Mga modernong pamamaraan ng diagnostic ng HIV. Mga panuntunan para sa pag-diagnose ng impeksyon sa HIV

/ 16
Ang pinakamasama Pinakamahusay

Ang mga sumusunod ay napapailalim sa pagsusuri para sa impeksyon sa HIV:

2. Mga taong may pinaghihinalaang o nakumpirmang diagnosis: bacterial infection sa mga batang wala pang 13 taong gulang, maramihan at paulit-ulit; candidiasis ng esophagus, trachea, bronchi o baga; cervical invasive cancer; disseminated o extrapulmonary coccidioidomycosis; extrapulmonary cryptococcosis; cryptosporidiosis na may pagtatae sa loob ng 1 buwan o higit pa; cytomegalovirus lesyon ng iba pang mga organo, maliban sa atay, pali, lymph node sa mga pasyente na mas matanda sa 1 buwan; cytomegalovirus retinitis na may pagkawala ng paningin; herpetic infection na nagdudulot ng multifocal ulcers na hindi gumagaling sa loob ng 1 buwan, o bronchitis, pneumonia, esophagitis; histoplasmosis disseminated o extrapulmonary; isosporiasis na may pagtatae nang higit sa 1 buwan; laganap ang tuberculosis o extrapulmonary; pulmonary tuberculosis sa mga matatanda o kabataan na higit sa 13 taong gulang; extrapulmonary tuberculosis; iba pang sakit na dulot ng mycobacteria, maliban sa M. tuberculosis disseminated o extrapulmonary; pulmonya na sanhi ng pneumocystis; progresibong multifocal leukoencephalopathy; salmonella (maliban sa Salmonella typhi) septicemia, paulit-ulit; toxoilase ng utak sa mga batang mas matanda sa 1 buwan; Kaposi's sarcomas; lymphoid interstitial pneumonia sa mga batang wala pang 13 taong gulang; Burkitt's lymphoma; immunoblastic lymphoma; pangunahing utak lymphoma; wasting syndrome, hepatitis B, karwahe ng HBsAg; nakakahawang mononucleosis; paulit-ulit na herpes zoster sa mga taong higit sa 60 taong gulang; mga sakit na nakukuha sa pakikipagtalik.

Sa isang mataas na dalubhasang laboratoryo ay isinasagawa:

a) pagpapasiya ng mga antibodies, antigens at immune complex na nagpapalipat-lipat sa dugo; paglilinang ng virus, pagtuklas ng genomic na materyal at enzymes nito;

b) pagtatasa ng mga function ng cellular link ng immune system. Ang pangunahing papel ay nabibilang sa mga pamamaraan ng serological diagnostic na naglalayong matukoy ang mga antibodies, pati na rin ang mga pathogen antigens sa dugo at iba pang mga biological fluid ng katawan.

Ang pagsusuri para sa mga antibodies sa HIV ay isinasagawa upang:

a) kaligtasan ng mga pagsasalin ng dugo at mga paglipat;

b) pagsubaybay, pagsusuri upang masubaybayan ang paglaganap ng impeksyon sa HIV at pag-aralan ang dinamika ng pagkalat nito sa isang partikular na populasyon;

c) diagnosis ng impeksyon sa HIV, ibig sabihin, boluntaryong pagsusuri ng serum ng dugo ng halos malusog na tao o mga pasyente na may iba't ibang mga klinikal na palatandaan at sintomas na katulad ng impeksyon sa HIV o AIDS.

Ang sistema para sa pagsusuri sa laboratoryo ng impeksyon sa HIV ay batay sa isang tatlong yugto na prinsipyo. Ang unang yugto ay screening, na idinisenyo upang magsagawa ng mga pangunahing pagsusuri sa dugo para sa pagkakaroon ng mga antibodies sa mga protina ng HIV. Ang pangalawang yugto ay referential - pinapayagan nito ang paggamit ng mga espesyal na pamamaraan ng pamamaraan upang linawin (kumpirmahin) ang pangunahing positibong resulta na nakuha sa yugto ng screening. Ang ikatlong yugto - dalubhasa, ay inilaan para sa pangwakas na pag-verify ng presensya at pagtitiyak ng mga marker ng impeksyon sa HIV na natukoy sa mga nakaraang yugto ng mga diagnostic sa laboratoryo. Ang pangangailangan para sa ilang mga yugto ng mga diagnostic ng laboratoryo ay pangunahin dahil sa mga pagsasaalang-alang sa ekonomiya.

Sa pagsasagawa, maraming mga pagsusuri ang ginagamit upang makilala ang mga taong nahawaan ng HIV na may sapat na antas ng katiyakan:

Ang pagsusulit ng ELISA (ELISA) (enzyme-linked immunosorbent assay) para sa pag-detect ng unang antas ay nailalarawan sa pamamagitan ng mataas na sensitivity, bagama't mas kaunting specificity kaysa sa mga sumusunod;

Immune blot (Western-blot), isang napaka-espesipiko at pinakaginagamit na pagsusuri upang makilala ang HIV-1 at HIV-2;

Antigenemia p25-test, epektibo sa mga unang yugto ng impeksyon;

Polymerase chain reaction (PCR).

Sa mga kaso ng mass screening ng mga sample ng dugo, inirerekumenda na subukan ang mga mixtures ng sera mula sa isang pangkat ng mga paksa, na pinagsama-sama sa paraang ang pangwakas na pagbabanto ng bawat sample ay hindi lalampas sa 1:100. Kung positibo ang serum-current mixture, sinusuri ang bawat serum ng positive mixture. Ang pamamaraang ito ay hindi humantong sa pagkawala ng sensitivity sa parehong ELISA at immunoblot, ngunit binabawasan ang mga gastos sa paggawa at ang gastos ng paunang pagsusuri ng 60-80%.

Sa pangunahing serodiagnosis ng HIV infection, ang kabuuang antibodies ay tinutukoy gamit ang screening screening tests - ELISA at agglutination reactions. Sa ikalawang yugto (arbitrasyon), isang mas kumplikadong pagsubok ang ginagamit - isang immunoblot, na nagbibigay-daan hindi lamang upang kumpirmahin o tanggihan ang paunang konklusyon, ngunit gawin din ito sa antas ng pagtukoy ng mga antibodies sa mga indibidwal na protina ng virus.

Naka-link na immunosorbent assay(ELISA) ay ang pangunahing at pinakamalawak na ginagamit na paraan para sa pagtukoy ng mga antibodies sa HIV. Ngunit ang mga disadvantages ng paggamit ng ELISA sa serodiagnosis ng impeksyon sa HIV ay kinabibilangan ng madalas na maling positibong resulta. Kaugnay nito, ang resulta sa ELISA ay hindi batayan para sa konklusyon na ang paksa ay HIV-seropositive. Ito ay dahil sa hindi sapat na paglilinis ng immunosorbent mula sa mga ballast protein; kusang pagbubuklod ng mga serum antibodies sa plastik, kung ang mga lugar nito na hindi inookupahan ng immunosorbent ay hindi sapat na naharang o hindi naharang ng isang ganap na espesyal na neutral na protina; cross-interaction sa HIV proteins ng immunosorbent ng iba't ibang mga protina na nasa dugo ng mga indibidwal na may ilang, mas madalas na autoimmune pathological na mga proseso tulad ng multiple sclerosis, SLE, tuberculosis; na may madalas na donasyon, mga nakakahawang sakit at oncological na sakit, paso, pagbubuntis, paulit-ulit na pagsasalin ng dugo, paglipat ng mga organo, tisyu, pati na rin ang mga taong nasa hemodialysis; na may pagkakaroon ng rheumatoid factor sa dugo, na kadalasang nagdudulot ng mga maling positibong reaksyon ng HIV; ang presensya sa dugo ng mga sinuri na tao ng mga antibodies sa HIV gag proteins at, higit sa lahat, sa p24 protein (malinaw naman, ang mga antibodies ay nabuo sa mga exogenous o endogenous na retrovirus na hindi pa nakikilala). Dahil ang anti-p24 ay na-synthesize nang walang kabiguan sa mga unang yugto ng HIV seroconversion, ang karagdagang immunological monitoring ng mga indibidwal na may mga antibodies sa HIV gag proteins ay isinasagawa, pati na rin ang kanilang pag-alis mula sa donasyon.

Ang sensitivity at specificity ng enzyme immunoassay ay patuloy na tumataas. Bilang resulta, ang ika-apat na henerasyong ELISA ay hindi mababa sa mga kakayahan sa diagnostic nito sa immune blotting at maaaring gamitin hindi lamang sa screening, kundi pati na rin sa confirmatory stage ng pag-diagnose ng HIV infection [Smolskaya T. T., 1997].

Immunoblotting ay ang panghuling paraan ng serological diagnostics, na nagbibigay-daan upang makagawa ng pangwakas na konklusyon tungkol sa HIV-positivity o negatibiti ng paksa.

Mayroong malinaw na ugnayan sa pagitan ng mga resulta ng pag-aaral ng sera sa immunoblot at ELISA - dalawang beses na positibo sa ELISA na may iba't ibang mga sistema ng pagsubok, serum sa 97-98% ng mga kaso pagkatapos ay naging positibo sa HIV sa immunoblot. Kung ang sera ay positibo sa ELISA lamang sa isa sa dalawang sistema ng pagsubok na ginamit, sila ay positibo sa immunoblot lamang sa 4% ng mga kaso. Sa 5% ng mga kaso, kapag nagsasagawa ng confirmatory study sa mga taong may positibong data, ang ELISA immunoblot ay maaaring magbigay ng "hindi tiyak" na mga resulta, at kasama ng mga ito, sa halos 20% ng mga kaso, ang mga antibodies sa HIV-1 gag proteins (p55, p25, p18). ). Ang pagkakaroon ng mga antibodies lamang sa HIV-1 gag proteins ay isang dahilan para sa karagdagang pagsusuri ng serum ng dugo para sa impeksyon sa HIV-2.

Ang pagsusuri ng mga resulta ng immunoblotting ay isinasagawa nang mahigpit alinsunod sa mga tagubilin na nakalakip sa sistema ng pagsubok. Kung walang gabay sa interpretasyon ng mga resulta, dapat gamitin ang pamantayan ng WHO.

Sa pagtanggap ng mga positibong resulta ng pagsusuri sa sangguniang yugto ng pagsusuri sa laboratoryo ng impeksyon sa HIV at isang negatibong resulta ng pag-aaral sa pamamagitan ng paraan ng immune blotting, isang ipinag-uutos na paulit-ulit na pagsusuri ng eksperto ay isinasagawa 6 na buwan pagkatapos ng unang pagsusuri.

Kung ang mga resulta ng immunoblotting 12 buwan pagkatapos ng pag-aaral ng unang sample ay mananatiling negatibo o hindi tiyak, kung gayon sa kawalan ng mga kadahilanan ng panganib, mga klinikal na sintomas o iba pang mga kadahilanan na nauugnay sa impeksyon sa HIV, ang paksa ay tinanggal mula sa obserbasyon ng dispensaryo.

Sa mga serological na pamamaraan, sa kaso ng hindi tiyak na mga resulta, ang immunoblot ay ginagamit bilang isang ekspertong pagsusuri. radioimmunoprecipitation(RIP). Ito ay batay sa paggamit ng mga viral protein na may label na radioactive iodine, at ang mga precipitates ay natukoy gamit ang mga beta counter. Ang mga disadvantages ng pamamaraan ay kinabibilangan ng mataas na halaga ng kagamitan, ang pangangailangan na magbigay ng mga espesyal na silid para sa mga layuning ito.

Ang mga taong na-diagnose na may impeksyon sa HIV ay napapailalim sa patuloy na dynamic na pagsubaybay na may mandatoryong pagsusuri sa laboratoryo tuwing 6 na buwan.

Ang polymerase chain reaction (PCR) ay nagpapakita ng premultiplied nucleotide sequence na partikular para sa genome ng isang partikular na pathogen. Ang hiwalay na multiplikasyon ng isang gene o ang fragment nito, na tinatawag na amplification, ginagawang posible ng PCR na isagawa sa vitro gamit ang enzyme thermostable DNA polymerase. Sa loob ng 2-3 oras, pinapayagan ka ng PCR na makakuha ng milyun-milyong kopya ng isang partikular na seksyon ng virus. Sa panahon ng impeksyon sa HIV, mula sa cellular RNA, kabilang ang RNA ng virus, kung ito ay muling ginawa sa cell o isinama sa genome nito, gamit ang reverse transcription at hybridization na may label na oligonucleotide "probes", isang sapat na dami ng proviral DNA ay nakuha para sa pagsusuri, na natukoy at nailalarawan sa dami , gayundin kaugnay ng pag-aari sa genome ng HIV, gamit ang radioactive o iba pang label ng probe, na nagtatatag ng homology ng DNA at mga sequence ng amino acid na partikular sa virus. Ang sensitivity ng PCR ay ang pagtuklas ng mga viral gene sa isa sa limang libong mga cell.

Ang PCR, kabilang ang quantitative, ay maaari lamang gamitin upang matukoy ang viral load sa plasma upang malutas ang isyu ng pagsisimula ng paggamot sa gamot para sa isang pasyente o pagpapalit ng mga antiretroviral na gamot. Ang PCR ay hindi inirerekomenda para sa pag-diagnose ng impeksyon sa HIV, dahil kahit na ang pinaka-cutting-edge na pamamaraan ng pagbabalangkas at reagents nito ay ginagawang posible upang matukoy ang viral load na hindi mas mababa sa isang tiyak na antas - 50 kopya / ml. At ang pagiging kumplikado ng pag-set up ng PCR at ang mataas na halaga nito (mga $200) ay nagpapawalang-bisa sa malakihang paggamit nito bilang isang paraan ng pang-araw-araw na pagsusuri sa laboratoryo ng impeksyon sa HIV. Kaya, ang PCR ay nananatiling kailangan lamang para sa pagtatasa ng viral load sa plasma sa mga pasyenteng may naitatag nang diagnosis ng HIV infection upang malutas ang isyu ng therapy ng pasyente.

