Anf a antsa. Krvný test na markery systémového lupus erythematosus

Existuje množstvo chorôb, pri ktorých obranný systém berie bunky vlastného tela za cudzie, po čom ich začne omylom napádať. Väčšina autoimunitných patológií je chronická a predstavuje vážnu hrozbu pre zdravie. Aby bolo možné identifikovať tieto ochorenia v najskoršom štádiu ich vývoja, lekári predpisujú analýzu ANF. Táto skratka znamená „antinukleárny faktor“. V niektorých správach je štúdia označená ako ANA. Význam znamená "test antinukleárnych protilátok". ANF ​​​​je klinicky významný indikátor, ktorý pomáha lekárovi zostaviť najefektívnejší liečebný režim a zabrániť rozvoju komplikácií.

Podstata metódy

Biologickým materiálom na výskum je krv. Keď sa do tela dostane akýkoľvek patogénny mikroorganizmus, imunitný systém začne produkovať špecifické protilátky, ktorých úlohou je ničiť cudzie antigény. Podstata metódy spočíva v detekcii a kvantitatívnom stanovení týchto látok v tekutom spojivovom tkanive.

Lekári hovoria, že krvný test ANF je laboratórny, ktorý má vysoký stupeň informačného obsahu. S jeho pomocou je možné identifikovať akékoľvek autoimunitné patológie aj v počiatočnom štádiu ich vývoja.

Špecifické protilátky sa často zisťujú aj u ľudí trpiacich ťažkou hepatitídou, onkológiou a niektorými infekčnými ochoreniami. Tieto látky nájdeme aj u zdravých ľudí. Táto situácia si vyžaduje integrovaný prístup na identifikáciu príčiny.

Analýza ANF niekedy zahŕňa hodnotenie kvantitatívneho obsahu imunoglobulínov. Ich prítomnosť môže naznačovať rozvoj kolagénových ochorení a reumatických ochorení.

Indikácie

Je dôležité vedieť, že krvný test ANF je štúdia, ktorá je predpísaná na potvrdenie alebo vylúčenie prítomnosti autoimunitných patológií, ako aj na posúdenie účinnosti liečby.

Lekár môže mať podozrenie na ochorenie podľa nasledujúcich príznakov:

• Predĺžená horúčka bez zjavného dôvodu.
• Bolestivé pocity v kĺboch.
• Zvýšená únava.
• Bolesti svalov a kĺbov.
• Kožné prejavy bez zjavného dôvodu.
• Časté epizódy svalových kŕčov.
• Zvýšená telesná teplota.
• Zníženie telesnej hmotnosti.
• Pravidelné epizódy nevoľnosti.
• Bolesť hlavy.
• Porucha sluchu.
• Hnačka.

Okrem toho je pri podozrení na reumatické ochorenie predpísaná analýza ANF. Štúdia sa uskutočňuje po obdržaní výsledkov laboratórnej diagnostiky, v ktorej sa zvyšujú parametre ESR, CEC a C-reaktívneho proteínu.

Čo ukazuje

Krvný test ANF vám umožňuje identifikovať patológie autoimunitnej povahy. Štúdia je informatívna pre nasledujúce choroby:

• Systémový lupus erythematosus.
• Akútna diseminovaná encefalomyelitída.
• Sjogrenova choroba.
• Reumatoidná artritída.
• Alopecia areata.
• Addisonova choroba.
• Ankylozujúca spondylitída.
• Antifosfolipidový syndróm.
• Autoimunitná hemolytická anémia.
• Bulózny pemfigoid.
• Autoimunitná hepatitída.
• Celiakia.
• Autoimunitné patológie vnútorného ucha.
• Chagasova choroba.
• Churg-Straussovej syndróm.
• Chronická obštrukčná choroba pľúc.
• Dermatomyozitída.
• Crohnova choroba.
• Diabetes mellitus I. typu.
• Goodpastureov syndróm.
• Hashimotova tyroiditída.
• Basedowova choroba.
• Guillain-Barrého syndróm.
• Kawasakiho choroby.
• Hnisavá hydradenitída.
• Primárna nefropatia.
• Idiopatická trombocytopenická purpura.
• Intersticiálna cystitída.
• Erytematózny lupus erythematosus.
• Sharpeov syndróm.
• Prstencová sklerodermia.
• Roztrúsená skleróza.
• Narkolepsia.
• Neuromyotónia.
• Pemphigus vulgaris.
• Psoriáza.
• Raynaudov fenomén.
• Vaskulitída.
• Wegenerova granulomatóza.

Toto je neúplný zoznam chorôb. Je dôležité, aby analýza ANF ukázala vývoj autoimunitných patológií v najskoršom štádiu ich priebehu. To umožňuje lekárovi určiť taktiku liečby av budúcnosti posúdiť jej účinnosť.

Príprava

Odber vzoriek biomateriálu sa vykonáva ráno. Krv je potrebné darovať nalačno. Posledné jedlo je potrebné dokončiť aspoň 4 hodiny vopred. Zároveň je dovolené piť vodu kedykoľvek a v akomkoľvek množstve. Používanie alkoholu je zakázané.

Odpočinok je zobrazený 1 deň pred štúdiou. Fyzický a psycho-emocionálny stres často vedie k falošným výsledkom. Pol hodiny pred darovaním krvi je zakázané fajčiť.

Je potrebné informovať lekára o užívaných liekoch, keď predpisuje test ANF. Je to spôsobené tým, že aktívne zložky niektorých liekov vyvolávajú tvorbu protilátok a môžu tiež spôsobiť lupus vyvolaný liekmi. Falošne negatívne výsledky sú často výsledkom užívania glukokortikosteroidov.

Ak bola pacientovi predpísaná fyzioterapia alebo inštrumentálne vyšetrenia, mali by sa vykonať až po darovaní krvi.

Odber biomateriálov

Vykonáva sa ráno. Biologickým materiálom je venózna krv. Jeho zber sa vykonáva podľa štandardného algoritmu. Zvyčajne sa krv odoberá z žily umiestnenej na lakti.

