Moderné metódy diagnostiky infekcie HIV. Diagnostika infekcie HIV Skríningová metóda na diagnostiku infekcie HIV

Diagnostika HIV je jednou z primárnych úloh, pred ktorými stoja zamestnanci dermatovenerologickej ambulancie, ako aj zamestnanci polikliniky.

Ochorenie lekári charakterizujú ako veľmi zákerné. Je charakterizovaný chronickým priebehom a nie je vhodný na úplnú liečbu. Je dôležité ho odhaliť včas, aby sme ho dostali pod kontrolu a zabránili nekontrolovanému šíreniu. Aké sú vlastnosti vírusu ľudskej imunodeficiencie a ako sa môže infikovať, pacienti sa často zaujímajú.

Aké sú spôsoby diagnostiky ochorenia a aké príznaky naznačujú infekciu?

Dnes môžete odvšadiaľ počuť, aká nebezpečná je infekcia HIV. Málokto však vysvetľuje, v čom spočíva toto nebezpečenstvo. Výsledkom je, že pacienti majú neúplný súbor informácií a v dôsledku toho neberú hrozbu vážne. Ale HIV je mimoriadne nebezpečné. Je klasifikovaný ako pomaly progresívne vírusové ochorenie náchylné na chronický priebeh. Pri tejto patológii je primárne ovplyvnený imunitný systém.

Lekári upozorňujú pacientov na skutočnosť, že smrť nenastáva na samotný vírus imunodeficiencie ako taký.

Osoba umiera na sprievodné infekcie, telo už nie je schopné poskytnúť plnú ochranu proti ktorým. Príčinou smrti sú tiež rakovinové nádory, ktoré nie sú schopné bojovať so zníženou imunitou.

V skutočnosti je mechanizmus, ktorým infekcia HIV ovplyvňuje imunitný systém, pomerne zložitý. Ako poznamenávajú lekári, pacienti tomu nemusia dôkladne rozumieť. Stačí vedieť, že ochorenie môže znížiť úroveň imunity na kritické hodnoty. V dôsledku toho sa telo nebude vedieť brániť rôznym vonkajším vplyvom, ktoré skôr či neskôr povedú k smrti.

Ako prebieha infekcia

Je dôležité pochopiť, že infekcia HIV je dnes obklopená širokou škálou mýtov.

Pacienti sú veľmi zle informovaní o tom, kedy sa môžu nakaziť a kedy je zdravie mimo ohrozenia života.

Prvá vec, ktorú si treba zapamätať, je, že HIV je vo svojom prostredí veľmi krehký. To znamená, že patogénny mikroorganizmus je schopný plnohodnotne a dlhodobo žiť iba v ľudskom tele. Neznáša zahrievanie nad 50 stupňov (okamžite zomrie). Tiež nie je schopný odolať procesom sušenia. Nie všetky telesné tekutiny obsahujú dostatok vírusu na to, aby došlo k infekcii.

Najväčšie nebezpečenstvo predstavuje:

  • krv;
  • pre-ejakulát;
  • spermie;
  • výtok zo ženskej vagíny;
  • lymfy;
  • materské mlieko.

Ak sa niektorá z týchto tekutín dostane do kontaktu so sliznicami, v ktorých sú mikrotraumy, alebo s poranenou pokožkou, dochádza k infekcii.

Je to tiež možné, ak sa cudzia tekutina dostane priamo do krvného obehu. Sliny a slzy, na rozdiel od všeobecného presvedčenia, nie sú hrozbou. Vzhľadom na povahu vírusu a jeho nízku mieru prežitia sa prenáša niekoľkými spôsobmi:

  • genitálny trakt t.j. s nechráneným pohlavným stykom, ktorý nevyhnutne zahŕňa kontakt biologických tekutín a slizníc tela citlivých na patogén;
  • parenterálna cesta t.j. prenos vírusu krvou počas jej transfúzie alebo v dôsledku použitia nesterilných nástrojov na lekárske účely;
  • vertikálna dráha t.j. z matky na dieťa (dnes, ak žena užíva antiretrovírusovú liečbu a odmieta dojčiť, pravdepodobnosť infekcie dieťaťa počas pôrodu je minimalizovaná).

Je dôležité pochopiť, že ak je pre infekciu cez kožu potrebná mikrotrauma alebo otvorené rany, potom to nie je nevyhnutná podmienka pre infekciu cez sliznicu. Rozdiel je vysvetlený skutočnosťou, že sliznice a pokožka ľudského tela majú úplne inú štruktúru. Tento rozdiel treba brať do úvahy.

Aké sú príznaky podozrenia na HIV

Mnohí pacienti sa zaujímajú o otázku, aké znaky sú zvyčajne podozrivé z infekcie vírusom ľudskej imunodeficiencie.

  • bezdôvodné zvýšenie teploty systémového typu, ktoré nemožno vysvetliť inou infekciou a ktoré napriek opatreniam prijatým na liečbu dlhodobo pretrváva;
  • silné zvýšenie veľkosti lymfatických uzlín (v prvom rade trpia uzliny v oblasti slabín, ale je možné aj ich zapojenie do celého tela);

  • silný pokles telesnej hmotnosti, ktorý nemožno vysvetliť diétami, stresom, hormonálnymi poruchami a inými dôvodmi;
  • sťažnosti na poruchy stolice, ktoré pacienta dlho sledovali, a nie je možné nájsť dôvod, prečo sa objavili;
  • výrazná tendencia k prechodu akýchkoľvek infekčných ochorení na chronické formy a na povahe patogénu nezáleží, bakteriálne aj vírusové patológie sú chronické;
  • vyvíjajú sa choroby vyvolané oportúnnou mikroflórou, ktoré nepredstavujú hrozbu pre osobu, ktorej imunita je plne funkčná (napríklad mykoplazmóza, ureaplazmóza, kandidóza atď.).

