Organizacija prevzema, označevanja in registracije biomateriala. Pravila za odvzem, dostavo, sprejemanje, predelavo in registracijo biološkega materiala

tok

MU 4.2.2039-05

METODOLOŠKA NAVODILA

4.2. NADZORNE METODE. BIOLOŠKI IN MIKROBIOLOŠKI DEJAVNIKI

Tehnika zbiranja in transporta biomaterialov v mikrobiološke
laboratoriji

Datum uvedbe 2006-07-01

2. PRIPOROČA V ODOBRITEV Komisiji za državno sanitarno-higiensko normiranje pri Zvezni službi za nadzor varstva pravic potrošnikov in blaginje ljudi 6. oktobra 2005 (zapisnik št. 3).

3. ODOBRIL IN PREDSTAVIL vodja Zvezne službe za nadzor varstvo pravic potrošnikov in blaginjo ljudi, glavni državni sanitarni zdravnik Ruske federacije G. G. Oniščenko dne 23. decembra 2005

5. PREDSTAVLJENO PRVIČ.

1 področje uporabe

1 področje uporabe

1.1. Smernice določajo pravila za zbiranje in transport biološkega materiala v mikrobiološke laboratorije z namenom izboljšanja kakovosti rezultatov laboratorijskih raziskav in organiziranja protiepidemičnih in preventivnih ukrepov ter preprečevanja bolnišničnih okužb med zdravstvenim osebjem in bolniki.

1.2. Smernice so namenjene uporabi organov in organizacij Zvezne službe za nadzor varstva pravic potrošnikov in blaginje ljudi, uporabljajo pa jih lahko tudi zdravstveni organi in organizacije.

2. Splošne določbe

2.1. Pridobivanje zanesljivih podatkov o identifikaciji virov okužbe je potrebno za pravočasno in učinkovito organizacijo protiepidemičnih in preventivnih ukrepov ter ocenjevanje stopnje prizadetega prebivalstva med epidemiološkim nadzorom.

2.2. Razvita tehnika zbiranja in transporta bioloških materialov v mikrobiološke laboratorije bo omogočila znižanje stopnje predanalitične napake in izboljšanje kakovosti dela laboratorijev pri objektivizaciji rezultatov.

2.4. Smernice se lahko uporabljajo pri izvajanju epidemiološkega nadzora protimikrobne odpornosti patogenov, izoliranih in laboratorijsko identificiranih, pri optimizaciji uporabe protimikrobnih zdravil in ukrepov na področju preprečevanja, nadzora in zajezitve odpornosti na lokalni, regionalni in nacionalni ravni.

3. Splošne zahteve za odvzem vzorcev biološkega materiala za mikrobiološke raziskave

3.1. Za preprečevanje okužbe zdravstvenega osebja in bolnikov med odvzemom vzorcev biomateriala in njihovo dostavo v laboratorij je potrebno:

ne kontaminirajte zunanje površine posode med zbiranjem in dostavo vzorcev;

ne onesnažujejo spremnih dokumentov (napotnic);

čim bolj zmanjšati neposredni stik vzorca biomateriala z rokami zdravstvenega delavca, ki ga zbira in dostavi v laboratorij;

za zbiranje, shranjevanje in dostavo vzorcev za te namene uporabljati sterilne posode za enkratno uporabo ali ustrezno odobrene posode (posode);

transport vzorcev v nosilcih ali skladovnicah z ločenimi gnezdi;

upoštevajte aseptične pogoje, da preprečite okužbo bolnika v procesu izvajanja invazivnih ukrepov;

zbiranje vzorcev v sterilni posodi za enkratno uporabo ali stekleni (ni onesnaženi z biomateriali, ne poškodovani z razpokami, okrnjenimi robovi in ​​drugimi napakami)

3.2. Vzorce biomateriala je treba zbrati na naslednji način:

pred začetkom antibiotične terapije, če takšne priložnosti ni - tik pred ponovnim uvedbo (sprejemom) zdravil;

v količini (teža, prostornina), ki je potrebna za izvedbo analize, ker nezadostna količina biomateriala za raziskave vodi do napačnih rezultatov;

z minimalno kontaminacijo materiala z normalno mikrofloro, tk. njegova prisotnost vodi v napačno razlago rezultatov, dobljenih, na primer pri študiji sputuma, vzorcev iz nosu, žrela (žrela), genitalij itd.

3.3. Pri zbiranju vzorca se prepričajte, da pri odpiranju posode z biomaterialom v laboratoriju ne nastane aerosol: vzorce krvi in ​​drugih telesnih tekočin previdno prenesite iz brizge, ne da bi se penili, v suho in/ali napolnite z medijem ( antikoagulantne) jedi.

3.4. V smeri študije navedite: priimek, ime, patronimik bolnika; leto rojstva; podružnica, v kateri se nahaja; številka zdravstvene anamneze (ambulantna kartica); diagnoza; gradivo, poslano za raziskovalne in raziskovalne naloge; datum in ura odvzema gradiva (ure); antibakterijska (imunska) zdravila, če se vzorec daje v ozadju antibiotikov in / ali imunoterapije; priimek, ime, patronim lečečega zdravnika (svetovalca), ki pošlje vzorec na pregled. Pri pošiljanju biomateriala, pridobljenega ob obdukciji, je naveden tudi oddelek, na katerem je bolnik umrl.

3.5. Pred vzorčenjem, zlasti pri uporabi invazivnih metod, se upošteva verjetnost tveganja za bolnika in koristi ter pomen te posebne vrste biomateriala za namene objektivizacije klinične diagnoze in vrednotenja tekočih ali načrtovanih terapevtskih ukrepov. .

4. Splošne zahteve za dostavo vzorcev biomateriala v mikrobiološki laboratorij

4.1. Vsi zbrani vzorci se takoj po prejemu pošljejo v mikrobiološki laboratorij, razen v primerih, ko se uporabljajo posode s transportnimi mediji, ki so v Ruski federaciji odobrene za uporabo v te namene na predpisan način.

To je potrebno za:

ohranjanje sposobnosti preživetja patogenov in možnosti izolacije mikroorganizmov, ki zahtevajo posebne pogoje gojenja (Haemophylus in drugi);

preprečiti prekomerno rast hitro rastočih in aktivnih mikroorganizmov;

vzdrževanje razmerja začetnih koncentracij izolatov ob prisotnosti mikrobnih povezav v vzorcu;

zmanjšanje časa stika vzorca z nekaterimi lokalnimi antiseptiki, ki imajo lahko antibakterijsko delovanje;

objektivizacija klinične diagnoze infekcijsko-vnetne bolezni in ocena rezultatov terapije.

4.2. Dovoljena je uporaba alternativnih metod za povečanje časa dostave biomateriala v laboratorij.

Vzorce je treba hraniti v hladilniku pri 2-8°C, razen kot je navedeno spodaj.

4.2.1. Kadar je vzorec shranjen v specializiranem transportnem vsebniku (transportnem sistemu), odobrenem za uporabo po ustaljenem postopku, ki je sterilna epruveta za enkratno uporabo z agarjem ali tekočim transportnim medijem in sondo za bris, vgrajeno v zamašek in sterilno pakirano z cev. Vzorce hranimo v takih posodah pri sobni temperaturi (18-20 °C). Transportni mediji, posebni gosti z aktivnim ogljem in brez, omogočajo ohranjanje sposobnosti preživetja mikroorganizmov, ki zahtevajo posebne pogoje gojenja 48-72 ur.

Za vzorce za anaerobe in fekalno floro se uporabljajo posebne posode s transportnim medijem, epruvete z gojišči za izolacijo Campylobacter in Helicobacter, odobrene za uporabo na predpisan način. Takšna okolja ustvarjajo anabiotično atmosfero za mikroorganizme, kar pripomore k zmanjšanju njihove presnove, zaviranju rasti ter preprečuje njihovo sušenje in kopičenje odpadnih snovi.

Vsak vzorec, zbran v tekočem mediju, se temeljito zmeša z medijem.

