Anf in antsa. Krvni test za označevalce sistemskega eritematoznega lupusa

Obstajajo številne bolezni, pri katerih obrambni sistem vzame celice svojega telesa za tuje, nakar jih začne napačno napadati. Večina avtoimunskih patologij je kroničnih in predstavlja resno nevarnost za zdravje. Da bi odkrili te bolezni v najzgodnejši fazi njihovega razvoja, zdravniki predpišejo analizo ANF. Ta kratica pomeni "antinuklearni faktor". V nekaterih poročilih je študija označena kot ANA. Pomen pomeni "test antinuklearnih protiteles". ANF ​​je klinično pomemben pokazatelj, ki zdravniku pomaga sestaviti najučinkovitejši režim zdravljenja in preprečiti razvoj zapletov.

Bistvo metode

Biološki material za raziskave je kri. Ko kateri koli patogeni mikroorganizem vstopi v telo, začne imunski sistem proizvajati specifična protitelesa, katerih naloga je uničiti tuje antigene. Bistvo metode je v odkrivanju in količinskem določanju teh snovi v tekočem vezivnem tkivu.

Zdravniki pravijo, da je krvni test ANF laboratorijski z visoko stopnjo vsebnosti informacij. Z njegovo pomočjo je mogoče prepoznati vse avtoimunske patologije že v zgodnji fazi njihovega razvoja.

Posebna protitelesa se pogosto odkrijejo tudi pri ljudeh, ki trpijo zaradi hudega hepatitisa, onkologije in nekaterih nalezljivih bolezni. Te snovi lahko najdemo tudi pri zdravih ljudeh. To stanje zahteva celosten pristop za odkrivanje vzroka.

Analiza ANF včasih vključuje oceno količinske vsebnosti imunoglobulinov. Njihova prisotnost lahko kaže na razvoj kolagenoz in bolezni revmatične narave.

Indikacije

Pomembno je vedeti, da je krvni test ANF študija, ki je predpisana za potrditev ali izključitev prisotnosti avtoimunskih patologij, pa tudi za oceno učinkovitosti zdravljenja.

Zdravnik lahko sumi na bolezen po naslednjih simptomih:

• Dolgotrajna vročina brez očitnega razloga.
• Boleče občutke v sklepih.
• Povečana utrujenost.
• Bolečine v mišicah in sklepih.
• Kožne manifestacije brez očitnega razloga.
• Pogoste epizode mišičnih krčev.
• Zvišana telesna temperatura.
• Zmanjšanje telesne teže.
• Redne epizode slabosti.
• Glavobol.
• Okvara sluha.
• Driska.

Poleg tega je analiza ANF predpisana v primeru suma na revmatično bolezen. Študija se izvede po prejemu rezultatov laboratorijske diagnostike, pri kateri se povečajo parametri ESR, CEC in C-reaktivnega proteina.

Kaj kaže

Krvni test ANF vam omogoča identifikacijo avtoimunskih patologij. Študija je informativna za naslednje bolezni:

• Sistemski eritematozni lupus.
• Akutni diseminirani encefalomijelitis.
• Sjogrenova bolezen.
• Revmatoidni artritis.
• Alopecia areata.
• Addisonova bolezen.
• Ankilozirajoči spondilitis.
• Antifosfolipidni sindrom.
• Avtoimunska hemolitična anemija.
• Bulozni pemfigoid.
• Avtoimunski hepatitis.
• Celiakija.
• Avtoimunske patologije notranjega ušesa.
• Chagasova bolezen.
• Churg-Straussov sindrom.
• Kronična obstruktivna pljučna bolezen.
• Dermatomiozitis.
• Crohnova bolezen.
• Sladkorna bolezen tipa I.
• Sindrom dobre paše.
• Hashimotov tiroiditis.
• Basedowljeva bolezen.
• Guillain-Barréjev sindrom.
• Bolezni Kawasakija.
• Gnojni hidradenitis.
• Primarna nefropatija.
• Idiopatska trombocitopenična purpura.
• Intersticijski cistitis.
• Eritematozni eritematozni lupus.
• Sharpov sindrom.
• Prstanasta sklerodermija.
• Multipla skleroza.
• Narkolepsija.
• Nevromiotonija.
• Pemphigus vulgaris.
• Luskavica.
• Raynaudov fenomen.
• Vaskulitis.
• Wegenerjeva granulomatoza.

To je nepopoln seznam bolezni. Pomembno je, da analiza ANF pokaže razvoj avtoimunskih patologij v najzgodnejši fazi njihovega poteka. To zdravniku omogoča, da določi taktiko zdravljenja in v prihodnosti oceni njegovo učinkovitost.

Priprava

Vzorčenje biomateriala se opravi zjutraj. Krv je treba darovati na prazen želodec. Zadnji obrok je treba opraviti vsaj 4 ure vnaprej. Hkrati je pitna voda dovoljena kadar koli in v kakršni koli količini. Prepovedana je uporaba alkohola.

Počitek je prikazan 1 dan pred študijo. Fizični in psiho-čustveni stres pogosto vodi do lažnih rezultatov. Pol ure pred darovanjem krvi je prepovedano kaditi.

Zdravnika je treba obvestiti o zdravilih, ki jih jemlje, ko predpiše ANF test. To je posledica dejstva, da aktivne sestavine nekaterih zdravil povzročijo nastanek protiteles in lahko povzročijo tudi lupus, ki ga povzroča zdravilo. Lažno negativni rezultati so pogosto posledica jemanja glukokortikosteroidov.

Če je bolniku predpisana fizioterapija ali instrumentalni pregledi, jih je treba opraviti šele po darovanju krvi.

Vzorčenje biomateriala

Izvaja se zjutraj. Biološki material je venska kri. Njena ograja je izvedena po standardnem algoritmu. Običajno se kri odvzame iz vene na komolcu.