Sa eskematiko, ang mga yugto ng pagsusuri sa laboratoryo ng impeksyon sa HIV ay ipinapakita sa Fig. isa.

kanin. 1. Mga yugto ng pagsusuri sa laboratoryo ng impeksyon sa HIV

Sa panahon ng impeksyon sa HIV, mayroong isang panahon ng "madilim na bintana ng laboratoryo" kapag ang dami ng anti-HIV antibodies ay hindi sapat para sa sensitivity ng mga sistema ng pagsusuri. Ang panahong ito ay mula sa isang linggo hanggang tatlong buwan mula sa sandali ng impeksyon sa HIV, depende sa antas ng sensitivity ng sistema ng pagsubok. Dahil sa hindi pangkaraniwang bagay na ito, ang mga paghihirap ay lumitaw kapag sinusuri ang naibigay na dugo mula sa mga taong nasa nabanggit na panahon ng impeksyon sa HIV. Samakatuwid, sa karamihan ng mga bansa sa mundo, ang isang sistema ay ipinakilala para sa paggamit ng dugo lamang matapos itong maimbak sa loob ng 3-6 na buwan upang magsagawa ng isang ipinag-uutos na muling pagsusuri para sa impeksyon sa HIV ng mga donor ng mga dosis ng dugo at nito. mga bahagi.

Ang yugto ng mga pangunahing pagpapakita ay nailalarawan sa pamamagitan ng aktibidad ng proseso ng pagkopya. Ang nagresultang viremia at antigenemia ay nagiging sanhi ng pagbuo ng mga tiyak na antibodies ng klase ng IgM: anti-p24, anti-gp41, anti-gp120. Ang p24 antigen sa ilan sa mga nahawahan ay maaaring matukoy sa dugo ng ELISA kasing aga ng 2 linggo pagkatapos ng impeksyon at maaaring matukoy hanggang sa ika-8 linggo. Dagdag pa, sa klinikal na kurso ng impeksyon sa HIV, ang pangalawang pagtaas sa nilalaman ng p24 na protina sa dugo ay nabanggit, nahuhulog ito sa panahon ng pagbuo ng yugto ng AIDS.

Ang hitsura ng kumpletong seroconversion, kapag ang isang mataas na antas ng mga tiyak na antibodies ng klase ng IgG sa mga istrukturang protina ng HIV gp41, p24, gpl20, ay naitala sa peripheral na dugo, lubos na pinapadali ang pagsusuri ng impeksyon sa HIV. Karamihan sa mga komersyal na kit ay idinisenyo upang ipahiwatig lamang ang mga naturang antibodies.

Ang mga kahirapan sa pag-detect ng mga antibodies sa mga pasyenteng nahawaan ng HIV ay maaaring lumitaw sa mga panahon ng napakalaking viremia at antigenemia, kapag ang magagamit na mga partikular na antibodies sa dugo ay nagamit upang magbigkis ng mga partikulo ng virus, at ang proseso ng pagkopya ay nauuna sa paggawa ng mga bagong antiviral antibodies.

Sa mga indibidwal na may unang humina na immune system, ang viremia at antigenemia ay lumalabas nang mas maaga at nananatili sa isang mataas na antas hanggang sa resulta ng sakit. Kasabay nito, ang mga naturang pasyente ay may mababang nilalaman ng mga libreng antibodies sa HIV, dahil sa dalawang dahilan - hindi sapat na produksyon ng mga antibodies sa pamamagitan ng B-lymphocytes at antibody binding ng mga virion at natutunaw na mga protina ng HIV, samakatuwid, upang matukoy ang impeksiyon, mga sistema ng pagsubok na may tumaas sensitivity o pagbabago ng mga pamamaraan ng pagsusuri ay kinakailangan, na nagbibigay ng yugto ng pagpapalabas ng mga antibodies mula sa mga immune complex.

Sa kabila ng kasaganaan ng mga tiyak na marker ng impeksyon sa HIV, ang pinakamadalas na tinutukoy ay ang pagkakaroon ng kabuuang antibodies sa mga protina ng HIV. Ang terminong "kabuuan" ay nagpapahiwatig ng pagkakaroon ng dalawang klase ng mga antibodies (IgG at IgM) at isang malawak na hanay ng mga antibodies sa iba't-ibang, pangunahin sa istruktura, mga protina ng HIV.

Pagpapasiya ng CD4 cells. Ang pangunahing tagapagpahiwatig ng klinikal at laboratoryo para sa pag-diagnose ng yugto ng impeksyon sa HIV, ang antas ng pagkasira ng immune system sa mga pasyente sa pang-araw-araw na buhay, ay ang pagpapasiya ng nilalaman ng CD4+ lymphocytes: ang pagbaba sa antas sa ibaba 200 cell/mm3 ay ang pangunahing criterion para sa pag-diagnose ng AIDS. Pinaniniwalaan na ang lahat ng indibidwal na nahawaan ng HIV na may bilang ng CD4+ lymphocyte na 200 cell/mm3 o mas mababa ay nangangailangan ng parehong antiviral therapy at PCP prophylaxis. At bagaman 1/3 ng mga taong nahawaan ng HIV na may CO4+ lymphocyte count na mas mababa sa 200 cell/mm3 ay walang clinical manifestations, ipinakita ng karanasan na nagkakaroon sila ng mga sintomas sa susunod na 2 buwan, kaya lahat sila ay itinuturing na mga pasyente sa AIDS yugto.

Sa kasalukuyan, ang mga bagong diagnostic na teknolohiya ay ginagawang posible upang matukoy ang etiological at pathogenetic na sanhi ng maraming sakit at radikal na nakakaapekto sa mga resulta ng paggamot. Marahil ang pinaka-kahanga-hangang mga resulta ng pagpapakilala ng mga teknolohiyang ito sa klinikal na kasanayan ay nakamit sa larangan ng immunology at diagnostic ng mga nakakahawang sakit.

Ang mga sistema ng pagsubok batay sa enzyme immunoassay at immunochemiluminescent analysis ay ginagawang posible upang makita ang mga antibodies ng iba't ibang klase, na makabuluhang pinatataas ang nilalaman ng impormasyon ng mga pamamaraan ng klinikal, analytical sensitivity at pagtitiyak para sa pagsusuri ng mga nakakahawang sakit. Dapat pansinin na ang pinakamahalagang pagsulong sa pagsusuri ng mga impeksyon ay nauugnay sa pagpapakilala sa pagsasanay sa laboratoryo ng paraan ng reaksyon ng polymerase chain, na itinuturing na "pamantayan ng ginto" sa pagsusuri at pagsusuri ng pagiging epektibo ng paggamot ng isang bilang ng mga nakakahawang sakit.

Para sa pag-aaral, maaaring gumamit ng iba't ibang biological material: serum, plasma ng dugo, pag-scrape, biopsy, pleural o cerebrospinal fluid (CSF). Una sa lahat, ang mga pamamaraan ng pagsusuri sa laboratoryo ng mga impeksyon ay naglalayong makilala ang mga sakit tulad ng viral hepatitis B, C, D, impeksyon sa cytomegalovirus, mga impeksiyon na nakukuha sa pakikipagtalik (gonorrhea, chlamydia, mycoplasma, ureaplasma), tuberculosis, impeksyon sa HIV, atbp.

Ang impeksyon sa HIV ay isang sakit na dulot ng human immunodeficiency virus (HIV), na nagpapatuloy nang mahabang panahon sa mga lymphocytes, macrophage, mga selula ng nervous tissue, na nagreresulta sa isang dahan-dahang progresibong pinsala sa immune at nervous system ng katawan, na ipinakikita ng pangalawang impeksyon, tumor, subacute encephalitis at iba pang mga pathological na pagbabago.

Ang mga causative agent ng impeksyon - mga human immunodeficiency virus ng 1st at 2nd type (HIV-1, HIV-2) - ay nabibilang sa pamilya ng mga retrovirus, isang subfamily ng mabagal na mga virus. Ang mga Virion ay mga spherical particle na may diameter na 100-140 nm. Ang viral particle ay may panlabas na phospholipid shell, na kinabibilangan ng glycoproteins (structural proteins) na may tiyak na molekular na timbang, na sinusukat sa kilodaltons. Sa HIV-1, ito ay gpl60, gpl20, gp41. Ang panloob na shell ng virus, na sumasakop sa core, ay kinakatawan din ng mga protina na may kilalang molekular na timbang - p17, p24, p55 (HIV-2 ay naglalaman ng gpl40, gpl05, gp36, p16, p25, p55).

Ang HIV genome ay naglalaman ng RNA at ang enzyme reverse transcriptase (revertase). Upang ang retrovirus genome ay kumonekta sa genome ng host cell, ang DNA ay unang na-synthesize sa viral RNA template gamit ang reversetase. Ang provirus DNA ay isinama sa genome ng host cell. Ang HIV ay may binibigkas na antigenic variability, na higit na lumampas sa influenza virus.

Sa katawan ng tao, ang pangunahing target ng HIV ay T-lymphocytes, na nagdadala ng pinakamalaking bilang ng mga CD4 receptor sa kanilang ibabaw. Matapos makapasok ang HIV sa cell sa tulong ng reversetase, ang virus ay nag-synthesize ng DNA ayon sa pattern ng RNA nito, na isinama sa genetic apparatus ng host cell (CD4-lymphocytes) at nananatili doon habang buhay sa estado ng isang provirus . Bilang karagdagan sa mga T-lymphocyte helpers, ang mga macrophage, B-lymphocytes, neuroglial cells, bituka mucosa at ilang iba pang mga cell ay apektado. Ang dahilan para sa pagbaba sa bilang ng mga T-lymphocytes (CD4 cells) ay hindi lamang ang direktang cytopathic na epekto ng virus, kundi pati na rin ang kanilang pagsasanib sa mga hindi nahawaang selula. Kasabay ng pagkatalo ng T-lymphocytes sa mga pasyente na may impeksyon sa HIV, ang polyclonal activation ng B-lymphocytes ay nabanggit na may pagtaas sa synthesis ng immunoglobulins ng lahat ng klase, lalo na ang IgG at IgA, at ang kasunod na pag-ubos ng seksyong ito ng immune system. Ang dysregulation ng mga proseso ng immune ay ipinakita din sa pamamagitan ng pagtaas sa antas ng α-interferon, β2-microglobulin, at pagbaba sa antas ng IL-2. Bilang resulta ng disfunction ng immune system, lalo na sa pagbaba ng bilang ng T-lymphocytes (CD4) hanggang 400 cell bawat 1 μl ng dugo o mas kaunti, ang mga kondisyon ay lumitaw para sa hindi nakokontrol na pagtitiklop ng HIV na may makabuluhang pagtaas sa bilang ng mga virion. sa iba't ibang kapaligiran ng katawan. Bilang resulta ng pagkatalo ng maraming bahagi ng immune system, ang isang taong nahawaan ng HIV ay nagiging walang pagtatanggol laban sa mga pathogens ng iba't ibang mga impeksiyon.

Laban sa background ng pagtaas ng immunosuppression, ang mga malubhang progresibong sakit ay bubuo na hindi nangyayari sa isang tao na may normal na gumaganang immune system. Ito ay mga sakit na tinukoy ng World Health Organization (WHO) bilang AIDS marker o AIDS-defining disease.

Mga sakit na tumutukoy sa AIDS

Ang unang pangkat - mga sakit na likas lamang sa malubhang immunodeficiency (antas ng CD4<200). Клинический диагноз ставится при отсутствии анти-ВИЧ-антител или ВИЧ-антигенов.

Ang pangalawang grupo - mga sakit na maaaring bumuo ng parehong laban sa background ng malubhang immunodeficiency, at sa ilang mga kaso nang wala ito.

Samakatuwid, sa mga kasong ito, kinakailangan ang kumpirmasyon ng laboratoryo ng diagnosis.

Unang pangkat:

candidiasis ng esophagus, trachea, bronchi;
extrapulmonary cryptococcosis;
cryptosporidiosis na may pagtatae nang higit sa 1 buwan;
mga lesyon ng cytomegalovirus ng iba't ibang organo maliban sa atay, pali o lymph node sa isang pasyente na higit sa 1 buwan;
impeksyon na dulot ng herpes simplex virus, na ipinakita ng mga ulser sa balat at mauhog na lamad na nagpapatuloy ng higit sa 1 buwan, pati na rin ang bronchitis, pneumonia o esophagitis sa anumang tagal, na nakakaapekto sa isang pasyente sa edad na 1 buwan;
pangkalahatan ang Kaposi's sarcoma sa mga pasyenteng wala pang 60 taong gulang;
brain lymphoma (pangunahing) sa mga pasyenteng wala pang 60 taong gulang;
lymphocytic interstitial pneumonia at/o pulmonary lymphoid dysplasia sa mga batang wala pang 12 taong gulang;
disseminated infection na dulot ng atypical mycobacteria (mycobacteria complex M. avium intracellulare) na may extrapulmonary localization o localization (bilang karagdagan sa mga baga) sa balat, cervical lymph nodes, lymph nodes ng mga ugat ng baga;
pneumocystis pneumonia;
progresibong multifocal leukoencephalopathy;
toxoplasmosis ng utak sa mga pasyente sa edad na 1 buwan.

Pangalawang pangkat:

mga impeksiyong bacterial, pinagsama o paulit-ulit, sa mga batang wala pang 13 taong gulang (higit sa dalawang kaso sa 2 taong pagmamasid): sepsis, pneumonia, meningitis, pinsala sa mga buto o kasukasuan, mga abscess na dulot ng hemophilic bacilli, streptococci;
disseminated coccidioidomycosis (extrapulmonary localization);
HIV encephalopathy (HIV dementia, AIDS dementia);
histoplasmosis na may pagtatae na nagpapatuloy nang higit sa 1 buwan;
isosporiasis na may pagtatae na nagpapatuloy nang higit sa 1 buwan;
Kaposi's sarcoma sa anumang edad;
brain lymphoma (pangunahing) sa mga tao sa anumang edad;
iba pang B-cell lymphomas (maliban sa Hodgkin's disease) o lymphoma ng hindi kilalang immunophenotype: small cell lymphomas (tulad ng Burkitt's lymphoma, atbp.); immunoblastic sarcomas (immunoblastic, malaking cell, diffuse histiocytic, diffuse undifferentiated lymphomas);
disseminated mycobacteriosis (hindi tuberculosis) na may mga sugat bilang karagdagan sa mga baga ng balat, cervical o basal lymph node;
extrapulmonary tuberculosis (na may pinsala sa mga panloob na organo, bilang karagdagan sa mga baga);
salmonella septicemia, paulit-ulit;
HIV-dystrophy (pagkapagod, biglaang pagbaba ng timbang).

Ang talahanayan 1 (tingnan ang sanggunian sa itaas) ay naglilista ng mga sakit na tumutukoy sa AIDS at ang kanilang mga etiological agent.

Maraming klasipikasyon ang AIDS.

Ayon sa bagong klasipikasyon na iminungkahi ng US Centers for Disease Control (Talahanayan 2 - tingnan ang link sa pinagmulan sa itaas), ang diagnosis ng AIDS ay itinatag para sa mga taong may antas ng CD4-lymphocyte na mas mababa sa 200/μL, kahit na sa kawalan ng mga sakit na tumutukoy sa AIDS.

