Sinusoidne celice (endotelijske celice, Krafe celice, zvezdni in črpalke celice), skupaj s sinusoidnim pretvorkom odseka hepatocitov, tvorijo funkcionalno in histološko enoto.
Endotelijske celice Sinusoids Linse in vsebujejo Fenstra, ki tvori stopnjo pregrade med sinusoidnim in profilom. Knevilske celice so pritrjene na endotelij.
Zvezde celice Jetra se nahajajo v prostoru brez rasle med hepatociti in endotelijskimi celicami. Nezadevani prostor Vsebuje tkivno tekočino, ki te pušča v limfnih žilah portalnih območij. Po povečanju sinusoidnega pritiska se proizvodnja limfe v brezsloni poveča, ki igra vlogo pri oblikovanju ascites s kršitvijo venskega odtoka iz jeter.
Celica uradnika vsebuje posebne membranske receptorje za ligand, vključno z imunoglobulin FC fragmentom in komponente komponente C3B, ki igra pomembno vlogo v predstavitvi antigena.
Krafe celice se aktivirajo v splošnih okužbah ali poškodbah. Izrecno absorbirajo endotoksin in v odzivu povzročajo številne dejavnike, na primer, faktor tumorske nekroze, interleukin, kolagenaza in lizosomsko hidrolazo. Ti dejavniki povečujejo občutek nelagodja in bolezni. Toksični učinek endotoksina je torej posledica izdelkov izločanja celic Kopera, saj je sama nestrupena.
Celica uradnika izloča tudi metabolite arahidonske kisline, vključno s prostaglandini.
Celica uradnika ima specifične membranske receptorje insulina, glukagona in lipoproteinov. Karbohidratski receptor N-acetilglikozamin, manoza in galaktoza je lahko mediator pri pitocitozi nekaterih glikoproteinov, zlasti lizosomskih hidrolasov. Poleg tega bo posredoval absorpcijo imunskih kompleksov, ki vsebujejo IGM.
V jetrih celic ploda Krafe, se izvede funkcija eritroblastoidov. Pripoznavanje in hitrost endocitoze s kopeck celicami so odvisna od ogrevanja, fibronektina, imunoglobulinov in TFTIN - naravnega imunomodulatornega peptida. Ti "jeter sedi" filtrirajo makromolekule različnih velikosti. Skozi ne prenašajo velikih, hilomikronskih trigliceridov, manjših, slabih trigliceridov, vendar lahko ostanki, nasičeni s holesterolom in retinolom, prodrejo v prostor za nesijo. Endotelijske celice so nekoliko drugačne glede na lokacijo v rezalcu. S skeniranjem elektronske mikroskopije je razvidno, da se količina fenoze lahko znatno zmanjša na oblikovanje bazalne membrane; Še posebej svetlo, te spremembe se kažejo v coni 3 pri bolnikih z alkoholizmom.
Sinusoidne endotelijske celice se aktivno odstranijo iz krvnega obtoka makromolekul in majhnih delcev z uporabo receptorje-posredne endocitoze. Prenašajo površinske receptorje za hialuronsko kislino (glavni polisaharidni komponenti vezivnega tkiva), hondroitinixulfat in glikoprotein, ki vsebuje na koncu manoza, kot tudi receptorje tipa II in III na fcigg fragmente in receptorja na lipopolnasaharide beljakovin. Endotelijske celice opravljajo funkcijo čiščenja, odstranjevanje encimov, poškodovanih tkiv in patogenih dejavnikov (vključno z mikroorganizmi). Poleg tega očistijo kri iz uničenega kolagena in vezajo in absorbirajo lipoproteine.