Po získaní tekutého spojivového tkaniva sa z neho izoluje sérum. Je to ona, ktorá je potrebná na analýzu.

Typy výskumov a ich popis

V súčasnosti je možné detegovať protilátky v biomateriáli niekoľkými spôsobmi:

1. Pomocou nepriamej imunofluorescenčnej mikroskopie. Ak sú v krvi prítomné špecifické látky, začnú sa viazať na špecifické jadrové antigény. V laboratóriách sa používajú prvky, ktoré sú schopné žiariť v samostatnom spektre. Biomateriál sa potom starostlivo skúma pod mikroskopom. Choroba môže byť podozrivá podľa typu žiary. Táto metóda je uznávaná ako najinformatívnejšia vo vzťahu k určovaniu hodnoty antinukleárnych protilátok. Jednou z používaných metód je výskum pomocou HEp buniek. Analýza ANF v tomto prípade zahŕňa odber biomateriálu z hrtana. Proces nie je spojený s výskytom bolestivých a iných nepríjemných pocitov. Je dôležité vedieť, že krvný test ANF HEP-2 je v súčasnosti najpresnejšou štúdiou. Epitelové bunky z hrtana sa inkubujú so sérom, potom sa kombinujú aj s fluorescenčnými látkami.
2. S Jeho pomocou spočíva podstata v tom, že keď dôjde k vzťahu medzi protilátkami a antigénmi, zmení sa farba roztoku. Prítomnosť tohto alebo toho odtieňa umožňuje podozrenie na prítomnosť určitej patológie.

Ošetrujúci lekár by sa mal zaoberať dekódovaním analýzy ANF. Ak existujú pozitívne výsledky výskumu, sú predpísané ďalšie testy. Konečná diagnóza sa nerobí na základe záveru jednej analýzy.

Normálne hodnoty

Najlepší výsledok je taký, v ktorom chýbajú antinukleárne protilátky. Je však potrebné pripomenúť, že ich možno nájsť aj u úplne zdravých ľudí. V tomto prípade je indikovaná druhá štúdia.

Rýchlosť analýzy ANF - titer nie viac ako 1: 160. Okrem toho je tento ukazovateľ relevantný pre dospelých aj deti.

Pri dekódovaní krvného testu ANF je dôležité zvážiť nasledujúce informácie:

• Nízke titre nie sú zárukou, že neexistuje autoimunitná patológia. Podľa štatistík je 5% pacientov s výsledkami výskumu negatívnych.
• Ak má človek všetky príznaky autoimunitného ochorenia a analýza naznačuje opak, lekár nevylučuje prítomnosť ochorenia. V takýchto situáciách sa dodatočne uskutočňuje enzýmový imunotest.

Analýza ANP vykonaná pomocou buniek HEp-2 sa považuje za normálnu, ak titer nie je vyšší ako 1: 160. Výsledok viac ako 1: 640 naznačuje exacerbáciu reumatických patológií. Počas obdobia remisie ochorenia sa titer zníži na 1: 320. Zároveň bude iba lekár schopný identifikovať skutočnosť, o čom hovorí taký nízky ukazovateľ, na základe údajov o anamnéze a individuálnych charakteristík zdravia pacienta.

Propagované ANF

Väzbou na antigény vytvárajú imunitný komplex. Ten je zase východiskovým faktorom pre rozvoj zápalového procesu v stenách krvných ciev. V dôsledku toho sa u človeka objavia prvé alarmujúce príznaky systémových ochorení. Analýza ukazuje vysoké tituly.

V tomto prípade môže byť patológia identifikovaná určením typu žiary. Interpretácia výsledkov:

• Homogénne. Takáto žiara môže naznačovať prítomnosť systémového lupus erythematosus, chronickej hepatitídy a sklerodermie.
• Periférne. Vždy hovorí o vývoji
• Granulovaný. Možné ochorenia: Sjogrenov syndróm, systémový lupus erythematosus, reumatoidná artritída, zmiešaná patológia spojivového tkaniva.
• Nukleárny. Tento typ žiary je charakteristický pre systémový lupus erythematosus, polymyozitídu, Sjogrenov syndróm a sklerodermiu.
• Centromeric. Možné patológie: kalcifikácia kože, dysfunkcia pažeráka, Raynaudov syndróm, telangiektázia, sklerodaktýlia.
• Cytoplazmatický. Takáto žiara hovorí o autoimunitných ochoreniach pečene alebo polymyozitíde.

ANF ​​znížená úroveň

Zníženie hladiny antinukleárnych protilátok má klinický význam výlučne pre predikciu a monitorovanie existujúcich a predtým identifikovaných systémových ochorení.

Indikátor ANF priamo závisí od intenzity patologického procesu. V tomto ohľade je jeho pokles priaznivým znakom, ktorý naznačuje, že liečba bola úspešne vykonaná a choroba vstúpila do štádia remisie.

Liečba

Každá patológia autoimunitnej povahy si vyžaduje špecifický terapeutický prístup. Účelom krvného testu na ANF je identifikovať protilátky v tekutom spojivovom tkanive a posúdiť povahu ich interakcie so špecifickými antigénmi. Na základe výsledkov diagnózy môže lekár urobiť predbežnú diagnózu. Na potvrdenie je potrebný ďalší výskum. A až potom lekár zostaví liečebný režim. Výber liekov priamo závisí od toho, aká patológia sa zistí u osoby.

cena

Test ANF môžete absolvovať v nezávislom laboratóriu, súkromnej klinike alebo vo verejnej zdravotníckej inštitúcii. Je dôležité vedieť, že nie všetky rozpočtové kliniky poskytujú takúto službu. Overte si jeho dostupnosť v registri.

Štúdium je platené aj vo verejných zdravotníckych zariadeniach. Náklady na analýzu priamo závisia od cenovej politiky kliniky, ktorá pozostáva z mnohých faktorov. Minimálna cena je 1 000 rubľov, maximálna nepresahuje 1 700 rubľov. Navyše si treba priplatiť za odber krvi. Náklady na túto službu spravidla nepresahujú 200 rubľov.