4.2.2. Ko se kri goji v juhi, potem po prejemu vzorec shranimo v termostatu pri temperaturi 35-37 °C.

Če vzorce zbiramo v posebnih posodah za naknadno študijo z dvofaznim medijem, jih je treba hraniti pri sobni temperaturi (18-20 ° C).

4.2.3. Kadar so lahko prisotni temperaturno odvisni mikroorganizmi (Neisseria sp.), vzorce pustimo pri sobni temperaturi (18-20 °C).

4.3. Za prevoz vzorcev, pregledanih na prisotnost aerobov in fakultativnih anaerobov, uporabite:

sterilne suhe epruvete za enkratno uporabo z vgrajeno sondo za bris (gomolji) ali posode s transportnim medijem, odobrenim za uporabo v te namene v Ruski federaciji na predpisan način; dovoljena je uporaba sterilnih steklenih epruvet, zaprtih s plinoprepustnim zamaškom z vgrajeno laboratorijsko pripravljeno sondo za bris;

sterilne posode za enkratno uporabo z navojnim pokrovom (dovoljeno je steklo s plinoprepustnim zamaškom) - za zbiranje vzorcev urina, sputuma, blata, bronho-alveolarnega izpiranja, biopsijskega (kosov tkiva) materiala;

sterilne za enkratno uporabo z navojno zaporko ali steklene epruvete - za zbiranje sterilnih tekočin, bronho-alveolarno izpiranje, ločeno od drenaž ali strganj;

sterilne petrijevke - za zbiranje vzorcev dlak ali za transport strganja z oznakami na dnu posode;

posebne sterilne sonde za nazofaringealne in urogenitalne brise z aluminijasto osjo (premer osi - 0,9 mm) in majhno bombažno ali viskozno palčko na konici (premer tampona - 2,5 mm), nameščeno v zamašku, ki zapira sterilno stekleno cev za enkratno uporabo - za vzorce iz nazofarinksa za B. pertusis in iz sečnice pri moških.

4.4. Za prevoz vzorcev, pregledanih na prisotnost anaerobov, se uporabljajo posode s posebnimi transportnimi mediji in epruvete s tioglikolnim medijem; epruvete z mediji za izolacijo Campylobacter in Helicobacter, odobrene za uporabo v te namene v Ruski federaciji na predpisan način. Vzorec, zbran v tekočem mediju, se z njim temeljito pomeša. Za pridobivanje vzorcev se priporočajo naslednje metode:

izpust iz odtokov, ki se uporabljajo za aktivno aspiracijo votlin, se aspirira s sterilno brizgo s tesnim batom v prostornini 2-4 ml; sterilna igla se namesti na napolnjeno brizgo, zapre s sterilno vatirano palčko, odvečni zrak se odstrani iz brizge; vatirano palčko spustimo v dezinfekcijsko raztopino; konec igle se vbrizga v sterilni gumijasti zamašek in v tej obliki se brizga z materialom dostavi v laboratorij;

vsebino žarišč okužbe in votlin, pridobljene z njihovo punkcijo, zberemo v prostornini 2-4 ml z uporabo 2-, 5-, 10-ml brizg s tesnim batom; odvečni zrak odstranimo iz brizge tako, da iglo pokrijemo s sterilno vatirano palčko, ki jo nato zavržemo v raztopino za razkuževanje; iglo razkužimo z brisanjem z blazinico, navlaženo s 70% etilnim alkoholom; za tesnjenje se konec igle vbrizga v sterilni gumijasti zamašek in v tej obliki brizgo z materialom dostavimo v laboratorij.

Pri zbiranju velike količine materiala (3 ml ali več) lahko anaerobne bakterije ostanejo sposobne preživetja 24 ur pri sobni temperaturi (18-20 °C).

Če je izcedka le nekaj kapljic, ga iz brizge prelijemo v manjšo posodo ali v epruveto s transportnim medijem takoj po prejemu (posodo s transportnim medijem prejmemo v laboratoriju dan prej).

Kose tkiv (biopsijski material) v primeru suma na anaerobno okužbo zberemo v sterilne posode za enkratno uporabo z navojnim pokrovom (dovoljeno je - v stekleni posodi z brušenim pokrovom) in jih takoj dostavimo v laboratorij.

4.5. Za prevoz vzorcev, pregledanih na prisotnost virusov, se uporabljajo posebne posode s tekočim medijem za ohranjanje virusov.