Zvezde jetrnih celic (Celice, ki govorijo maščobe, lipociti, celice ITO). Te celice se nahajajo v razdelku Subedentelial. Vsebujejo dolgo rast citoplazme, od katerih so nekatere tesno povezane z parenhimskimi celicami, medtem ko drugi dosežejo več sinusoidov, kjer lahko sodelujejo pri nadzoru pretoka krvi in \u200b\u200btako vplivajo na portal hipertenzijo. V normalnih jetrih so te celice kot glavni kraj skladiščenja retinoidov; Morfološko, to se kaže v obliki maščobnih kapljic v citoplazmi. Po izbiri teh kapljic so Stard celice postale podobne fibroblastom. Vsebujejo Aktin in Miozin in se zmanjšajo, če so izpostavljeni endotelinu-1 in snovi R. V primeru poškodb hepatocitov, Stard celice izgubijo maščobne kapljice, razlika, selitev na cono 3, pridobijo fenotip, ki spominja na fenotip miofibroblastov in proizvajajo Kolagenski tip I, III in IV ter proizvajajo kolagen tipa I, III in IV, in tudi laminin. Poleg tega prepoznajo celične matrične proteinaze in njihove inhibitorje, na primer, zaviralec tkiva metaloproteinaz (glej poglavje 19). Kolagenizacija prostora Sences vodi do zmanjšanja vstopa v hepatocit substratov, povezanih z beljakovinami.
Celice obrokov. To so zelo premični limfociti - naravni morilci, pritrjeni na endotelijsko površino sinusnoične pretvorbe. Njihove mikrovalovne pečice ali pseudopodia prodrejo skozi endotelinsko redčenje, ki se povezujejo z mikrovili parenhimskih celic v prostoru za nezivo. Te celice živijo dolgo in posodobljeno zaradi kroženja krvnih limfocitov, ki se razlikujejo v sinusoidi. Zaznavajo karakteristične granule in mehurčke s palčkami v centru. Potegnite celice imajo spontano citotoksičnost glede na tumor in okužene z virusom hepatocitov.
Interakcije sinusoidnih celic
Med krtalnimi celicami in endotelijskimi celicami, kot med sinusnimi celicami in hepatociti, obstaja kompleksna interakcija. Aktiviranje celic, ki jih kupoleatialipopolisaharidi zavirajo absorpcijo hialuronske kisline z endotelijskimi celicami. Ta učinek lahko posreduje levkotriene. Cytokine Sinusoidi, ki jih tvorijo celice, lahko spodbujata in zatreti širjenje hepatocitov.
Glavni vir endotoksina v telesuje gram-negativna črevesna flora. Trenutno ni dvoma, da je jetra glavno telo, očistek endotoksina. Endotoksin je zajet predvsemkami Kufera (QC), interakcija z membranskim receptorjemCd. 14. Z receptorjem lahko komunicira kot sam lipopolisaharid. (LPS), torej in njegov kompleks z lipidom A-vezavim Belcom plasma. Interakcija LPS z makrofagi iz jeter sproži kaskado reakcij, ki temeljijo na razvoju in sproščanju citokini in drugi biološko aktivnimediatorji.
Obstaja veliko publikacij o macrofugOV jetra (CK) v zasegu in očistek bakterijskih LP, vendar pa interakcija endotelija z drugimi mesonchmal. Celice, zlasti z perisinusoidal. Celice ITO, praktično ne preučujejo.
Raziskovalna metodologija
Uvedena je bila bela moška podgana, ki tehta 200 g intraperitonealno v 1 ml sterilne raztopine visoko prečiščena liofilizirana Lps. E. coli. sev 0111 v odmerkih 0,5,2.5, 10, 25 in 50 mg / kg. V smislu 0,5, 1, 3, 6, 12, 24, 72 ur in 1, so bili notranji organi odstranjeni pod anestezijo in postavljeni v pufra 10% formalin. Material smo vlili v parafinske bloke. 5 mikronov debelega rezana imunohistokemičnistreptavidin-Biotinovov. Način protiteles za dezin α - gladka mišična Aktina (A-GMA) in jedrski antihigdobro proliferirajoče celice (PCNA, " Dako."). Desmo uporablja kot marker perisinusoidal. Celice ITO, A-GMA - v kakovostiverjame miofibroblasts., PCNA. - proliferirajoče celice. Za odkrivanje endotoksina v jetrnih celicah, uporabljeni prečiščeni anti-R.e-glikolipid. Protitelesa (Inštitut za splošno in klinično patologijo KDO, Moskva).