Ko dobimo tekoče vezivno tkivo, iz njega izoliramo serum. Ona je tista, ki je potrebna za analizo.

Vrste raziskav in njihov opis

Trenutno je protitelesa v biomaterialu mogoče odkriti na več načinov:

1. Uporaba posredne imunofluorescenčne mikroskopije. Če so v krvi prisotne posebne snovi, se bodo začele vezati na specifične jedrske antigene. V laboratorijih se uporabljajo elementi, ki lahko svetijo v ločenem spektru. Biomaterial nato natančno pregledamo pod mikroskopom. Na bolezen se lahko sumi po vrsti sijaja. Ta metoda je priznana kot najbolj informativna v zvezi z določanjem vrednosti antinuklearnih protiteles. Ena od uporabljenih metod je raziskava z uporabo HEp celic. Analiza ANF v tem primeru vključuje zbiranje biomateriala iz grla. Proces ni povezan s pojavom bolečih in drugih neprijetnih občutkov. Pomembno je vedeti, da je krvni test ANF HEP-2 trenutno najbolj natančna študija. Epitelne celice iz grla inkubiramo s serumom, nato pa jih združimo tudi s fluorescenčnimi snovmi.
2. Z Njegovo pomočjo je bistvo v tem, da se ob razmerju protiteles in antigenov spremeni barva raztopine. Prisotnost tega ali onega odtenka omogoča sum na prisotnost določene patologije.

Lečeči zdravnik bi se moral ukvarjati z dekodiranjem analize ANF. Če so rezultati raziskave pozitivni, so predpisani dodatni testi. Končna diagnoza ne temelji na zaključku ene analize.

Normalne vrednosti

Najboljši rezultat je tisti, pri katerem protitelesa proti jedru niso prisotna. Vendar se je treba spomniti, da jih lahko najdemo tudi pri popolnoma zdravih ljudeh. V tem primeru je indicirana ponovljena študija.

Stopnja analize ANF - titer ne več kot 1: 160. Poleg tega je ta kazalnik pomemben tako za odrasle kot za otroke.

Pri dekodiranju krvnega testa ANF je pomembno upoštevati naslednje podatke:

• Nizki titri niso zagotovilo, da ni avtoimunske patologije. Po statističnih podatkih je 5% bolnikov z rezultati raziskav negativnih.
• Če ima oseba vse simptome avtoimunske bolezni in analiza kaže nasprotno, zdravnik ne izključuje prisotnosti bolezni. V takih situacijah se dodatno izvede encimski imunski test.

Analiza ANP, izvedena s celicami HEp-2, velja za normalno, če titer ni višji od 1: 160. Rezultat več kot 1: 640 kaže na poslabšanje revmatičnih patologij. V obdobju remisije bolezni se titer zmanjša na 1: 320. Hkrati bo le zdravnik lahko na podlagi podatkov anamneze in posameznih značilnosti bolnikovega zdravja ugotovil dejstvo, o čem govori tako nizek kazalnik.

Promoviran ANF

Z vezavo na antigene tvorijo imunski kompleks. Slednji pa je izhodiščni dejavnik za razvoj vnetnega procesa v stenah krvnih žil. Posledično se pri človeku pojavijo prvi zaskrbljujoči simptomi sistemskih bolezni. Analiza kaže visoke naslove.

V tem primeru je mogoče ugotoviti patologijo z določitvijo vrste sijaja. Interpretacija rezultatov:

• Homogeno. Takšen sijaj lahko kaže na prisotnost sistemskega eritematoznega lupusa, kroničnega hepatitisa in sklerodermije.
• Periferni. Vedno govori o razvoju
• Zrnat. Možne bolezni: Sjogrenov sindrom, sistemski eritematozni lupus, revmatoidni artritis, mešana patologija vezivnega tkiva.
• Jedrski. Ta vrsta sijaja je značilna za sistemski eritematozni lupus, polimiozitis, Sjogrenov sindrom in sklerodermo.
• Centromerično. Možne patologije: kalcifikacija kože, disfunkcija požiralnika, Raynaudov sindrom, telangiektazija, sklerodaktilija.
• Citoplazmatsko. Takšen sijaj govori o avtoimunskih boleznih jeter ali polimiozitisu.

ANF ​​je bil znižan

Zmanjšanje ravni protiteles proti jedru je kliničnega pomena izključno za napovedovanje in spremljanje obstoječih in že ugotovljenih sistemskih bolezni.

Indikator ANF je neposredno odvisen od intenzivnosti patološkega procesa. V zvezi s tem je njegovo zmanjšanje ugoden znak, ki kaže, da je bilo zdravljenje uspešno izvedeno in je bolezen prešla v fazo remisije.

Zdravljenje

Vsaka avtoimunska patologija zahteva poseben terapevtski pristop. Namen krvnega testa za ANF je identificirati protitelesa v tekočem vezivnem tkivu in oceniti naravo njihove interakcije s specifičnimi antigeni. Na podlagi rezultatov diagnoze lahko zdravnik postavi predhodno diagnozo. Za potrditev so potrebne dodatne raziskave. Šele po tem zdravnik pripravi režim zdravljenja. Izbira zdravila je neposredno odvisna od patologije, ki je odkrita pri osebi.

Cena

Test ANF lahko opravite v neodvisnem laboratoriju, zasebni kliniki ali javni zdravstveni ustanovi. Pomembno je vedeti, da vse proračunske klinike ne ponujajo takšne storitve. V registru preverite njegovo razpoložljivost.

Študija je plačana celo v javnih zdravstvenih ustanovah. Stroški analize so neposredno odvisni od cenovne politike klinike, ki je sestavljena iz številnih dejavnikov. Najnižja cena je 1000 rubljev, največja ne presega 1700 rubljev. Poleg tega morate za vzorčenje krvi doplačati. Stroški te storitve praviloma ne presegajo 200 rubljev.

