÚCIE a iných inštitúcií obsluhovaných laboratóriom, ako aj identifikáciu nezrovnalostí a ich odstránenie. .

Tento SOP je určený pre laboranta a operátora laboratória.

1. Metodické odporúčania „Organizácia predanalytickej fázy centralizácie laboratórnych krvných testov“ (Schválené na celoruskej vedeckej a praktickej konferencii „Skutočné klinické a diagnostické laboratórne služby: stupeň súladu s normami laboratórnej medicíny, kvalita, náklady a cena“ (Moskva, 2. – 4. októbra 2012.)
2. GOST R 53079.4─2008. „Technológie medicínskych laboratórií. Zabezpečenie kvality klinického laboratórneho výskumu. Časť 4. Pravidlá vykonávania predanalytickej fázy “. Účinnosť nadobudol dňa 1.01.2010.
3. ISO 15189: 2012 Lekárske laboratóriá. Požiadavky na kvalitu a kompetenciu"

3. Organizácia procesu prepravy biomateriálu kuriérom a zodpovednosť kuriéra.

3.1. Teplotu v chladničke, ktorá je uvedená na displeji v kabíne auta, zaznamená kuriér do denníka „Vestník teplotného režimu v chladničkách automobilov“ a v tomto denníku kuriér uvedie svoje celé meno, ŠPZ auta a čas odchodu auta na biomateriál tesne pred cestou do inštitúcií ... Tento časopis sa nachádza v kancelárii číslo ___. (Foto snímača teploty a foto tlačiva časopisu sú uvedené v prílohe č. 3).

3.2. Kuriér po príchode do zdravotníckeho zariadenia ide do podateľne tejto inštitúcie, kde si vyzdvihne nádoby s rôznymi biomateriálmi. Každá nádoba obsahuje názov inštitúcie a typ biomateriálu (krv, moč, výkaly, podložné sklíčka so sterom, škrabance). Kuriér umiestni nádoby vodorovne do chladničky stroja, ako je znázornené na fotografii.

3.3. Kuriér je zodpovedný za neporušenosť nádob, ich bezpečnosť, za zabezpečenie správneho teplotného režimu v chladničke stroja (+4 - +8 o C), ako aj za bezpečnosť biomateriálu dodávaného z inštitúcií do laboratória. . Počas cesty kuriér sleduje teplotu v chladničke auta, ktorá sa zobrazuje na displeji nainštalovanom v aute.

4. Prevzatie biomateriálu v laboratóriu.

4.1. Teplotu, ktorá je uvedená na displeji v chladničke automobilu v čase vyberania nádob, zaznamená kuriér do denníka „Vestník na zaznamenávanie teplotného režimu v chladničkách automobilov“ do stĺpca zodpovedajúceho na štátne číslo auta. A tiež v tom istom časopise vodič uvádza čas príchodu auta s biomateriálom z inštitúcií.

4.2. Kuriér odovzdá označené nádobky so vzorkami krvi, sterov a škrabancov laboratórnemu záchranárovi v miestnosti ___.

4.3. Kuriér odovzdá označené nádoby s močom a výkalmi sanitárovi-laborantovi na izbe ___.

4.4. V miestnosti ___ zdravotnícky záchranár otvorí veko nádoby a vyberie skúmavky s krvou, podložné sklíčka s nátermi a škrabkami, priečinky s pokynmi na výskum.

4.5. Laboratórny záchranár triedi skúmavky s krvou oddelene do stojanov, podľa typu skúmaviek (biochemické, hematologické a koagulologické) a názvov inštitúcií, ktoré sú na stojanoch uvedené.

4.6. V miestnosti ____ zdravotnícky záchranár odoberie vzorky z nádoby s močom, výkalmi a pokynmi.

5. Presun biomateriálu a odporúčanie na príslušné oddelenia laboratória.

5.1 V miestnosti ____ zdravotnícky záchranár vloží stojany so skúmavkami na biochemické, imunologické, koagulologické štúdie do nádob označených „na prenos biomateriálov“ a odnesie ich do miestnosti ___ na centrifugáciu.

5.2 Zdravotný asistent laborant zavolá na oddelenia hematológie a PCR, aby zdravotnícki asistenti laboranti z príslušných oddelení odobrali biomateriál z miestnosti č. ___

5.3. Zdravotný asistent laborant odovzdá pokyny na výskum z kancelárie č. ___ operátorom v kancelárii č. ____ na registráciu.

5.4 V kancelárii č. ___ zdravotnícky záchranár dáva pokyny operátorom, ktorí registrujú formuláre v tej istej kancelárii.

6. Registrácia objednávkových formulárov prevádzkovateľmi.

6.1. Operátori v kancelárii č. ___ po obdržaní odporúčaní od zdravotníckeho asistenta-laboranta z kancelárie č. ___ ich zaregistrujú v laboratórnom informačnom systéme.