Klinika infekcie HIV je veľmi nešpecifická, ako hovoria lekári. Z tohto dôvodu je často ťažké stanoviť diagnózu. Mnohí pacienti alarmujúce príznaky úplne ignorujú a radšej nevyhľadajú lekársku pomoc. Aj keď choroba silne ovplyvňuje ich celkovú pohodu.

Je dôležité pochopiť, že infekcia HIV sa nemusí po dlhú dobu vôbec cítiť. A keď sa objavia prvé príznaky, človek ich nemusí ani spájať s možnosťou jeho infekcie a pokúša sa liečiť doma.

Diagnostické metódy

Laboratórna diagnostika HIV sa dlhodobo rozvíja a úspešne využíva na diagnostiku tohto nebezpečného ochorenia.

Choroba sa nedá rozpoznať iba podľa symptómov. Preto často rozhodujúcu úlohu zohráva potvrdenie diagnózy na základe laboratórnych techník.

Existujú rôzne metódy diagnostiky HIV. V Rusku sa v prvom rade uprednostňuje imunitný blotting, ako aj reakcie ELISA. Tieto metódy sa často používajú ako skríningové metódy, napríklad pri kontrole zdravotníckeho personálu.

Systémy ELISA

Pacienti sa často pýtajú svojich lekárov, akú metódu by mali použiť na začatie diagnostického vyhľadávania, ak majú podozrenie na infekciu vírusom ľudskej imunodeficiencie.

Každý kompetentný lekár povie, že by sa mala uprednostniť enzýmová imunoanalýza. Práve táto technika je prvou diagnostickou etapou na území Ruska.

Princíp ELISA je jednoduchý. V laboratóriu lekári vytvorili špeciálne proteíny. Sú schopné detekovať a interagovať s protilátkami produkovanými telom v reakcii na kontakt s HIV. Potom sa do systému pridá špeciálny indikačný enzým, ktorý zmení jeho farbu. V záverečnej fáze sa materiál spracuje pomocou špeciálneho prístroja a lekár dostane konečný výsledok.

ELISA je veľmi populárna.

Predovšetkým kvôli tomu, že je možné dosiahnuť výsledky, aj keď od zavedenia patogénu do tela neuplynulo viac ako niekoľko týždňov.

Je dôležité pochopiť, že enzýmová imunoanalýza nezisťuje v krvi samotný vírus, ale protilátky proti nemu.

U mnohých ľudí sa môžu začať vyrábať neskôr ako o dva týždne neskôr, čo môže viesť k chybnému výsledku. Existuje niekoľko generácií testov ELISA.

Najmodernejšie a najpresnejšie sú tie, ktoré patria do 3. a 4. generácie. Lekári poznamenávajú, že ak existuje možnosť výberu, je najlepšie uprednostniť európske činidlá, pretože ich presnosť dosahuje 99%. Čas na získanie výsledkov ELISA je v priemere 2 až 10 dní.

Prečo môže byť ELISA nepravdivá

Je dôležité pochopiť, že enzýmová imunoanalýza môže poskytnúť falošne pozitívne aj falošne negatívne výsledky. Aj keď riziko takéhoto vývoja udalostí je extrémne malé.

Pacient môže dostať falošne negatívne výsledky, ak bola analýza predložená príliš skoro a protilátky sa ešte nestihli v tele vytvoriť.

Na vylúčenie takejto reakcie sa pacientom odporúča vykonať niekoľko testov v rôznych intervaloch.

Pri niektorých chorobách sa zistí falošne pozitívny test. Napríklad pacienti s:

  • alkoholická hepatitída;
  • myelómy vo veľkom počte;
  • niektoré autoimunitné ochorenia;
  • ženy počas tehotenstva atď.

Pri takýchto ochoreniach je ľudská krv doplnená protilátkami. Štruktúrou sa môžu podobať HIV protilátkam, čo zamieňa reagencie a vyvoláva reakciu. Samozrejme, v posledných rokoch sú testovacie systémy čoraz citlivejšie. Problém falošných výsledkov však ešte nie je úplne vyriešený.

Imunoblotting

V moderných podmienkach nie je možné stanoviť pozitívnu diagnózu HIV iba na základe testu ELISA. Je potrebné potvrdiť získané výsledky, čo sa vykonáva pomocou reakcie imunitného prenosu (immunoblotting, IB).

Na vykonanie IB musí mať laboratórium špeciálne testovacie prúžky. Aplikujú sa na ne vírusové proteíny. Pred rozborom sa pacientovi krv odobratá zo žily špeciálnym spôsobom pripraví.

Získaný biologický materiál sa pridá do gélu, v ktorom sa oddelia proteíny podľa ich hmotnosti. Potom sa do výslednej hmoty spustí predtým pripravený pás.

Prúžok zvlhne (vyskytuje sa škvrna), pruhy sa na ňom zistia, ak sú v materiáli HIV proteíny. Ak proteíny chýbajú, zvlhčenie nemení vzhľad prúžku.

Existuje niekoľko interpretácií Western blotting. Avšak bez ohľadu na to, ako konkrétna nemocnica alebo laboratórium vykonáva dekódovanie, pravdepodobnosť správnej diagnózy je 99,9%.