5. Vzorci različnih vrst biomateriala in okolja, ki obdaja bolnika

Tabela 1

Steklenina, ki se uporablja za dostavo vzorcev v laboratorij

Vir in vrsta kliničnega materiala	Izdelki, ki se uporabljajo za dostavo vzorcev
	Posebne transportne posode z medijem, z nevtralizatorji antibiotikov in reagenti, ki uničujejo krvne celice, ali brez njih, odobrene za uporabo v te namene v Ruski federaciji na predpisan način; dvofazni medij v vialah
centralni živčni sistem
Alkohol	Sterilne epruvete za enkratno uporabo z navojnim pokrovčkom; sterilne steklene epruvete z zamaškom iz celuloze ali bombažne gaze
Material za možganske abscese in biopsijski material za vnetne procese v centralnem živčnem sistemu	Brizga z iglo, vstavljena v sterilni gumijasti zamašek; epruveta s tioglikolom, zaprta s sterilnim gumijastim zamaškom; transportne posode z medijem za shranjevanje anaerobov
spodnji dihalni trakt
Biopsijski material pljuč in sapnika; izpljunek, naravno izkašljan in induciran; strganje iz bronhijev	Sterilna posoda za enkratno uporabo z navojnim pokrovom (za zbiranje izpljunka); laboratorijsko pripravljena sterilna steklena posoda
Aspirat sapnika, bronhoalveolarno izpiranje, izpiranje bronhijev	Sterilna posoda za zbiranje izpljunka za enkratno uporabo z navojnim pokrovom; tesno zaprta sterilna steklena viala
Aspirirajte transtrahealno in pljučno	Posebni transportni zabojniki z medijem za anaerobe; brizga z iglo, vstavljeno v sterilni gumijasti zamašek; posoda s tioglikolnim medijem; sterilna plastična posoda za enkratno uporabo z navojnim pokrovom; tesno zaprta viala
zgornjih dihalnih poti
Brisi iz nosu, žrela, nazofarinksa, zunanjega ušesa	Sterilna sonda za bris za enkratno uporabo, nameščena v sterilno suho epruveto (tubeser) ali transportno posodo z ustreznim medijem; transportna posoda za viruse; sterilna steklena posoda, sestavljena v laboratoriju
Izpiranje nosu, nazofagealni aspirat	Sterilna posoda za enkratno uporabo z navojnim pokrovom; transportna posoda za viruse
Tekočina iz timpanocenteze, sinusni aspirat iz aspiracije z iglo	Brizga z iglo, razkužena po manipulaciji z brisom, navlaženim s 70 % etilnim alkoholom in vstavljenim v sterilni gumijasti zamašek; material iz brizge je možno prenesti v sterilne epruvete za enkratno uporabo ali steklene epruvete ali posebno posodo z medijem za transport anaerobov
Tkivo, pridobljeno med operacijo nosu, žrela, ušesa	Sterilna posoda za enkratno uporabo z navojnim pokrovom; epruveta s tioglikolom ali drugim transportnim medijem, tesno zaprta s sterilnim gumijastim zamaškom; tesno zaprta sterilna plastična ali steklena viala za enkratno uporabo
Strganje iz konjunktive očesnega kota	Razmazi na sterilnih stekelcah brez maščobe; material, ki ga odnesemo v posebno transportno posodo z gojiščem ali inokuliramo v hranilni medij
intraokularna tekočina	Razmazi na sterilnih stekelcah brez maščobe; material, ki ga odnesemo v posebno ladijsko posodo z gojiščem za anaerobi ali brizgo z iglo, predhodno razkuženo s 70 % etanolom, zataknemo v sterilni gumijasti zamašek
Izcedek, vzet s sterilno stekleno paličico ali sterilno vatirano palčko iz sluznice spodnje prehodne gube, z roba vek, z razjedo - iz roženice (po anesteziji), z kotnim konjunktivitisom - iz vogalov veke	Sterilna epruveta za enkratno uporabo ali steklena cev s sladkorno juho, v katero je nameščena sonda za bris, ali sterilna steklena palica, s katero jemljemo vzorec; posebna ladijska posoda z medijem za viruse
Skrivnost iz solzne vrečke	Sterilna sonda za bris za enkratno uporabo, nameščena v sterilno suho epruveto (tubeser) ali v stekleno cev
genitourinarni sistem
Povprečni delež prosto tekočega urina; iz ilealnega kanala, ki se uporablja za ustvarjanje umetnega mehurja; kateter pri bolnikih na intenzivni negi. Izpiranje iz mehurja. Vzorec, pridobljen med dvostransko kateterizacijo sečnice	Sterilna posoda za zbiranje urina za enkratno uporabo z navojnim pokrovčkom ali sterilna cev za enkratno uporabo s pokrovčkom; ali posebna cev za zbiranje urina za enkratno uporabo. Pri uporabi sterilne steklene epruvete s celuloznim ali bombažno-gaznim zamaškom pazite, da zamaška ne namočite z materialom (volumen vzorca 10-20 ml)
Vzorec, pridobljen med suprapubično aspiracijo	Sterilna brizga brez igle, zaprta s sterilnim gumijastim zamaškom; sterilna brizga z iglo, ki je bila predhodno razkužena s 70 % etilnim alkoholom in zataknjena v gumijasti zamašek
Material iz ženskih spolnih organov
Tekočine: plodovnica, jajcevod, Bartholinova	Posebna transportna posoda z medijem za anaerobe; brizga brez igle, zaprta s sterilnim gumijastim zamaškom; brizgo z iglo, obdelano s 70% alkohola in vstavljeno v sterilni gumijasti zamašek (volumen vzorca 1-2 ml)
Vzorci iz cervikalnega kanala, sečnice, vagine	Sterilna sonda za bris za enkratno uporabo, nameščena v sterilno suho epruveto (gomolj) ali transportno posodo s posebnim medijem; sonda za bris, nameščena v celulozni ali bombažno-gazni zamašek sterilne steklene cevi. Mikroskopsko stekelce s pripravljenim brisom za pregled bakterijskih spolno prenosljivih okužb in virusov. Tuba s transportnim medijem z aktivnim ogljem za shranjevanje gonokokov 48 ur ali več
Vzorci materiala iz endometrija	Sterilna posoda za enkratno uporabo z navojnim pokrovčkom ali epruveto ali transportna posoda z anaerobnim medijem; sterilna steklena posoda
Material zunanjih genitalij	Sterilna brizga brez igle, zaprta s sterilnim gumijastim zamaškom; predmetno stekelce z razmazom, prekritim s pokrovnim stekelcem za določitev T. pallidum; sonda za bris, nameščena v sterilno cev za enkratno uporabo (tubeser) ali stekleno cev; posebna transportna cev z medijem z aktivnim ogljem za ohranjanje gonokokov in transportne posode za viruse in klamidijo; brisi na stekelcah za odkrivanje drugih spolno prenosljivih okužb
Material iz moških reproduktivnih organov
brisi iz sečnice	Sonda-tampon na aluminijasti osi (uretralna sonda-tampon), nameščena v sterilne epruvete za enkratno uporabo (tubeser) ali steklene epruvete; posebna transportna cev z medijem z aktivnim ogljem za ohranjanje gonokokov in transportnih posod za viruse in klamidijo; brisi na stekelcah za odkrivanje drugih spolno prenosljivih okužb
ejakulat, sperma	Sterilna posoda za enkratno uporabo z navojnim pokrovom; sterilna epruveta ali tuba, za enkratno uporabo ali steklena
Material epididimisa pri epididimitisu	Posebna transportna posoda z medijem za anaerobe ali posoda s tioglikolnim medijem; sterilna posoda za enkratno uporabo z navojno zaporko ali sterilno stekleno cevko z zamaškom iz celuloze ali bombažne gaze
Poškodba penisa	Brizga brez igle, zaprta s sterilnim gumijastim zamaškom; stekelce z razmazom na T. pallidum, prekrito s pokrovnim stekelcem; sonda za bris, nameščena v sterilno cev za enkratno uporabo (tubeser) ali stekleno cev; ladijski zabojniki za viruse in klamidijo; brisi za odkrivanje drugih povzročiteljev spolno prenosljivih okužb
Material za sum na gonorejo
Brisi iz anusa, cervikalnega kanala, sečnice, vagine	Sonda za bris, nameščena v sterilno cev za enkratno uporabo (tubeser) ali stekleno cev; posebna transportna cev z medijem z aktivnim ogljem za shranjevanje gonokokov 48 ur ali več
Prebavila
Ustne votline	Sonda za bris, nameščena v sterilno cev za enkratno uporabo (tubeser) ali stekleno cev; sterilna posoda za enkratno uporabo ali steklena posoda za zbiranje izpiranja iz ustne votline
Izpiranje želodca ali tekočina za izpiranje; duodenalni aspirat; vzorec, pridobljen med sigmoidoskopijo; material za rektalno biopsijo	Sterilna posoda za enkratno uporabo z navojnim pokrovom; posebna sterilna posoda za zbiranje izpljunka; sterilna steklena posoda; aspirat - v sterilni brizgi z iglo, ki je bila predhodno razkužena in zataknjena v sterilni gumijasti zamašek
Rektalni bris	Sonda za sterilno bris za enkratno uporabo, nameščena v sterilno suho epruveto (gomolj); ali sterilna epruveta s posebnim transportnim medijem; bris sonda iz nerjavečega materiala, nameščena v celulozni ali bombažno-gazni zamašek sterilne steklene cevi
Iztrebki za prisotnost črevesnih okužb ("razdruževanje"), Helicobacter, Campylobacter	Sterilna epruveta z brisom v fiziološki raztopini z glicerinom; transportna posoda z medijem za anaerobe v fekalnih vzorcih, s posebnimi mediji z in brez aktivnega oglja za izolacijo Campylobacter sp. in Helicobacter sp.; bris sonda v suhi sterilni epruveti za enkratno uporabo (tubeser); sterilna steklena cev, nameščena s sondo za bris na kovinsko žico iz titana, jekla, aluminija. Uporaba tampona z leseno osjo ni dovoljena
Iztrebki za prisotnost disbakterioze glede na generično in vrstno sestavo mikrobov ("za floro")	Posebna transportna posoda z gojiščem za anaerobe v fekalnih vzorcih, s posebnimi mediji z in brez aktivnega oglja, za izolacijo Campylobacter sp. in Helicobacter sp., odobreni za uporabo v te namene v Ruski federaciji na predpisan način; bris sonda v viali s fiziološko raztopino z glicerinom v sterilni viali za enkratno uporabo ali stekleni; posebna sterilna posoda za enkratno uporabo z navojnim pokrovom; laboratorijsko vgrajena steklena posoda
Iztrebki za prisotnost disbakterioze s kvantitativnim obračunom izoliranih in identificiranih mikrobov ("za disbakteriozo")	Posebne sterilne posode za enkratno uporabo z navojnim pokrovom in lopatico za zbiranje materiala in vzorčenje za inokulacijo, standardne teže; laboratorijsko nameščena posebna sterilna steklena posoda
Koža in podkožje
Razjede, noduli (nodularne zadebelitve), plitke, površinske rane (gnojne; opekline); globoke rane ali abscesi, kosti	Posebne sterilne posode za enkratno uporabo z navojnim pokrovom; sterilne epruvete z zamaški za enkratno uporabo ali steklene s prostornino 5 ml; posode s posebnimi mediji za anaerobe
Eksudat podkožja in mehkih tkiv; aspirat mehkih tkiv	Sterilna brizga brez igle, zaprta s sterilnim gumijastim zamaškom; brizga z iglo, ki je bila predhodno razkužena s 70 % etilnim alkoholom in zataknjena v gumijasti zamašek
Sterilne telesne tekočine, razen krvi, cerebrospinalne tekočine, urina (glejte zgoraj)
Tekočine
Plevralni, peritonealni, ascitični, sklepni, sinovialni	Sterilna posoda za enkratno uporabo z navojnim pokrovom; zaprta brizga brez igle ali z iglo, ki je bila predhodno dekontaminirana s 70 % etilnim alkoholom in zataknjena v sterilni gumijasti zamašek
Biomaterial za PCR diagnostiko
kri; druge telesne tekočine	Sterilne epruvete za enkratno uporabo z zamaškom 1,5 ml z antikoagulantom. Cev se 3-5 krat obrne, da se vzorec pomeša z antikoagulantom. Dostava v laboratorij - v stojalu iz materialov za sterilizacijo v avtoklavu
Biopsijski material; strganja; sputum in druge vrste biomateriala	Sterilne suhe epruvete za enkratno uporabo tipa "Eppendorf" in druge podobne. Dostava v laboratorij - v posebnem stojalu iz materialov za sterilizacijo v avtoklavu
Vzorci okolja, ki obdaja bolnika
Zrak	Sterilne petrijevke za enkratno uporabo (=90 mm) ali steklene (=100 mm) z gostimi hranili. Dostava v laboratorij v posebnih zabojnikih
Izpiranje iz predmetov iz okolja, ki obdaja bolnika
Vzorci za ugotavljanje sterilnosti
Kri in krvne komponente iz oddelka, ki jih zbira	Zabojniki s pripravljenim materialom se v laboratorij dostavijo v posebnih nosilnih zabojnikih.
Izpiranja iz medicinskih instrumentov, cevi opreme, ki se uporabljajo v oddelkih za oživljanje in anestezijo, pa tudi v operacijskih sobah; roke medicinskega osebja; spodnje perilo	Sterilne sonde za bris, nameščene v prozornih epruvetah s prozornim brezbarvnim tekočim medijem. Vzorci se v laboratorij dostavijo v regalih iz materialov za sterilizacijo v avtoklavu.
Kirurški material: tamponi, prtički, turunde, vatirane palčke na leseni osi	Sterilne prozorne epruvete z zamaški, s prozornim brezbarvnim tekočim medijem s 3-5 sterilnimi steklenimi kroglicami. Vzorci se v laboratorij dostavijo v regalih iz materialov za sterilizacijo v avtoklavu.
Material za šivanje: katgut, shranjen v operacijski sobi v alkoholni raztopini joda	Sterilna epruveta (steklenica z zamaškom) z raztopino nevtralizatorja (natrijev hiposulfit)
Svilene, kapronske, monomerne sintetične niti, shranjene v operacijski sobi v alkoholni raztopini	Sterilna epruveta z zamaškom s sterilno destilirano vodo kot tekočino za izpiranje. Vzorci šivalnega materiala se dostavijo v laboratorij v stojala za sterilizacijo v avtoklavu.
Izpiranje z operacijskega polja bolnika	Pred obdelavo polja: v prozornih epruvetah, napolnjenih s prozornim tekočim hranilnim medijem. Po obdelavi polja: sterilna epruveta (steklenica z zamaškom) z raztopino nevtralizatorja (natrijev hiposulfit). Dostava materiala v laboratorij poteka v regalih za sterilizacijo v avtoklavu.
Vzorci za določanje imunoloških faktorjev protiinfektivnega zaščitnega sistema (sistem protiinfektivne odpornosti telesa - SAIR)
Kri in druge telesne tekočine za določitev humoralnih zaščitnih faktorjev	Brizge za epruvete za enkratno uporabo (vakutainerji); sterilne epruvete za enkratno uporabo z navojnim pokrovčkom; sterilne steklene epruvete s sterilnimi gumijastimi, celuloznimi ali bombažnimi zamaški. Vzorce dostavimo v laboratorij v posebnem stojalu iz materialov za sterilizacijo v avtoklavu. Če uporabljate steklene epruvete z zamaški iz bombažne gaze - jih med transportom ne namočite
Kri in druge telesne tekočine za določanje celičnih zaščitnih faktorjev	Sterilne epruvete za enkratno uporabo z navojnim pokrovčkom; sterilne steklene epruvete, tesno zaprte s sterilnim gumijastim zamaškom. Epruvete za enkratno uporabo z antikoagulantom za centrifugiranje. Dostava v laboratorij poteka v posebnem regalu iz materialov za sterilizacijo v avtoklavu.
Papa bris za bakterijske in virusne antigene (na primer, če obstaja sum na spolno prenosljive okužbe)	Steklena stekelca brez maščobe; za T. pallidum je treba stekelce prekriti s pokrovnim stekelcem. Dostava v laboratorij se izvaja v posodi za enkratno uporabo ali sterilnih za enkratno uporabo ali steklenih petrijevkah v posebnih posodah