Konečne

Skratka ANF znamená antinukleárny faktor. Normálne by nemal byť prítomný v krvi zdravého človeka alebo by jeho koncentrácia mala byť nižšia ako 1:160. Analýza na ANF je predpísaná s cieľom identifikovať patológie autoimunitnej povahy u pacienta v najskoršom štádiu ich vývoja.

Podstata metódy: keď provokujúce činidlá vstúpia do tela, obranný systém začne produkovať protilátky. Ich úlohou je napádať antigény a ničiť ich. Na zistenie tejto reakcie od pacienta sa odoberie venózna krv s následným oddelením séra. K tomu sa pridajú špecifické antigény a hodnotia sa ďalšie reakcie.

Antinukleárne protilátky- všeobecný názov skupiny protilátok namierených proti rôznym zložkám bunky, ich výskyt je spojený najmä s autoimunitnými ochoreniami.

Synonymá: antinukleárne protilátky, antinukleárny faktor, antinukleárny faktor, protilátky proti extrahovateľným jadrovým (jadrovým) antigénom, antinukleárne protilátky, Hep-2 substrát, ANA-Hep2, fluorescenčná antinukleárna detekčná protilátka, ANA, FANA

Antinukleárne protilátky sú

komplex protilátok (viac ako 200), najmä imunoglobulínov G (menej často IgM a IgA), sa objavuje v dôsledku porušenia mechanizmu autológnosti pri autoimunitných a reumatických ochoreniach.

V niektorých prípadoch je imunitná odpoveď namierená nie proti cudzím ľuďom, ale proti ich vlastným tkanivám. V tomto prípade hovoria o autoimunitné ochorenie... A protilátky, ktoré sú produkované ich vlastným bunkám alebo ich zložkám, sa nazývajú autoimunitné.

Väčšina ľudí má v krvi malé (!) množstvo autoprotilátok, ktoré nie sú prejavom ochorenia.

Len v prípade vážneho narušenia imunity sa hladina autoprotilátok zvýši a postačuje na stanovenie diagnózy.

ANA môže byť pozitívna ešte predtým, ako sa objavia prvé príznaky ochorenia. Asi 95 % pacientov so systémovým lupus erythematosus má v krvi antinukleárne protilátky. Prítomnosť symptómov lupusu potvrdzuje diagnózu.

Formačný mechanizmus

• expozícia ultrafialovým lúčom na koži vedie k aktivácii programovanej bunkovej smrti (apoptózy), čo je normálna reakcia organizmu, no pri systémových ochoreniach súčasne hromadne migrujú
• predtým nedostupné a neviditeľné pre imunitný systém sa bunkové zložky, ako sú jadierka, históny, jadrový obal atď., „stanú nahými“ a makrofágy namiesto toho, aby jednoducho „využili“ tento materiál, prenášajú o ňom signál pozdĺž reťazca imunitná odpoveď
• B-lymfocyty v reakcii na signál makrofágov začnú produkovať antinukleárne protilátky, ktoré naviazaním na príslušný antigén vytvárajú imunitné komplexy (jadrový antigén + IgG protilátka, IgM, IgA)
• imunitné komplexy sa usadzujú na bazálnej membráne rôznych orgánov a tkanív, najmä ciev, aktivujú komplementový systém – lokálna zápalová odpoveď
• v dôsledku toho - poškodenie a dysfunkcia orgánu

Antinukleárne protilátky sú namierené proti rôznym štruktúram v normálnej bunke.

Typy antinukleárnych protilátok:

• anti-Ro (SS-A) - protilátky proti proteínom asociovaným s RNA Y1-Y5 v spliceozómoch
• anti-Jo1 - protilátky proti cytoplazmatickému antigénu Jo-1
• anti-Sm
• anti-La (SS-B) - protilátky proti proteínu spojenému s RNA polymerázou-3
• anti-Sci 70 - protilátky proti jadrovej topoizomeráze
• anti-U1 RNP - protilátky proti ribonukleoproteínu U1
• anticentromérne protilátky
• antihistónové protilátky

Indikácie

• diagnostika systémového lupus erythematosus, Shergenov syndróm

Systémový lupus erythematosus

Systémový lupus erythematosus- autoimunitné ochorenie spojivového tkaniva a krvných ciev. Ide o najzávažnejšie ochorenie spojivového tkaniva, pri ktorom dochádza k ostrým bolestiam kĺbov, poškodeniu kože ("motýľ"), seróznych membrán, srdca, obličiek, nervového systému, pľúc, trofických porúch.

Symptómy

• artritída - zápal kĺbu, prejavujúci sa bolesťou, opuchom, zhoršenou pohyblivosťou, začervenaním kože a zvýšením teploty nad ňou
• zápal vonkajšej výstelky srdca alebo pleury (alebo) neznámeho pôvodu
• zmeny vo výsledkoch (- bielkoviny alebo červené krvinky v moči)
• - ničenie so zvyšujúcou sa úrovňou
• trombocytopénia - znížený počet
• - znížený počet v
• kožné prejavy – vyrážka, zhrubnutie kože, najmä po aktív
• Raynaudov syndróm - periodické sfarbenie prstov na nohách a rukách (modré sfarbenie a začervenanie) so zhoršenou citlivosťou a bolesťou
• atypické neurologické a duševné symptómy
• zvýšená telesná teplota, únava, strata hmotnosti,

Metódy

Existujú dva spôsoby stanovenia antinukleárnych protilátok v krvi.

Nepriama imunofluorescenčná mikroskopia(FANA - fluorescenčný test na antinukleárne protilátky) na preparáte buniek Hep-2 (bunková línia získaná z laryngeálneho adenokarcinómu) - antinukleárne protilátky (ak existujú) sa viažu na antigény buniek Hep-2, pridávajú špeciálne svetelné značky, ktoré sa viažu na vytvorený komplex a pod mikroskopom sa sleduje intenzita a typ žiary. Najlepšia metóda na testovanie antinukleárnych protilátok. Iné meno - .