Kasama sa Kategorya B ang iba't ibang mga sindrom, ang pinakamahalaga sa mga ito ay bacillary angiomatosis, oropharyngeal candidiasis, paulit-ulit na vulvovaginal candidiasis, mahirap gamutin, cervical dysplasia, cervical carcinoma, idiopathic thrombocytopenic purpura, listeriosis, peripheral neuropathy.

Antibodies sa HIV-1 at HIV-2 sa dugo

Ang mga antibodies sa HIV-1 at HIV-2 ay karaniwang wala sa serum ng dugo.

Ang pagpapasiya ng mga antibodies sa HIV ay ang pangunahing paraan ng pagsusuri sa laboratoryo ng impeksyon sa HIV. Ang pamamaraan ay batay sa enzyme immunoassay (ELISA) - ang sensitivity ay higit sa 99.5%, ang pagtitiyak ay higit sa 99.8%. Lumilitaw ang mga antibodies sa HIV sa 90-95% ng mga nahawahan sa loob ng 1 buwan pagkatapos ng impeksyon, sa 5-9% - pagkatapos ng 6 na buwan, sa 0.5-1% - sa ibang araw. Sa yugto ng AIDS, ang bilang ng mga antibodies ay maaaring bumaba hanggang sa ganap itong mawala.

Ang resulta ng pag-aaral ay ipinahayag nang husay: positibo o negatibo.

Ang isang negatibong resulta ng pagsusuri ay nagpapahiwatig ng kawalan ng mga antibodies sa HIV-1 at HIV-2 sa serum ng dugo. Ang laboratoryo ay naglalabas ng negatibong resulta sa sandaling ito ay handa na. Sa pagtanggap ng isang positibong resulta - ang pagtuklas ng mga antibodies sa HIV - upang maiwasan ang mga maling positibong resulta sa laboratoryo, ang pagsusuri ay inuulit ng 2 beses pa.

Immunoblotting para sa mga antibodies sa HIV viral proteins sa blood serum

Ang mga antibodies sa HIV viral proteins ay karaniwang wala sa serum ng dugo.

Ang paraan ng ELISA para sa pagtukoy ng mga antibodies sa HIV ay isang paraan ng screening. Sa pagtanggap ng isang positibong resulta, upang kumpirmahin ang pagtitiyak nito, ang paraan ng Western-blot ay ginagamit - kontra-precipitation sa gel ng mga antibodies sa serum ng dugo ng pasyente na may iba't ibang mga viral na protina na sumailalim sa paghihiwalay sa pamamagitan ng molekular na timbang gamit ang electrophoresis at inilapat sa nitrocellulose. Natutukoy ang mga antibodies sa mga viral protein na gp41, gpl20, gpl60, p24, pi8, p17, atbp.

Ayon sa mga rekomendasyon ng Russian Center para sa Pag-iwas at Pagkontrol ng AIDS, ang pagtuklas ng mga antibodies sa isa sa mga glycoproteins gp41, gpl20, gpl60 ay dapat isaalang-alang na isang positibong resulta. Kung ang mga antibodies sa iba pang mga protina ng virus ay napansin, ang resulta ay itinuturing na nagdududa, ang naturang pasyente ay dapat suriin nang dalawang beses - pagkatapos ng 3 at 6 na buwan.

Ang kawalan ng antibodies sa mga partikular na protina ng HIV ay nangangahulugan na ang enzyme immunoassay ay nagbigay ng maling positibong resulta. Kasabay nito, sa praktikal na gawain, kapag sinusuri ang mga resulta ng paraan ng immunoblotting, kinakailangan na magabayan ng mga tagubilin na ibinigay ng kumpanya sa ginamit na "Immunoblotting kit".

Ang paraan ng immunoblotting ay ginagamit para sa pagsusuri sa laboratoryo ng impeksyon sa HIV.

p24 antigen sa serum ng dugo

Ang p24 antigen ay karaniwang wala sa serum ng dugo.

Ang p24 antigen ay ang HIV nucleotide wall protein. Ang yugto ng mga pangunahing pagpapakita pagkatapos ng impeksyon sa HIV ay isang kinahinatnan ng simula ng proseso ng pagkopya. Ang p24 antigen ay lumilitaw sa dugo 2 linggo pagkatapos ng impeksyon at maaaring matukoy ng ELISA sa panahon mula 2 hanggang 8 linggo. Pagkatapos ng 2 buwan mula sa sandali ng impeksyon, ang p24 antigen ay nawawala sa dugo. Sa hinaharap, sa klinikal na kurso ng impeksyon sa HIV, ang pangalawang pagtaas sa nilalaman ng p24 na protina sa dugo ay nabanggit. Ito ay bumagsak sa panahon ng pagbuo ng AIDS. Ang mga kasalukuyang sistema ng pagsubok ng ELISA para sa pag-detect ng p24 antigen ay ginagamit para sa maagang pagtuklas ng HIV sa mga donor ng dugo at mga bata, pagtukoy sa pagbabala ng kurso ng AIDS at pagsubaybay sa patuloy na therapy sa mga pasyente ng AIDS. Ang ELISA ay may mataas na analytical sensitivity, na ginagawang posible na makita ang p24 antigen ng HIV-1 sa serum ng dugo sa isang konsentrasyon ng 5-10 pg/ml at HIV-2 - mas mababa sa 0.5 ng/ml, at pagtitiyak. Gayunpaman, dapat tandaan na ang antas ng p24 antigen sa dugo ay napapailalim sa mga indibidwal na pagkakaiba-iba, na nangangahulugang 20-30% lamang ng mga pasyente ang maaaring makita gamit ang pag-aaral na ito sa maagang panahon pagkatapos ng impeksyon (Rose NR et al., 1997).

Ang mga antibodies sa p24 antigen ng mga klase ng IgM at IgG ay lumilitaw sa dugo mula sa ika-2 linggo, umabot sa pinakamataas sa loob ng 2-4 na linggo at nananatili sa antas na ito sa iba't ibang oras: IgM class antibodies - sa loob ng ilang buwan, nawawala sa loob ng isang taon pagkatapos ng impeksiyon , at ang mga IgG antibodies ay maaaring magpatuloy sa loob ng maraming taon.

Ang algorithm para sa pag-diagnose ng impeksyon sa HIV ay nakasalalay sa yugto ng sakit at nailalarawan sa pamamagitan ng pagbabago sa dinamika ng pagtuklas ng mga antibodies ng iba't ibang klase (Larawan 1, 2 - tingnan ang link sa pinagmulan sa itaas).

Ang resulta ng pag-aaral ay ipinahayag nang husay - positibo o negatibo. Ang isang negatibong resulta ng pagsusuri ay nagpapahiwatig ng kawalan ng mga antibodies sa HIV-1 at HIV-2 at ang p24 antigen sa serum ng dugo.

Ang laboratoryo ay naglalabas ng negatibong resulta sa sandaling ito ay handa na. Sa pagtanggap ng isang positibong resulta - pagtuklas ng mga antibodies sa HIV-1 at HIV-2 at / o p24 antigen - upang maiwasan ang mga maling positibong resulta sa laboratoryo, ang pagsusuri ay paulit-ulit ng 2 beses.

Anuman ang mga resulta ng pagsusulit na nakuha, ang sample ng dugo ng pasyente at ang mga resulta ng 3 mga pagsusuri ay ipinapadala ng laboratoryo sa sentro ng AIDS sa rehiyon upang kumpirmahin ang isang positibong resulta o i-verify ang isang hindi tiyak na resulta. Sa ganitong mga kaso, ang panrehiyong AIDS center ay naglalabas ng huling sagot para sa pag-aaral na ito.

Pagtukoy sa HIV sa pamamagitan ng polymerase chain reaction (qualitatively)

Ang pagtuklas ng HIV sa pamamagitan ng polymerase chain reaction - PCR (qualitatively) ay isinasagawa upang:

paglutas ng mga kaduda-dudang resulta ng immunoblot;
para sa maagang pagsusuri ng impeksyon sa HIV;
pagsubaybay sa pagiging epektibo ng antiviral na paggamot;
pagtukoy sa yugto ng sakit na AIDS (ang paglipat ng impeksyon sa isang sakit).

Sa kaso ng pangunahing impeksyon sa HIV, ginagawang posible ng PCR na paraan upang matukoy ang HIV RNA sa dugo kasing aga ng 10-14 araw pagkatapos ng impeksyon.

Ang resulta ng pag-aaral ay ipinahayag nang husay: positibo o negatibo. Ang isang negatibong resulta ng pagsusuri ay nagpapahiwatig ng kawalan ng HIV RNA sa dugo.

Ang isang positibong resulta - ang pagtuklas ng HIV RNA - ay nagpapahiwatig ng impeksyon sa pasyente.

Pagtukoy sa HIV sa pamamagitan ng polymerase chain reaction (quantitative)

Karaniwang wala ang HIV sa dugo.

Ang direktang quantitative determination ng HIV RNA gamit ang PCR ay nagbibigay-daan sa mas tumpak kaysa sa pagtukoy ng nilalaman ng CD4 cells upang mahulaan ang rate ng pag-unlad ng AIDS sa mga taong nahawaan ng HIV, samakatuwid, upang mas tumpak na masuri ang kanilang kaligtasan. Ang isang mataas na nilalaman ng mga partikulo ng viral ay kadalasang nauugnay sa isang malinaw na paglabag sa katayuan ng immune at isang mababang nilalaman ng mga cell ng CD4. Ang isang mababang bilang ng butil ng virus ay karaniwang nauugnay sa isang mas mahusay na katayuan sa immune at isang mas mataas na bilang ng CD4 cell. Ang nilalaman ng viral RNA sa dugo ay ginagawang posible upang mahulaan ang paglipat ng sakit sa klinikal na yugto. Kapag ang nilalaman ng HIV RNA-1> 74 100 kopya/ml, halos lahat ng mga pasyente ay bumuo ng klinikal na larawan ng AIDS (Senior D., Holden E., 1996).

Ang mga taong may antas ng dugo ng HIV-1>10,000 kopya/mL ay 10.8 beses na mas malamang na magkaroon ng AIDS kaysa sa mga taong may antas ng HIV-1 sa kanilang dugo<10 000 копий/мл. При ВИЧ-инфекции прогноз непосредственно определяется уровнем виремии. Снижение уровня виремии при лечении улучшает прогноз заболевания.

Isang panel ng mga eksperto sa US ang bumuo ng mga indikasyon para sa paggamot ng mga pasyenteng may HIV. Ang paggamot ay ipinahiwatig para sa mga pasyente na may bilang ng CD4 sa dugo<300/мкл или уровнем РНК ВИЧ в сыворотке >20,000 kopya/ml (PCR). Ang pagtatasa ng mga resulta ng antiretroviral therapy sa mga taong nahawaan ng HIV ay isinasagawa sa pamamagitan ng pagbabawas ng antas ng serum HIV RNA.

Sa epektibong paggamot, ang antas ng viremia ay dapat bumaba ng 10 beses sa unang 8 linggo at mas mababa sa limitasyon ng pagtuklas ng pamamaraan (PCR) (<500 копий/мл) через 4-6 месяцев после начала терапии.

Kaya, hanggang ngayon, maraming mga pamamaraan ng pananaliksik ang ipinakilala at ginamit sa klinikal na kasanayan para sa pagsusuri ng impeksyon sa HIV, tulad ng para sa lahat ng iba pang mga impeksyon sa viral. Kabilang sa mga ito, ang nangungunang papel ay ibinibigay sa serological na pag-aaral. Ang mga pangunahing pamamaraan para sa pag-diagnose ng mga impeksyon sa HIV ay ipinakita sa Talahanayan 3 (tingnan ang link sa pinagmulan sa itaas), kung saan nahahati ang mga ito depende sa kahalagahan ng bawat paraan para sa pagtuklas ng mga virus sa apat na antas:

A - ang pagsusulit ay karaniwang ginagamit upang kumpirmahin ang diagnosis;
B - ang pagsusulit ay kapaki-pakinabang sa ilang mga pangyayari para sa pagsusuri ng ilang mga uri ng impeksiyon;
C - pagsubok ay bihirang ginagamit para sa mga layunin ng diagnostic, ngunit ito ay may malaking kahalagahan para sa epidemiological survey;
Ang D - test ay hindi karaniwang ginagamit ng mga laboratoryo para sa mga layuning diagnostic.

Dahil para sa pagsusuri ng mga impeksyon sa viral, bilang karagdagan sa pagpili ng pinakamainam na paraan ng pagsusuri, ito ay pantay na mahalaga upang matukoy nang tama at kunin ang biomaterial para sa pananaliksik, ang Table 4 (tingnan ang link sa pinagmulan sa itaas) ay nagbibigay ng mga rekomendasyon para sa pagpili ng pinakamainam na biomaterial para sa pag-aaral ng impeksyon sa HIV.

Upang masubaybayan ang mga taong nahawaan ng HIV, dapat gamitin ang mga posibilidad ng isang komprehensibong pag-aaral ng immune status - isang dami at functional na pagpapasiya ng lahat ng mga link nito: humoral, cellular immunity at nonspecific na pagtutol sa pangkalahatan.

Sa modernong mga kondisyon ng laboratoryo, ang multi-stage na prinsipyo ng pagtatasa ng immunological status ay kinabibilangan ng pagpapasiya ng isang subpopulasyon ng mga lymphocytes, mga immunoglobulin ng dugo. Kapag sinusuri ang mga tagapagpahiwatig, dapat itong isaalang-alang na ang impeksyon sa HIV ay nailalarawan sa pamamagitan ng pagbawas sa ratio ng CD4 / CD8 T cells na mas mababa sa 1. CD4 / CD8 index 1.5-2.5 - nagpapahiwatig ng normergic state, higit sa 2.5 - nagpapahiwatig ng hyperactivity , mas mababa sa 1.0 - nagpapahiwatig ng immunodeficiency. Gayundin, ang ratio ng CD4/CD8 ay maaaring mas mababa sa 1 sa matinding pamamaga.

Ang ratio na ito ay may pangunahing kahalagahan sa pagtatasa ng immune system sa mga pasyente ng AIDS, dahil ang HIV ay pumipili ng impeksyon at sinisira ang mga CD4 lymphocytes, bilang isang resulta kung saan ang CD4 / CD8 ratio ay bumaba sa mga halaga na mas mababa sa 1.