Opomba. Vzorce gnoja, tekočine in tkiva je treba dostaviti v laboratorij v posebnih sterilnih posodah za enkratno uporabo z navojnimi pokrovčki. Sonde za bris - posušite v sterilnih epruvetah za enkratno uporabo (gomolji) ali v posodah s transportnim medijem, če materiala ni mogoče dostaviti v laboratorij takoj po vzorčenju. Za te namene lahko uporabite transportne medije, vklj. v epruvetah za enkratno uporabo, pakiranih skupaj s sterilno sondo za bris, odobreno za uporabo v Ruski federaciji na predpisan način. Sonde za bris so izdelane (pripravljene) iz različnih materialov: za sam palček (vata-gaza, bombaž, viskoza, dacron), za os sonde za bris (les, plastika, nerjaveče kovine - titan, jeklo, aluminij) in gosti agarski mediji: z in brez ogljika za anaerobe.


Številni klinično pomembni anaerobi, kot so Clostridium perfringens, Bacteroides fragilis, so dovolj tolerantni na prisotnost kisika in so dobro ohranjeni v veliki količini gnoja, vzorcih tekočin in telesnih tkiv, pa tudi na bris sondi v posebnem transportu ali tioglikolu. medijev.

V vzorcu biološkega materiala so dobro ohranjene tudi bolj občutljive na kisik (na primer fuzobakterije), in če je material posejan v 2-3 urah od trenutka zbiranja, potem posebna pozornost na način dostave ni potrebna. . Anaerobi, ki zahtevajo posebne pogoje gojenja, ne ostanejo sposobni preživeti na sondi za bris v transportni posodi z medijem, ki ni namenjen za dostavo anaerobov, z izjemo posod s posebnim transportnim medijem ali tioglikolom.

Hkrati ti mikroorganizmi rastejo 5-7 dni dlje od časa, v katerem večina praktičnih laboratorijev inkubira posode, inokulirane z materialom za izolacijo in identifikacijo aerobov in fakultativnih anaerobov. Iz tega razloga se zdi rutinsko testiranje prisotnosti anaerobov s posebnimi transportnimi anaerobnimi posodami z mediji v običajnih praktičnih laboratorijih neprimerno in se lahko omejimo na epruvete s tioglikolnim medijem.

Za zbiranje in prevoz vzorcev se uporabljajo mediji, posode, orodja in materiali, ki so na predpisan način odobreni za uporabo v Ruski federaciji.

6. Pravila in tehnike za pridobivanje vzorcev različnih vrst biološkega materiala za mikrobiološke raziskave

Priporočljivo je, da vsak vzorec od pacienta, ki zahteva uporabo invazivnih metod, opravi zdravnik (z izjemo vzorca krvi, ki ga lahko odvzame medicinska sestra).

Če je treba material zbrati s sondo za bris na odprti operacijski površini ali v primeru drugega invazivnega posega, je dovoljena uporaba že pripravljenih brisov z mednarodno stopnjo varnosti najmanj razreda IIA, odobrenih za uporabo za te namene v Ruski federaciji na predpisan način.