Môže imunoblotting poskytnúť nesprávne výsledky, často sa pýtajú pacienti? Áno, je to možné, napríklad ak je pacient chorý na tuberkulózu, je v stave tehotenstva alebo trpí onkológiou.

PCR pomôcť

PCR je ďalšou metódou, ktorá dokáže diagnostikovať vírus ľudskej imunodeficiencie v krvi a iných biologických tekutinách, kde je jeho koncentrácia dosť vysoká.

Ako lekári poznamenávajú, polymerázová reťazová reakcia môže poskytnúť pozitívny výsledok do 10 dní po prvom kontakte tela s infekciou.

Je dôležité pochopiť, že PCR v niektorých prípadoch poskytuje falošne pozitívne výsledky. Vysvetľuje to skutočnosť, že metóda má veľmi vysokú citlivosť.

V dôsledku toho často reaguje na podobné protilátky, čo naznačuje úplne odlišné patologické procesy v tele pacienta.

Napriek vysokej citlivosti a nízkej pravdepodobnosti získania falošných výsledkov sa PCR nepoužíva univerzálne. Vysvetľuje to niekoľko faktorov. Po prvé, na vykonanie polymerázovej reťazovej reakcie je potrebné špeciálne vybavenie, ktorého cena je pomerne vysoká. Po druhé, personál pracujúci so zariadením musí byť vysoko kvalifikovaný, čo môže tiež spôsobiť ťažkosti. Tieto vlastnosti v kombinácii robia z PCR nákladnú diagnostickú metódu a v dôsledku toho nie je dostupná pre každého.

Napriek tomu, že PCR nie je skríningová metóda, používa sa napríklad pri kontrole novorodenca na infekciu vírusom ľudskej imunodeficiencie.

Expresné systémy pre diagnostiku

Lekári a vedci vynaložili veľké úsilie na vytvorenie rýchlych testov na posúdenie infekcie HIV. Ako lekári poznamenávajú, pri použití týchto systémov je možné získať výsledok do 15 minút po vykonaní testu.

Rýchle testy HIV sú založené na princípe imunochromatografie. Systém zvyčajne obsahuje prúžok namočený v špeciálnych činidlách.

Úlohou pacienta je aplikovať krv, spermie alebo inú biologickú tekutinu, ktorá môže obsahovať protilátky proti vírusu.

Ak sa nájdu, potom sa na prúžku objavia dva farebné pásy, z ktorých jeden je kontrolný a druhý diagnostický. Ak nie, tak sa na svetlo dostane len ovládací pásik.

Je dôležité pochopiť, že rýchle testy nedávajú 100% záruku, že osoba nie je infikovaná alebo naopak infikovaná HIV. V každom prípade výsledky získané s ich pomocou musia byť potvrdené v laboratóriu pomocou Western blottingu.

Testovacie systémy expresného typu sú vhodné pre pacientov, ktorí sa chcú upokojiť doma. Ako však lekári poznamenávajú, aj keď s ich pomocou človek dostal negatívny výsledok, ak máte podozrenie na negatívne zmeny v tele, mali by ste sa stále poradiť s lekárom.

Ktorého lekára by ste mali kontaktovať, ak máte podozrenie na infekciu

Mnohí pacienti sa pýtajú, ku ktorému lekárovi by mali ísť, ak existuje podozrenie na infekciu HIV. V prvom rade sa odporúča navštíviť venereológa. Práve tento lekár sa špecializuje na choroby, ktoré sa môžu prenášať z človeka na človeka sexuálnym kontaktom.

Venerológ bude schopný vykonať kompetentné vyšetrenie, zhromaždiť anamnézu a rozhodnúť, aké vyšetrenia potrebuje pacient na presnú diagnózu. Podľa vlastného uváženia môže pacienta poslať aj do infekčnej nemocnice. Najmä ak má stále podozrenie, že má HIV.

Vírus ľudskej imunodeficiencie je bežné ochorenie. Môže tomu čeliť každý, kto je sexuálne aktívny.

Znalosť charakteristík šírenia a diagnostiky tejto choroby v modernej realite je životne dôležitá, ak si pacient chce zachovať zdravie a dlhovekosť. Len včasná návšteva lekára vám umožní dostať infekciu pod kontrolu a chrániť sa pred ňou!

Pred testovaním alebo skríningom protilátok proti HIV existujú dva široké, ale veľmi dobre definované ciele – vyhľadávanie prípadov a dohľad. Keď sú prípady identifikované, prvým krokom je objasnenie stavu infekcie HIV u každého daného jedinca, aby sa predpísala vhodná liečba alebo sledovanie s vhodnými opatreniami.

Účelom surveillance je odhadnúť prevalenciu HIV, distribúciu infekcií a ich trendy v skupine alebo celej populácii.

Citlivosť testu na protilátky proti HIV je mierou jeho schopnosti presne detegovať tieto protilátky vo vzorke a špecifickosť testu je mierou jeho schopnosti presne potvrdiť neprítomnosť protilátok, ak nie sú prítomné vo vzorke. vzorka. V ideálnom prípade by mala senzitivita a špecifickosť testu dosiahnuť 100 %. V praxi túto požiadavku nespĺňa ani jeden biologický test a napriek tomu patria používané testy na protilátky proti HIV medzi najcitlivejšie a najšpecifickejšie dostupné testy v súčasnosti.

Laboratórna diagnostika AIDS spočíva vo vykonávaní virologických, sérologických, imunologických štúdií materiálu od chorých osôb s podozrením na toto ochorenie.