Ang pagtatasa ng immunological status ay umaasa din sa pagkakakilanlan ng pangkalahatan o "gross" na mga depekto sa sistema ng cellular at humoral immunity: hypergammaglobulinemia (nadagdagang konsentrasyon ng IgA, IgM, IgG) o hypogammaglobulinemia sa terminal stage; pagtaas sa konsentrasyon ng nagpapalipat-lipat na mga immune complex; nabawasan ang produksyon ng mga cytokine; pagpapahina ng tugon ng mga lymphocytes sa antigens at mitogens.

Ang paglabag sa ratio ng mga populasyon sa kabuuang pool ng B-lymphocytes ay katangian ng kakulangan ng humoral immunity. Gayunpaman, ang mga pagbabagong ito ay hindi partikular sa impeksyon sa HIV at maaaring mangyari sa iba pang mga sakit. Sa isang komprehensibong pagtatasa ng isang bilang ng iba pang mga parameter ng laboratoryo, dapat itong isaalang-alang na ang impeksyon sa HIV ay nailalarawan din ng: anemia, lymphopenia at leukopenia, thrombocytopenia, isang pagtaas sa antas ng β2-microglobulin at C-reactive na protina, isang pagtaas sa aktibidad ng mga transaminase sa serum ng dugo.

kabuuang mga pahina: 8

Mga diagnostic sa klinika at laboratoryo ng impeksyon sa HIV may tatlong direksyon:

Pagtatatag ng katotohanan ng impeksyon sa HIV, diagnosis ng impeksyon sa HIV.
Pagtukoy sa yugto ng klinikal na kurso ng sakit at pagkilala sa mga pangalawang sakit.
Prognosis ng pag-unlad ng klinikal na kurso ng sakit, pagsubaybay sa laboratoryo ng pagiging epektibo ng paggamot at mga side effect ng mga antiretroviral na gamot.

1. Pagtatatag ng impeksyon sa HIV, pagsusuri ng impeksyon sa HIV

Upang matukoy ang impeksyon sa HIV, ginagamit ang mga sumusunod na partikular na tagapagpahiwatig: antibodies sa HIV, HIV antigens, HIV RNA at provirus DNA. Ang mga antibodies sa HIV ay tinutukoy ng enzyme immunoassay (ELISA) o immunoblotting, na mahalagang uri ng ELISA. Ang mga antigen (protina) ng HIV ay tinutukoy ng ELISA. Sa tulong ng molecular genetic method ng polymerase chain reaction (PNR) at bDNA, posibleng matukoy ang HIV RNA at provirus DNA. Ang paggamit ng isang karagdagang paraan ng hybridization ng mga nucleic acid na may mga tiyak na DNA probes ay nagbibigay-daan sa iyo upang suriin ang pagtitiyak ng mga pagkakasunud-sunod ng DNA na nakuha sa panahon ng PCR. Sensitivity ng PCR - pagtuklas ng mga viral gene sa isa sa limang libong mga cell.

Sa panahon ng pangunahing impeksyon, ang mga sumusunod na dinamika ng mga marker ng HIV sa dugo ng mga nahawahan ay sinusunod. Sa unang buwan, bilang isang resulta ng pag-activate ng proseso ng pagkopya, mayroong isang matalim na pagtaas sa viral load (nilalaman ng HIV RNA sa plasma), pagkatapos, dahil sa pagpapakalat ng virus at napakalaking impeksyon ng mga target na selula sa dugo at lymph nodes, nagiging posible upang matukoy ang proviral DNA. Ang pinakamahalagang halaga ng diagnostic ay ang katotohanan ng pagtuklas ng provirus DNA na isinama sa genome ng target na cell.

Sinasalamin ng viral load ang tindi ng proseso ng pagtitiklop sa mga nahawaang selula. Sa panahon ng pangunahing impeksiyon, ang antas ng viral load ay iba kapag nahawaan ng iba't ibang mga subtype ng HIV, ngunit ang dynamics ng mga pagbabago nito ay humigit-kumulang pareho. Kaya, kapag nahawahan ng subtype B, halimbawa, kung sa unang buwan pagkatapos ng impeksyon ang halaga ng viral load ay 700 kopya / ml, pagkatapos ay sa ika-2 buwan ay may pagbaba sa 600, sa ika-3 - hanggang 100, sa ang ika-4 - hanggang 50 kopya / ml. Ang ganitong mga dinamika ay sinusunod laban sa background ng isang pagtaas sa nilalaman ng mga tiyak na antibodies sa HIV sa dugo. Ang nilalaman ng proviral DNA sa mga selulang mononuklear ng dugo ng mga pasyenteng nahawaan ng HIV ay nailalarawan sa pamamagitan ng kamag-anak na katatagan sa unang 6 na buwan na may bahagyang pagbabagu-bago sa ilang mga subtype. Kaya, ang RNA at DNA load ay hindi magkapareho.

Sa yugto ng pagpapapisa ng itlog, sa loob ng ilang panahon ay walang nabuong mga tiyak na antibodies sa HIV sa isang halagang sapat upang matukoy ng mga umiiral na pamamaraan ng laboratoryo. Bago ang pagtuklas ng mga antibodies, ang hitsura sa dugo ng protina ng Nef, na pinipigilan ang proseso ng pagtitiklop, at ang istrukturang protina na p24 ay sinusunod sa napakaikling panahon. Ang p24 antigen ay maaaring matukoy sa dugo sa pamamagitan ng enzyme-linked immunosorbent assay na 1-2 linggo pagkatapos ng impeksiyon at maaaring matukoy hanggang sa ika-8 linggo, pagkatapos ay bumababa nang husto ang nilalaman nito. Dagdag pa, sa klinikal na kurso ng impeksyon sa HIV, ang pangalawang pagtaas sa nilalaman ng p24 na protina sa dugo ay nabanggit. Ito ay bumagsak sa panahon ng pagbuo ng AIDS. Ang paglaho ng libre (hindi nakagapos ng mga antibodies) p24 na mga pangunahing protina sa dugo at ang paglitaw ng mga tiyak na antibodies sa mga protina ng HIV ay nagmamarka ng simula ng seroconversion (Fig. 9.6).

Ang Viremia at antigenemia ay nagdudulot ng pagbuo ng mga tiyak na antibodies ng klase ng IgM (anti-p24, anti-gp41, anti-gp120, anti-gp160). Ang mga libreng antibodies ng mga klase ng IgM at IgG sa p24 na protina ay maaaring lumitaw simula sa ika-2 linggo, ang kanilang nilalaman ay tumataas sa loob ng 2-4 na linggo, na umaabot sa isang tiyak na antas, na nananatili sa loob ng mga buwan (IgM) at taon (IgG) (Larawan 9.7 ).

Ang hitsura ng kumpletong seroconversion, kapag ang isang mataas na antas ng mga tiyak na IgG antibodies sa HIV structural protein p24, gp41, gp120, gp160, ay naitala sa peripheral na dugo, lubos na pinapadali ang pagsusuri ng impeksyon sa HIV. Lumilitaw ang mga antibodies sa HIV sa 90-95% ng mga nahawahan sa loob ng 3 buwan pagkatapos ng impeksyon, sa 5-9% - sa panahon mula 3 hanggang 6 na buwan mula sa sandali ng impeksyon, at sa 0.5-1% - sa ibang araw.

Sa kabila ng katotohanang huling lumilitaw ang mga antibodies sa HIV, ang pangunahing tagapagpahiwatig ng diagnostic ng laboratoryo sa ngayon ay ang pagtuklas ng mga tiyak na antibodies sa pamamagitan ng ELISA at immunoblotting.

Ang mga datos na ipinakita sa Talahanayan 9.2 [ipakita] at 9.3 [ipakita] , malinaw na nagpapakita ng mataas na sensitivity ng modernong ELISA test system sa pagtuklas ng mga antibodies sa HIV, na lumalampas sa sensitivity ng immunoblotting. Sa ilang mga kaso, kapag nakatanggap ng pangunahing positibong resulta sa ELISA, maaari itong makumpirma sa immunoblotting pagkatapos lamang ng 2-3 linggo.

Talahanayan 9.3. Isang halimbawa ng pagsubaybay sa seroconversion (ayon kay H. Fleury, 2000)
Sandali ng kahulugan	p24 antigen, pg/ml	Antibodies sa mga protina ng HIV
		ELISA, OD arr/OD cr **			Immunoblotting
		HIV DUO	screen ng gen	Uniform	Immunoblotting
Pasyente 1
Pangunahin	17	1,24	mas mababa sa 1	mas mababa sa 1	*
Pagkatapos ng 4 na araw	67	1,36	1,85	mas mababa sa 1	-
Sa 7 araw	*	2,33	6,84	mas mababa sa 1	-
Pagkatapos ng 2 araw	*	6,77	15,0	4,8	gp160
Pasyente 2
Pangunahin	400	13	mas mababa sa 1	mas mababa sa 1	-
Sa loob ng 5 araw	450	18	2,11	mas mababa sa 1	-
Pagkatapos ng 10 araw	*	33	12,19	2,9	gp160
Tandaan: * - hindi natukoy ** - ang ratio ng optical density ng pinag-aralan na serum sample sa kritikal (threshold) na halaga ng optical density

Kapag sinusuri ang mga pasyenteng may HIV infection (HIV-infected) gamit ang immunoblotting test system ng mga nangungunang kumpanya sa mundo, ang mga antibodies sa gp160 at p24/25 ay nakikita sa lahat ng kaso, ang mga antibodies sa iba pang mga protina ay nakita sa 38.8-93.3% ng mga kaso (Talahanayan 1). ) 9.4 [ipakita] ).

Ang mga kahirapan sa pag-detect ng mga antibodies sa mga pasyenteng may impeksyon sa HIV ay maaaring lumitaw sa mga panahon ng napakalaking viremia at antigenemia, kapag ang mga umiiral na partikular na antibodies sa dugo ay nauugnay sa mga partikulo ng virus, at ang proseso ng pagkopya ay nauuna sa paggawa ng mga bagong antiviral antibodies. Ang sitwasyong ito ay maaaring dumating at umalis sa panahon ng nakakahawang proseso.

Sa mga pasyente na may unang humina na immune system, ang viremia at antigenemia ay lumilitaw nang mas maaga at nananatili sa isang mataas na antas hanggang sa resulta ng sakit. Ang mga naturang pasyente ay may mababang nilalaman ng mga libreng antibodies sa HIV, dahil sa dalawang dahilan - hindi sapat na produksyon ng mga antibodies ng B-lymphocytes at pagbubuklod ng mga antibodies sa pamamagitan ng mga virion at natutunaw na mga protina ng HIV, samakatuwid, upang matukoy ang impeksiyon, mga sistema ng pagsubok na may tumaas na sensitivity o pagbabago ng Kinakailangan ang mga pamamaraan ng pagsusuri na kinabibilangan ng yugto ng pagpapalabas ng antibody mula sa mga immune complex.

Kadalasan, ang pagbawas sa nilalaman ng mga antibodies sa HIV para sa mga ipinahiwatig na dahilan ay nangyayari sa yugto ng terminal, kapag ang mga antibodies sa HIV sa serum ng hiwa ay maaaring hindi makuha ng mga pamamaraan ng immunoassay ng enzyme, o ng immunoblotting (Western blot). Bilang karagdagan sa paglitaw ng mga tiyak na antibodies sa HIV, ang immune response sa unang 4 na buwan ay nailalarawan sa pamamagitan ng pagbaba sa nilalaman ng mga nahawaang CD4+ sa dugo at pagtaas ng mga CD8+ na selula. Dagdag pa, ang nilalaman ng mga cell na nagdadala ng mga CD4 at CD8 na mga receptor ay nagpapatatag at nananatiling hindi nagbabago sa loob ng ilang panahon. Ang pagtaas sa nilalaman ng CD8-lymphocytes ay isang proteksiyon na reaksyon, dahil. Ang cell-dependent cytotoxicity ay natanto ng CD8+-lymphocytes, na naglalayong sirain ang mga cell na nahawaan ng HPV. Sa una, ang mga cytotoxic lymphocytes (CTLs) ay tumutugon sa Nef regulatory protein ng virus, na gumaganap ng mahalagang papel sa pagbabawas ng viral (RNA) load sa plasma ng isang taong nahawaan ng HIV sa mga unang buwan. Pagkatapos ang tugon ng CTL ay nabuo sa iba, kasama. mga istrukturang protina ng HIV, bilang isang resulta kung saan, 12 buwan pagkatapos ng impeksyon, ang cptotoxic na epekto ay tumataas nang malaki.

Mga scheme para sa pagsusuri sa laboratoryo ng impeksyon sa HIV

Isinasaalang-alang ang ibinigay na dinamika ng mga tiyak na marker ng impeksyon sa HIV, sa pagsasagawa ito ay ipinapayong sumunod sa mga sumusunod na scheme para sa mga diagnostic ng laboratoryo sa mga matatanda (Larawan 9.8-9.10).

Ang mga scheme ay sumasalamin sa tatlong pangunahing yugto ng pangunahing pagsusuri sa laboratoryo ng impeksyon sa HIV:

Screening.
Sanggunian.
Dalubhasa.

Ang pangangailangan para sa ilang mga yugto ng mga diagnostic ng laboratoryo ay pangunahin dahil sa mga pagsasaalang-alang sa ekonomiya. Kaya, halimbawa, ang gastos ng pagsasagawa ng isang ekspertong pag-aaral sa tulong ng mga domestic test system sa pamamagitan ng immunoblotting ay hanggang 40 US dollars, ang screening (ni ELISA) ay humigit-kumulang 0.2, iyon ay, ang ratio ay 1:200.

Sa unang yugto (Larawan 9.8), ang mga antibodies sa HIV ay tinutukoy sa mga paksa gamit ang isang enzyme immunoassay test system na idinisenyo upang makita ang mga antibodies sa parehong uri ng virus - HIV-1 at HIV-2.

Gumagamit ang mga tagagawa sa mga iminungkahing sistema ng pagsubok ng isang viral lysate, mga recombinant na protina, mga sintetikong peptide bilang isang antigenic na batayan. Ang bawat isa sa mga nakalistang carrier ng antigenic determinants ng HIV ay may sariling mga pakinabang at disadvantages. Samakatuwid, kapag pumipili ng mga sistema ng pagsubok na humigit-kumulang pantay na halaga, ang mga kit na may pinakamataas na sensitivity (mas mabuti 100%) ay dapat na mas gusto. Sa mga sistema ng pagsubok na may parehong gastos at sensitivity, ipinapayong tumuon sa mga may pinakamataas na pagtitiyak.

Batay sa virus lysate, nilikha ang mga unang sistema ng pagsubok para sa pagsusuri sa laboratoryo ng impeksyon sa HIV. Noong dekada 80, ang mga naturang sistema ng pagsubok ay nailalarawan sa pamamagitan ng isang sensitivity na mas mababa sa 100% at mababang pagtitiyak, na ipinakita ng isang malaking bilang (hanggang sa 60%) ng mga maling positibong resulta.