6.1. vzorci krvi

Vzorce za ugotavljanje prisotnosti bioloških povzročiteljev v krvi (bakteremija, viremija itd.) pridobimo z venepunkcijo perifernih ven (pogosto vene komolca), arterij ali iz pete pri novorojenčkih.

Odvzem vzorca iz stalnega intravenskega ali intraarterijskega katetra je dovoljen le v primerih suma okužbe, povezane s katetrom, ali nezmožnosti pridobitve z venepunkcijo.

6.1.1. Pri akutni sepsi, meningitisu, osteomielitisu, artritisu, akutni nezdravljeni bakterijski pljučnici in pielonefritisu pred začetkom antibiotične terapije odvzamemo 2 vzorca iz dveh žil ali dveh delov žile.

6.1.2. Če sumite na prisotnost endokarditisa in počasne sepse z majhno (10-30 CFU / ml) koncentracijo patogena v krvnem obtoku:

ob prisotnosti akutnega procesa se odvzame 2 vzorca iz dveh delov žil (različnih žil) v prvih 1-2 urah dviga telesne temperature (ne na vrhuncu temperature!) in pred začetkom terapije. ;

pri subakutnem ali počasnem poteku se prvi dan odvzamejo 3 vzorci z intervalom 15 minut ali več. Če so vsi vzorci negativni, se drugi dan po setvi zberejo še 3;

pri bolnikih z endokarditisom, ki prejemajo antibiotike, se vsak od treh dni odvzame 2 ločena vzorca s pozitivno klinično dinamiko terapije;

za potrditev klinične diagnoze "infektivnega endokarditisa", če od pacienta ni mogoče dobiti potrebnega števila vzorcev krvi za mikrobiološko analizo ali če so kulture negativne, se vzorci krvi pošljejo v študijo imunoloških dejavnikov obrambnega sistema telesa. (sistem odpornosti proti okužbam - SAIR); dostava v laboratorij se izvaja v sterilnih steklenih ali epruvetah za enkratno uporabo s pokrovom (plutovina), pridobljenih dan prej v laboratoriju;

če ima bolnik prirojeno srčno bolezen (CHD), se je treba spomniti, da je CHD prodrom infektivnega endokarditisa, določanje imunoloških faktorjev CAD pa je vključeno v preiskovalni algoritem pri takem bolniku.

6.1.3. Pri bolnikih, katerih terapija vključuje antibiotike, se v 48 urah odvzame 6 vzorcev; vzorce je treba odvzeti tik pred dajanjem (odvzemom) naslednjega odmerka zdravila.

6.1.4. Če ima bolnik vročino neznanega izvora, se najprej odvzame 2 vzorca iz različnih krvnih žil (dva dela žile), nato pa po 24-36 urah še 2 vzorca ob zvišanju telesne temperature (ne pri najvišja temperatura!).

6.1.5. Tehnika za odvzem vzorca krvi. Odvzem vzorcev krvi za kulturo izvajata 2 osebi ob pacientovi postelji ali v sobi za zdravljenje.

Če želite dobiti vzorec, naredite naslednje:

razkužiti predel kože nad posodo, ki je izbrana za punkcijo: kožo obdelamo z brisom, navlaženim s 70 % etilnim alkoholom, nato z drugim tamponom, navlaženim z 1-2 % raztopino joda ali drugim razkužilom, odobrenim za uporabo v te namene na predpisan način, v krožnih gibih, začenši od središča, v 30 s;

počakajte, da se obdelana površina posuši. Po obdelavi kože pred uvedbo igle ni dovoljeno palpirati žile;

pri delu z vialami z dvojnim medijem: s sterilno brizgo zberite 10 ml krvi odraslih, od otrok - 5 ml; odprite vialo nad plamenom žgane svetilke; injicirajte kri v vialo iz brizge, potem ko ste odstranili iglo; zažgete vrat in zamašek viale v plamenu alkoholne svetilke, zaprite vialo z zamaškom; previdno, da ne prepojite zamaška viale, s krožnimi gibi premešajte njeno vsebino.

Pri uporabi že pripravljenih vial z medijem in reagenti, ki nevtralizirajo antibiotike in uničujejo krvne celice, ali brez njih, odobrenih za uporabo v te namene v Ruski federaciji na predpisan način, odrasli prejmejo 10-30 ml krvi, otroci - 0,5 - 3,0 ml.

pri čemer:

vzporedno z dezinfekcijo predela kože za punkcijo, se pokrovčki steklenic obdelajo s 70% etilnim alkoholom (pri delu s steklenicami ni dovoljeno uporabljati raztopine joda za obdelavo pokrovčkov, na primer Bactec, Vital in drugi podobni, odobreni za uporabo za te namene v Ruski federaciji po določenem vrstnem redu);

kri, pridobljena od odraslih, v enakih količinah, medtem ko se preluknja zamašek posode, vnese v "aerobno" in "anaerobno" posodo; kri, prejeta od otrok - v posebni "otroški" steklenici, medtem ko preluknjate zamašek posode.

6.1.6. Po venepunkciji in hemokulturi v posodi z gojiščem za preprečevanje morebitnega draženja (opekline) z brisom, navlaženim s 70 % etilnim alkoholom, odstranimo ostanke joda s pacientove kože.

6.2. Testi za infekcijske in vnetne procese centralnega živčnega sistema (CNS)

6.2.1. Alkohol. 4,0-5,5 ml cerebrospinalne tekočine, pridobljene z lumbalno punkcijo iz subarahnoidnega prostora med vretenci L3-L4, L4-L5 ali L5-S1, pa tudi s punkcijo stranskih prekatov možganov, pošljemo v mikrobiološki laboratorij na raziskavo. .

Odvzem vzorcev poteka tako, da se tri epruvete počasi polnijo s tremi porcijami materiala za raziskave v laboratorijih. Uporabite sterilne epruvete s tesno prilegajočimi pokrovi (za enkratno uporabo z zamaškom ali kozarcem s sterilnim gumijastim zamaškom).

Od treh epruvet za lumbalno punkcijo vedno pošljite cev z najbolj motno vsebino, običajno drugo cevko v postopku zbiranja.

Po prejemu materiala s punkcijo stranskih ventriklov možganov se sveže vzeta cerebrospinalna tekočina iz brizge, po predhodno odstranitvi igle, vnese v sterilno epruveto nad plamen alkoholne svetilke, vrat epruvete. in pluto zažigamo v plamenu alkoholne svetilke (pri delu s stekleno cevko, zaprto z bombažno gazo ali gumijastimi zamaški), zaprto zamaško cev.

V vseh primerih, pri katerih obstaja sum na meningitis, se poleg likvorja odvzame material iz domnevnih žarišč okužbe: bris iz nazofarinksa, srednjega ušesa, vzorci krvi in ​​se skupaj z likvorjem pošlje v laboratorij. Dober način za dolgotrajno ohranitev meningokoka (do 48 ur) je, da material vzamete z brisom in ga položite v epruveto s transportnim medijem z ali brez aktivnega oglja.

Tekočina za mikrobiološke raziskave se takoj pošlje v laboratorij na grelni blazini, da se vzdržuje temperatura 35-37 °C. Če to ni mogoče, se cerebrospinalna tekočina zbere v posodo s transportnim medijem in pusti v hladilniku (pri temperaturi 4-8 ° C) do jutra, nato pa se dostavi v laboratorij.

Če je potrebno izvesti virološke študije, vzorce CSF damo v hladilnik pri temperaturi 2-8 ° C ali zamrznemo ali shranimo pri sobni temperaturi v posodah s posebnim tekočim medijem.

6.2.2. Material iz možganskih abscesov. Glede na to, da v 90% primerov v vzorcu rastejo anaerobi, se material iz žarišča aspirira in pošlje v laboratorij v posodah z anaerobnim medijem, odobrenim za uporabo v te namene v Ruski federaciji na predpisan način, ali v brizgi. s katerim smo odvzeli vzorec, po odstranitvi igle in brizgo zaprite s sterilnim gumijastim zamaškom.

Vzorec se dostavi takoj po prejemu.