Vo virologických štúdiách možno na izoláciu vírusu použiť primárne kultúry mononukleárnych krviniek. Izolácia a identifikácia vírusu je metodicky zložitá a možno ju vykonávať v špecializovaných laboratóriách. Najúčinnejšou diagnostickou metódou, ktorá sa v súčasnosti používa pri rutinných hromadných vyšetreniach, je detekcia protilátok proti vírusu ľudskej imunodeficiencie. Protilátky proti HIV sa môžu objaviť do konca prvého mesiaca infekcie. Podľa mnohých autorov trvá vývoj sérokonverzie 4-7 týždňov až 6 mesiacov alebo viac. Prítomnosť protilátok má pri AIDS diagnostickú hodnotu alebo poukazuje na riziko jeho rozvoja. Protilátky nie sú len sérologickým markerom AIDS. Odhaľujúce sa v predklinickej fáze ochorenia umožňujú jeho včasnú diagnostiku. Ich prítomnosť je obzvlášť dôležitá pre detekciu nosičov. Protilátky sa detegujú počas mnohých rokov, prakticky počas celého života. Vedci zistili paralelnosť pri detekcii vírusu a protilátok proti nemu, to znamená, že prítomnosť protilátok proti vírusu imunodeficiencie naznačuje vysokú pravdepodobnosť, že osoba je nosičom vírusu.

Protilátky proti antigénu HIV, ktoré sa objavujú v inkubačnej dobe, sa s rozvojom ochorenia naďalej intenzívne tvoria, pretože antigénne podráždenie je stimulované viriónmi uvoľnenými z infikovaných lymfocytov a subviriónovými zložkami, ktoré sa dostávajú do krvného obehu počas rozpadu infikovaných buniek, a infikované lymfocyty. Zároveň provírus vložený do genómu infikovaných buniek zostáva nedostupný pre špecifické protilátky. To vysvetľuje zdanlivo paradoxný fakt: čím viac protilátok proti vírusu ľudskej imunodeficiencie je v krvnom sére, tým ľahšie je izolovať samotný vírus od pacienta. Stáva sa to preto, že protilátky produkované v reakcii na vírusovú infekciu nie sú neutralizujúce a v dôsledku toho nemajú viditeľný účinok na vírus, ale sú s ním jednoducho prítomné v tele. Na detekciu protilátok (AT) proti vírusu AIDS bolo vyvinutých množstvo testov, ktoré umožňujú vykonávať štúdie na dostatočne vysokej úrovni špecifickosti a citlivosti. Ide o metódy rádioimunoanalýzy na pevnej fáze, rádioimunoprecipitácie, imunofluorescencie, enzýmovej imunoanalýzy a imunitného prenosu. Najširšie uplatnenie v praxi našli metódy ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay), ktoré sa vyznačujú vysokou citlivosťou, schopnosťou kvantitatívne a vizuálne zaznamenávať výsledky reakcie, vďaka čomu je metóda dostupná laboratóriu akejkoľvek úrovne. . ELISA využíva zahraničné a domáce testovacie systémy.

Pozor si treba dávať na deti narodené infikovaným matkám. Pri absencii kliniky sa dieťa považuje za infikované, ak AT až HIV pretrváva po roku. Ak sa v teste ELISA dosiahne pozitívny výsledok, je potrebné trikrát otestovať séra, ktoré poskytli jednorazové pozitívne výsledky, a potvrdiť pozitívny výsledok v nezávislom systéme - imunitný blotting

Detekcia AT v reakcii ELISA neposkytuje dostatočné informácie, pretože sa nehovorí o stave subjektu, ale iba naznačuje inkubáciu, ochorenie alebo prítomnosť asymptomatickej infekcie. Imunitný blotting poskytuje veľa informácií, keďže prítomnosť AT na mnohých antigénoch HIV je charakteristická pre ťažké ochorenie, zatiaľ čo reakcia s 1-2 antigénmi je typická skôr pre mierny infekčný proces

Informatívny je výpočet počtu T (pomocníkov) a pomeru T4 k Te (supresorov) lymfocytov, stanovený pomocou monokonálnych protilátok. Dôležitým kritériom ochorenia môže byť prudké zvýšenie množstva imunoglobulínov, najmä A a V. Pri všeobecnej klinickej analýze krvi môže ochorenie naznačovať lymfopénia, leukopénia, erytropénia, trombocytopénia, eozinofília.

Testy HIV používané na účely dohľadu nemusia byť také presné, ako sa klinicky vyžaduje. Pri veľmi nízkej prevalencii HIV v populácii však musia byť všetky pozitívne vzorky opätovne testované v dodatočných testoch.

Odber krvi na testovanie HIV protilátok alebo na skríning môže byť sprevádzaný registráciou mien subjektov (pomenovaný odber), alebo môže byť vykonaný bez registrácie mien alebo individuálnych identifikačných údajov (anonymný odber) (tabuľka 2).

Pre anonymný skríning bez zohľadnenia identifikačných informácií sú charakteristické tieto body: používajú sa vzorky krvi odobraté na iné účely; anonymita je zaručená z dôvodu, že sa nezhromažďujú alebo neberú do úvahy identifikačné údaje; nie je potrebné získať súhlas skúmaného; nie je potrebný kontakt s poradenskými a sociálnymi službami; Napokon, a čo je najdôležitejšie, chyby v štatistických odhadoch, v závislosti od úrovne participácie populácie, sú minimalizované.