Sa panahon ng pagbuo ng isang virion sa isang kultura ng mga lymphocytes, ang sobre nito ay nilikha mula sa panlabas na lamad at samakatuwid ay naglalaman ng mga antigen ng pangunahing histocompatibility complex ng mga klase I at II. Ang sitwasyong ito ay nagdudulot ng mga maling positibong reaksyon sa kaganapan na ang mga antibodies sa histocompatibility alloantigens ay naroroon sa dugo ng mga pasyente.

Nang maglaon, upang makuha ang virus, iminungkahi na gumamit ng isang kultura ng mga macrophage, kung saan ang mga particle ng viral ay nabuo nang nakararami sa intracellularly sa pamamagitan ng pag-usbong hindi mula sa panlabas na lamad ng cell, ngunit mula sa mga lamad ng endoplasmic reticulum. Binawasan ng teknolohiyang ito ang bilang ng mga maling positibong resulta.

Kinikilala ang enzyme immunoassays bilang isa sa mga pinakamahusay sa mga tuntunin ng pinakamahalagang katangian - sensitivity at specificity - bilang bahagi kung saan isang kumbinasyon ng isang purified viral lysate na may synthetic peptides, na kung saan ay ang pinaka-antigen-significant na mga rehiyon ng mga protina ng virus, o recombinant proteins, ay ginagamit.

Ang sensitivity ng sistema ng pagsubok ay nakasalalay din sa mga katangian ng iba pang mga bahagi ng mga kit. Kaya, ang mga sistema ng pagsubok na gumagamit ng mga conjugates na kumikilala ng mga antibodies hindi lamang ng klase ng IgG, kundi pati na rin ng IgM at IgA, ay ginagawang posible upang matukoy ang isang mas maagang yugto ng seroconversion. Tila nangangako na gumamit ng mga sistema ng pagsubok na maaaring sabay na matukoy ang parehong antiviral antibodies at ang p24 antigen, na ginagawang mas maaga ang pagsusuri sa laboratoryo ng impeksyon sa HIV.

Ang unang positibong resulta ay dapat suriin muli sa pamamagitan ng muling pagsusuri sa sample sa parehong sistema ng pagsubok, ngunit mas mabuti sa ibang batch at ng ibang laboratory assistant. Kung ang isang negatibong resulta ay nakuha sa panahon ng pangalawang pagsusuri, ang pagsusuri ay isinasagawa sa pangatlong beses.

Matapos makumpirma ang isang positibong resulta, ipinapayong kumuha muli ng dugo at suriin ito para sa mga antibodies sa HIV bilang ang pangunahin. Ang paulit-ulit na pag-sample ng dugo ay nakakatulong upang maiwasan ang isang error na dulot ng hindi tumpak na pag-label ng mga tubo at pagsagot sa mga form ng referral.

Ang positibong serum sa yugto ng screening ay ipinapadala para sa mga sangguniang pag-aaral na isinagawa gamit ang dalawa o tatlong lubos na tiyak na mga sistema ng pagsubok sa ELISA. Sa kaso ng dalawang positibong resulta, ang isang ekspertong pag-aaral ay isinasagawa sa pamamagitan ng immunoblotting.

Ang paggamit ng enzyme-linked immunosorbent assays sa reference diagnostics, na maaaring magamit upang pag-iba-ibahin ang mga partikular na antibodies sa HIV-1 at HIV-2, ay nagpapadali sa karagdagang trabaho at nagbibigay-daan sa iyo upang agad na suriin ang isang positibong sample sa yugto ng eksperto gamit ang naaangkop na immunoblotting ( HIV-1 o HIV-2) .

Ang opinyon ng eksperto sa laboratoryo sa impeksyon sa HIV ay ibinibigay lamang batay sa positibong resulta ng Western blot. Kapag nagsasagawa ng mga diagnostic ng eksperto, kinakailangang gamitin ang nomenclature ng mga gene at gene products ng HIV na iminungkahi noong 1990 ng WHO expert group (Talahanayan 9.5 [ipakita] ).

Ang pagtitiyak ng mga banda sa immunoblot ay dapat na masuri nang mabuti at maingat, gamit ang mga resulta ng mga pag-aaral ng control sera (positibo at negatibo), na isinasagawa kasabay ng pag-aaral ng mga eksperimentong sample, at isang immunoblot sample na may pagtatalaga. ng mga protina ng HIV (nakalakip ng tagagawa sa sistema ng pagsubok). Ang interpretasyon ng mga resulta na nakuha ay dapat isagawa alinsunod sa mga tagubilin na nakalakip sa sistema ng pagsubok. Bilang isang patakaran, ang criterion para sa pagiging positibo ay ang ipinag-uutos na pagkakaroon ng mga antibodies sa dalawang protina (precursor, panlabas o transmembrane) na naka-encode ng env gene, at ang posibleng pagkakaroon ng mga antibodies sa mga produkto ng dalawang iba pang istrukturang HIV genes - gag at pol ( Talahanayan 9.6 [ipakita] ).

Talahanayan 9.6. Pamantayan sa interpretasyon para sa mga resulta ng immunoblot para sa HIV-1 at HIV-2 (WHO, 1990)
Resulta	HIV-1	HIV-2
Positibo	+/- pol bands +/- gag stripes	2 lane env (precursor, outer gp o transmembrane gp) +/- pol bands +/- gag stripes
Negatibo	Kakulangan ng mga partikular na banda ng HIV-1	Walang mga partikular na banda sa HIV-2
Hindi sigurado		Ang iba pang mga profile ay hindi nakikita bilang positibo o negatibo

Sa kaso ng pagkuha ng isang kahina-hinalang resulta, kinakailangang gamitin ang listahan ng mga rekomendasyon para sa panghuling paglilinaw ng mga resulta ng immunoblotting (Talahanayan 9.7 [ipakita] ).

Talahanayan 9.7. Mga Rekomendasyon para sa Depinitibong Paglilinaw ng Walang Katiyakang Resulta ng Immunoblotting (WHO, 1990)
Ang pagkakaroon ng mga banda na nauugnay sa mga protina ng HIV	Interpretasyon ng resulta, karagdagang mga aksyon
HIV-1
P17 lang

P24 at gp160 lang	Ang gayong hindi pangkaraniwang larawan ay maaaring mangyari sa simula ng seroconversion. Ang sample ay dapat na muling suriin kaagad. Sa kaso ng pagkuha ng parehong profile, kinakailangan na kumuha ng pangalawang sample para sa pagsubok sa immunoblotting 2 linggo pagkatapos kumuha ng unang sample
Iba pang mga profile	Ang mga profile na ito (gag at/o pol na walang env) ay maaaring magpahiwatig ng seroconversion o hindi partikular na mga reaksyon.
HIV-2
p16 lang	Maaaring uriin bilang negatibo, hindi nangangailangan ng karagdagang mga kahulugan
I lane env may o walang gag/roll	Ang parehong sample ay dapat muling masuri gamit ang ibang batch ng mga reagents.
P24 o gp140 lang	Ang hindi pangkaraniwang profile na ito ay maaaring mangyari nang maaga sa seroconversion. Ang sample ay dapat na muling suriin kaagad. Sa kaso ng pagkuha ng parehong profile, 2 linggo pagkatapos kumuha ng unang sample, ang pangalawang sample ay dapat kunin para sa pagsubok sa immunoblotting
Iba pang mga profile	Ang mga profile na ito (gag at/o pol na walang env) ay maaaring magpahiwatig ng seroconversion o hindi partikular na mga reaksyon.

Ayon sa mga rekomendasyon ng Russian Scientific and Methodological Center para sa Pag-iwas at Pagkontrol ng AIDS, ang isang positibong resulta ay isinasaalang-alang kung mayroong mga antibodies sa hindi bababa sa isa sa mga protina na gp41, gp120, gp160 kasama ng mga antibodies sa iba pang partikular na HIV-1 protina o wala ang mga ito. Ang mga rekomendasyong ito ay batay sa karanasan sa sera mula sa mga bata mula sa nosocomial foci, kung saan ang mga antibodies sa isa lamang sa mga viral envelope na protina ay madalas na nakita.

Ang pangunahing bahagi ng unang napagmasdan na mga pasyente na seropositive sa ELISA ay kabilang sa yugto ng persistent generalized lymphadenopathy (PGL) o sa asymptomatic phase. Samakatuwid, sa isang immunoblot (nitrocellulose strip kung saan ang mga protina ng HIV ay hindi kumikilos), ang sumusunod na kumbinasyon ng mga antibodies sa HIV-1 ay karaniwang tinutukoy: mga antibodies sa mga protina ng sobre na gp160, gp120 at gp41 na naka-encode ng env gene, kasama ng mga antibodies sa ang p24 core proteins (protein nucleocapsid na naka-encode ng gag gene) at p31/34 (endonuclease na naka-encode ng pol gene).

Ang mga positibong reaksyon na may lamang gag at/o pol na mga protina ay maaaring mangyari sa unang bahagi ng seroconversion at nagpapahiwatig din ng impeksyon na dulot ng HIV-2 o isang hindi partikular na reaksyon.

Kung ang isang kaduda-dudang resulta ay nakuha, posible na gumamit ng iba't ibang pamamaraan ng pamamaraan upang linawin ang katotohanan ng impeksyon sa HIV.

Depende sa mga teknikal na kakayahan (availability ng diagnostic kit at reagents, kagamitan na may espesyal na kagamitan at pagsasanay ng mga tauhan), ang ekspertong laboratoryo ay nagsasagawa ng karagdagang diagnostic na pag-aaral (Fig. 9.10).

Sa ilang mga kaso, ipinapayong gumamit ng mga molecular genetic na pamamaraan upang matukoy ang mga genetic sequence ng HIV sa serum, blood lymphocytes, o lymph node punctures. Ang pagpapatunay ng pagiging tiyak ng mga pagkakasunud-sunod ng DNA na nakuha ng PCR ay maaaring isagawa sa pamamagitan ng hybridization ng mga nucleic acid na may mga tiyak na DNA probes.

Ang mga pamamaraan ng Radioimmunoprecipitation (RIP) at indirect immunofluorescence (IFl) ay maaari ding gamitin para sa panghuling pag-verify ng sera na may mga kaduda-dudang resulta ng immunoblot.

Ang pagtuklas ng HIV RNA sa plasma sa pamamagitan ng qualitative o quantitative na pamamaraan ay hindi makabuluhan para sa diagnosis ng HIV infection. Ang ganitong resulta ay dapat kumpirmahin ng mga karaniwang pamamaraan, tulad ng immunoblotting, 2-4 na buwan pagkatapos makatanggap ng paunang kaduda-dudang o negatibong tugon.

Ang paghihiwalay ng HIV sa cell culture ay ang tunay na katotohanan. Gayunpaman, ang pamamaraan ay kumplikado, mahal at ginagawa lamang sa mga espesyal na kagamitan sa mga laboratoryo ng pananaliksik.

Ang nilalaman ng mga cell ng CD4+ sa dugo ay isang hindi tiyak na tagapagpahiwatig, gayunpaman, sa mga kontrobersyal na kaso (ELISA "+", immunoblot "-", ang pagkakaroon ng mga klinikal na palatandaan ng impeksyon sa HIV / AIDS), maaari itong magamit bilang isang gabay para sa paggawa ng isang dalubhasang desisyon. Kung ang laboratoryo ay may kakayahang magsagawa lamang ng immunoblotting, dapat sundin ang mga rekomendasyong ibinigay sa Talahanayan 1. 9.7 at sa fig. 9.9.

Ang mga tao na ang sera ay may kaduda-dudang (indeterminate) na nagreresulta sa isang ekspertong pagsusuri, maliban sa mga kaso ng pagtuklas ng mga antibodies lamang sa p17 (HIV-1) o p16 (HIV-2), ay dapat muling suriin sa loob ng 6 na buwan (pagkatapos ng 3 buwan). Sa kaso ng totoong impeksyon sa HIV, pagkatapos ng 3-6 na buwan, ang isang "positibong" trend ay sinusunod sa spectrum ng mga antibodies - karagdagang pagbuo ng mga antibodies sa iba pang mga protina ng virus. Ang isang huwad na reaksyon ay nailalarawan sa pamamagitan ng pananatili ng isang kahina-hinalang pattern ng immunoblot sa loob ng mahabang panahon o ang pagkawala ng mga kahina-hinalang banda. Kung, pagkatapos ng tinukoy na yugto ng panahon, ang mga resulta ng paulit-ulit na immunoblotting ay negatibo o nananatiling may pagdududa, kung gayon sa kawalan ng mga kadahilanan ng panganib, klinikal na sintomas, o iba pang mga kadahilanan na nauugnay sa impeksyon sa HIV, ang tao ay maaaring ituring na seronegative para sa mga antibodies sa HIV- 1 at HIV-2.

Ang mga maling positibong resulta dahil sa nilalaman sa dugo ng mga pasyente ng antibodies sa alloantigens ng histocompatibility, na bahagi ng HIV envelope, ay lumilitaw sa immunoblot sa anyo ng mga banda sa antas ng gp41 at gp31. Ang mga sanhi ng iba pang mga di-tiyak na reaksyon (halimbawa, sa p24, madalas na matatagpuan sa mga indibidwal na may mga proseso ng autoimmune) ay hindi pa nilinaw.

Ang pagpapabuti ng teknolohiya para sa produksyon ng mga sistema ng pagsubok ng ELISA ay naging posible upang makamit ang mataas na sensitivity - hanggang sa 99.99%, habang ang sensitivity ng paraan ng immunoblotting ay 97%. Samakatuwid, ang isang negatibong resulta ng immunoblot na may positibong resulta ng ELISA ay maaaring magpahiwatig ng isang paunang panahon ng seroconversion na nailalarawan sa pamamagitan ng mababang antas ng mga partikular na antibodies. Samakatuwid, kinakailangang ulitin ang pag-aaral pagkatapos ng 1.5-2 na buwan, iyon ay, ang haba ng oras na kinakailangan upang makumpleto ang seroconversion, upang makamit ang isang konsentrasyon ng mga tiyak na antibodies sa dugo na sapat upang matukoy ng immunoblotting.