Rezultati raziskav
Pri odmerku 25 mg / kg in nad 6 urami po uvedbi LPS je opazil smrtonosni šok. Akutni učinek LPS na jetrno tkanino je povzročila aktiviranje celic ITO, ki se je pokazala povečanje njihovega števila. Številka demindoint. Celice se je po injiciranju LPS povečala s 6 h in dosegla maksimum ma na 48-72 h (sl. 1, a, B).
Sl. 1. Oddelke jeter Kry zvočna drevesaLsab. - chenny. protitelesa do des. min. \\ t (Skupina α - Gladcom swenchny Aktina (B), X400 (Ampak, ampak, b)x200 (b).
a - pred uvedbo endotoksina, samski demindoinable. Celice ITO na območju medparja; b.- 72 C.po dajanju endotoksi na: številne demindoinable. Celice ITO; v - 120 h po vstopu ENdotoksin: α - Smart Bocsels. aktin je prisoten samoko v gladkih mišicahkakh plovila.
V 1. Številka demindoint. Celice so se zmanjšalenad kontrolnimi kazalniki. Za v nobenem primeru nismo opazili videza A-GMA-pozitivna v Sinusoyjudah jetra. Notranji pozitivni Nadzor, ko obarvate protitelesa do A-GMA postrežemo za identifikacijo gladkih mišičnih celicžile plovila portalnih poti, ki vsebujejo A-GMA (Sl. 1, \\ t v).Posledično, kljub povečanju števila celic ITO, enega brataučinek L PS ne vodi do transformacije ( transdifferentition.) So v miofibroblastov.
Sl. 2. Oddelki jeterpodgane obdelaneLsab. - Dvorana protitelesa K.PCNA. in - pred uvedbo en dotoksin: samskiprotiferiranje G. patocite., X200; B - 72 H Po uvedbi endotoksina: številni proliferacijski hepatociti, X400.
Povečanje količine demindoint. Celice se je začela znotraj območja portala. Od 6 ur do 24 ur po uvedbi LPS perisinusoidal. Celice so bile najdene samo okoli portalskih poti, tj. V 1. coni Acty nUSA.. V smislu 48-72 ur, ko je bil opazen maksymal Number. demindoint. Pamettok, pojavili so se na drugih območjih Acinus; Kljub temu je bilo večina celic ITO še vedno periportically.
Morda je to posledica dejstva, da periodično Nahaja se KK prvi zajemendotoksin, ki prihaja iz črevesja v portalski veni ali iz sistemskega pretoka krvi. AK. yivirated QC proizvajajo široko paletocitokini, ki se domneva, da se začnejo z aktiviranjem celic ITO in transdifferentition. So v miofibroblastov. Očitno je, da je razlog, zakaj prve emisije citokinov reagirajo v IT celice, ki se nahajajo v bližini aktiviranih makrofagov v jetrih (v 1. Oscinus coni). Vendar pa jih v naši študiji nismo opazovali transdifferentition. v myofibroblasts.in to nakazuje, da lahko Cytokin označil CK in hepatocite, kot dejavnik, ki je že podprl proces transdifferentition.Vendar jih verjetno ne morejo voditi z eno izpostavljenostjo LPS na jetrih.
Povečanje proliferativne aktivnosti celic smo opazili predvsem v 1. coni acinusa. Verjetno to kaže, da so vsi (ali praktično vse) postopki usmerjeni približno- in parakrinalna ureditev medceličnih interakcij nadaljujemo v peripontalnih conah. Povečanje količine proliferiranih celic smo opazili od 24 ur po uvedbi LP; Število pozitivnih celic se je povečalo do 72 ur (največja proliferativna dejavnost, slika 2, a, B).Proliferizirali obeh hepatocitov in sinusničnih celic. Vendar pa slikanjePCNA. ne daje priložnosti za identifikacijo vrste proliferasinusni celice. Po literaturi vodi učinek endotoksina Število QC. Verjamem, da je toizvaja tako na račun širjenja makrofagov jeter in zaradi migracije monocitov montažnih organov. Izmenjeni citokini QC lahko povečajo proliferativno sposobnost celic ITO. Zato je logično domnevati, da so predstavljene prodiferirane celice perisinusoidal. Celice ITO. Povečanje našega števila, ki ga registriramo, je očitno potrebno povečati sintezo rastnih dejavnikov in obnovo medcelične matrike v pogojih škode. To je lahko ena od povezav kompenzacijskih reakcij jetrnih jetrnih reakcij, saj so celice ITO glavni vir komponent medceličnih matriksov, faktorja iz matične celice in rastni faktor hepatocitov, ki sodelujejo v popravilu in diferenciaciji stilelialne jetrne celice. Manjkaenaka transformacija celic ITO v myofibroblasts. Označuje, da ena epizoda endotoksične agresije ni dovolj za razvoj jetrne fibroze.