Postup registrácie:

Operátor načíta čiarový kód skenerom, prilepený na smer polotovaru;

Následne operátor zadá do LIS-u údaje z pasu pacienta: celé meno, dátum narodenia, adresu bydliska a ďalšie údaje: zdroj objednávky (povinné zdravotné poistenie, dobrovoľné zdravotné poistenie, hotovosť, lekárska prehliadka), číslo inštitúcie, oddelenie, celé meno lekára, ktorý štúdium nariadil, diagnóza, MES kód (lekársky - ekonomický štandard).

Potom operátor zadá do LIS tie indikátory, ktoré predpísal ošetrujúci lekár a vygenerovanú objednávku uloží do LIS. Formulár na odporúčanie je uvedený v prílohe č.

Príloha č.2

V idey nezrovnalostí a ich odstránenie

Typ nezhody	Popis akcií	exekútor	Zodpovedný
Porušenie integrity nádoby	Oznámte to hlavnému laborantovi	laboratórny asistent	Senior asistent
Nedostatok pokynov pre výskum v kontajneri	Zdravotný záchranár o tom informuje vedúceho laboranta, ktorý musí telefonicky kontaktovať vedúceho lekára. Sestra tejto inštitúcie	laboratórny asistent	Senior asistent
Rozliatie biologického materiálu do nádoby	1. Oznámte to hlavnému laborantovi 2. Opatrne vyberte všetok obsah z nádoby 3. Vydezinfikujte samotnú nádobu a všetok obsah nádoby, ktorý prišiel do kontaktu s rozliatym biomateriálom.	laboratórny asistent	Senior asistent
Poškodený odporúčací formulár (roztrhnutý, rozliaty kontajner atď.)	1. Zdravotný záchranár, ak je smer čitateľný, prenáša všetky informácie do nového formulára. 2. V prípade nečitateľnosti návodu zdravotnícky záchranár informuje vedúceho laboranta, ktorý kontaktuje starý med. Sestra inštitúcie.	laboratórny asistent	Senior asistent
Rozbité sklenené sklíčka v nádobe	Zdravotný záchranár o tom informuje vedúceho laboranta, ktorý musí telefonicky kontaktovať vedúceho lekára. Zdravotná sestra ústavu a nahlásiť nezrovnalosť	laboratórny asistent	Senior asistent

Žiadny čiarový kód na tube	1. Zdravotný záchranár o tom informuje vedúceho laboranta, ktorý musí telefonicky kontaktovať vedúceho lekára. Zdravotná sestra ústavu a nahlásiť nezrovnalosť. 2. Tento nesúlad zapíše sanitár-laborant do denníka „Zápis manželstva“.	laboratórny asistent	Senior asistent
Neadekvátny formulár odporúčania	1. Zdravotný záchranár o tom informuje vedúceho laboranta, ktorý musí telefonicky kontaktovať vedúceho lekára. Sestra tejto inštitúcie 2. Tento nesúlad zapíše sanitár – laborant do denníka „Zápis manželstva“. 3. Zdravotnícky asistent laborant odošle na druhý deň toto odporúčanie inštitúcii, odkiaľ prišlo, aby lekár odporúčací list prepísal do čitateľnej podoby.	laboratórny asistent	Senior asistent

Príloha č.3

Snímač teploty stroja v chladničke

V tejto prílohe je tiež užitočné poskytnúť formulár denníka, ktorý musí vodič vyplniť.

Nasledujúce prílohy poskytujú formulár na odporúčanie atď.

Pravidlá pre odber, skladovanie a prepravu biomateriálu

Na identifikáciu patogénov pomocou PCR

1.1.1. Biomateriál sa odoberá z predpokladaného biotopu mikroorganizmov a rozvoja infekcie.

1.1.2. Množstvo zozbieraného materiálu by malo byť malé. Nadmerné sekréty, hlien a hnis negatívne ovplyvňujú kvalitu extrakcie DNA a prispievajú k degradácii DNA počas skladovania a prepravy.

1.1.3. Pri zavádzaní biomateriálu odobraného pacientovi sondou s vatovým tampónom alebo kefkou do skúmavky Eppendorf s tlmivým roztokom je potrebné:

Dodržujte sterilitu;

Pred ponorením biomateriálu zozbieraného na tampóne (kefke) do roztoku ho rozotrite na suchú stenu skúmavky, potom tampón (kefku) navlhčite v roztoku a otáčaním sondy dôkladne zmyte všetok materiál zo steny skúmavky a tampónu (kefky);

Ak je to možné, pritlačte tampón k stene skúmavky, vyberte sondu s tampónom (kefkou) a skúmavku uzavrite.