Výsledok štúdie je napísaný vo forme titra - maximálne zriedenie krvi, pri ktorom je viditeľná žiara, je tiež opísaný typ fluorescencie (v prípade pozitívneho výsledku). Čím viac protilátok, tým vyšší titer. Nízke titre sa považujú za negatívne, zatiaľ čo vysoké titre naznačujú zvýšenú koncentráciu antinukleárnych protilátok.

Typy fluorescencie hodnotené ANA:

• homogénne (difúzne, rovnomerné) - so systémovým lupus erythematosus, zmiešané ochorenia spojivového tkaniva (MCTD)
• granulárne (granulárne) - so systémovým lupus erythematosus, Sjogrenovým syndrómom, sklerodermiou, reumatoidnou artritídou a MCTD - najviac nešpecifické
• nukleárne (nukleárne) - so sklerodermiou a polymyozitídou
• centromerický - na sklerodermiu a CREST syndróm
• cytoplazmatická - dermatomyozitída, polymyozitída, autoimunitné ochorenia pečene, primárna biliárna cirhóza

Príklad pozitívneho výsledku testu na antinukleárne protilátky: „ Pozitívne riedenie/titer 1:320, homogénny obraz“.

Algoritmus činnosti lekára po štúdiu antinukleárnych protilátok metódou FANA

• negatívny výsledok testu na antinukleárne protilátky + príznaky - vykonajte testy: anti-Ro a anti-Jo1
• pozitívny výsledok testu na antinukleárne protilátky + prítomnosť / absencia symptómov - vykonať testy na anti-DNA, anti-Sm, anti-Ro, antihistónové a anticentromerické protilátky, anti-Sci-70, anti-U1 RNP, anti-Jo1 - závisí na prejavoch chorôb

Enzýmová imunoanalýza

Enzýmová imunoanalýza (ELISA) - protilátky prítomné v krvi sa viažu na zodpovedajúci antigén, čo vedie k zmene farby roztoku.

• menej ako 1,0 U - negatívny výsledok (normálne)
• 1,1-2,9 U - slabo pozitívny (vyžaduje opakovanie)
• 3,0-5,9 U - pozitívne
• viac ako 6,0 - výrazne pozitívne

Pozitívny výsledok testu na antinukleárne protilátky- to nie je diagnóza, ale výkričník o potrebe ďalšieho výskumu. Vyžaduje si pravidelné, dôkladnejšie vyšetrenie na čo najskoršie odhalenie možnej choroby.

Negatívny výsledok testu na antinukleárne protilátky naznačuje ich neprítomnosť v krvi, ale nevylučuje diagnózu autoimunitného ochorenia.

Norm

Normálne v krvi nie sú žiadne anti-nukleárne protilátky.

Dodatočný výskum

• všeobecný rozbor moču
• reumatické testy - rýchlosť sedimentácie erytrocytov (ESR),
• cirkulujúce imunitné komplexy
• C3 zložka komplementu
• C4 zložka komplementu

Čo ovplyvňuje výsledok?

• lieky - prokaínamid, fenytoín, penicilín, hydralazín
• ARI a prechladnutie, akékoľvek akútne alebo chronické infekčné ochorenie

Dôvody pre vznik ANA

1. Systémové ochorenia spojivového tkaniva

• - 95-100%, detekcia antinukleárnych protilátok určuje diagnózu
• (5-25%)
• (100%)
• (30-50%)
• juvenilná reumatoidná artritída (20-50%)
• (40-70%)
• (30-80%)
• (Sharpeov syndróm) 100%
• autoimunitná hepatitída (

Na základe protilátok a stanovenia ukazovateľov ich koncentrácie v krvnej plazme prebieha diagnostika mnohých stavov organizmu. Jedným z indikátorov je antinukleárny faktor, ktorý pod svojim názvom spája skupinu rôznych druhov protilátok namierených proti bunkovým komponentom. Keď je takýto faktor identifikovaný, má zmysel hovoriť o autoimunitnom ochorení, najmä o systémovom lupus erythematosus.

Aj keď je test univerzálny na určenie mnohých systémových patológií tela, najmä takého závažného ochorenia, ako je lupus erythematosus, sú s ním spojené niektoré zaujímavé vlastnosti. Používa sa od roku 1957, no táto technika sa rozšírila až od konca 80. rokov minulého storočia. Je potrebné poznamenať, že prítomnosť implantátov v prsníku zvyšuje titer antinukleárnych protilátok, ktorý sa pozoruje od 5% do 55% všetkých prípadov u pacientok.

Čo sú

Komplex protilátok, ktorý zahŕňa antinukleárny faktor, predstavuje viac ako 200 ukazovateľov, najčastejšie sú to imunoglobulíny triedy G, v ojedinelých prípadoch IgM a IgA. Objavujú sa pri patológiách charakterizovaných autoimunitnou alebo reumatickou povahou lézie v dôsledku narušenej imunitnej tolerancie voči vlastným tkanivám.

V niektorých stavoch imunitný systém nasmeruje všetky svoje sily, aby nebojoval proti cudzím faktorom, ale proti vlastným tkanivám, bunkám, čo by sa normálne nemalo stávať. Zhoršuje sa tolerancia voči niektorým bunkám, na ktoré je agresivita zameraná, vzniká autoimunitné ochorenie. Protilátky produkované v priebehu ochorenia alebo komplexy sa nazývajú autoimunitné.

Mnoho ľudí má malé množstvo autoprotilátok, ale to nie je príznakom choroby. Len závažná porucha imunity môže viesť k zvýšeniu hladiny autoprotilátok, to je dôvod na vhodnú diagnózu. Stále je však potrebné doplniť ďalšie štúdie, najmä krv, moč, ako aj klinické prejavy.

U osoby so systémovým lupus erythematosus ANF stúpa ešte predtým, ako sa objavia prvé príznaky. Zo všetkých pacientov má 95 % zvýšený antinukleárny faktor v krvi, ktorý sa dopĺňa s príznakmi ochorenia, čo následne potvrdzuje diagnózu.