Končno

Kratica ANF pomeni antinuklearni faktor. Običajno ne bi smelo biti v krvi zdrave osebe ali pa bi morala biti njegova koncentracija manjša od 1: 160. Analiza ANF je predpisana za odkrivanje patologij avtoimunske narave pri pacientu v najzgodnejši fazi njihovega razvoja.

Bistvo metode: ko v telo vstopijo povzročitelji, obrambni sistem začne proizvajati protitelesa. Njihova naloga je, da napadajo antigene in jih uničijo. Za odkrivanje te reakcije pri bolniku se vzame venska kri z naknadnim ločevanjem seruma. Slednjim se dodajo specifični antigeni in ocenijo nadaljnje reakcije.

Antinuklearna protitelesa- splošno ime skupine protiteles proti različnim sestavinam celice, njihov videz je povezan predvsem z avtoimunskimi boleznimi.

Sinonimi: antinuklearna protitelesa, antinuklearni faktor, antinuklearni faktor, protitelesa proti ekstrakcijskim jedrskim (jedrskim) antigenom, antinuklearna protitelesa, substrat Hep-2, ANA-Hep2, fluorescentno protitelo za odkrivanje jedrskih jeder, ANA, FANA

Antinuklearna protitelesa so

kompleks protiteles (več kot 200), predvsem imunoglobulinov G (redkeje IgM in IgA), se pojavi kot posledica kršitve mehanizma avtolognosti pri avtoimunskih in revmatičnih boleznih.

V nekaterih primerih imunski odziv ni usmerjen proti drugim, ampak proti lastnemu tkivu. V tem primeru govorijo o avtoimunska bolezen... In protitelesa, ki nastanejo do lastnih celic ali njihovih sestavin, se imenujejo avtoimunski.

Večina ljudi ima v krvi majhno (!) Količino avtoprotiteles, ki niso manifestacija bolezni.

Samo v primeru resnega okvare imunosti se raven avtoprotiteles poveča in zadošča za diagnozo.

ANA je lahko pozitivna, še preden se pojavijo prvi simptomi bolezni. Približno 95% bolnikov s sistemskim eritematoznim lupusom ima v krvi antinuklearna protitelesa. Prisotnost simptomov lupusa potrjuje diagnozo.

Mehanizem oblikovanja

• izpostavljenost ultravijoličnim žarkom na koži vodi v aktiviranje programirane celične smrti (apoptoza), kar je normalna reakcija telesa, v primeru sistemskih bolezni pa se hkrati množično selijo
• prej nedostopne in nevidne za imunski sistem, celične komponente, kot so nukleoli, histoni, jedrska ovojnica itd., "postanejo gole", makrofagi pa namesto da preprosto "uporabijo" ta material, oddajajo signal o tem po verigi imunski odziv
• B-limfociti kot odgovor na signal makrofagov začnejo proizvajati protitelesa proti jedru, ki z vezavo na ustrezen antigen tvorijo imunske komplekse (jedrski antigen + protitelo IgG, IgM, IgA)
• imunski kompleksi se usedejo na bazalno membrano različnih organov in tkiv, zlasti krvnih žil, aktivirajo sistem komplementa - lokalni vnetni odziv
• posledično - poškodba in disfunkcija organa

Antinuklearna protitelesa so usmerjena proti različnim strukturam normalne celice.

Vrste antinuklearnih protiteles:

• anti-Ro (SS-A)-protitelesa proti beljakovinam, povezanim z RNA Y1-Y5 v spliceosomih
• anti-Jo1-protitelesa proti citoplazemskemu antigenu Jo-1
• anti-Sm
• anti-La (SS-B)-protitelesa proti proteinu, povezana z RNA polimerazo-3
• anti -Sci 70 - protitelesa proti jedrski topoizomerazi
• anti -U1 RNP - protitelesa proti U1 ribonukleoproteinu
• anticentromerična protitelesa
• antihistonska protitelesa

Indikacije

• diagnoza sistemskega eritematoznega lupusa, Shergenov sindrom

Sistemski eritematozni lupus

Sistemski eritematozni lupus- avtoimunska bolezen vezivnega tkiva in krvnih žil. To je najhujša bolezen vezivnega tkiva, pri kateri se pojavijo ostre bolečine v sklepih, poškodbe kože ("metulj"), seroznih membran, srca, ledvic, živčnega sistema, pljuč, trofične motnje.

Simptomi

• artritis - vnetje sklepa, ki se kaže z bolečino, oteklino, oslabljeno gibljivostjo, pordelostjo kože in zvišanjem temperature nad njo
• vnetje zunanje obloge srca ali plevre (ali) neznanega izvora
• spremembe rezultatov (, - beljakovine ali rdeče krvne celice v urinu)
• - uničenje s povečanjem ravni
• trombocitopenija - zmanjšano število
• - zmanjšano število v
• kožni simptomi - izpuščaj, odebelitev kože, še posebej po aktivnem
• Raynaudov sindrom - občasno razbarvanje prstov in rok (modra obarvanost in pordelost) z oslabljeno občutljivostjo in bolečino
• atipični nevrološki in duševni simptomi
• zvišana telesna temperatura, utrujenost, hujšanje,

Metode

Obstajata dve metodi za določanje antinuklearnih protiteles v krvi.

Posredna imunofluorescenčna mikroskopija(FANA - preskus fluorescenčnih protiteles proti protitelesu) na pripravku celic Hep -2 (celična linija, pridobljena iz adenokarcinoma grla) - protitelesa proti jedru (če obstajajo) se vežejo na antigene celic Hep -2, dodajo posebne svetlobne oznake, ki se vežejo na nastali kompleks in pod intenzivnostjo in vrsto sijaja opazujemo z mikroskopom. Najboljša metoda za testiranje antinuklearnih protiteles. Drugo ime -.