Metódy odberu biomateriálu pre štúdie PCR

1.2.1. Odrezky. Na škrabanie sa používajú jednorazové sterilné sondy, ktoré majú vatový tampón so zvýšenou adsorpciou alebo "kefy", menej často - Volkmannove lyžice, malé ušné lyžičky alebo podobné nástroje s mierne tupými okrajmi. Zbierajte materiál škrabacími pohybmi. Testovaný materiál by mal obsahovať čo najviac epitelových buniek a minimálne množstvo hlienu, krvných nečistôt a exsudátu. Pridajte materiál do sterilnej Eppendorfovej skúmavky s tlmivým roztokom (pozri časť 1.1.).

Škrabanie z cervikálneho kanála: pred odberom škrabania je potrebné odstrániť prebytočný hlien sterilným vatovým tampónom, ošetriť krčok maternice sterilným fyziologickým roztokom. Zaveďte sondu do cervikálneho kanála do hĺbky 0,5 – 1,5 cm, vyhýbajte sa kontaktu so stenami vagíny a pomocou škrabania (nie do krvi) odoberte materiál. Malé množstvo červených krviniek vo vzorke neovplyvňuje výsledok analýzy. V prítomnosti erózie krčka maternice sa materiál odoberá z hranice zdravého a zmeneného tkaniva.

Škrabanie z močovej trubice: vložte sondu do močovej trubice (u mužov - do hĺbky 2-4 cm) a odoberte materiál niekoľkými rotačnými pohybmi. V predvečer, pred odberom materiálu, je povolená provokácia (pikantné jedlo, alkohol atď.). Pred odberom vzorky sa odporúča zdržať sa močenia 1-2 hodiny. V prípade hojného hnisavého výtoku by sa škrabanie malo vykonať najneskôr 15 minút po močení.

Škrabanie spojiviek užite po predbežnej anestézii oka 0,5% roztokom dikaínu. Po otočení viečka odoberte epitelové bunky zo spojovky sondou s vatovým tampónom (alebo očným skalpelom).

Škrabanie z konečníka: zasuňte sondu do konečníka do hĺbky 3-4 cm a rotačným pohybom odoberajte materiál.

1.2.2. Ťahy. Jednorazovou sterilnou sondou s vatovým tampónom alebo kefkou odoberte malé množstvo výtoku (z fornixu pošvy, z hltana, nosohltanu atď.) a preneste ho do sterilnej Eppendorfovej skúmavky s tlmivým roztokom (pozri časť 1.1.).

1.2.3. Krv. Pre štúdie PCR musí byť krv natívny(nie stočený).

Odoberte krv asepticky, venepunkciou, do značkovej skúmavky (2-3 ml) s antikoagulantom EDTA ( heparín sa nesmie používať ako antikoagulancium!), jemne premiešajte jemným prevracaním skúmavky.

Krv s EDTA je biomateriál pre nasledujúce skupiny štúdií:

- genetický výskum(nezáleží na momente odberu krvi).

- identifikácia pôvodcov infekcie(najinformatívnejšie sú vzorky odobraté pri zimnici, zvýšenej teplote, t.j. pravdepodobne pri virémii alebo bakteriémii).

1.2.4. Moč. Do prázdnej sterilnej nádoby s pevne priskrutkovaným viečkom odoberte rannú prvú alebo strednú časť moču v množstve aspoň 10 ml. Ak sa moč odoberá počas dňa, potom by pacient predtým nemal močiť 1,5-3 hodiny.

1.2.5. Spútum. Ráno dezinfikujte ústa a hrdlo (vypláchnite roztokom sódy bikarbóny). Zachyťte spútum do prázdnej sterilnej injekčnej liekovky so širokým hrdlom.

1.2.6. Biopsia. Materiál by sa mal odobrať z oblasti údajného miesta infekčného agens, z poškodeného tkaniva alebo miesta hraničiaceho s poškodením. Bioptickú vzorku vložte do sterilnej Eppendorfovej skúmavky s tlmivým roztokom.

1.2.7. Sliny, žalúdočná šťava, cerebrospinálna tekutina, synoviálna tekutina. Sliny (1-5 ml), žalúdočná šťava (1-5 ml), cerebrospinálny mok (1-1,5 ml) - vložte do prázdnej sterilnej skúmavky (nádoby).

1.2.8. Prostatická šťava. Po masáži prostaty sa šťava odoberá v množstve 0,5-1 ml do prázdnej sterilnej skúmavky (nádoby). Ak nie je možné získať šťavu, ihneď po masáži sa odoberie prvá časť moču v množstve nie viac ako 10 ml (táto časť obsahuje šťavu z prostaty).

1.2.9. Výplachy, bronchoalveolárna laváž (BAL). Sterilný vatový tampón a 5-7 ml fyziologického roztoku sa vypláchnu napríklad z hrotu endoskopu alebo bronchoskopu a 0,5-5 ml preplachu sa umiestni do prázdnej sterilnej skúmavky (nádoby).

1.2.10. Výkaly. Sonda s vatovým tampónom je umiestnená vo vnútri stolice a mierne pootočená, čím sa zachytí malé množstvo materiálu. Potom sa materiál umiestni do sterilnej Eppendorfovej skúmavky s tlmivým roztokom.