Ang isang positibong resulta (mga resulta) ng pag-aaral sa sanggunian o tanging yugto ng screening ng pagsusuri sa laboratoryo ng impeksyon sa HIV, iyon ay, isang positibong resulta sa anumang enzyme immunoassay test system, sa huli ay hindi nakumpirma ng mga ekspertong pamamaraan, ay binibigyang-kahulugan bilang pagkakaroon ng cross -mga reaktibong antibodies sa dugo ng mga nasuri na antibodies. Ang cross-reactivity ay tumutukoy sa pagbubuklod ng mga antibodies sa hindi partikular na mga site sa mga protina ng HIV o peptides na ginagamit bilang antigenic base sa sistema ng pagsubok kung saan nakakuha ng positibong resulta.

Sa kawalan ng immunodeficiency at mga klinikal na palatandaan ng impeksyon sa HIV, ang mga naturang indibidwal ay itinuturing na seronegative para sa mga antibodies sa HIV at dapat na alisin sa pagkakarehistro.

Ang panghuling pagsusuri ng impeksyon sa HIV ay itinatag lamang batay sa lahat ng data ng klinikal, epidemiological at laboratoryo. Ang dumadating na manggagamot lamang ang may karapatang ipaalam sa pasyente ang diagnosis ng impeksyon sa HIV.

Ang pangunahing paraan ng confirmatory (eksperto) na pagsusuri sa laboratoryo ng impeksyon sa HIV ay immunoblotting. Gayunpaman, dahil sa mas mababang sensitivity nito kumpara sa ELISA, ang ilang mga mananaliksik ay nagmungkahi ng paggamit ng isang kumbinasyon ng ilang mga sistema ng pagsubok para sa huling pagpapasiya ng pagkakaroon ng mga tiyak na antibodies sa HIV. Halimbawa, G. van der Groen et al. nagmungkahi ng alternatibo sa paraan ng immunoblotting para sa pagsusuri ng mga positibong resulta ng yugto ng screening ng pagsusuri sa laboratoryo ng impeksyon sa HIV. Ito ay nagsasangkot ng pag-aaral ng materyal na kahanay sa tatlong mga sistema ng pagsubok, na batay sa iba't ibang mga pamamaraan para sa pag-detect ng mga tiyak na antibodies sa HIV (ilang mga variant ng ELISA, agglutination reaction) gamit ang mga antigen ng iba't ibang kalikasan. Nagawa ng mga may-akda ang mga ganitong kumbinasyon ng mga sistema ng pagsubok, ang paggamit nito ay nagbibigay ng 100% sensitivity at specificity kung ihahambing sa mga resulta na nakuha sa immunoblotting.

Ang mababang halaga ng pamamaraang ito ng mga diagnostic ng eksperto ay isang walang alinlangan na kalamangan, gayunpaman, ang kakulangan ng impormasyon kung saan ang mga tiyak na protina ng virus ay may mga antibodies sa dugo ng pasyente ay hindi nagpapahintulot sa pagtatasa ng pagtitiyak ng reaksyon sa bawat indibidwal na kaso, pati na rin bilang pagsubaybay sa mga pagbabago sa spectrum ng mga antibodies sa isang maagang yugto ng seroconversion.

Ang pagsusuri sa laboratoryo ng impeksyon sa HIV sa mga batang ipinanganak mula sa mga ina na nahawaan ng HIV ay may sariling mga katangian. Mula sa sandali ng kapanganakan, sa loob ng mahabang panahon (hanggang 15 buwan), ang maternal antibodies sa HIV ay maaaring magpalipat-lipat sa dugo ng naturang mga bata. Tanging ang mga immunoglobulin ng klase ng IgG ang tumagos sa placental barrier, samakatuwid, ang pagkakakilanlan ng mga HPV-specific na mupoglobulin ng mga klase ng IgM at IgA sa isang bata ay maaaring kumpirmahin ang impeksyon, ngunit ang isang negatibong resulta ay hindi maaaring magpahiwatig ng kawalan ng HIV.

Ang mga batang wala pang 1 buwan ay wala pang HPV replication, at ang PCR ang tanging paraan ng pag-verify. Ang pagpapasiya ng p24 antigen sa mga batang mas matanda sa 1 buwan ay isa ring paraan ng pagkumpirma.

Ang kawalan ng antibodies sa HIV sa mga bagong silang ay hindi nangangahulugan na ang virus ay hindi tumawid sa placental barrier. Sa anumang kaso, ang mga anak ng mga ina na nahawaan ng HIV ay sasailalim sa pagsusuri at pagmamasid sa laboratoryo ng diagnostic sa loob ng 36 na buwan mula nang ipanganak.

Ang mga resulta ng mga pagsubok sa laboratoryo para sa mga marker ng impeksyon sa HIV ay nangangailangan ng maingat na interpretasyon at dapat lamang isaalang-alang kasabay ng data mula sa epidemiological at clinical survey. Sa kabilang banda, dapat tandaan na sa kabila ng mataas na sensitivity ng mga modernong pamamaraan, ang mga negatibong resulta ng pagsusuri ay hindi maaaring ganap na ibukod ang pagkakaroon ng impeksyon sa HIV. Samakatuwid, ang isang negatibong resulta ng pagsusuri, halimbawa, sa pamamagitan ng immunoblotting, ay maaari lamang mabuo bilang kawalan ng mga partikular na antibodies sa HIV-1 at HIV-2.

Diagnosis ng impeksyon sa HIV sa mga seronegative na pasyente

Ang kalidad ng mga sistema ng pagsubok na ginagamit sa mga diagnostic ng laboratoryo ng impeksyon sa HIV ay bumubuti bawat taon, at ang kanilang pagiging sensitibo ay tumataas. Gayunpaman, ang mataas na pagkakaiba-iba ng HIV ay maaaring humantong sa paglitaw ng mga bagong uri, mga antibodies na maaaring hindi makilala ng mga kasalukuyang sistema ng pagsubok. Bilang karagdagan, ang mga kaso ng hindi tipikal na humoral na tugon ng immune system ng host organism sa virus ay kilala. Kaya, iniulat ni L. Montagnier noong 1996 sa dalawang pasyente ng AIDS na walang tiyak na antibodies na nakita sa kanilang dugo sa nakaraang ilang taon, ang diagnosis ay ginawa batay sa klinikal na data at nakumpirma ng laboratoryo lamang sa pamamagitan ng paghihiwalay ng HPV-1 sa kultura ng cell. Sa ganitong mga kaso, kinakailangang gamitin ang mga rekomendasyon ng WHO, ayon sa kung saan posible ang klinikal na pagsusuri ng impeksyon sa HIV sa mga matatanda at bata sa pagkakaroon ng isa sa 12 na mga sakit na tumutukoy sa AIDS:

candidiasis ng esophagus, trachea, bronchi, baga;
extrapulmonary cryptococcosis;
cryptosporidiosis na may pagtatae nang higit sa isang buwan;
pinsala ng cytomegalovirus sa anumang organ (maliban sa at bilang karagdagan sa atay, pali at lymph node sa isang pasyente na mas matanda sa 1 buwan):
impeksyon na dulot ng herpes simplex virus na nagpapatuloy nang higit sa 1 buwan sa isang pasyenteng mas matanda sa 1 buwan;
brain lymphoma sa isang pasyenteng wala pang 60 taong gulang;
lymphocytic interstitial pneumonia sa isang batang wala pang 13 taong gulang;
disseminated infection na dulot ng bacteria ng grupong Mycobacterium avium intracellulare o M. Kansassii;
pneumocystis pneumonia;
progresibong multifocal leukoencephalopathy;
toxoplasmosis ng central nervous system sa mga pasyente na mas matanda sa 1 buwan.

Ang pagkakaroon ng isa sa mga sakit na ito ay ginagawang posible upang masuri ang impeksyon sa HIV sa kawalan ng isang pagsubok sa dugo sa laboratoryo para sa pagkakaroon ng mga antibodies sa HIV, o kahit na ang isang seronegative na resulta ay nakuha.

Lobzin Yu. V., Kazantsev A. P. Mga patnubay para sa mga nakakahawang sakit. - St. Petersburg, 1996. - 712 p.

Lysenko A. Ya., Turyanov M. Kh., Lavdovskaya M. V., Podolsky V. M. HIV infection at AIDS-associated disease / Monograph.- M.: Rarog LLP, 1996,- 624 p.

Novokhatsky L. S., Khlyabich G. N. Teorya at pagsasanay ng pagsusuri sa laboratoryo ng nakuha na immunodeficiency syndrome (AIDS). - M.: VINITI, 1992, - 221 p.

Pokrovsky V. I., Pokrovsky V. V. AIDS: acquired immunodeficiency syndrome.- M.: Medicine, 1988.- 43 p.

Pokrovsky V. I. impeksyon sa HIV o AIDS // Therapist, arch. - 1989. - T. 61, No. 11. - S. 3-6.

Pokrovsky V.V. Impeksyon sa HIV: klinika, diagnostics / Ed. ed. V. V. Pokrovsky.- M.: GEOTAR MEDICINE, 2000.- 496 p.

Rakhmanova A. G. impeksyon sa HIV (klinika at paggamot) .- St. Petersburg: "SSZ", 2000.- 367 p.

Mga rekomendasyon para sa paggamit ng mga antiretroviral na gamot sa mga matatanda at kabataan na nahawaan ng human immunodeficiency virus // Consilium Medicum appendix. Enero 2000, - 22 p.

Smolskaya T. T., Leninskaya P. P., Shilova E. A. Serological diagnosis ng HIV infection / Methodological guide para sa mga doktor - St. Petersburg, 1992. - 80 p.

Smolskal T. T. Ang ikalawang dekada ng buhay sa mga kondisyon ng SPDA: mga aralin at problema / Aktwal na pananalita - St Petersburg, 1997 - 56 p.

Khaitov R.M., Ignatieva G.A. AIDS.- M., 1992.- 352 p.

Connor S. Ipinapakita ng pananaliksik kung paano nauubos ng HIV ang katawan // Brit. Mod. J.- 1995.- Tomo 310.- P. 6973-7145.

Burcham J., Marmor M., Dubin N. et al. Ang CD4 ay ang pinakamahusay na predictor ng pag-unlad ng AIDS sa isang pangkat ng HIV-infecteci homosexual na lalaki // J. AIDS.- 1991.- jN "9. - P.365.

Furlini G., Vignoli M., Re MC, Gibellini D., Ramazzotti E., Zauli G.. La Placa M. Human immunodeficiency virus type I na pakikipag-ugnayan sa lamad ng CD4+ cells ay nag-uudyok sa synthesis at nuclear translocation ng 70K heat shock protein // J. Gen. Virol.- 1994.- Tomo 75, pt. 1.- P. 193-199.

Gallo R. C. Mechanism of disease induction by HIV // J. AIDS.- 1990.- N3.- P. 380-389.

Gottlieb M. S., Schroff R., Schanker H. et al. Pneumocystis carinii pneumonia at mucosal candidiasis sa dating homosexual mon // Ngayon England J. Med. - 1981. - Vol. 305. - P. 1425-1430.

Harper M. E., Marselle L. M., Gallo R.C., Wong-Staal F. Detection ng lymfocytes na nagpapahayag ng human T-lymphotropic virus type III sa limph nodes at peripheral blood mula sa mga nahawaang indibidwal sa pamamagitan ng in situ hybridization // Proc. Natl. Acad. sci. U. S. A. - 1986. - Vol. 83. - N 2. - P. 772-776.

Hess G. Mga klinikal at diagnostic na aspeto ng HIV-infection.- Mannheim: Boehringer Mannheim GmbH, 1992.- 37 p.

Hu D.J., Dondero T.J., Ryefield M. A. et al. Ang umuusbong na genetic diversity ng HIV // JAMA.- 1996. - N 1.- P. 210-216.

Lambin P., Desjobert H., Debbia M. et al. Serum neopterin at beta-2-microglobulin sa anti-HIV positive blood donors // Lancet.- 1986.- Vol.8517. - P. 1216.

Maldonado I. A., Retru A. Diagnosis ng pediatric HIV disease // The AIDS knowledge base, Fd. Cohen P.T.; Sande M. A. Voiberding. 1994.- P. 8.2.1-8.2.10.

Mc Dougal J.S., Kennedy M.S., Sligh J.M. et al. Ang pagbubuklod ng HTLV-III/LAV sa T4+ T cells ng isang complex ng 110K molecule at ng T4 molecule // Science.- 1985.- Vol.23.- P. 382-385.

Montagnier L., Gougeon M. L., Olivier R. et al. Mga salik at mekanismo ng AIDS pathogenesis // Science na humahamon sa AIDS. Basel: Karger, 1992.- P. 51-70.

Paterlini P., Lallemant-Le C., Lallemant M. et al. Polymerase chain reaction para sa mga pag-aaral ng ina sa anak na paghahatid ng HIV-I sa Africa // J.Med. Virol. - 1990.- Tomo 30, N 10.- P. 53-57.

Polis M. A., Masur H. Hulaan ang pag-unlad sa AIDS // Amor. J. Med. - 1990.- Vol.89, N 6.- P. 701-705.

Roddy M.M., Grieco M. H. Nakataas na natutunaw na mga antas ng receptor ng IL-2 sa serum ng mga populasyon na nahawaan ng HIV // AIDS Res. Hum. retrovir. - 1988.- Vol.4, N 2. - P. 115-120.

VandorGroen. G., Van Kerckhoven I. et al. Isang pinasimple at mas mura, kumpara sa tradisyonal, paraan para sa pagkumpirma ng impeksyon sa HIV // Bull. SINO.- 1991.- T. 69, No. 6.- S. 81-86.

Isang source: Mga diagnostic ng medikal na laboratoryo, mga programa at algorithm. Ed. ang prof. Karpishchenko A.I., St. Petersburg, Intermedica, 2001

Kasama sa diagnosis ng impeksyon sa HIV ang dalawang yugto: pagtatatag ng aktwal na katotohanan ng impeksyon sa impeksyon sa HIV at pagtukoy sa yugto ng sakit. Ang pagpapasiya ng yugto ay hindi mapaghihiwalay na sinusundan ng paglilinaw ng likas na katangian ng kurso ng sakit, at pagkatapos ay ang pagbuo ng pagbabala sa pasyente na ito, pati na rin ang pagpili ng mga taktika sa paggamot.

Tulad ng alam mo, ang diagnosis ng anumang nakakahawang sakit ay batay sa isang paghahambing ng data ng epidemiological, klinikal at laboratoryo, at ang pagmamalabis sa halaga ng isa sa mga pangkat ng data na ito ay maaaring humantong sa mga diagnostic error.

Epidemiological na pamantayan para sa impeksyon sa HIV .

Ang unang hakbang sa pag-diagnose ng impeksyon sa HIV ay ang pagkolekta ng epidemiological history at iba pang epidemiological data tungkol sa pasyenteng sinusuri. Ang kakulangan ng epidemiological data ay maaaring makabuluhang makapagpalubha sa diagnosis ng HIV infection at makahadlang sa pagpapatupad ng mga hakbang laban sa epidemya.