Zatiaľ čo presnejšie údaje možno získať z anonymného testovania na HIV, táto metóda má nasledujúce nevýhody: nemôže eliminovať potenciálne skreslenie výberu; údaje o vysoko rizikovom správaní a iných dôležitých premenných nie sú dostupné a nemožno ich spätne zbierať; nie je možné nadviazať kontakt s ľuďmi postihnutými HIV s cieľom informovať ich o ich stave; vyšetrenie možno vykonať len v skupinách osôb, ktorým bola krv odobratá na iné účely.

V oblastiach, kde sa prevalencia HIV považuje za veľmi nízku, by sa mal dohľad nad zdravotným systémom zamerať predovšetkým na jednotlivcov alebo populácie s najvyšším rizikom správania sa HIV.

Krv na testovanie HIV v tejto rizikovej skupine sa najľahšie získava z centier pre pohlavné choroby alebo podobných zariadení. Ak je bežné aj vnútrožilové užívanie drog, mali by sa odoberať vzorky krvi užívateľom drog v špecializovaných ústavoch. Zvyčajne postačuje odber krvi raz za 3 alebo 6 mesiacov vo väčšine rizikových skupín z geografických oblastí, kde je takýchto skupín najviac. Výnimkou môžu byť rizikové skupiny ako narkomani praktizujúci vnútrožilovú aplikáciu drog, u ktorých môžu byť potrebné častejšie vyšetrenia.

WHO v súčasnosti vyvíja systém klasifikácie (stupňovania) chorôb pre klinické skúšky, ktorý možno použiť aj pri skúškach liečby, čo môže mať aj predikčnú hodnotu. Účelom takéhoto systému však nie je nahradiť existujúce definície AIDS používané pri zdravotnom dozore.

V súčasnosti sa všade vyvíjajú systémy plánovaného (rutinného) sledovania HIV. Tieto systémy je potrebné prispôsobiť existujúcej epidemiologickej situácii; preto sa metódy odberu vzoriek v populáciách s veľmi nízkou prevalenciou vírusu musia nevyhnutne líšiť od metód používaných tam, kde je prevalencia stredná alebo vysoká.

Takýto dohľad zahŕňa rutinné prieskumy dobre definovaných a dostupných populácií. V prvom rade by mala zahŕňať tie skupiny, ktoré sú najviac ohrozené infekciou a do každej z týchto skupín je potrebné vybrať konštantný vopred stanovený počet osôb na vyšetrenie.

V posledných rokoch sa anonymný skríning v neidentifikovanej populácii stáva čoraz rozšírenejším ako presný a nákladovo efektívny spôsob epidemiologického dohľadu nad HIV v systéme zdravotnej starostlivosti.

Odporúčania: Vyšetrenie na prítomnosť ľudský vírus nedostatočnej imunity (Hiv) sa má vykonávať pravidelne u osôb liečených na sexuálne prenosné choroby, drogovo závislých, homosexuálov, bisexuálov a iných osôb patriacich do rizikových skupín. Testovanie na HIV by sa malo ponúkať aj tehotným ženám a ženám naznačujúcim tehotenstvo, ktoré sú ohrozené vírusom HIV.

HIV testovanie Nemali by sa vykonávať bez súhlasu a bez vhodnej rady pred a po teste, lekári by mali byť opatrní pri používaní vhodných testov a laboratórií. Jedinci s pozitívnym sérologickým výsledkom vyžadujú primerané poradenstvo po teste. Vyžaduje sa okamžitá identifikácia sexuálnych partnerov. Jedinci s negatívnym výsledkom testu tiež vyžadujú poradenstvo po teste a opätovné testovanie podľa pokynov.

Odhaduje sa, že 1-1,5 milióna ľudí v Spojených štátoch infikovaných vírusom HIV... Počas 10 rokov vývoja HIV sa približne u 50 % infikovaných vyvinul syndróm získanej imunodeficiencie (AIDS), zvyšok má iné klinické ochorenia spojené s infekciou HIV. V súčasnosti neexistuje žiadna liečba, ktorá by dokázala zabrániť úmrtiu pacientov s AIDS. V predlicencovanej štúdii AZT (azidotymidín, zidovudín) iba polovica pacientov prežila viac ako rok po diagnóze; len 15 % žilo viac ako 5 rokov. Z 82 764 prípadov hlásených CDC na konci roku 1988 zomrelo 56 % (viac ako 46 000 pacientov), ​​vrátane viac ako 80 % prípadov diagnostikovaných pred rokom 1985.

AIDS- jediná vážna choroba v Spojených štátoch, úmrtnosť na ňu stúpa. Výskyt je najvyšší medzi mladými ľuďmi (25-44 rokov) a AIDS je jedným z hlavných dôvodov zníženia potenciálnej strednej dĺžky života. V rokoch 1984 až 1987 sa AIDS posunul zo 130. na 7. miesto medzi hlavnými príčinami poklesu potenciálnej strednej dĺžky života na 65 rokov. AIDS je hlavnou príčinou úmrtí medzi drogovo závislými (IV) a hemofilikmi. Od objavenia AIDS v roku 1981 do konca roku 1988 bolo hlásených 82 764 prípadov AIDS. Do konca roku 1992 sa predpokladá, že bude hlásených viac ako 365 000 ochorení a 260 000 ľudí zomrie na AIDS. V súčasnosti sa na boj proti AIDS v Spojených štátoch vynakladá 2,2 miliardy USD. Očakáva sa, že tieto náklady v roku 1992 vzrastú na 12 miliárd.