6.2.3. biopsijski material. Vzorce pridobimo med operacijo, damo v posodo z anaerobnim medijem ali v sterilno epruveto s tioglikolnim medijem, zaprto s sterilnim gumijastim zamaškom.

Material se takoj pošlje v laboratorij.

6.3. Testi za infekcijske in vnetne procese oči

Večino očesnih vzorcev zbere oftalmolog. Te vzorce je treba ob sprejemu inokulirati na hranilne medije ob pacientovi postelji ali v sobi za zdravljenje ali v zdravniški ordinaciji, inokulirani material pa prenesti v laboratorij za gojenje, izolacijo, identifikacijo in določanje občutljivosti na antibiotike. patogeni. Vzorce, odvzete z invazivnimi in drugimi agresivnimi metodami, odvzamemo vzporedno z brisom veznice, ki v takih primerih služi kot kontrola.

Dan prej za 6-8 ur (noč) prekličite vsa zdravila in postopke.

Ob prisotnosti specifičnih kliničnih manifestacij infekcijsko-vnetnega procesa ali sumov, ki jih ima zdravnik, je pred anestezijo nujno pripraviti brise za določitev klamidije in virusov, zdravila pa poslati v laboratorij. Za ohranitev klamidije in virusov se material zbira v posodah s transportnimi mediji.

Izcedek se zbira s sterilno stekleno paličico ali sterilno sondo-tamponom: dva ali tri premike se izvedejo vzdolž sluznice spodnje prehodne gube, od roba vek; z razjedo - iz roženice (po anesteziji), z "kotnim konjunktivitisom" - iz vogalov vek.

Skrivnost iz solzne vrečke se po nežni masaži pobere s sterilno sondo za bris.

Material, odvzet s paličico in/ali bris sondo, damo v posodo s transportnim medijem ali v sterilno stekleno cev s tekočim medijem in dostavimo v laboratorij, pri čemer pazimo, da ne namočimo celuloznega ali bombažno-gaznega zamaška. cev.

Pri uporabi brisovnih sond je zaželeno uporabljati posode za enkratno uporabo s transportnim medijem ali sterilne steklene epruvete z zamaški iz bombažne gaze, napolnjene s sterilnim medijem.

Najbolj pravilne podatke o povzročitelju vnetnega procesa lahko dobimo z mikrobiološko analizo strganja.

6.3.1. Konjunktivitis in blefarokonjunktivitis. Dan prej se za 6-8 ur (noč) bolnikom v bolnišnici odpovejo vsa zdravila in posegi.

Vzorce iz očesne veznice odvzamemo s sterilnim, predhodno navlaženim tamponom s sondo iz viskoze ali kalcijevega alginata, ki se nahaja v sterilni epruveti ali stekleni cevi za enkratno uporabo. Vzorce iz vsakega očesa odvzamemo z ločenimi brisovi z dvema ali tremi krožnimi gibi po sluznici.

Gomolji z brisi iz vsakega očesa označijo "desno" in "levo" in takoj poslano v laboratorij.

Pred strganjem se injicira 1-2 kapljici anestetika, na primer proparakain hidroklorida ali drugega, ki je na voljo in odobren za uporabo v te namene na predpisan način.

Z dvema ali tremi kratkimi ostrimi gibi v eni smeri se s posebno sterilno lopatico poberejo strganja iz konjunktive. Med manipulacijo mora biti oko odprto.

Pri zbiranju vzorca je treba paziti, da se ne dotaknete trepalnic.

Pripravite vsaj 2 brisa iz vsakega očesa tako, da material nanesete na čisto, razmaščeno stekelce s krožnimi gibi na površini s premerom 1 cm.

Razmaze fiksiramo 5 minut v 95% metil alkoholu, ki je v posebni, tesno zaprti posodi.

Takoj epruvete s sondami za brise in očala z brisi prenesemo v laboratorij.

6.3.2. bakterijski keratitis. Dan prej se za 6-8 ur (noč) bolnikom v bolnišnici odpovejo vsa zdravila in posegi.

Pridobite 2 vzorca iz konjunktive, kot je opisano v 6.3.1, ker rezultati kulture so lahko koristni pri določanju vira kontaminacije roženice (če se sumi na glivično okužbo, se uporabi en vzorec).

Če sumimo na virusno okužbo, se eksudat veznice in material, pridobljen s strganjem, da v poseben transportni medij za viruse.

Anestezija se izvede, kot je navedeno v točki 6.3.1.

Zberite 3-5 strganj po metodi, opisani v odstavku 6.3.1.

Zbrani material damo v majhno (5 ml) sterilno epruveto za enkratno uporabo z navojnim pokrovčkom ali sterilno stekleno epruveto z gumijastim zamaškom, napolnjeno z medijem.

Pripravite 2-3 namaze na stekelcu in jih po sušenju pritrdite, kot je opisano v odstavku 6.3.1.

Takoj ves material se pošlje v laboratorij.

6.3.3. Bakterijski endoftalmitis. Vzorec steklaste tekočine (1-2 ml) se odvzame z aspiracijo s fino iglo in vzorec dobi med vitrektomijo.

Nato naredite naslednje:

Po odstranitvi igle iz brizge se vsebina da v sterilno posodo za enkratno uporabo z navojnim pokrovčkom ali epruveto, tesno zaprto z gumijastim zamaškom;

vzorec materiala lahko pustite v brizgi, odstranite zrak in odstranite iglo, zaprite brizgo s sterilnim gumijastim zamaškom;

odvzeti vzorec iz veznice, kot je opisano v odstavku 6.3.1;

ves material takoj poslano v laboratorij.

6.3.4. Preseptalni celulitis. Kožo obdelamo s 70 % etilnim alkoholom in 1-2 % raztopino joda ali jodoformom ali drugim razpoložljivim razkužilom, ki je dovoljeno za uporabo na predpisan način.

Če ni odprte rane, se zgornja ali spodnja veka preluknja, da se zbere material.

V prisotnosti odprte rane se vzorec gnojnega materiala odvzame z brizgo z iglo.

Pripravite brise na stekelcu, kot je opisano v odstavku 6.3.1.

Zbrani material prestavimo v transportno posodo z mediji za anaerobi ali pa ga pustimo v brizgi, ki jo po odstranitvi zraka iz nje in odstranitvi igle zapremo z zamaškom.

Zbrani material in brisi takoj poslano v laboratorij.

6.3.5. Orbitalni celulitis. Zbrati aspirat iz cone v skladu z metodo, opisano prej v odstavku 6.3.2.

Zberite vzorec iz veznice in pripravite brise na stekelcu, kot je navedeno v odstavku 6.3.1.

Za dostavo v laboratorij uporabite materiale, opisane v točki 6.3.3.

Odvzeti vzorce krvi pri pacientu v skladu z metodo, opisano v odstavku 6.1. Vzorci krvi, ves zbrani material se prenese v laboratorij.

6.3.6. Vnetje solzne žleze (dakriadenitis).

Gnojna vsebina se odvzame s sondo za bris, kot je navedeno v odstavku 6.3.1.

Ne uporabljajte metode aspiracije z iglo, da ne bi motili celovitosti solzne žleze.

Sonda za bris in stekelca z razmazi se prenesejo v laboratorij.

6.3.7. Vnetje solzne vrečke (dakriocistitis). Vzemite vzorec iz veznice, kot je navedeno v odstavku 6.3.1.

Masirajte in pritiskajte na solzno vrečko, da dobite vzorec eksudata za kulturo in pripravo brisa, ali z drugo metodo zbrati eksudat z brizgo in iglo.

Zbrani vzorec eksudata položite v transportne posode, kot je opisano prej, in dostavite v laboratorij.

6.3.8. Kanalikulitis. Pritisnite notranjo stran veke, da dobite gnoj.

Nadaljnje delo se izvaja po metodah, opisanih prej v tem razdelku.

Če je v zdravstveno-preventivni organizaciji specializiran oddelek (ambulanta), se vsi posevki izdelujejo ob pacientovi postelji na hranilih, pridobljenih v laboratoriju. Inokulirani material skupaj s pripravljenimi brisi prenesemo v laboratorij.