Ang mga pamantayan sa epidemiological ay maaaring maging mapagpasyahan kung minsan sa paggawa ng diagnosis ng impeksyon sa HIV, ngunit maaari ding maging pangalawang kahalagahan. Ang criterion para sa mataas na posibilidad ng impeksyon ay ang pagtuklas sa taong sinuri ng mga panganib na kadahilanan para sa impeksyon tulad ng pagsasalin ng dugo ng donor na natanggap mula sa isang taong nahawaan ng HIV, ang kapanganakan ng isang bata na nahawaan ng HIV ng nasuri na babae. Mayroong mataas na posibilidad ng impeksyon sa kaso ng kapanganakan ng paksa mula sa isang ina na nahawaan ng HIV, pakikipagtalik sa isang taong nahawaan ng HIV, pinagsamang paggamit ng parenteral na gamot sa isang taong nahawaan ng HIV. Ang isang tiyak na panganib ng impeksyon ay matatagpuan sa maaasahang parenteral na interbensyon na isinasagawa gamit ang mga instrumento na malamang na kontaminado ng HIV (ibig sabihin, sa nosocomial at katulad na foci ng impeksyon sa HIV na may parenteral transmission ng HIV).

Ang isang kapansin-pansing panganib ng impeksyon ay maaaring talakayin sa mga kaso kung saan ang paksa ay nag-uulat ng pakikipagtalik o parenteral na paggamit ng droga sa mga lugar kung saan ang HIV ay laganap nang malaki sa pangkat ng populasyon kung saan kabilang ang paksa.

Kasabay nito, ang pakikipagtalik at paggamit ng droga sa mga lugar na may mababang pagkalat ng impeksyon sa HIV ay hindi ibinubukod ang posibilidad ng impeksyon sa HIV.

Ang kawalan ng maaasahang mga kadahilanan ng panganib para sa impeksyon sa HIV ay maaaring magdulot ng pagdududa sa data ng laboratoryo. Sa ganitong mga kaso, inirerekomenda na ulitin ang mga pagsubok sa laboratoryo.

Mga klinikal na pamantayan para sa impeksyon sa HIV.

Tinitiyak ng maagang pagsusuri ng impeksyon sa HIV ang napapanahong paggamot sa pasyente at ang pag-deploy ng mga hakbang sa pag-iwas sa pagsiklab, na pumipigil sa hindi sinasadyang paghahatid ng virus mula sa isang nahawaang tao patungo sa isang malusog na tao. Sa wakas, ang maagang pagsusuri ay nagbibigay-daan sa napapanahong klinikal na pagsusuri, sikolohikal na tulong, at panlipunang rehabilitasyon. Ang mga unang tagumpay sa paggamot ng mga pasyente ay nagpapahintulot, na may maagang pagsusuri, na makabuluhang pahabain ang buhay ng mga pasyente at kahit na umaasa para sa isang lunas.

Ang pagiging kumplikado ng maagang pagsusuri batay sa klinikal na larawan ay namamalagi sa hindi tiyak, polymorphism ng mga sintomas sa yugto II, hindi sa banggitin ang kawalan ng isang klinika sa yugto I. Gayunpaman, sa lahat ng mga kaso ng unmotivated na pagkapagod, ang pagkakaroon ng mga pagpapawis sa gabi. , sakit ng ulo, lalo na laban sa background ng panandaliang lagnat ( 3-10 araw) na may temperatura na 38-38.50 C, sinamahan ng tonsilitis, prolonged diarrheal syndrome, pagbaba ng timbang sa isang maikling panahon, ito ay kinakailangan una sa lahat upang ibukod Impeksyon sa HIV. Ang diagnosis sa panahong ito ay nakatulong sa pamamagitan ng pagtukoy ng iba't ibang mga pantal sa balat (mga spot, papules, roseola, pustules) o furunculosis sa panahon ng isang layunin na pagsusuri. Ang pagkakaroon ng lymphadenopathy, kahit na sa mga kaso ng pagtaas sa isang grupo ng mga lymph node, at higit pa sa isang pangkalahatan, ay mas malamang na maghinala ng clinically HIV infection. Ang sakit ay lalo na nailalarawan sa pamamagitan ng pagtaas sa posterior cervical, submandibular, supra- at subclavian, axillary at ulnar lymph nodes. Bilang isang patakaran, sila ay tumaas sa laki hanggang sa 2-5 cm ang lapad, ay walang sakit, nang makapal na nababanat sa pagkakapare-pareho, paminsan-minsan ay pinagsama sa isang conglomerate. Napaka tipikal para sa impeksyon sa HIV na tumaas ng higit sa isang node, higit sa isang grupo (maliban sa inguinal), na tumatagal ng higit sa 3 buwan.

Kadalasan sa unang bahagi ng sakit, ang pagkakaroon ng mga sintomas ng psycho-neurological: pagkabalisa, depresyon, hindi matatag na lakad, nabawasan ang visual acuity, convulsive seizure na may mga palatandaan ng pinsala sa psycho-emotional sphere (pagkasira ng memorya, pagkalimot, hindi naaangkop na pag-uugali, dulling. ng mga damdamin). Sa mga pinaka-katangiang katangian Ang mga unang yugto ng impeksyon sa HIV ay kinabibilangan ng:

1. Mas mababa sa 10% pagbaba ng timbang;

2. Mga pagbabago sa balat at mauhog na lamad (seborrheic dermatitis, folliculitis, prurigo, psoriasis, impeksyon sa fungal nail, paulit-ulit na oral ulcers, necrotizing gingivitis);

3 . Herpes zoster sa mga taong wala pang 50 taong gulang;

4. Mga paulit-ulit na impeksyon sa itaas na respiratory tract;

SA intermediate na yugto Ang mga sakit na nailalarawan sa pamamagitan ng isang klinika ng pinalawig na superinfection, na nabuo bilang isang resulta ng immunodeficiency, ay pinaka-katangian:

1 . Progresibong pagbaba ng timbang ng higit sa 10%;

2 . Pagtatae ng hindi kilalang pinanggalingan, na tumatagal ng higit sa 1 buwan;

3 . oral candidiasis;

4 . Leukoplakia;

5. Tuberculosis sa baga;

6. Peripheral neuropathy;

7. Mga localized na anyo ng Kaposi's sarcoma;

8. Pagpapalaganap ng herpes zoster;

9. Malubha, paulit-ulit na impeksiyong bacterial (pneumonia, sinusitis, pyomyositis).

Para sa Huling yugto, na nagpapahintulot sa pag-diagnose ng impeksyon sa HIV, o, sa anumang kaso, upang magsagawa ng differential diagnosis, kasama ang:

1. Pneumocystis pneumonia;

2 . Toxoplasmosis;

3. Cryptococcosis;

4. impeksyon sa CMV;

5. Herpes simplex;

6. Progresibong multifocal leukoencephalopathy;

7. Histoplasmosis;

8. Candida esophagitis;

9. impeksyon sa MAC;

10. Salmonella septicemia;

11. Extrapulmonary tuberculosis;

12. Lymphoma, Kaposi's sarcoma;

13. cachexia;

14. HIV encephalopathy.

Noong 1988, iminungkahi ng WHO para sa layunin ng klinikal na pagsusuri na isakatuparan marka ng sintomas magagamit sa isang pasyente na pinaghihinalaang may impeksyon sa HIV:

Patuloy na pangkalahatang lymphadenopathy 0

Mga pagbabago sa balat at mucous membrane 1

Pagbaba ng timbang 1

Matinding pagkapagod 1

Herpes simplex 2

Pagtatae na tumatagal ng higit sa 1 buwan. 4

Lagnat na tumatagal ng higit sa 1 buwan. 4

Pagbaba ng timbang ng higit sa 10% 4

Pulmonary tuberculosis 5

Paulit-ulit na impeksiyong bacterial 5

Oral leukoplakia 5

Stomatitis, thrush ng bibig 5

Lokal na Kaposi's sarcoma 8

cachexia 12

Kasabay nito, ang kabuuan ng mga puntos mula 0 hanggang 3 ay tinatantya bilang ang posibilidad ng impeksyon sa HIV ay napakaliit, 4-11 puntos - ang sakit ay malamang, at 12 o higit pa - napaka-malamang.

Sa pangkalahatan, ang klinikal na diagnosis ng impeksyon sa HIV ay, una sa lahat, ang diagnosis ng spectrum ng patolohiya na nauugnay sa AIDS sa isang pasyente na may pangalawang immunodeficiency. Dahil ang mga sakit sa HIV-indicator ay may kasamang 23 nosological forms, isang syndromic approach sa diagnosis ang pinakaangkop. Halos palaging, ang pasyente ay may isang sindrom ng pangkalahatang pagkalasing (walang motibasyon na kahinaan, pag-aantok, pagkapagod) na bubuo laban sa background ng matagal na mababang antas ng lagnat o lagnat na hindi kilalang pinanggalingan, mas madalas sa gabi at sa umaga, na sinamahan ng labis na pawis. Ang sindrom ng unmotivated generalized peripheral lymphadenopathy ay permanente, sa 20% ito ay sinamahan ng hepatosplenomegaly ng iba't ibang kalubhaan. Ang isa sa mga nangungunang sindrom ng sakit ay ang sindrom ng broncho-pulmonary pathology, bagaman ang malalim na mga sugat ng tissue ng baga sa anyo ng pneumocystis pneumonia ay bubuo sa mga advanced na kaso ng sakit, dahil ang pneumocystosis ay bubuo laban sa background ng malalim na immunodeficiency. Ngunit tumatagal ng higit sa 1 buwan, ang sindrom ng unmotivated na pagtatae ay tumutukoy sa maagang paglitaw, ito ay nailalarawan sa pamamagitan ng paglaban sa therapy sa droga. Ang isa sa mga sindrom ng impeksyon sa HIV ay ang undulating arthralgia ng hindi kilalang etiology. Ang pinaka-katangian na mga pagpapakita ng sakit ay kinabibilangan ng sindrom ng mga sugat sa balat at mauhog na lamad, na ipinakita ng isang hindi tiyak na maculopapular na pantal, eksema na lumalaban sa steroid therapy, at staphylococcal impetigo. Kasama rin sa mga dermatological manifestations ang paulit-ulit na fungal (mycosis, candidiasis, bacterial (folliculitis, furunculosis, hydroadenitis), viral (herpes) lesyon ng balat at mucous membrane. Sa wakas, ang impeksyon sa HIV ay nailalarawan din ng mga neoplasma, pangunahin sa anyo ng Kaposi's sarcoma at lymphoma, at pati na rin ang ilang iba pang uri ng mga tumor.

Ang pagkakaroon ng hindi bababa sa dalawang klinikal at dalawang klinikal na sintomas ng laboratoryo (leukoliphoneutropenia, hypogammaglobulinemia) ng mga sintomas sa itaas sa isang pasyente ay nagpapahintulot sa pag-diagnose ng impeksyon sa HIV na may mataas na antas ng katiyakan. Ngunit sa parehong oras, sa kaso ng pagtuklas ng dalawa sa naturang mga sindrom na karaniwan sa mga pasyente, tulad ng lagnat at lymphadenopathy, na nagpapatuloy sa loob ng isang buwan o higit pa, ang patuloy na walang motibasyon na pagtatae, pagbaba ng timbang ng higit sa 10%, o masagana. pagpapawis sa gabi, magbunga ng staging diagnosis at masusing pagsusuri sa laboratoryo.

SA yugto 2a ang sakit ay maaaring pinaghihinalaang lamang sa pamamagitan ng sintomas ng paulit-ulit na pangkalahatang lymphadenopathy sa isang pasyenteng nasa panganib o sa pagkakaroon ng isang epidemiological history.

SA yugto 2b(maaga o banayad), somatic well-being, normal na aktibidad ay napanatili pa rin. Ang mga sugat sa balat at mauhog na lamad ay hindi malubha, ang mga paulit-ulit na impeksyon sa respiratory tract ay hindi pangkalahatan, ang pagbaba ng timbang ay hindi hihigit sa 10%.

Ayon sa mga rekomendasyon ng WHO, ang maaasahang clinical diagnosis ng HIV infection sa mga matatanda at bata ay posible sa pagkakaroon ng isa sa 12 AIDS-indicating disease: 1) candidiasis ng esophagus, trachea, bronchi, baga; 2) extrapulmonary cryptococcosis; 3) cryptosporidiosis na may pagtatae nang higit sa isang buwan; 4) pinsala sa cytomegalovirus sa anumang organ (maliban sa at bilang karagdagan sa atay, pali at lymph node sa isang pasyente na mas matanda sa 1 buwan); 5) impeksyon na dulot ng herpes simplex virus, na nagpapatuloy ng higit sa 1 buwan sa isang pasyente na mas matanda sa 1 buwan; 6) Kaposi's sarcoma sa isang pasyenteng wala pang 60 taong gulang; 7) brain lymphoma sa isang pasyenteng wala pang 60 taong gulang; 8) lymphocytic interstitial pneumonia sa isang batang wala pang 13 taong gulang, 9) disseminated infection na dulot ng bacteria ng Mycobacterium avium intracellulare o M. Kansassii group; 10) pneumocystis pneumonia; 11) progresibong multifocal leukoencephalopathy; 12) toxoplasmosis ng central nervous system sa mga pasyente na mas matanda sa 1 buwan. Ang pagkakaroon ng isa sa mga sakit na ito ay ginagawang posible upang masuri ang impeksyon sa HIV sa kawalan ng isang serological enzyme-linked immunosorbent assay, o kahit na ang isang seronegative na resulta ay nakuha.

Hindi gaanong kumplikado ang pagkita ng kaibahan ng mga yugto ng sakit, i.e. pagtatanghal ng dula ayon sa klinikal na pamantayan. Ayon sa mga eksperto sa CDC (USA), ang pinakalayunin na pamantayan ay ang bilang ng mga selulang T-helper, at hindi mga klinikal na pagpapakita, dahil marami sa mga kundisyong ito ay madalas na matatagpuan sa mga taong hindi nahawaan ng HIV. Noong 1991, natukoy ng Center na ang isang diagnosis ng AIDS ay maaaring gawin kung: a) ang taong nahawahan ay may isa sa 23 mga kondisyong nauugnay sa AIDS o b) siya ay nahawaan ng HIV at may mas mababa sa 200 CD4+ cell/mm.

Mga pamantayan sa laboratoryo para sa impeksyon sa HIV.