Rezultat študije je zapisan v obliki titra - največje redčenje krvi, pri katerem je viden sij, opisan je tudi tip fluorescence (v primeru pozitivnega rezultata). Več protiteles, višji je titer. Nizki titri se štejejo za negativne, visoki titri pa kažejo na povečano koncentracijo protiteles proti jedru.

Vrste fluorescence pri ocenjevanju ANA:

• homogen (razpršen, enakomeren) - s sistemskim eritematoznim lupusom, mešanimi boleznimi vezivnega tkiva (MCTD)
• zrnat (zrnat) - s sistemskim eritematoznim lupusom, Sjogrenovim sindromom, sklerodermo, revmatoidnim artritisom in MCTD - najbolj nespecifičen
• nukleolarni (nukleolarni) - s sklerodermo in polimiozitisom
• centromerično - za sklerodermo in sindrom CREST
• citoplazmatska - dermatomiozitis, polimiozitis, avtoimunske bolezni jeter, primarna biliarna ciroza

Primer pozitivnega rezultata testa na protitelesa proti jedru: " Pozitivno redčenje / titer 1: 320, homogena slika“.

Algoritem zdravnikovih dejanj po študiji antinuklearnih protiteles po metodi FANA

• negativen rezultat testa na jedrska protitelesa + simptomi-opravite teste: anti-Ro in anti-Jo1
• pozitiven rezultat testa na antinuklearna protitelesa + prisotnost / odsotnost simptomov-opravite teste za anti-DNA, anti-Sm, anti-Ro, antihistonska in anticentromerična protitelesa, anti-Sci-70, anti-U1 RNP, anti-Jo1-odvisno o manifestacijah bolezni

Encimski imunski test

Encimski imunski test (ELISA)) - protitelesa, prisotna v krvi, se vežejo na ustrezen antigen, kar vodi do spremembe barve raztopine.

• manj kot 1,0 U - negativen rezultat (normalno)
• 1,1-2,9 U - šibko pozitivno (zahteva ponovitev)
• 3,0-5,9 U - pozitivno
• več kot 6,0 - močno pozitivno

Pozitiven rezultat testa na antinuklearna protitelesa- to ni diagnoza, ampak klicaj o potrebi po dodatnih raziskavah. Za čimprejšnje odkrivanje možne bolezni je potreben rednejši in temeljitejši pregled.

Negativni rezultat testa na protitelesa proti jedrom kaže na njihovo odsotnost v krvi, vendar ne izključuje diagnoze avtoimunske bolezni.

Norma

Običajno v krvi ni protiteles proti jedru.

Dodatne raziskave

• splošna analiza urina
• revmatični testi - hitrost sedimentacije eritrocitov (ESR),
• krožni imunski kompleksi
• C3 komponenta komplementa
• C4 komponenta komplementa

Kaj vpliva na rezultat?

• zdravila - prokainamid, fenitoin, penicilin, hidralazin
• ARI in prehlad, katera koli akutna ali kronična nalezljiva bolezen

Vzroki za nastanek ANA

1. Sistemske bolezni vezivnega tkiva

• - 95-100%, odkrivanje antinuklearnih protiteles določi diagnozo
• (5-25%)
• (100%)
• (30-50%)
• juvenilni revmatoidni artritis (20-50%)
• (40-70%)
• (30-80%)
• (Sharpov sindrom) 100%
• avtoimunski hepatitis (

Na podlagi protiteles in določitve kazalnikov njihove koncentracije v krvni plazmi poteka diagnostika številnih telesnih stanj. Eden od kazalcev je antinuklearni faktor, ki pod svojim imenom združuje skupino različnih vrst protiteles, usmerjenih proti celičnim komponentam. Ko se ugotovi tak dejavnik, je smiselno govoriti o avtoimunski bolezni, zlasti o sistemskem eritematoznem lupusu.

Čeprav je test univerzalen za ugotavljanje številnih sistemskih patologij telesa, zlasti tako resne bolezni, kot je eritematozni lupus, so z njo povezane nekatere zanimive značilnosti. Uporablja se od leta 1957, vendar je tehnika postala razširjena šele od konca 80. let prejšnjega stoletja. Treba je opozoriti, da prisotnost vsadkov v dojkah poveča titer protiteles proti jedru, kar opazimo pri 5% do 55% vseh primerov pri ženskah.

Kaj so

Kompleks protiteles, ki vključuje antinuklearni faktor, predstavlja več kot 200 kazalcev, najpogosteje so to imunoglobulini razreda G, v redkih primerih IgM in IgA. Pojavljajo se pri patologijah, za katere je značilna avtoimunska ali revmatična narava lezije zaradi oslabljene tolerance imunosti na lastna tkiva.

V nekaterih pogojih imunski sistem usmeri vse svoje sile ne v boj proti tujim dejavnikom, ampak proti lastnim tkivom, celicam, kar se običajno ne bi smelo zgoditi. Toleranca na nekatere celice, na katere vpliva agresija, je oslabljena in razvije se avtoimunska bolezen. Protitelesa, nastala med boleznijo, ali kompleksi se imenujejo avtoimunska.

Mnogi ljudje imajo majhne količine avtoprotiteles, vendar to ni znak bolezni. Le resna okvara imunosti lahko povzroči zvišanje ravni avtoprotiteles, to je razlog za ustrezno diagnozo. Še vedno pa ga je treba dopolniti z drugimi študijami, zlasti s krvjo, urinom in kliničnimi manifestacijami.

Pri osebi s sistemskim eritematoznim lupusom se ANF poveča še preden se pojavijo prvi simptomi. Od vseh bolnikov ima 95% povečan antinuklearni faktor v krvi, ki ga dopolnjujejo simptomi bolezni, kar pa potrjuje diagnozo.