6.4. Testi za infekcijske in vnetne procese ušesa

6.4.1. V primeru poškodbe zunanjega ušesa kožo obdelamo s 70 % alkoholom, nato pa speremo s sterilno fiziološko raztopino. Izcedek iz žarišča zberemo na sterilnem sončnem brisu gomolja ali epruvetah s transportnim medijem za enkratno uporabo ali na tamponu, ki je nameščen v sterilni stekleni epruveti, zaprti z zamaškom, s posebnim medijem ali brez njega. Bris se da v epruveto in dostavi v laboratorij.

6.4.2. V primeru poškodbe srednjega in notranjega ušesa se zbirajo punktati in drug material, pridobljen med operacijo. Punktate se v laboratorij dostavijo v zaprti brizgi s predhodno odstranjenim zrakom. Vzorci tkiva - v transportni posodi z anaerobnim medijem, odobrenim za uporabo v te namene v Ruski federaciji po ustaljenem postopku, ali v sterilni posodi za enkratno uporabo z navojnim pokrovom. Možna je uporaba sterilne steklene cevi, zaprte s sterilnim gumijastim zamaškom.

6.4.3. Timpanocenteza bobniča se izvaja za mikrobiološko diagnostiko okužb srednjega ušesa le v primerih, ko se bolnik ne odzove na predhodno terapijo ali v primeru topidnega kataralnega vnetja srednjega ušesa tudi ob odsotnosti eksudata v štrleči krvi (sejanje iz nazofarinksa je pozitiven v manj kot 90 % primerov).

Za pridobitev vzorca zunanji kanal očistimo s tamponom, navlaženim s 70 % etanolom, čemur sledi obdelava s sterilno fiziološko raztopino.

S pomočjo brizge se tekočina zbira iz bobnične votline. Vzorec se v laboratorij dostavi v sterilni posodi za enkratno uporabo z navojno zaporko ali v zaprti brizgi z predhodno odstranjenim zrakom.

Če je bobnič poškodovan, se material pobere s sondo za bris z ogledalom. Bris se vstavi v sterilno epruveto za enkratno uporabo (gomolj) ali posodo s transportnim medijem (dovoljena je uporaba sterilne steklene epruvete z ali brez medija) in v tej obliki dostavimo v laboratorij.

6.5. Testi za infekcijske in vnetne procese dihalnih poti

6.5.1. zgornjih dihalnih poti. Če pri bolniku obstaja sum na davico, oslovski kašelj, klamidijo, mikoplazmozo, legionelozo, gonorejo, pred oddajo vzorca obvestijo laboratorijske delavce, da se pripravijo na analizo tovrstnega materiala.

6.5.1.1. Vzorec iz sluznice sprednjih delov nosne votline odvzamemo z eno sterilno sondo za bris, nameščeno v sterilno cev za enkratno uporabo (tubeser) ali posebej nameščeno v sterilno stekleno cev:

odstranite bris iz epruvete, vstavite v desno nosnico in zavrtite material iz kril nosu in zgornjega kota nosne odprtine;

ponovite manipulacijo za levo nosnico;

bris damo v epruveto in dostavimo v laboratorij.

Tako pridobljeni vzorci so uporabni za ugotavljanje nosilnosti Staphylococcus aureus pri zdravstvenih delavcih, prisotnosti povzročiteljev bolnišničnih okužb, pa tudi za karakterizacijo disbiotskih motenj sluznice zgornjih dihal med celovitim kliničnim in imunomikrobiološkim pregledom bolnikov. izvajajo v znanstvenih in praktičnih laboratorijih.

Če so v nosni votlini žarišča vnetja ali razjede, se uporablja ločen bris za zbiranje materiala iz žarišč (žarišč).

6.5.1.2. Aspirate iz nazofarinksa zbiramo za ugotavljanje prenašanja piogenih streptokokov, meningokokov, povzročiteljev davice in oslovskega kašlja, pa tudi pri izvajanju epidemioloških študij protimikrobne odpornosti S. pneumoniae in H. influenzae:

sesalni material iz nazofarinksa;

material prenesite v sterilno posodo za enkratno uporabo z navojnim pokrovčkom ali posebno sterilno epruveto z zamaškom za plin prepustno celulozo ali bombažno gazo, pri čemer pazite, da ga ne prepojite z vzorcem kliničnega materiala.

6.5.1.3. Bris iz nazofarinksa. Material se zbira za ugotavljanje prenašanja meningokoka in diagnozo oslovskega kašlja.

Previdno z rotacijskimi gibi vzdolž spodnjega nosnega prehoda se izmenično v nazofarinks v nazofarinks vstavi bombažna, viskozna ali kalcijev alginatna sonda-tampon. Hkrati se nosna krila pritisnejo na bris in nosni septum za tesnejši stik s sluznico.

Bris se da v sterilno epruveto in dostavi v laboratorij.

6.5.1.4. Izpiranje nosu se uporablja za ugotavljanje prisotnosti ne le bakterijske, temveč tudi pretežno virusne okužbe.

Pacienta opozorite, naj med postopkom ne pogoltne.

Pacientovo glavo postavimo v obrnjeni položaj pod kotom približno 70°, v vsako nosnico vbrizgamo 5 ml sterilne fiziološke raztopine, v tem položaju mora biti bolnik 3-5 sekund.

Za zbiranje materiala pacientovo glavo spustimo naprej, tako da se tekočina izlije iz nosnic v sterilno posodo za enkratno uporabo ali pa se tekočina aspirira z uvedbo gumijaste drenaže v vsako nosnico.

Enako količino pralnega sredstva položite v posodo z medijem za prenašanje virusov ali ta del dajte v sterilno posodo za enkratno uporabo.

6.5.1.5. Punkcija sinusa. S tehniko aspiracije z brizgo posebej usposobljen izkušen zdravnik ali otorinolaringolog pridobi material iz čelnih čeljusti ali drugih sinusov. Vsebino brizge damo v posodo s transportnim medijem za anaerobe ali v sterilno epruveto s tioglikolnim medijem. Material lahko pustite v brizgi in ga po zaprtju s sterilnim gumijastim zamaškom dostavite v laboratorij.

6.5.1.6. Pridobivanje vzorca iz sluznice žrela (žrela).

Pri vnetem epiglotisu ni dovoljeno jemati materiala iz žrela (žrela), saj lahko poseg povzroči resno obstrukcijo dihal.

Pri jemanju vzorcev iz sluznice žrela (žrela) se z brisom ne dotikajte sluznice lic, jezika, dlesni, ustnic in ne zbirajte sline, saj je ta material značilen za sluznico ustne votline, tj. , zgornji gastrointestinalni trakt.

Bris žrela (žrela) vzamemo na prazen želodec ali 3-4 ure po obroku. Pred odvzemom vzorca mora bolnik splakniti usta s toplo kuhano vodo.

Za pridobitev vzorca uporabimo sterilno lopatico ali bris: iz sterilne epruvete za enkratno uporabo (tubeser) odstranimo viskozni bris ali uporabimo tampon, pripravljen v laboratoriju, nameščen v sterilno stekleno epruveto. Zaželena je uporaba sonde za bris z viskozno glavo, ker viskoza absorbira manj tekočine in več celičnega materiala.

Z eno roko pacientov jezik pritisnemo s sterilno lopatico.

Material zbiramo z drugo roko, izmenično obdelamo desni tonzil, desni palatinski lok, levi tonzil, levi palatinski lok, uvulo s tamponom, na nivoju uvule se dotaknemo zadnje stene žrela s tampon.

Tako pridobljeni vzorci so uporabni za ugotavljanje prisotnosti povzročitelja bolnišnične okužbe, pa tudi za karakterizacijo disbiotskih motenj sluznice zgornjih dihal med obsežnim kliničnim in imunomikrobiološkim pregledom bolnikov, opravljenim v znanstvenih in praktičnih laboratorijih. .