Tako akutni učinek endetock sina povzroča povečanje števila demindoint. Celice ITO, ki je posredni znak poškodbe jeter. številka perisinusoidal. Celice se očitno povečajo kot posledica njihove širjenja. Enkratno epizodo endotoksične agresije vzrokov aktivacija kamera perisinusoidal. Celice ITO.in ne vodi do njih transdifferentition. V miofibroblastih. V zvezi s tem se lahko domneva, da v aktivacijskih mehanizmih in transdifferentition. Celice ITO so vpletene ne le endotoksin in citokinov, temveč tudi nekatere druge dejavnike medceličnih interakcij.
Literatura.
1. Myata. D.N., Videti E., Decker K. // Nove meje hepatologija. Novosibirsk, 1992.
2. Salakhov i.m., Ipatov a.i., Konev yu.v., Yakovlev M.YU. Obisk Uspehi kršitvenega, BIOL-a. 1998. T. 118, Vol. 1. P. 33-49.
3. Yakovlev m.yu. ObiskKazan. . m. Journal. 1988. 5. P. 353-358.
4. Freudenberg. N.., Piotrovch. J.., Galanos. C.. et. al. // Virhows.Arch. [B]. 1992. Vol.. 61. str. 343-349.
5. Gressner. A.. M.. // HepatogastroNologija.. 1996. Vol. 43. P. 92-103.
6. Schmidt C, Bladt F., Goedecke S. et al. Obisk Narava. 1995. Vol. 373, N 6516. P. 699-702.
7. Wisse. E., Braet F., Luo D. et al. Obisk Toksikol. Patol. 1996.Vol. 24, N 1. P. 100-111.
Medcelularna komunikacija se lahko realizira s tarifoniranjem parakrina in neposrednih stikov celic to-celic. Znana je kot jetrna persinusoidna celica (HPC), ki vzpostavljajo regionalne matične celice nišo in določijo njihovo razlikovanje. HPE HPC ostaja slabo označen po molekularni in celični ravni.
Cilj projekta je bil preučiti interakcije med rat jetrnimi perisinusoidnimi celicami in različnimi matičnimi celicami, kot so mononuklearne celične frakcije človeške umbilične krvi (UCB-MC) in podgana večplastne mezenske strodome mezenchymal (BM-MMSC).
Materiali in metode. Rat BM-MSC in HPC, Human UCB-MC celice so bili izvedeni z uporabo standardnih tehnik. Študirati HPC regulacijo parakrine smo soustvarjali UCB-MC ali BM-MMSC celice s HPC z uporabo Boyden Chambers in Connectionad HPC celice medijev. Eliktivno označene celice so bile soustvarjene in njihove interakcije smo opazili s fluorescentno mikroskopijo kontrasta in imunocitokemije.
Rezultati. V prvem tednu gojenja je bila samodejna influorescenca vitamina A zaradi zmožnosti maščob, ki segajo na PHC. BM-MMSC je pokazal visoko viabilnost v vseh modelih ko-kulture. Po 2-dnevni inkubaciji v kondicionirani medijski ko-kulturi BM-MMSC s HPC smo opazili spremembe v morfologiji MMSC - so se zmanjšale v velikosti, njihovi škripi pa so postali krajši. Izraz α-gladkih mišic Actin in Desmin je bil podoben myOFibroblast - vmesni obliki ITO celice kulture in vitro. Te spremembe bi lahko bile posledica parakrilnega stimulacije s HPC. Najbolj globok učinek HPC na UCB-MC celice je bil opažen v kontaktni komoriji, s čimer je to pomembno za UCB-MC celice, da ustvarijo neposredne celice-cell Celtatis za vzdrževanje njihove sposobnosti preživetja. Nismo opazili celične fuzije med HPC / UCB in HPC / BM-MMSC celicami v soustrovih. V naših nadaljnjih eksperimentih nameravamo študirati rastne dejavnike, ki jih proizvaja HPC za jetrno razlikovanje iz matičnih celic.