Mechanizmus vzhľadu faktora

Existuje niekoľko dôvodov, ktoré prispievajú k rozvoju ochorenia u ľudí. Všetko sa deje v určitom poradí:

1. Vplyvom ultrafialového žiarenia slnka na kožu sa spúšťajú procesy geneticky naprogramovanej bunkovej smrti, ktorá sa nazýva apoptóza. Ide o normálnu reakciu tela, avšak v prípade ochorení systémového charakteru začnú lymfocyty energicky migrovať.
2. Pre imunitu sa stávajú dostupné dovtedy nedostupné, neviditeľné zložky buniek, najmä bunková membrána, jadierka, históny, membrána jadra a iné. Stávajú sa nahými a makrofágy namiesto využitia takéhoto materiálu prenášajú informácie ďalej, čím vyvolávajú imunitnú odpoveď tela.
3. B-lymfocyty, ktoré produkujú antinukleárne protilátky, reagujú na signál vyslaný makrofágom, interagujú s príslušným antigénom a vytvárajú komplex.
4. Na membránach orgánov a tkanív sa ukladajú komplexy, dochádza k tomu hojne na povrchu cievnej steny zvnútra, aktivuje sa komplement alebo lokálna imunitná odpoveď.
5. Poškodenie narúša funkciu orgánu.

Analýza, indikácie

Existuje niekoľko indikácií, kedy je predpísaný test na antinukleárne protilátky. V prvom rade ide o podozrenie na rozvoj systémového lupus erythematosus, Sjogrenov syndróm. Ak existuje jedno systémové ochorenie, lekár má podozrenie na iné, napríklad na pozadí lupusu sa môže vyvinúť antifosfolipidový syndróm.

Príznaky, kedy stojí za to podstúpiť test

Vždy existujú príznaky, ktorých vzhľad by mal človeka upozorniť, prinútiť ho podrobiť sa vyšetreniu. Lekár by mal viesť pacienta, ak existuje:

1. Artritída, prejavujúca sa zápalom kĺbu, bolesťou, opuchom, zhoršenou pohyblivosťou, začervenaním kože nad kĺbom a horúčkou.
2. Vyšetrenie na perikarditídu, zápal pohrudnice, ktorých príčina nie je známa, nebude rušiť.
3. Poškodenie obličiek spojené s porušením imunitného systému, výskyt zmien v analýze moču, najmä bielkovín, krvi.
4. Ďalšou indikáciou je hemolytický variant anémie, pri ktorom sa vo veľkom množstve ničia erytrocyty, stúpa hladina bilirubínu v krvi a rozbor moču.
5. Indikáciou je zníženie hladiny krvných doštičiek, neutrofilov v leukocytovom vzorci.
6. Kožné prejavy vo forme vyrážky, zhrubnutia, ku ktorému dochádza po vystavení slnku.
7. Raynaudov syndróm, pri ktorom prsty na nohách a rukách pravidelne menia svoju farbu. Stávajú sa bledými, modrými alebo červenými, citlivosť je narušená, bolesť sa obáva.
8. Indikáciou sú necharakteristické symptómy z neurológie alebo psychiatrie.
9. Ak teplota stúpa, vzniká únava, znižuje sa telesná hmotnosť a zväčšujú sa lymfatické uzliny.

Výskum odrôd

Existujú dve metódy, ktoré vám umožňujú určiť antinukleárne protilátky v krvi. Prvá sa nazýva nepriama imunofluorescenčná mikroskopia. Bunková línia pre ňu pochádza z adenokarcinómu v oblasti hrtana. Ak existujú antinukleárne protilátky, viažu sa na špecifické antigény, po ktorých sa pridávajú značky, ktoré môžu žiariť v určitom spektre svetla. Pod mikroskopom je možné určiť intenzitu, typ žiary.

Táto technika je uznávaná ako najlepšia na stanovenie indikátora antinukleárnych protilátok. Má iný názov - testovacie prúžky na lupus.

Výsledkom štúdie je titer alebo maximálne zriedenie krvi, ktoré dáva žiaru. Ak je výsledok pozitívny, opíše sa typ žiary. Titer stúpa pri veľkej akumulácii protilátok. Nízky titer možno považovať za negatívny výsledok a pri vysokom titri môžeme povedať, že koncentrácia antinukleárnych protilátok sa zvyšuje.

Druhou diagnostickou možnosťou je enzymatická imunitná analýza. Jeho podstata spočíva v tom, že protilátky, ktoré sú v krvi, prichádzajú do kontaktu s príslušným antigénom, výsledkom je, že roztok mení svoju farbu.

Treba poznamenať, že pozitívny výsledok testu nie je absolútnou diagnózou. To je signál, že je potrebné ďalšie vyšetrenie, ktoré pomôže identifikovať ochorenie v počiatočnom období, predpísať liečbu. Pri negatívnej analýze antinukleárnych faktorov možno hovoriť o ich úplnej absencii, ale diagnóza údajnej autoimunitnej patológie nie je vylúčená.

Je nevyhnutné vykonať krvné testy na rôzne ukazovatele. Je však potrebné pripomenúť, že výsledok môže byť ovplyvnený príjmom určitých liekov, ako aj akútnych alebo chronických ochorení. Špecialista vždy pomôže pochopiť všetky jemnosti, po ktorých stanoví diagnózu, odporučí, čo robiť ďalej.

Imunitný systém človeka je jedinečný dobre koordinovaný mechanizmus schopný reagovať na akékoľvek vonkajšie zavedenie patogénnych faktorov, čím chráni telo pred množstvom chorôb. Ale ako viete, z každého pravidla existujú výnimky a v tomto prípade vyzerajú ako reakcia imunitného systému na vlastné bunky, čo sa nazýva autoimunitné ochorenia.

Pri týchto patológiách sa vytvárajú protilátky, ktoré napádajú zdravé bunky, ovplyvňujú ich alebo ničia. V dôsledku toho dochádza k narušeniu fungovania jednotlivých tkanivových štruktúr a dokonca aj orgánov. Takéto patológie sa v dôsledku ich prevalencie a zapojenia niekoľkých orgánov alebo systémov do procesu nazývajú systémové ochorenia.