Mehanizem pojavljanja faktorja

Obstaja več razlogov, ki prispevajo k razvoju bolezni pri ljudeh. Vse se zgodi v določenem zaporedju:

1. Pod vplivom ultravijoličnega sevanja sonca na kožo se sprožijo procesi gensko programirane celične smrti, ki se imenuje apoptoza. To je normalna reakcija telesa, vendar se pri boleznih sistemske narave limfociti začnejo močno seliti.
2. Za imunost so na voljo prej nedostopne, nevidne komponente celic, zlasti celična membrana, nukleoli, histoni, membrana jedra in drugi. Postanejo goli in makrofagi, namesto da bi uporabili tak material, dalje prenašajo informacije in izzovejo imunski odziv telesa.
3. B-limfociti, ki proizvajajo protitelesa proti jedrom, se odzivajo na signal, ki ga pošilja makrofag; medsebojno delujejo z ustreznim antigenom in tvorijo kompleks.
4. Kompleksi se odlagajo na membranah organov in tkiv, to se obilno pojavi na površini žilne stene od znotraj, komplement ali se aktivira lokalni imunski odziv.
5. Poškodba moti delovanje organa.

Analize, indikacije

Obstaja več znakov, da je predpisan test na protitelesa proti jedrom. Najprej gre za sum razvoja sistemskega eritematoznega lupusa, Sjogrenovega sindroma. Če obstaja ena sistemska bolezen, zdravnik sumi na drugo, na primer se lahko v ozadju lupusa razvije antifosfolipidni sindrom.

Simptomi, ko se je vredno testirati

Vedno obstajajo simptomi, katerih videz bi moral opozoriti osebo, jo prisiliti, da opravi pregled. Zdravnik mora pacienta usmeriti, če:

1. Artritis, ki se kaže z vnetjem sklepa, z bolečino, oteklino, oslabljeno gibljivostjo, pordelostjo kože nad njo in zvišano telesno temperaturo.
2. Pregled perikarditisa, plevritisa, katerega vzrok ni znan, ne bo motil.
3. Poškodbe ledvic, povezane s kršitvijo stanja imunskega sistema, pojavom sprememb v analizi urina, zlasti beljakovin, krvi.
4. Drugi pokazatelj je hemolitična varianta anemije, pri kateri se eritrociti uničijo v velikih količinah, raven bilirubina v krvi naraste in analiza urina.
5. Indikacija je zmanjšanje ravni trombocitov, nevtrofilcev v formuli levkocitov.
6. Kožne manifestacije v obliki izpuščaja, odebelitve, ki se pojavi po izpostavitvi soncu.
7. Raynaudov sindrom, pri katerem prsti in roke občasno spreminjajo barvo. Postanejo bledi, modri ali pordeči, občutljivost je motena, bolečina skrbi.
8. Indikacija so neznačilni simptomi nevrologije ali psihiatrije.
9. Če se temperatura dvigne, se pojavi utrujenost, zmanjša se telesna teža in povečajo bezgavke.

Raziskovalne sorte

Obstajata dve metodi, ki vam omogočata, da določite protitelesa proti jedru v krvi. Prva se imenuje posredna imunofluorescenčna mikroskopija. Celična linija zanjo izhaja iz adenokarcinoma v predelu grla. Če obstajajo antinuklearna protitelesa, se vežejo na specifične antigene, nakar se dodajo oznake, ki lahko svetijo v določenem spektru svetlobe. Pod mikroskopom je mogoče določiti intenzivnost, vrsto sijaja.

Ta tehnika je priznana kot najboljša za določanje indikatorja antinuklearnih protiteles. Ima drugo ime - testni lističi za lupus.

Rezultat študije je titer ali največja redčenje krvi, ki daje sijaj. Če je rezultat pozitiven, je opisana vrsta sijaja. Ko se kopičijo protitelesa, se titer dvigne. Nizek titer lahko štejemo za negativen rezultat, z visokim titrom pa lahko rečemo, da se koncentracija protiteles proti jedru povečuje.

Druga diagnostična možnost je encimska imunska analiza. Njegovo bistvo je v tem, da protitelesa, ki so v krvi, pridejo v stik z ustreznim antigenom, rezultat pa je, da raztopina spremeni barvo.

Treba je opozoriti, da pozitiven rezultat testa ni absolutna diagnoza. To je signal, da je potreben dodaten pregled, ki bo pomagal prepoznati bolezen v zgodnjem obdobju in predpisati zdravljenje. Z negativno analizo antinuklearnih dejavnikov lahko govorimo o njihovi popolni odsotnosti, vendar diagnoza domnevne avtoimunske patologije ni izključena.

Za različne kazalnike je nujno opraviti krvne preiskave. Vendar je treba spomniti, da na rezultat lahko vpliva vnos nekaterih zdravil, pa tudi akutne ali kronične bolezni. Specialist bo vedno pomagal razumeti vse zapletenosti, nato pa bo postavil diagnozo, priporočil, kaj storiti naprej.

Človeški imunski sistem je edinstven dobro usklajen mehanizem, ki se lahko odzove na kakršen koli zunanji vnos patogenih dejavnikov in tako zaščiti telo pred številnimi boleznimi. A kot veste, pri vsakem pravilu obstajajo izjeme in v tem primeru izgledajo kot odziv imunskega sistema na lastne celice, kar imenujemo avtoimunske bolezni.

S temi patologijami se proizvajajo protitelesa, ki napadajo zdrave celice, jih vplivajo ali uničujejo. Posledično pride do motenj v delovanju posameznih tkivnih struktur in celo organov. Takšne patologije se zaradi razširjenosti in vključenosti več organov ali sistemov v proces imenujejo sistemske bolezni.