Uvod
Posebnega zanimanja med različnimi jetrnimi celicami predstavljajo perisinusoidne celice jeter (celice ITO). Zaradi izločanja rastnih faktorjev in komponent medcelularnega matrika ustvarjajo mikrofuzijo hepatocitov, in v številnih znanstvenih raziskavah, sposobnost železnih jetrnih celic na tvorbo mikroviročenja za nosečnice celice (vključno z hematopoetskim) in vplivom njihovo razlikovanje v hepatocite. Medcelične interakcije teh celičnih populacij se lahko izvede s izločanjem rastnih faktorjev rasti ali neposrednih medceličnih stikov, vendar molekularne in celične podlage teh procesov ostajajo popolnoma neraziskane.
Namen študije.
Študija mehanizmov interakcij celice ITO z hematopoetskim (HSC) in mezenhimskimi (MMSK) matične celice In vitro.
Materiali in metode.
Celice na jetrnih celicah so poudarjene v dveh različnih encimskih metodah. Hkrati je bil stromalni MMSK pridobljen iz podgan kostnega mozga. Mononuklearna frakcija hematopoetskih matičnih celic je označena iz krvi človeške kabla. Vledeni vplivi v celicah ITO smo raziskali med gojenjem MMSK in HSC v mediju, v katerem so se celice ITO povečale, in s skupnim gojenjem celic, ločenih s polprepustno membrano. Učinek medceličnih stikov je bil preučen s soampletiranjem celic. Za boljšo vizualizacijo je bilo vsako populacijo označeno z individualno fluorescentno oznako. Morfologija celic je bila ocenjena s postopki kontrasta in fluorescenčne mikroskopije. Fenotipski znaki kultiviranih celic smo preučevali metode imunocitokemične analize.
Rezultati.
Med tednom, po sprostitvi perisinusoidnih celic, imamo možnost, da se samodejnofluorescence zaradi maščobnega prevoza. Nato se celice preusmerijo na vmesno fazo njihove rasti in kupljene zvezde. V začetnih fazah soustvarjanja celic ITO z MMSC podgane kostnega mozga je preživetja MMSC ostala v vseh izvedbah pridelave. Drugi dan, med gojenjem MMSK v kulturnem mediju celic ITO, je prišlo do spremembe v morfologiji MMSK-a - so se znižale v velikosti, predelani postopek. Izraz alfa-gladke mišice Actin in Desha v MMSK se je povečal, kar je pokazalo svojo fenotipsko podobnost z miofibroblasti - vmesna faza rasti aktiviranih celic ITRO in vitro. Naši podatki kažejo na učinek parakristnih faktorjev, ki jih dodelijo celice ITO na lastnostih MMSK v kulturi.
Na podlagi so-kultiviranja hematopoetskih matičnih celic z ITO celicami, je bilo dokazano, da hematopoetske matične celice obdržijo viabilnost samo z kontaktno so-kultivacijo z ITO celicami. Glede na fluorescentno analizo mešanih pridelkov, pojav fuzije celic različnih populacij ni bila odkrita.
Sklepi. Da bi ohranili sposobnost preživetja izvornih celic za oblikovanje krvi, je odločilen dejavnik prisotnost neposrednih medceličnih stikov z ITO celicami. Paraktinalna uredba je bila opažena le pri gojenju MMSC v hranilničnem mediju, v katerem so se celice ITO povečale. Študija vpliva specifičnih dejavnikov, ki jih generirajo celice ITO na diferenciaciji GSK in MMSK v celični kulturi, naj bi se izvajala v naslednjih študijah.
Shafubullina a.k., Trondina A.A., Shaichutdinova a.r., Kaligin M.S., Gazizov i.m., Rizvanov a.a., Gmerova a.a., Kiyasov a.p.