S príchodom moderných metód laboratórnej diagnostiky, jedným z nich je krvný test ANF na hľadanie antinukleárneho faktora, ktorý umožňuje identifikovať antinukleárne (antinukleárne) protilátky a určiť príčinu patológie. Tento indikátor je jedným z markerov systémových ochorení spojivového tkaniva (SCDT), akceptovaný ako „zlatý štandard“ tohto typu výskumu.

Základné pojmy charakterizujúce SZST

Ako už bolo opísané vyššie, patogenéza týchto patológií pochádza zo zlyhania funkcie imunitného systému a produkcie ochranných protilátok proti určitým zložkám vlastných buniek. Pre zvláštnosť ich pôvodu majú takéto bunky druhé meno - autoprotilátky. V procese zlyhania imunity sa dostávajú do kontaktu s proteínovými zlúčeninami jadra, nukleovými kyselinami a antigénmi cytoplazmy, čo vedie k objaveniu sa symptómov zápalových ochorení, ako sú:

• štrukturálne zmeny v tkanivách a orgánoch;
• ťažká neprimeraná únava;
• bolesť svalov a kĺbov;
• poškodenie kože;
• chudnutie a iné.

Antinukleárne protilátky (ANA) sa môžu tvoriť pri pomerne širokom spektre autoimunitných patológií, ale ich výskyt je najpravdepodobnejší pri systémovom lupus erythematosus (SLE).

V prípade príznakov dlhotrvajúceho zápalového procesu sa musí podať ANF

Referencia! Podľa štatistík u viac ako 90% pacientov s CTD je určená patologická produkcia takýchto protilátok. K dnešnému dňu bolo študovaných asi 200 ich druhov, ktoré dostali zovšeobecnený názov - antinukleárny faktor. Reprezentujú ich najmä imunoglobulíny triedy G, ale niekedy sa vyskytujú aj M alebo A.

Podstata krvného testu na antinukleárny faktor

Predtým, ako sa ponoríme do špecifík vykonávania výskumu v ANF, stojí za zmienku, že táto technika bola vynájdená a začala sa používať už dávno - v 60. rokoch minulého storočia. V diagnostickej praxi sa však rozšíril až na začiatku 80. rokov XX storočia po zlepšení. Vedec Beck použil bunky z laboratórnych zvierat ako substrát už v roku 1961 a až v roku 1982 Tan použil transplantovanú ľudskú bunkovú líniu HEp-2 na hľadanie ANP.

Hoci hlavným účelom použitia tohto testu je stanovenie diagnózy lupus erythematosus, stále sa považuje za univerzálnu metódu pre iné kolagenózy (CCDT). Medzi posledné patria:

• sklerodermia;
• dermatomyozitída;
• periarteritis nodosa;
• chronická aktívna hepatitída atď.

Nepriama imunofluorescencia sa považuje za jednu z najpohodlnejších a preto najčastejšie používaných metód na stanovenie antinukleárneho faktora v krvi pacientov. Štúdia sa uskutočňuje, keď sa krvné sérum aplikuje na bunky transplantovateľnej epiteloidnej línie adenokarcinómu ľudského hrtana HEp-2 (obsahujúceho určitý počet jadrových antigénov) s použitím značeného konjugátu (zlúčeniny) s protilátkami.

Táto voľba nebola urobená náhodou - bunky HEp-2 sú veľmi vhodným substrátom na štúdium biomateriálu. Majú pomerne veľké jadrá a keď sú vysadené na laboratórnom skle, rastú v jednej vrstve. Iné ľudské bunkové línie môžu byť použité ako substrát, ale úspešná morfológia a kultivácia rozhodne robí z HEp-2 nenahraditeľný materiál.

V priebehu diagnostiky sa počas inkubácie pacientovho séra s bunkovým substrátom v prítomnosti ANA kombinujú s príslušnými jadrovými antigénmi. Miesta väzby ANP s HEp-2 sú určené pomocou konjugátu značeného fluoresceínom (farbivom). Na posúdenie výsledkov reakcií, ktoré sa vyskytli, sa používa fluorescenčný mikroskop, ktorý umožňuje rozlíšiť povahu a stupeň výsledných väzov.

Luminiscenčný mikroskop pre laboratórny výskum ANF

Referencia! Ľudský HEp-2 má na rozdiel od tkanivových kryosekcií zvierat vyššiu rýchlosť bunkového delenia, čo umožňuje detekovať protilátky proti antigénom, ktoré sa exprimujú až pri delení. V ľudskom substráte tiež nie je žiadna bunková matrica, čo znižuje kvalitu vizualizácie študovanej luminiscencie.

Aké skupiny antigénov sa používajú v štúdii?

Pri dekódovaní materiálov je vždy potrebné brať do úvahy, že spektrum ANA zahŕňa pomerne veľkú skupinu autoprotilátok proti nukleoproteínom, ribonukleoproteínom, histónom, DNA a iným štruktúrnym jednotkám jadra. Z toho vyplýva, že funkcionalita testu je zameraná na detekciu protilátok proti zložkám jadra a cytoplazmy, ktoré boli pôvodne stanovené pri SLE.

Neskôr sa diagnostické možnosti štúdie rozšírili v dôsledku stanovenia podobných protilátok v iných CTD. Pri skríningových metódach na detekciu celkovej ANA sa spravidla používa určitý súbor antigénov, ktoré sa považujú za hlavné markery autoimunitných CTD.

Patria sem protilátky triedy IgG:

• SS-A (Ro) - jadrové ribonukleoproteíny;
• SS-B (La) - jadrové proteíny;
• Scl-70 - proteín-enzým (topoizomeráza-1);
• natívna dvojvláknová DNA;
• RNP / Sm - komplex antigénu;
• Jo-1 - RNA enzým - syntetáza;
• CENP-B (centroméra)
• bunky Hep-2;
• mitochondrie (PDC).

ANA sú pre telo prakticky neškodné - nie sú schopné preniknúť do živých tkanív. Ale v niektorých prípadoch sa môžu spojiť do komplexov antigén-protilátka, čo vedie k deštrukcii štrukturálneho tkaniva. Jedným z takýchto príkladov je lézia renálneho parenchýmu pri SLE. Keďže v procese so SZST je zapojených viacero orgánov, identifikácia ANA nemá prvoradý význam pre diagnostiku, ale považuje sa len za potvrdenie určitej symptomatológie.