S pojavom sodobnih metod laboratorijske diagnostike, med katerimi je tudi krvni test ANF za iskanje antinuklearnega faktorja, ki omogoča identifikacijo antinuklearnih (antinuklearnih) protiteles in ugotavljanje vzroka patologije. Ta indikator je eden od označevalcev sistemskih bolezni vezivnega tkiva (SCDT), sprejetih kot "zlati standard" tovrstnih raziskav.

Osnovni pojmi, ki označujejo SZST

Kot je že opisano zgoraj, patogeneza teh patologij izvira iz okvar imunskega sistema in proizvodnje zaščitnih protiteles proti določenim sestavinam lastnih celic. Zaradi posebnosti njihovega izvora imajo take celice drugo ime - avtoprotitelesa. V procesu imunske odpovedi pridejo v stik z beljakovinskimi spojinami jedra, nukleinskimi kislinami in antigeni citoplazme, kar vodi v pojav simptomov vnetnih bolezni, kot so:

• strukturne spremembe v tkivih in organih;
• huda nerazumna utrujenost;
• bolečine v mišicah in sklepih;
• poškodbe kože;
• hujšanje in drugo.

Antinuklearna protitelesa (ANA) se lahko tvorijo v precej širokem razponu avtoimunskih patologij, vendar je njihova največja verjetnost za pojav pri sistemskem eritematoznem lupusu (SLE).

V primeru znakov dolgotrajnega vnetnega procesa je treba opraviti ANF

Referenca! Po statističnih podatkih se pri več kot 90% bolnikov s CTD ugotovi patološka proizvodnja takšnih protiteles. Do danes je bilo preučenih približno 200 njihovih vrst, ki so dobile splošno ime - antinuklearni faktor. Predstavljajo jih predvsem imunoglobulini razreda G, včasih pa najdemo M ali A.

Bistvo krvnega testa za antinuklearni faktor

Preden se poglobimo v posebnosti raziskovanja na ANF, velja omeniti, da je bila tehnika izumljena in se je začela uporabljati že precej dolgo nazaj - v 60. letih prejšnjega stoletja. Toda v diagnostični praksi je postala razširjena šele v zgodnjih 80. letih 20. stoletja po izboljšanju. Znanstvenik Beck je celice laboratorijskih živali uporabil kot substrat že leta 1961 in šele leta 1982 je Tan uporabil presajeno človeško celično linijo HEp-2 za iskanje ANP.

Čeprav je glavni namen uporabe tega testa vzpostavitev diagnoze eritematoznega lupusa, še vedno velja za univerzalno metodo za druge kolagenoze (CCDT). Slednji vključujejo:

• skleroderma;
• dermatomiozitis;
• nodozni periarteritis;
• kronični aktivni hepatitis itd.

Posredna imunofluorescenca velja za eno najprimernejših in zato najpogosteje uporabljenih metod za določanje antinuklearnega faktorja v krvi bolnikov. Študija se izvede, ko se krvni serum nanese na celice presadljive epitelioidne linije adenokarcinoma humanega grla HEp-2 (ki vsebuje določeno število jedrskih antigenov) z uporabo označenega konjugata (spojine) s protitelesi.

Ta izbira ni bila naključna - celice HEp -2 so zelo priročen substrat za preučevanje biomateriala. Imajo precej velika jedra in ko jih posadimo na laboratorijsko steklo, rastejo v enem sloju. Druge človeške celične linije se lahko uporabljajo tudi kot substrat, vendar zaradi uspešne morfologije in pridelave vsekakor postane HEp-2 nenadomestljiv material.

Med diagnostiko se med inkubacijo pacientovega seruma s celičnim substratom v prisotnosti ANA združijo z ustreznimi jedrskimi antigeni. Mesta vezave ANP na HEp-2 se določijo s konjugatom, označenim s fluoresceinom (barvilo). Za oceno rezultatov nastalih reakcij se uporablja fluorescenčni mikroskop, ki omogoča razlikovanje narave in stopnje nastalih vezi.

Luminescenčni mikroskop za laboratorijske raziskave ANF

Referenca! Človeški HEp-2 ima v nasprotju s kriosekcijo živali pri živalih višjo stopnjo celične delitve, kar omogoča odkrivanje protiteles proti antigenom, ki se izražajo le med delitvijo. Prav tako v človeškem substratu ni celične matrice, kar zmanjšuje kakovost vizualizacije preučevane luminescence.

Katere skupine antigenov se uporabljajo v študiji?

Pri dekodiranju materialov je vedno treba upoštevati, da spekter ANA vključuje precej veliko skupino avtoprotiteles proti nukleoproteinom, ribonukleoproteinom, histonom, DNA in drugim strukturnim enotam jedra. Iz tega sledi, da je funkcionalnost testa namenjena odkrivanju protiteles proti sestavinam jedra in citoplazmi, ki so bile sprva določene pri SLE.

Kasneje so bile diagnostične zmogljivosti študije razširjene zaradi določanja podobnih protiteles pri drugih CTD. Pri presejalnih tehnikah za odkrivanje celotne ANA se praviloma uporablja določen nabor antigenov, ki se jemljejo kot glavni označevalci avtoimunskih CTD.

Sem spadajo protitelesa razreda IgG:

• SS -A (Ro) - jedrski ribonukleoproteini;
• SS -B (La) - jedrske beljakovine;
• Scl-70-beljakovinski encim (topoizomeraza-1);
• domorodna dvoverižna DNA;
• RNP / Sm - kompleks antigena;
• Jo -1 - encim RNA - sintetaza;
• CENP-B (centromera)
• Celice Hep-2;
• mitohondrije (PDC).

ANA so praktično neškodljive za telo - ne morejo prodreti v živa tkiva. Toda v nekaterih primerih se lahko združijo v komplekse antigen-protitelo, kar posledično vodi do uničenja strukturnega tkiva. Eden takih primerov je lezija ledvičnega parenhima pri SLE. Ker je v procesu z SADD vključenih več organov, identifikacija ANA ni najpomembnejša za diagnozo, ampak velja le za potrditev določenih simptomov.