HIV infekcia pozorované najmä u homosexuálov a bisexuálov, narkomanov a osôb s heterosexuálnym kontaktom s infikovanými ľuďmi. Medzi ďalšie rizikové skupiny patria príjemcovia transfúzií s hemoféliou a deti narodené infikovaným matkám. Séropozitívne výsledky sa pohybujú od 20 do 50 % u homosexuálov a bisexuálov v závislosti od miesta bydliska a od 5 do 50 – 65 % u drogovo závislých žijúcich v metropolách, ako je New York. Černosi tvoria 36 % všetkých hlásených prípadov AIDS a 16 % tvoria Hispánci.

V závislosti od geografickej oblasti, počtu žien, ktoré rodia, infikovaných vírusom HIV, sa pohybuje od 0,02 do 3 %. Existujú informácie, ktoré naznačujú, že tehotné ženy infikované HIV majú vyššiu úmrtnosť na vírusové ochorenia a vyššie riziko rozvoja AIDS. Asi 30-35% prenáša vírus na svoje deti. Tri štvrtiny prípadov AIDS u detí mladších ako 13 rokov sú spojené s prenatálnou infekciou.

Účinnosť skríningových testov na infekciu HIV.

Hlavný skríningový test na stanovenie protilátok proti HIV je enzýmová imunoanalýza (ELISA alebo EIA). ELISA má účinnosť a citlivosť približne 99 %, ak sa dodaná súprava používa v optimálnych laboratórnych podmienkach. V bežnej praxi sa častejšie objavujú falošne pozitívne a falošne negatívne reakcie. Falošne negatívne reakcie sa zvyčajne vyskytujú z biologických dôvodov v prvých 6-12 týždňoch po infekcii, keď si telo HIV-infikovaných ľudí ešte nestihlo vytvoriť detekovateľný počet protilátok. Falošne pozitívne reakcie môžu byť spôsobené špecifickými sérologickými reakciami u jedincov s imunologickými ochoreniami alebo viacerými ochoreniami. Aby sa znížila pravdepodobnosť falošne pozitívnych výsledkov, test ELISA v sérii sekvenčných testov môže mať špecificitu až 99,8 %. Avšak aj táto vynikajúca citlivosť vedie k nízkej miere skorého rozpoznania pozitívnej HIV reakcie, keď sa testovanie vykonáva v skupine s nízkym rizikom.

Ukázalo sa, že tri zo štyroch osôb, ktoré majú pozitívnu reakciu, opakovane HIV ELISA test sú falošne pozitívne, keď je prevalencia ochorenia 30 na 100 000 (predpokladá sa, že ELISA má senzitivitu 98 % a špecificitu 99,8 %).

Je tiež potrebné potvrdiť výsledky ELISA vykonaním nezávislých testov vysokej špecifickosť pre infekciu HIV(napr. "West Spot", rádioimunologické metódy a metódy nepriamej imunofluorescencie). West Spot je najbežnejším z týchto testov v Spojených štátoch.

Sériové testy ELISA dodávané v súlade s normami na infekciu HIV s ich záverečným testom „Western Spot“ majú falošne pozitívny podiel nižší ako 0,001 %. Dôležitým problémom je, že mnohé laboratóriá nepoužívajú štandardizované metódy na prácu s testom West Spot, keďže presnosť testu vo veľkej miere závisí od výberu chemikálií, kvalifikácie technického personálu a metód analýzy výsledkov, laboratórií, ktorým chýba správna kontrola kvality vydáva viac falošne pozitívnych a falošne negatívnych výsledkov, ako sa pozorovalo za optimálnych podmienok.

Okrem toho môžu spôsobiť niektoré implicitné kombinácie vírusovo špecifických proteínových skupín pozitívny test na infekciu HIV pri aplikácii West Spot testu. Môže byť tiež potrebné opraviť falošne pozitívne výsledky ELISA v prípadoch, keď West Spot neposkytuje jednoznačný výsledok. Stáva sa to v 15-20% testov vykonaných v skupinách s nízkym rizikom. Ak osoba nie je infikovaná, potom "West Spot" nemusí priniesť výsledky niekoľko mesiacov. Použitie vírusových kultúr v budúcnosti môže vytvoriť tretiu etapu diagnostických testov na zníženie rizika diagnostickej chyby.

- Späť na obsah sekcie " "

Včasná diagnostika infekcie HIV je nevyhnutná. Z toho závisí zložitosť terapie a vývoj patologických komplikácií. Dnes existuje veľa inovatívnych výskumných metód na identifikáciu takejto hroznej diagnózy. O tom sa bude diskutovať ďalej.

Aké sú metódy na diagnostikovanie infekcie HIV?

V skutočnosti existuje mnoho spôsobov, ako diagnostikovať HIV. V priemere sú rozdelené do podskupín - laboratórny výskum, diferenciálne vyšetrenie a hardvér. Okrem toho musíte vziať do úvahy fázy vykonávania diagnostických opatrení. O tomto všetkom a ďalších aspektoch si povieme viac.

Laboratórna diagnostika

Pre uvažovanú diagnostickú metódu je potrebné vysoko špecializované laboratórium. V takýchto podmienkach možno identifikovať nasledujúce indikácie:
  • Stanovia sa protilátky, antigény patogénov a imunitné komplexy.
  • Keď sa zistí vírus, je kultivovaný a identifikuje sa genómový materiál a enzýmy.
  • Hodnotí sa funkčnosť imunitného systému.
  • Epinadzor a sledovanie prevalencie vírusu ľudskej imunodeficiencie sa vykonáva.
  • Študuje sa dynamika distribúcie a určuje sa populácia.
  • Je možné určiť stupeň bezpečnosti transplantácie a transfúzie krvi.
Ak sa zistí vhodný patogén HIV, pacient je odoslaný na ďalšie vyšetrenie. Potom je osoba zaregistrovaná na ďalšie sledovanie progresie ochorenia.