Schopnosti analýzy ANF vyjadrené v percentách

Štúdium výsledkov

Po vykonaní všetkých potrebných postupov – odberu biomateriálu a jeho laboratórnej príprave na výskum, sa výsledky vyhodnotia a interpretujú. To zahŕňa stanovenie titra (koncentrácie) protilátok a typu fluorescencie. Významným parametrom pre diagnostiku je pomer koncentrácií viac ako 1:160. Napríklad pri exacerbácii reumatizmu môže prekročiť značku 1: 640, zatiaľ čo v období remisie dochádza k poklesu na 1: 160-1: 320.

Typ žiary zobrazuje ciele ANA, čo je obzvlášť dôležitý klinický moment, ktorý riadi následné kroky lekára pri vymenovaní diagnostických opatrení. Podľa povahy luminiscencie jadier pri použití HEp-2 sa určí viac ako 20 variantov farbenia jadier v závislosti od typov protilátok prítomných v biomateriáli. Medzi hlavné patria nasledujúce typy žiary.

• Periférne. Žiarenie indikuje prítomnosť anti-DNA protilátok, čo potvrdzuje SLE. Hlavným typom antigénov pre periférny typ sú histónové proteíny a DNA.
• Difúzne (homogénne). Takáto luminiscencia sa pozoruje pri SLE, sprevádzaná poškodením štruktúry obličiek a podobným CTD, nefritídou, sklerodermiou, ako aj liekmi indukovaným SLE. Antigény tohto typu predstavujú dsDNA, histonáty a nukleozómy.
• Nukleárny (jadrový). Tento typ je charakteristický pre systémovú formu sklerodermie a určuje sa v prítomnosti protilátok u pacientov - RNA polymeráza 1, PM / Scl, NOR, U3RNP.
• Cytoplazmatický. Tento typ osvetlenia indikuje prítomnosť ANA až tRNA syntetáz, menovite Jo-1, a pozoruje sa pri polymyozitíde.
• Granulovaný. Stanovuje sa pri Sjogrenovom syndróme, infekčnej mononukleóze, zmiešanej CTD (Sharpov syndróm, MCTD) a liekom indukovanom lupusovom syndróme. Prevažne prítomné antigény pre tento typ sú SS-A, SS-B, Sm, U1-RNP a PCNA.
• Veľké zrnité. Je charakteristická pre zmiešané CTD a podľa mnohých vedcov je spojená s prítomnosťou antigénu RNP.
• Jemnozrnný. Zisťuje sa prítomnosť protilátok vytvorených proti ribonukleovým proteínom - АSSP (АЦЦП), SS-A, SS-B a iné. Takéto protilátky sú charakteristické pre SLE, ako aj pre jeho špecifické kožné formy, reumatoidnú artritídu, sklerodermiu, polymyozitídu, Sjogrenov syndróm.
• Centromeric. Tento typ sa vyskytuje hlavne pri sklerodermii. Hoci v jednej vzorke krvi, najmä u jedincov s difúznymi CTD, možno v oddelenej plazme detegovať protilátky proti rôznym jadrovým zložkám.
• Bodové inklúzie v jadre. Tento typ sa zisťuje najmä pri ochoreniach pečene autoimunitnej povahy. S ním možno kombinovať niekoľko fluorescenčných typov, napríklad nukleárny a malogranulárny, čo je spôsobené protilátkami proti Scl-70.

Referencia! Je potrebné poznamenať, že so zvyšujúcim sa riedením plazmatického biomateriálu sa môžu meniť parametre luminiscencie, pretože mnohé protilátky sú charakterizované zmenou aktivity pri rôznych stupňoch koncentrácie.

Faktory, ktoré môžu skresliť výsledky

Spoľahlivosť údajov získaných počas štúdie môže byť ovplyvnená len niekoľkými faktormi, ktoré môžu vykazovať falošne pozitívny aj falošne negatívny výsledok. Nepravdepodobné reakcie s posunom nahor sa teda pozorujú u starších pacientov nad 60 rokov (podľa štatistík v 10–37 % prípadov) a pri užívaní liekov, ktoré spôsobujú lupus vyvolaný liekmi (niektoré antibiotiká, antikoncepcia, sulfónamidy, tiazidy diuretiká).

Zistilo sa, že u 5–55 % žien s prsnými implantátmi sa hladina koncentrácie ANA zvyšuje. Použitie glukokortikoidných liekov - Prednizolón, Metipred alebo Dexametazón môže viesť k chybnej diagnóze s posunom nadol.

Antinukleárny faktor

Antinukleárny faktor- laboratórny rozbor zameraný na stanovenie rôznych typov špecifických imunoglobulínov do štruktúr bunkového jadra. Index ANF sa zvyšuje pri systémových ochoreniach spojivového tkaniva. Test sa vykonáva s cieľom diagnostiky, odlíšenia, sledovania liečby, identifikácie exacerbácií. Predpisuje sa na klinické a laboratórne príznaky systémového lupus erythematosus, sklerodermie, Sharpovho syndrómu, Sjogrenovho syndrómu, reumatoidnej artritídy, zápalovej myopatie. Venózne krvné sérum sa vyšetruje metódou RNIF. Normálny indikátor je titer nie vyšší ako 1: 160. Podmienky prípravy testovacích údajov - 8 pracovných dní.

Základom reumatických ochorení je autoimunitná reakcia proti štruktúram bunkového jadra – komplexom bielkovín a nukleových kyselín. Antigény sa tvoria počas programovanej smrti epitelových buniek a lymfocytov. Ultrafialové lúče, infekčné agens, lieky urýchľujú deštrukciu buniek, spomaľujú odstraňovanie apoptotických teliesok a vyvolávajú rozvoj autoimunitných procesov. Protilátky proti štruktúram jadra sú zastúpené mnohými typmi, pri štúdiu antinukleárneho faktora sa ich izoluje asi osem. Výhodou testu je jeho vysoká špecifickosť – stanovujú sa protilátky, ktoré nie je možné purifikovať pre ELISA. Časť imunitných komplexov sa však počas RNIF extrahuje do plazmy, preto existuje možnosť falošne negatívneho výsledku.