Zmožnosti analize ANF, izražene v odstotkih

Študija rezultatov

Po opravljenih vseh potrebnih postopkih - jemanju biomateriala in njegovi laboratorijski pripravi na raziskave se rezultati ocenijo in interpretirajo. To vključuje določanje titra (koncentracije) protiteles in vrste fluorescence. Pomemben parameter pri diagnostiki je razmerje koncentracij več kot 1: 160. Na primer, s poslabšanjem revmatizma lahko preseže raven 1: 640, medtem ko se v obdobju remisije zmanjša na 1: 160-1: 320.

Vrsta sijaja prikazuje tarče ANA, kar je še posebej pomemben klinični trenutek, ki vodi kasnejša zdravnikova dejanja pri imenovanju diagnostičnih ukrepov. Glede na naravo luminescence jeder pri uporabi HEp-2 bo odvisno od vrste protiteles, prisotnih v biomaterialu, določenih več kot 20 variant jedrskega obarvanja. Med glavne spadajo naslednje vrste sijaja.

• Periferni. Žar označuje prisotnost protiteles proti DNA, kar potrjuje SLE. Glavna vrsta antigenov za periferni tip so histonski proteini in DNA.
• Razpršen (homogen). Takšno luminiscenco opazimo pri SLE, ki jo spremljajo poškodbe strukture ledvic in podobna CTD, nefritis, skleroderma, pa tudi SLE, ki ga povzročajo zdravila. Antigene te vrste predstavljajo dsDNA, histonati in nukleosomi.
• Jedrski (jedrski). Ta vrsta je značilna za sistemsko obliko skleroderme in se ugotavlja v prisotnosti protiteles pri bolnikih - RNA polimeraze 1, PM / Scl, NOR, U3RNP.
• Citoplazmatsko. Ta vrsta osvetlitve kaže na prisotnost ANA v sintetizah tRNA, in sicer Jo-1, in jo opazimo pri polimiozitisu.
• Zrnat. Določa se pri Sjogrenovem sindromu, infekcijski mononukleozi, mešanem CTD (Sharpov sindrom, MCTD) in sindromu lupusa, ki ga povzroča zdravilo. Prevladujoči antigeni te vrste so SS-A, SS-B, Sm, U1-RNP in PCNA.
• Velik zrnat. Značilen je za mešane CTD in je po mnenju mnogih znanstvenikov povezan s prisotnostjo antigena RNP.
• Drobnozrnat. Ugotavlja se prisotnost protiteles proti ribonukleinskim beljakovinam-ASSP (АЦЦП), SS-A, SS-B in drugih. Taka protitelesa so značilna za SLE, pa tudi za njegove specifične kožne oblike, revmatoidni artritis, sklerodermo, polimiozitis, Sjogrenov sindrom.
• Centromerično. Ta vrsta se pojavlja predvsem pri sklerodermiji. Čeprav lahko v enem vzorcu krvi, zlasti pri osebah z razpršenimi CTD, v ločeni plazmi odkrijemo protitelesa proti različnim jedrskim sestavinam.
• Vključitve točk v jedro. Ta vrsta se odkrije predvsem pri boleznih jeter avtoimunske narave. Z njim je mogoče združiti več fluorescenčnih tipov, na primer nukleolarne in drobnozrnate, kar je posledica protiteles proti Scl-70.

Referenca! Opozoriti je treba, da se lahko s povečanjem redčenja biomateriala plazme parametri luminiscence spremenijo, saj je za mnoga protitelesa značilna sprememba aktivnosti pri različnih stopnjah koncentracije.

Dejavniki, ki lahko izkrivijo rezultate

Na zanesljivost podatkov, pridobljenih med študijo, lahko vpliva le nekaj dejavnikov, ki lahko pokažejo lažno pozitiven in lažno negativen rezultat. Torej so neverjetni odzivi s premikom navzgor opaženi pri starejših bolnikih, starih 60 let (po statističnih podatkih v 10–37% primerov) in pri jemanju zdravil, ki povzročajo lupus (nekateri antibiotiki, kontraceptivi, sulfonamidi, tiazidni diuretiki).

Ugotovljeno je bilo, da se pri 5–55% samic z vsadki dojke raven koncentracije ANA poveča. Uporaba glukokortikoidnih zdravil - prednizolona, ​​metipreda ali deksametazona lahko privede do napačne diagnoze s premikom navzdol.

Antinuklearni faktor

Antinuklearni faktor- laboratorijska analiza, katere namen je določiti različne vrste specifičnih imunoglobulinov za strukture celičnega jedra. Indeks ANF se poveča v primeru sistemskih bolezni vezivnega tkiva. Test se izvaja z namenom diagnosticiranja, razlikovanja, spremljanja zdravljenja, ugotavljanja poslabšanj. Predpisuje se za klinične in laboratorijske znake sistemskega eritematoznega lupusa, skleroderme, Sharpovega sindroma, Sjogrenovega sindroma, revmatoidnega artritisa, vnetne miopatije. Serum venske krvi se pregleda po metodi RNIF. Običajen indikator je titer, ki ni višji od 1: 160. Pogoji priprave testnih podatkov - 8 delovnih dni.

V središču revmatičnih bolezni je avtoimunska reakcija na strukture celičnega jedra - komplekse beljakovin in nukleinskih kislin. Antigeni se tvorijo med programirano smrtjo epitelijskih celic in limfocitov. Ultravijolični žarki, povzročitelji okužb, zdravila pospešujejo uničenje celic, upočasnjujejo odstranjevanje apoptotičnih teles in povzročajo razvoj avtoimunskih procesov. Protitelesa proti strukturi jedra predstavljajo številne vrste; pri preučevanju antinuklearnega faktorja je izoliranih približno osem. Prednost testa je njegova visoka specifičnost - določijo se protitelesa, ki jih ni mogoče očistiti za ELISA. Del imunskih kompleksov pa se pri izvajanju RNIF ekstrahira v plazmo, zato obstaja možnost lažno negativnega rezultata.