Ang pagsusuri para sa impeksyon sa HIV ay pangunahing napapailalim sa:

2 . Mga taong may klinika ng candidal esophagitis, candidiasis ng bronchi at baga, disseminated o extrapulmonary coccidiomycosis, pneumocystis pneumonia, extrapulmonary cryptococcosis, cryptosporidiosis na may pagtatae nang higit sa 1 buwan, cytomegalovirus lesions ng mga panloob na organo maliban sa atay, spleen. mga pasyente na mas matanda sa 6 na buwan, cytomegalovirus retinitis na may pagkawala ng paningin, herpetic infection na may multifocal ulcers na tumatagal ng higit sa 1 buwan, bronchitis, pneumonia o esophagitis, paulit-ulit na herpes zoster, disseminated o extrapulmonary histoplasmosis, pulmonary o extrapulmonary tuberculosis, isosporiosis na may pagtatae na tumatagal ng higit sa 1 buwan, laganap o extrapulmonary MAC- mga impeksyon, progresibong multifocal leukoencephalopathy, toxoplasmosis ng utak, salmonella septicemia, Kaposi's sarcoma, lymphoma, lymphoid interstitial pneumonia (sa mga bata)

Sa kasalukuyan, para sa pagsusuri sa laboratoryo ng impeksyon sa HIV, ang iba't ibang mga pamamaraan para sa pagtuklas ng HIV, mga antigen ng HIV at materyal na gene ng HIV, pati na rin ang mga pamamaraan para sa pagtuklas ng mga antibodies sa HIV ay ginagamit. Ang lahat ng mga pamamaraang ito ay may iba't ibang kahusayan, nangangailangan ng iba't ibang kagamitan at iba't ibang antas ng pagsasanay ng mga tauhan. Ang mga resulta ng mga pag-aaral na ito ay nangangailangan ng karampatang interpretasyon.

... ang diagnosis ng anumang nakakahawang sakit ay batay sa isang paghahambing ng data ng epidemiological, klinikal at laboratoryo, at ang pagmamalabis sa halaga ng isa sa mga grupo ng data na ito ay maaaring humantong sa mga diagnostic error.

Kasama sa diagnosis ng impeksyon sa HIV ang dalawang yugto:
ako yugto - pagtatatag ng aktwal na katotohanan ng impeksyon sa HIV ;
II yugto - pagpapasiya ng yugto ng sakit .

PAGTATATAG NG KATOTOHANAN NG INFECTION WITH HIV

Ang pagtatatag ng katotohanan ng impeksyon sa HIV mismo (iyon ay, pagkilala sa mga taong nahawaan ng HIV), sa turn, ay kinabibilangan din ng dalawang yugto:
stage ako- naka-link na immunosorbent assay(KUNG ANG): ang pamamaraan ng ELISA ay screening (selective) - ang pagpili ng mga posibleng infected na indibidwal, ibig sabihin, ang layunin nito ay kilalanin ang mga kahina-hinalang indibidwal at i-screen out ang mga malulusog na indibidwal; Ang mga antibodies sa HIV ay natutukoy gamit ang iba pang mga antibodies sa nais na mga antibodies (antibodies laban sa iba pang mga antibodies). Ang mga "katulong" na antibodies na ito ay may label na isang enzyme. Ang lahat ng mga pagsusuri sa screening ay dapat na lubhang sensitibo upang hindi makaligtaan ang pasyente. Dahil dito, ang kanilang pagtitiyak ay hindi masyadong mataas, iyon ay, ang ELISA ay maaaring magbigay ng positibong tugon ("marahil may sakit") sa mga hindi nahawaang tao (halimbawa, sa mga pasyente na may mga sakit na autoimmune: rayuma, systemic lupus erythematosus, atbp.). Ang dalas ng mga maling positibong resulta kapag gumagamit ng iba't ibang mga sistema ng pagsubok ay mula 0.02 hanggang 0.5%. Kung ang ELISA ng isang tao ay nagbigay ng positibong resulta, pagkatapos ay upang kumpirmahin ang katotohanan ng impeksyon sa HIV, ito ay kinakailangan upang masuri pa. Kapag nagsasagawa ng ELISA sa 3-5% ng mga kaso, posible ang maling-negatibong mga resulta - kung ang impeksyon ay naganap kamakailan lamang at ang antas ng mga antibodies ay napakababa pa, o sa yugto ng pagtatapos ng sakit, na nailalarawan sa matinding pinsala sa immune system na may malalim na paglabag sa proseso ng pagbuo ng antibody. Samakatuwid, sa pagkakaroon ng data na nagpapahiwatig ng pakikipag-ugnay sa mga taong nahawaan ng HIV, ang mga paulit-ulit na pag-aaral ay karaniwang isinasagawa pagkatapos ng 2 hanggang 3 buwan.
II yugto - immunoblotting(sa pagbabago ng Western Blot, Western blot): ay isang mas kumplikadong paraan at nagsisilbing kumpirmahin ang katunayan ng impeksiyon. Ang pamamaraang ito ay hindi nakakakita ng mga kumplikadong antibodies sa HIV, ngunit mga antibodies sa mga indibidwal na istrukturang protina nito (p24, gp120, gp41, atbp.). Ang mga resulta ng immunoblotting ay itinuturing na positibo kung ang mga antibodies sa hindi bababa sa tatlong protina ay nakita, ang isa ay na-encode ng env genes, ang isa ay sa pamamagitan ng gag genes, at ang pangatlo ay sa pamamagitan ng pol genes. Kung ang mga antibodies sa isa o dalawang protina ay nakita, ang resulta ay itinuturing na nagdududa at nangangailangan ng kumpirmasyon. Sa karamihan ng mga laboratoryo, ang diagnosis ng impeksyon sa HIV ay ginawa kung ang mga antibodies sa p24, p31, gp4l at gpl20/gp160 na mga protina ay nakita nang sabay-sabay. Ang kakanyahan ng pamamaraan: ang virus ay nawasak sa mga bahagi (antigens), na binubuo ng ionized amino acid residues, at samakatuwid ang lahat ng mga bahagi ay may isang bukang-liwayway na naiiba sa bawat isa; pagkatapos, gamit ang electrophoresis (electric current), ang mga antigens ay ipinamamahagi sa ibabaw ng strip - kung mayroong mga antibodies sa HIV sa test serum, makikipag-ugnayan sila sa lahat ng mga grupo ng antigens, at ito ay maaaring makita.

Dapat tandaan na ang mga antibodies sa HIV ay lumilitaw sa 90-95% ng mga nahawaang tao sa loob ng 3 buwan pagkatapos ng impeksyon, sa 5-9% ng mga nahawaang tao ang mga antibodies sa HIV ay lumilitaw pagkatapos ng 6 na buwan at sa 0.5-1% ng mga nahawaang tao ay lumalabas ang mga antibodies sa HIV sa mga susunod na termino. Sa yugto ng AIDS, ang bilang ng mga antibodies ay maaaring bumaba, hanggang sa kumpletong pagkawala.

Sa immunology, mayroong isang bagay bilang "serological window" - ang panahon mula sa impeksyon hanggang sa paglitaw ng isang bilang ng mga antibodies na maaaring matukoy. Para sa HIV, ang panahong ito ay karaniwang tumatagal mula 2 hanggang 12 linggo, sa mga bihirang kaso na mas matagal. Sa panahon ng "serological window", ang isang tao ay malusog ayon sa mga pagsusuri, ngunit sa katunayan siya ay nahawaan ng HIV. Ito ay itinatag na ang HIV DNA ay maaaring nasa genome ng tao nang hindi bababa sa tatlong taon nang walang mga palatandaan ng aktibidad at ang mga antibodies sa HIV (mga marker ng impeksyon sa HIV) ay hindi lumalabas.

Sa panahong ito ("serological window"), posibleng makilala ang isang taong nahawaan ng HIV at kahit 1-2 linggo pagkatapos ng impeksyon gamit ang polymerase chain reaction(PCR). Ito ay isang napaka-sensitibong pamamaraan - ayon sa teorya, 1 DNA sa bawat 10 ml ng medium ang maaaring matukoy. Ang kakanyahan ng pamamaraan ay ang mga sumusunod: gamit ang isang polymerase chain reaction, maraming mga kopya ng isang nucleic acid ang nakuha (ang isang virus ay isang nucleic acid - DNA o RNA - sa isang protina coat), na pagkatapos ay nakita gamit ang mga may label na enzyme o isotopes. , pati na rin sa pamamagitan ng isang katangiang istraktura. Ang PCR ay isang mamahaling paraan ng diagnostic, kaya hindi ito ginagamit para sa screening at regular.

DETERMINATION OF THE STAGE OF THE DISEASE

Sa puso ng AIDS ay, una sa lahat, ang pagkasira ng T-lymphocytes-helpers, na minarkahan ng monoclonal antibodies - mga kumpol ng pagkita ng kaibhan - bilang CD4. Sa pagsasaalang-alang na ito, ang diagnosis at pagsubaybay sa pag-unlad ng sakit ay imposible nang walang kontrol ng subpopulasyon ng T-helper, na kung saan ay pinaka-maginhawang isinasagawa gamit ang isang laser cell sorter.

Para sa banayad na impeksyon sa HIV ang bilang ng mga T-lymphocytes ay isang lubhang variable indicator. Sa pangkalahatan, ang pagbaba sa bilang ng mga CD4 cell (ganap at kamag-anak) ay makikita sa mga indibidwal na ang impeksyon sa HIV ay naganap kahit isang taon na ang nakalipas. Sa kabilang banda, sa mga unang yugto ng impeksiyon, ang bilang ng mga T-suppressor (CD8) ay kadalasang tumataas nang husto kapwa sa peripheral blood at sa pinalaki na mga lymph node.

Sa matinding AIDS ang karamihan sa mga pasyente ay may nabawasan na kabuuang bilang ng T-lymphocytes (mas mababa sa 1000 bawat 1 μl ng dugo, kabilang ang CD4 lymphocytes - mas mababa sa 22 bawat 1 μl, habang ang ganap na halaga ng nilalaman ng CD8 ay nananatili sa loob ng normal na hanay). Alinsunod dito, ang ratio ng CD4/CD8 ay nabawasan nang husto. Ang tugon ng T-lymphocytes sa vitro sa karaniwang antigens at mitogens ay nabawasan sa mahigpit na alinsunod sa medyo nabawasan na bilang ng CD4.

Para sa advanced AIDS nailalarawan sa pamamagitan ng pangkalahatang lymphopenia, neutropenia, thrombocytopenia (ayon sa pagkakabanggit, isang pagbawas sa bilang ng mga lymphocytes, neutrophils at platelets), anemia. Ang mga pagbabagong ito ay maaaring resulta ng sentral na pagsugpo ng hematopoiesis dahil sa pagkatalo ng mga hematopoietic na organo ng virus, pati na rin ang autoimmune na pagkasira ng mga subpopulasyon ng cell sa paligid. Bilang karagdagan, ang AIDS ay nailalarawan sa pamamagitan ng isang katamtamang pagtaas sa dami ng gamma globulin na may nangingibabaw na pagtaas sa nilalaman ng IgG. Ang mga pasyente na may malubhang sintomas ng AIDS ay kadalasang may mataas na antas ng IgA. Sa ilang mga yugto ng sakit, ang antas ng naturang mga marker ng AIDS bilang 1-microglobulin, acid-stable interferon, 1-thymosin ay tumataas nang malaki. Ang parehong nangyayari sa pagtatago ng libreng neopterin, isang metabolite ng macrophage. Hindi pa posible na masuri ang kamag-anak na kahalagahan ng bawat isa sa mga nakalistang pagsubok, ang bilang ng mga ito ay patuloy na tumataas. Samakatuwid, dapat silang isaalang-alang sa pakikipag-ugnayan sa mga marker ng impeksyon sa HIV, parehong immunovirological at cytological. Ang isang klinikal na pagsusuri sa dugo ay nailalarawan sa pamamagitan ng leukopenia, lymphopenia (ayon sa pagkakabanggit, isang pagbawas sa bilang ng mga leukocytes at lymphocytes).

Stage 1 - " yugto ng pagpapapisa ng itlog» - ang mga antibodies sa HIV ay hindi pa nakikita; ang diagnosis ng impeksyon sa HIV sa yugtong ito ay ginawa batay sa epidemiological data at dapat na kumpirmahin ng laboratoryo sa pamamagitan ng pagtuklas ng human immunodeficiency virus, mga antigen nito, mga nucleic acid ng HIV sa serum ng dugo ng pasyente;
Stage 2 - " yugto ng mga paunang pagpapakita» - sa panahong ito mayroon nang paggawa ng mga antibodies:;
Stage 2A - " asymptomatic» - Ang impeksyon sa HIV ay ipinakikita lamang sa pamamagitan ng paggawa ng mga antibodies;
2B yugto - " talamak na impeksyon sa HIV na walang pangalawang sakit» - sa dugo ng mga pasyente, wide-plasma lymphocytes - "mononuclear cells" ay maaaring makita at isang lumilipas na pagbaba sa antas ng CD4-lymphocytes ay madalas na nabanggit (ang talamak na klinikal na impeksyon ay sinusunod sa 50-90% ng mga nahawaang indibidwal sa unang 3 buwan pagkatapos ng impeksiyon; ang simula ng panahon ng talamak na impeksiyon, bilang panuntunan, ay nauuna sa seroconversion , i.e. ang paglitaw ng mga antibodies sa HIV);
2B yugto - " talamak na impeksyon sa HIV na may pangalawang sakit» - laban sa background ng pagbawas sa antas ng CD4-lymphocytes at ang nagresultang immunodeficiency, lumilitaw ang pangalawang sakit ng iba't ibang etiologies (tonsilitis, bacterial at pneumocystis pneumonia, candidiasis, herpes infection, atbp.);
Stage 3 - " tago» - bilang tugon sa pag-unlad ng immunodeficiency, ang immune response ay binago sa anyo ng labis na pagpaparami ng CD4 cells, na sinusundan ng unti-unting pagbaba sa antas ng CD4 lymphocytes, sa average sa rate na 0.05-0.07x109/l bawat taon ; ang mga antibodies sa HIV ay matatagpuan sa dugo;
Stage 4 - " yugto ng pangalawang sakit» - pag-ubos ng CD4 lymphocytes, ang konsentrasyon ng mga antibodies sa virus ay makabuluhang nabawasan (depende sa kalubhaan ng pangalawang sakit, ang mga yugto 4A, 4B, 4C ay nakikilala);
Stage 5 - " yugto ng terminal» - karaniwang pagbaba sa bilang ng mga cell ng CD4 sa ibaba 0.05x109/l; ang konsentrasyon ng mga antibodies sa virus ay makabuluhang nabawasan o ang mga antibodies ay maaaring hindi matukoy.