Indikácie

Štúdium antinukleárneho faktora je indikované pre systémové patológie spojivového tkaniva. Základom pre zadanie testu je:

• Príznaky reumatického ochorenia... Typickými prejavmi sú horúčka, únava, slabosť, chudnutie, bolesti svalov a kĺbov, kožné vyrážky. Test sa používa na identifikáciu a odlíšenie SLE, sklerodermie, Sjogrenovho syndrómu, Sharpovho syndrómu, reumatoidnej artritídy, zápalových myopatií.
• Výsledky laboratórnych testov... Podozrenie na reumatickú patológiu vzniká so zvýšením ESR, hladiny C-reaktívneho proteínu a CEC. Na potvrdenie diagnózy je predpísané vyšetrenie.
• Diagnóza reumatického ochorenia... Analýza sa vykonáva niekoľkokrát do roka (frekvencia sa určuje individuálne) s cieľom kontrolovať priebeh patológie po cykle užívania imunosupresív - na posúdenie účinnosti liečby.

Príprava na analýzu

Biomateriálom na stanovenie antinukleárneho faktora je venózna krv. Postup odberu sa vykonáva ráno. Pravidlá prípravy sú nasledovné:

1. Posledné jedlo by sa malo dokončiť najneskôr 4 hodiny vopred. Pitná voda je povolená kedykoľvek.
2. Deň pred zákrokom je potrebné vylúčiť alkohol, fyzickú aktivitu, emocionálne utrpenie.
3. Užívanie liekov treba konzultovať s lekárom. Niektoré lieky vyvolávajú tvorbu protilátok, rozvoj lupusu vyvolaného liekmi. Počas užívania glukokortikosteroidov je možné získať falošne negatívne údaje.
4. Po darovaní krvi by sa mali vykonávať inštrumentálne diagnostické postupy, fyzioterapeutické sedenia.
5. Posledných 30 minút pred zákrokom je zakázané fajčiť.

V laboratóriu sa sérum izoluje z krvi. Stanovenie antinukleárnych protilátok v ňom prebieha metódou RNIF pomocou bunkovej kultúry HEp-2. Titer sa hodnotí podľa najvyššieho zriedenia biomateriálu, pri ktorom sa deteguje žiara jadrových štruktúr, typ imunoglobulínov - podľa povahy fluorescencie. Čas analýzy je 6-8 dní.

Normálne hodnoty

Normálne je výsledok testu na antinukleárny faktor negatívny. Titer nie je vyšší ako 1: 160 pre dospelých a deti. Pri interpretácii celkovej hodnoty sa berú do úvahy nasledujúce poznámky:

• Nízke titre ANA znižujú pravdepodobnosť autoimunitného ochorenia, ale nevylučujú ho. Pri SLE je výsledok negatívny v 5% prípadov, robí sa test na protilátky proti SS antigénom.
• Získanie normálneho výsledku po priebehu imunosupresívnej terapie potvrdzuje jej úspech.
• Negatívny výsledok na pozadí symptómov autoimunitnej patológie vyžaduje ďalšie testy (NCA, ANA pomocou ELISA).

Zvýšenie indikátora

Antinukleárne protilátky nemajú cytotoxické vlastnosti, ale po ich naviazaní na antigény sa vytvárajú imunitné komplexy, ktoré spúšťajú zápaly v cievnych stenách. Prejavujú sa léziami kože, obličkových glomerulov, kĺbových membrán, pohrudnice. Vyvíjajú sa symptómy, charakteristické pre systémové patológie. Možné ochorenia sú určené typom luminiscencie s minimálnym riedením séra:

• Homogénne... Difúzna fluorescencia indikuje prítomnosť protilátok proti ds DNA, histónov. Stanovuje sa pomocou SLE a liekmi vyvolaného lupusu.
• Periférne... Typ luminiscencie je určený umiestnením chromatínu, zisťuje sa v prítomnosti zložiek Ig až DNA špecifických pre SLE.
• Granulovaný... Komplexy nukleoproteínov sú antigény. Žiara je nešpecifická a nachádza sa pri mnohých reumatických ochoreniach. Vysoký titer a fluorescencia veľkých granúl sú pre Sharpov syndróm najcharakteristickejšie.
• Jadrový... Odráža prítomnosť špecifických Ig v štruktúrach jadierka. Odhaľuje sklerodermiu a Sjogrenov syndróm. Zriedkavo sa zaznamenáva pri endokrinopatiách, kožných patológiách, transplantáciách orgánov.
• Centromeric. Centroméry chromozómov sú antigény. Žiara potvrdzuje obmedzenú sklerodermiu.
• Cytoplazmatický... Vyvoláva ho prítomnosť protilátok proti tRNA syntetáze (Jo-1), ribozómy, organely. Umožňuje určiť zápalové myopatie, autoimunitné poškodenie pečene.
• Mitochondriálne. Antigény sú zložkami pyruvátdekarboxylázového komplexu. Luminiscencia je charakteristická pre primárnu biliárnu cirhózu.
• Bod... Súvisí s cirkuláciou protilátok proti nukleoproteínom, spája sa s autoimunitným poškodením pečene.

Zníženie ukazovateľa

Pokles ukazovateľa má výpovednú hodnotu pri sledovaní systémových ochorení spojivového tkaniva. Hladina ANA koreluje s aktivitou patologických procesov, preto je pokles ich koncentrácie známkou remisie a úspechu terapie.

Liečba odchýlok od normy

Test na antinukleárny faktor umožňuje zistiť prítomnosť protilátok proti jadrovým antigénom a určiť ich typ. Z tohto dôvodu je analýza široko používaná na diferenciálnu diagnostiku reumatických ochorení. Na interpretáciu výsledku a vymenovanie liečby je potrebné poradiť sa s lekárom - reumatológom, imunológom, dermatovenerológom.