Gou VPO "Kazanska državna medicinska univerza Zvezne agencije za zdravje in družbeni razvoj"
Na vrhu - shematska predstavitev celice ITO (HSC), ki meji na najbližje hepatocite (PC), pod sinusnimi epitelijskimi celicami jeter (ES). S - Jetra Sinusoid; Kc je Kravostna celica. Na dnu leve - celice ITO v kulturi pod lahkim mikroskopom. Na spodnji desni - elektronski mikroskopiji vam omogoča, da vidite številne maščobne vakuole (L) ITO celice (HSC), v katerih so shranjeni retinoidi.
Celice ITO. (Sinonime: zrnarska kletka Bienenije, celica življenjske črpalke, lipocyte., angleščina Heter Stelte Cell, HSC, celica ITO, ITO celica) - pericitis. vsebovano v dveh različnih državah - mirno in aktiviran. Aktivirane celice ITO. Igrajte glavno vlogo pri oblikovanju rubatova Tkanine med poškodbami jetra.
V nedotaknjene jetra so zvezde celice mirno stanje. V tem stanju imajo celice več, ki pokrivajo sinusoid kapilar . Druga značilnost celice je prisotnost v njihovem citoplaz rezerve vitamin A. (Retinoida) v obliki maščobnih kapljic. Mirna celice ITO je 5-8% števila vseh jetrnih celic.
Povečane celice ITO so razdeljene na dve vrsti: perisinusoidal. (Subedentelial) in intergepatocellular.. Prvi pustimo telo celice in se razteza po površini sinusoida kapilar. Pokrit s tankimi vejami prsta. Perisinusoidni raste so prekrita s kratkimi žilami in imajo karakteristične dolge mikrovalovne pečice, ki še bolj raztezajo na površini endotelijske cevi kapilarne. Intergeplatocelularna raste, premagovanje hepatocitnih plošč in doseganje sosednje sine žage, so razdeljene na več perisinusoidnih rasti. Tako celica ITO v povprečju pokriva malo več kot dveh sosednjih Sinesoidov.
V primeru poškodb na jetrnih celicah se ITO prenese aktivirano stanje. Aktiviran fenotip. značilno za širjenje kemotaksiza , zmanjšanje, izguba retinoidnih rezerv in nastajanja celic, podobnih miofibloblastic. . Aktivirane zvezde jetrnih celic dokazujejo tudi povečano vsebino novega genov. , kot naprimer, ICAM-1. , kemokina. in cytokines. . Aktiviranje označuje začetek zgodnje faze fibrgeneze in pred večjo proizvodnjo ECM. -Belkov. Zaključno uprizoritev jetrnega kupa je značilna ojačana apoptoza Aktivirane celice ITTO, zaradi katerih se njihova količina močno zmanjša.
Za vizualizacijo celic ITO med mikroskopijo se uporablja obarvanje zlaga klorid. . Ugotovljeno je bilo tudi, da je zanesljiv marker za razlikovanje teh celic iz drugih miofibroblastov izraz beljakovin rilin..
Zgodovina [ | ]
V 1876. Karl von Kuver. Opisal sem celice, imenovane "Sternzellen" (Star Cells). Pri slikanju zlata oksid so bili vključki opazni v citoplazmi. Ker so se zmotno po svojih delcih rdečih krvnih celic, zajeti s fagocitozo, je Kuver leta 1898 spremenil svoje poglede na "zvezdno celico" kot ločeno vrsto celic in jih prenašal v kategorijo fagocyt. . V naslednjih letih pa so bili redni opisi celic, podobnih Cochetian "Star Cells". Dodeljena so bila različna imena: intersticijske celice, parazinoidne celice, lipocite, perijis. Vloga teh celic je ostala skrivnost 75 let, medtem ko profesor (Toshio ITO) ni našel perisinusoidni prostor Človeška jetra. Nekatere celice, ki vsebujejo maščobne obloge. ITO jih je imenoval "Shibo-Sesshu Saibo" - Celice brez absorpcije. Zavedajoč se, da so bile vključki maščobe, ki jih proizvajajo celice glikogen. Imel je ime na Shibo-Chobo Saibo - Grasel celice. V