Indikacije

Študija antinuklearnega faktorja je indicirana za sistemske patologije vezivnega tkiva. Podlaga za dodelitev testa je:

• Simptomi revmatične bolezni... Tipične manifestacije so zvišana telesna temperatura, utrujenost, šibkost, izguba teže, bolečine v mišicah in sklepih, kožni izpuščaji. Test se uporablja za prepoznavanje in razlikovanje SLE, skleroderme, Sjogrenovega sindroma, Sharpovega sindroma, revmatoidnega artritisa, vnetnih miopatij.
• Rezultati laboratorijskih testov... Sum na revmatsko patologijo se pojavi s povečanjem ESR, ravni C-reaktivnega proteina in CEC. Za potrditev diagnoze je predpisan test.
• Diagnoza revmatične bolezni... Analiza se izvaja večkrat na leto (pogostost se določi posamično), da se po poteku uporabe imunosupresivov nadzira potek patologije - za oceno učinkovitosti terapije.

Priprava na analizo

Biomaterial za določanje antinuklearnega faktorja je venska kri. Postopek zbiranja se izvaja zjutraj. Pravila priprave so naslednja:

1. Zadnji obrok je treba zaključiti najkasneje v 4 urah. Pitna voda je dovoljena kadar koli.
2. Dan pred posegom je treba izključiti alkohol, telesno aktivnost, čustveno stisko.
3. O uporabi zdravil se je treba pogovoriti s svojim zdravnikom. Nekatera zdravila izzovejo proizvodnjo protiteles, razvoj lupusa, ki ga povzročajo zdravila. Med jemanjem glukokortikosteroidov je mogoče pridobiti lažno negativne podatke.
4. Instrumentalne diagnostične postopke, fizioterapevtske seje je treba opraviti po darovanju krvi.
5. Kajenje je prepovedano v zadnjih 30 minutah pred posegom.

V laboratoriju se serum izolira iz krvi. Določanje protiteles proti jedru v njem poteka po metodi RNIF z uporabo celične kulture HEp-2. Titer se oceni z največjim redčenjem biomateriala, pri katerem se zazna sijaj jedrskih struktur, vrsta imunoglobulinov - po naravi fluorescence. Časovni okvir analize je 6-8 dni.

Normalne vrednosti

Običajno je rezultat testa antinuklearnega faktorja negativen. Za odrasle in otroke titer ni višji od 1: 160. Pri razlagi skupne vrednosti se upoštevajo naslednje opombe:

• Nizek titer ANA zmanjšuje verjetnost avtoimunske bolezni, vendar je ne izključuje. Pri SLE v 5% primerov je rezultat negativen, opravi se test na protitelesa proti SS antigenom.
• Doseganje normalnega rezultata po poteku imunosupresivne terapije potrjuje njegov uspeh.
• Negativen rezultat v ozadju simptomov avtoimunske patologije zahteva dodatne teste (NCA, ANA z ELISA).

Povečanje kazalnika

Antinuklearna protitelesa nimajo citotoksičnih lastnosti, po vezavi na antigene pa nastanejo imunski kompleksi, ki sprožijo vnetje v žilnih stenah. Pojavljajo se z lezijami kože, ledvičnimi glomeruli, sklepnimi membranami, pleuro. Razvijajo se simptomi, značilni za sistemske patologije. Možne bolezni se določijo glede na vrsto luminiscence z minimalno razredčitvijo seruma:

• Homogeno... Razpršena fluorescenca kaže na prisotnost protiteles proti ds DNA, histonov. Določa se s SLE in lupusom, ki ga povzroča zdravilo.
• Periferni... Vrsta luminiscence je določena z lokacijo kromatina, zaznana je v prisotnosti Ig do komponent DNA, specifičnih za SLE.
• Zrnat... Kompleksi nukleoproteinov so antigeni. Luminescenca je nespecifična, najdemo jo pri številnih revmatičnih boleznih. Visok titer in velikozrnata fluorescenca sta najbolj značilna za Sharpov sindrom.
• Jedrski... Odraža prisotnost specifičnega Ig v strukturah jedra. Odkrije sklerodermijo in Sjogrenov sindrom. Redko ga opazimo pri endokrinopatijah, kožnih patologijah, presaditvah organov.
• Centromerično. Centromere kromosomov so antigeni. Sijaj potrjuje omejeno sklerodermijo.
• Citoplazmatska... Izzove ga prisotnost protiteles proti tRNA sintetazi (Jo-1), ribosomov, organelov. Omogoča vam ugotavljanje vnetnih miopatij, avtoimunskih poškodb jeter.
• Mitohondrijski. Antigeni so sestavine kompleksa piruvat dekarboksilaze. Za primarno biliarno cirozo je značilna luminiscenca.
• Točka... Povezan s kroženjem protiteles proti nukleoproteinom, povezan z avtoimunskimi poškodbami jeter.

Zmanjšanje kazalnika

Zmanjšanje kazalnika ima napovedno vrednost pri spremljanju sistemskih bolezni vezivnega tkiva. Raven ANA je povezana z aktivnostjo patoloških procesov, zato je zmanjšanje njihove koncentracije znak remisije in uspeha terapije.

Zdravljenje odstopanj od norme

Test na antinuklearni faktor vam omogoča, da odkrijete prisotnost protiteles proti jedrskim antigenom in določite njihovo vrsto. Zaradi tega se analiza pogosto uporablja za diferencialno diagnozo revmatičnih bolezni. Za razlago rezultata in imenovanje zdravljenja se je treba posvetovati z zdravnikom - revmatologom, imunologom, dermatovenerologom.