Odlišná diagnóza

Choroba sa rozlišuje z rôznych dôvodov:
  • Pri prvých príznakoch infekcie HIV v akútnej fáze, najmä ak existuje syndróm podobný mononukleóze. Diagnostika je založená na patológiách, ako je infekčná mononukleóza, syfilis, rubeola, adenovírus, akútna leukémia, yersinióza, hyperkeratóza.
  • Ak HIV vstúpi do štádia pretrvávajúcej generalizovanej lymfadenopatie, potom sa rozlišujú ochorenia, pri ktorých sa lymfatické uzliny zväčšujú. Napríklad lymfocytová leukémia, syfilis, toxoplazmóza, lymfogranulomatóza. V tejto fáze sa symptómy pacienta stávajú výraznejšími.
  • Ak sa zistia sekundárne patológie, diferencuje sa imunodeficiencia, ktorá vznikla na pozadí užívania určitých skupín liekov - radiačnej terapie, užívania glukokortikosteroidov a cytostatických liekov. Imunita je výrazne znížená pri ochoreniach ako myelóm, lymfoidná leukémia, onkologické novotvary atď.
  • Ak je HIV lokalizovaný v ústnej dutine, potom sa rozlišujú ochorenia ústnej sliznice.

Expresná diagnostika

Dodnes boli vyvinuté dokonca aj rýchle testy, vďaka ktorým je možné do 15 minút určiť prítomnosť HIV infekcie. Je ich viacero druhov:
  • Najpresnejší test je imunochromatografický. Test pozostáva zo špeciálnych prúžkov, na ktoré sa aplikuje kapilárna krv, moč alebo sliny. Ak sa zistia protilátky proti HIV, prúžok má farebnú a kontrolnú čiaru. Ak je odpoveď nie, je viditeľný iba riadok.
  • Súpravy na domáce použitie "OraSure Technologies1". Vývojár - Amerika. Tento konkrétny test bol schválený FDA.
  • Existujú aj iné rýchle testy, ktoré však nemajú schválenie špecialistov, a preto sú na testovanie nežiaduce.

Ak sa zistí pozitívna reakcia na vírus ľudskej imunodeficiencie, je potrebné dodatočne vykonať príslušné vyšetrenie v klinickom prostredí.

Včasná diagnóza

Existuje včasná diagnostika HIV, aby bolo možné včas určiť riziká poškodenia imunitného systému. Vďaka tomu je ochorenie zastavené v počiatočných štádiách, v dôsledku čoho sa infekcia iných vnútorných orgánov zníži na minimum.

Aby ste mohli nezávisle diagnostikovať patológiu v počiatočných štádiách, venujte pozornosť príznakom, ktoré v tomto prípade existujú:

Polymerická reťazová reakcia

PCR alebo polymerázová reťazová reakcia sa používa na identifikáciu akéhokoľvek infekčného patogénu vrátane vírusu HIV. V tomto prípade sa deteguje jeho RNA a patogén môže byť identifikovaný vo veľmi skorých štádiách (po infekcii musí prejsť najmenej 10 dní).

Ide o pomerne drahú diagnózu, ale v niektorých prípadoch môže poskytnúť falošný výsledok. Preto sa pri testovaní na HIV dodatočne používajú aj iné metódy.



Kvantifikácia polymerázovej reťazovej reakcie je potrebná na určenie rýchlosti rozvoja HIV a komplikácií, ako je AIDS. To umožňuje včas určiť prognózu dĺžky života pacienta infikovaného HIV.

Imunitný blotting

Imunitný blotting je poslednou metódou vyšetrenia pacienta pred stanovením presnej diagnózy. Technika je založená na použití špecializovaného prúžku (nitrocelulóza) s vírusovými proteínmi. Lekár odoberie venóznu krv a následne ju odošle na spracovanie. Po tomto procese sa srvátkové proteíny rozdelia na gélovitú látku na základe molekulovej hmotnosti a náboja. Na tento účel sa používa zariadenie s efektívnym elektrickým poľom. Potom sa vyššie uvedený prúžok umiestni do tohto gélu a blotuje, to znamená, že sa podrobí blotovaniu. Toto sa vykonáva v špecializovanej bunke.

Výsledok je určený väzbou krvných bielkovín na bielkoviny uložené na nitrocelulózovom prúžku. Ak je HIV prítomný v tele pacienta, potom sú viditeľné jednotlivé čiary. Existujú určité línie, ktoré signalizujú prítomnosť HIV. Existujú však aj podhodnotené čísla. V tomto prípade existuje riziko vzniku počiatočného štádia vírusu ľudskej imunodeficiencie, vzniku onkologických nádorov, tuberkulózy a transfúzie krvi.

ELISA test

ELISA test sa vzťahuje na skríningovú metódu vyšetrenia na podozrenie na HIV. Výskum prebieha v laboratórnych podmienkach. Práve tam vznikajú špecifické proteíny choroby, ktoré sú schopné zachytiť proteíny produkované ľudským telom. Pri interakcii s činidlami sa farba indikátora zmení. Nedeteguje sa teda samotný patogén, ale protilátky proti vírusu. Tento test dokáže odhaliť vírus ľudskej imunodeficiencie v počiatočných štádiách vývoja.

Existuje niekoľko typov testov ELISA, ale používajú sa iba najnovšie poznatky - 3. a 4. generácia. Technika je založená na odbere krvnej tekutiny zo žily. Existuje určitá príprava - pacient by nemal konzumovať jedlo 8 hodín pred vykonaním testu. Preto sa krv odoberá ráno nalačno.

Ako prebieha diagnostika počas inkubačnej doby?

Inkubačná doba vírusu HIV je 90 dní. Počas tohto obdobia je ťažké zistiť prítomnosť patológie, ale dá sa to urobiť pomocou PCR.

Potom je človek počas celého roka pod prísnym dohľadom lekárov a absolvuje viaceré vyšetrenia. Až po tomto období je možné presne stanoviť diagnózu – HIV.

Charakteristiky diagnostiky u detí

Ak sa žene s diagnózou vírusu ľudskej imunodeficiencie narodí dieťa, dieťa sa vyšetruje počas prvých 3 rokov života. Faktom je, že v tomto období môžu byť protilátky matky v krvnej tekutine dieťaťa. Ani krvné testy však infekciu nepotvrdia. Samozrejme, existuje veľa prípadov, keď sa choroba zistí hneď po narodení. Podrobnosti o tehotenstve s infekciou HIV.

Prvé testy na HIV sa u dieťaťa robia na druhý deň po narodení. Potom po dosiahnutí 2 mesiacov, potom každé 4 mesiace.

Na identifikáciu patológie v detstve sa používajú techniky sérologického vyšetrenia, PCR. Je to posledný typ diagnózy ochorenia, ktorý umožňuje odhaliť DNA a RNA vírusu už v prvých mesiacoch života bábätka. Na tento účel sa dieťaťu odoberie krv, ktorá sa následne vloží do skúmavky s konzervačnou látkou EDTA. Ďalej sa materiál skladuje 2 dni pri teplote nepresahujúcej 8 stupňov. Ale nie je dovolené ani zmrazovať krv. Môže sa použiť aj suchá krvná tekutina, ktorá sa získava z plnej krvi a suší sa.


Diagnostické kroky

Diagnostické opatrenia na identifikáciu vírusu ľudskej imunodeficiencie sa vykonávajú v troch hlavných fázach:
  • Predtriedenie alebo preosievanie.
  • Referenčná diagnostika.
  • Potvrdzujúci krok alebo odborná diagnostika.

Screening - predtriedenie

Predbežná fáza vyšetrenia vám umožňuje určiť celkové protilátky pomocou enzýmovej imunoanalýzy, tj ELISA. Informáciu o prítomnosti vírusu môžete získať už 3 mesiace po infekcii. Vyskytli sa však prípady detekcie patogénu v skorších štádiách - po 3 týždňoch.

Musíte vedieť, že ELISA môže za určitých podmienok poskytnúť falošne pozitívny výsledok. Môže to byť počas obdobia nosenia dieťaťa s autoimunitnými ochoreniami (psoriáza, reumatizmus, lupus atď.), Epstein-Barovou chorobou a inými patológiami.

Referenčná diagnostika

V tejto fáze sa používajú rôzne testy minimálne dvakrát, maximálne trikrát. Ak je výsledok v dvoch prípadoch pozitívny, vyžaduje sa fáza potvrdenia.

Etapa potvrdenia - expert

V tomto štádiu sa diagnostika vykonáva pomocou imunitného prenosu. Protilátky sa stanovujú proti určitým proteínom patogénu. Výsledok je zvyčajne presný, existujú však prípady falošných poplachov. To je možné pri terminálnom stupni rozvoja AIDS a počas útlmu ochorenia HIV. Preto je dôležité absolvovať procedúru dodatočne po určitom čase.

Diagnostické chyby


Paradoxne existuje možnosť získať falošne pozitívny výsledok. To sa zvyčajne stáva pri testovaní doma, najmä pri použití rýchlych testov. V klinickom prostredí je to možné len pri určitých ochoreniach alebo stavoch:

  • obdobie tehotenstva;
  • krížová reakcia tela;
  • autoimunitné patologické poruchy;
  • prechladnutie v akútnom štádiu;
  • onkologické novotvary;
  • tuberkulóza;
  • skleróza.

Funkcia - ak je osoba infikovaná vírusmi a hubami, výsledok testu môže byť tiež falošný. To platí najmä pre alergické stavy.

Príprava na testovanie

Je veľmi dôležité dodržiavať pravidlá prípravy na testy HIV, pretože od toho závisí presnosť výsledku:
  • V prvom rade musíte navštíviť príslušného odborníka, aby vám dal presné pokyny k prípravným opatreniam.
  • Krvné testy sa odoberajú vždy nalačno. Preto by ste pred odchodom na kliniku nemali nič jesť. Vaše posledné jedlo by malo byť najneskôr o 21:00.
  • V deň testovania je zakázané fajčiť.
  • Deň predtým nemôžete piť alkoholické nápoje.
  • Ak užívate nejaké lieky, určite sa vopred poraďte so svojím lekárom. Pretože mnohé lieky sa pred testovaním na HIV nesmú užívať.
  • Niekoľko dní pred odberom analýzy sa neodporúča vykonávať ultrazvukové vyšetrenie.
  • Deň až dva pred procedúrou nie je vhodné jesť nadmerne tučné jedlá a konzumovať veľa sladkostí.

Diagnostika infekcie HIV (video)

Viac o rôznych metódach diagnostiky HIV sa môžete dozvedieť od kvalifikovaných odborníkov. Ak to chcete urobiť, pozrite si nasledujúce video.