Ob prisotnosti žarišč vnetja ali razjed na sluznici so še posebej pozorni na odvzem vzorcev in dodatno zbirajo material iz žarišč (žarišč) z ločenim brisom.

Bris položimo v sterilno cev za enkratno uporabo ali stekleno cev in dostavimo v laboratorij.

6.5.1.7. Če obstaja sum na davico, o tem obvestijo laboratorijske delavce, ki navedejo diagnozo v napotnici.

V primerih respiratornega patološkega procesa se material hkrati zbira iz sluznice nazofarinksa in žrela po prej predstavljenih metodah.

Če sumimo na kožno obliko davice, se material odvzame s kože, pa tudi iz sluznice žrela (žrela) in nazofarinksa ter vse vzorce dostavi v laboratorij.

6.5.2. spodnji dihalni trakt. Mikrobiološka diagnostika vnetnih procesov v spodnjih dihalih predstavlja resne težave, ker. med odvzemom je lahko vzorec kontaminiran z mikroorganizmi, ki kolonizirajo zgornja dihala. Ta ekološka niša je precej obilno posejana z oportunističnimi mikrobi, zlasti ob prisotnosti disbakterioze (kvalitativno - vrstna sestava in / ali kvantitativno - koncentracija vrst prisotnih v CFU / ml pri oslabljenem in / ali imunsko oslabljenem kontingentu oseb).

Zato se vzorci materiala iz spodnjih dihalnih poti zbirajo posebej skrbno, da dobimo pravilne informacije o etiološkem povzročitelju (agentih). Pri uporabi invazivnih metod za odvzem vzorca (če do tega ne pride med operacijo) uporabljeni instrumenti prehajajo skozi zgornja dihala in obstaja realna možnost zasejanja globljih lokusov z mikroorganizmi – prebivalci zgornjih dihal.

6.5.2.1. Sputum.

Ohlapno ločen (ekspektoriran) sputum- Po možnosti zjutraj.

Pred odvzemom vzorca si mora bolnik, če je mogoče, umiti zobe ter sperite usta in grlo s toplo prekuhano vodo, če bolnik tega ne zmore sam, potem stranišče njegove ustne votline izvajajo zdravstveni delavci. .

Pacienta opozorite, naj ne zbira sline ali nazofaringealnega izcedka v posodi.

Vzorec izpljunka, pridobljen kot posledica globokega kašlja, se zbere v posebni sterilni posodi za enkratno uporabo z navojnim pokrovom ali v posebej pripravljenem sterilnem steklenem kozarcu.

Vzorec sputuma se pošlje v laboratorij.

Inducirano sputum (priporočeno predvsem za sum na Mycobacterium tuberculosis in Pneumocystis yiroveci)- Po možnosti zjutraj.

Pred odvzemom vzorca naj si bolnik, če je mogoče, umije zobe ter spere usta in grlo s toplo, prekuhano vodo; če bolnik tega ne zmore sam, potem stranišče njegove ustne votline izvaja medicinsko osebje.

Pred posegom čisto zobno ščetko navlažite s toplo prekuhano vodo in z njo nanesite na sluznico obeh lic, jezika in dlesni.

Aktivno sperite pacientova usta s toplo kuhano vodo.

Z inhalatorjem dajte bolniku, da pogoltne 20-30 ml 3-10% sterilne fiziološke raztopine.

Inducirani sputum zberemo v posebno sterilno posodo za enkratno uporabo z navojno zaporko ali v ustrezno pripravljen sterilni steklen kozarec.

Vzorec pošljite v laboratorij.

Hkrati z vzorcem izpljunka je treba v laboratorij poslati vzorec žrela (žrela), ki ga odvzamemo po stranišču ustne votline in neposredno pred odvzemom prosto ločenega (ekspektoriranega) ali induciranega sputuma.

6.5.2.2. Traheostomija in endotrahealni aspirati. Traheostomo kolonizirajo mikroorganizmi že 24 ur po pacientovi intubaciji, zaradi česar so rezultati študije kulture majhnega kliničnega pomena. Glede na zgoraj navedeno je treba rezultate kulture intubiranih bolnikov nenehno primerjati s kliničnimi izvidi (npr. zvišana telesna temperatura ali rentgenski infiltrati).

Vzorci izpiranja bronhijev ali bronhoalveolarnega izpiranja se po možnosti odvzamejo pred odvzemom vzorcev za strganje ali biopsijo. Pravilo narekuje potreba po izogibanju odvečni krvi v nastali tekočini, ker. kri lahko spremeni koncentracijo celičnih in neceličnih komponent vzorca in vpliva na rezultat mikrobiološke analize.

Vzorec aspirata se zbere v sterilni posodi za enkratno uporabo z navojnim pokrovom ali v ustrezno nameščeni sterilni stekleni posodi ali v sterilni stekleni cevi za enkratno uporabo z zamaškom ali pa se v zaprti brizgi z odstranjenim zrakom dostavi v laboratorij.

6.5.2.3. Vzorci, pridobljeni z bronhoskopom. Bronhoalveolarno izpiranje (izbirni vzorec), izpiranje bronhijev (nizka občutljivost pri diagnosticiranju pljučnice), strganje bronhijev (pomembnejše od izpiranja), vzorci transtrahealne biopsije se pridobijo z vstavitvijo bronhoskopa transnazalno ali transoralno pri neintubiranem bolniku ali skozi endotrahealno cev pri intubiranem bolniku.

Za pridobitev vzorca izpiranja bronhijev ali bronhoalveolarnega izpiranja:

injiciramo z brizgo skozi biopsijski kanal bronhoskopa v ločenih porcijah sterilne nebakteriostatske (uradne) fiziološke raztopine (skupni volumen od 5-20 do 100 ml);

pred vnosom naslednje porcije fiziološke raztopine z vstavljenim delom brizge previdno aspirirajte v sterilno posodo za enkratno uporabo z navojno zaporko ali v sterilno epruveto za enkratno uporabo ali stekleno cevko z zamaškom ali jo pustite v zaprti brizgi, predhodno odstranite zrak iz nje (običajno je 50-70% injicirane fiziološke raztopine v izpiranju);

vsak odsesani del se zbere v ločeni skledi;

na koncu postopka se vzorci, pridobljeni z istega območja, združijo. Vzorce z različnih lokacij (npr. desnega zgornjega pljučnega režnja in desnega spodnjega režnja) je treba združiti le po posvetu z zdravnikom;

v smeri navedite celoten volumen injicirane fiziološke raztopine.

Za pridobitev vzorca za strganje bronhijev:

skozi biopsijski kanal bronhoskopa se vstavi teleskopski dvojni kateter z distalnim koncem, obdelanim s polietilen glikolom (ali drugim ustreznim reagentom), da se prepreči kontaminacija vzorca;

zbirajte material v sterilni posodi za enkratno uporabo z navojnim pokrovom ali v transportni posodi z anaerobnim medijem ali v sterilni epruveti s tioglikolnim medijem, tesno zaprti s sterilnim gumijastim zamaškom;

material dostaviti v laboratorij.

Za transbronhialno biopsijo se vzorec odvzame skozi biopsijski kanal bronhoskopa in ga položi v sterilno posodo za enkratno uporabo z navojno zaporko z majhno količino (1-2 ml) nebakteriostatske (uradne) fiziološke raztopine ali v testu. epruveta s tioglikolnim medijem, tesno zaprta z gumijastim zamaškom, prenesena v laboratorij

6.5.2.4. Vzorci pljučnega aspirata. Za odvzem vzorca se igla vstavi skozi prsnico v pljučni infiltrat pod nadzorom CT skenerja. Material se aspirira iz žarišča vnetja. Če je infiltrat velik ali pa jih je več, je treba vzeti več vzorcev iz ustreznih žarišč ali več vzorcev iz ene velike lezije. Material se v laboratorij prenese v transportni posodi z medijem za anaerobe ali v stekleni cevi s tioglikolnim medijem ali v vijačni posodi za enkratno uporabo.

6.5.2.5. Vzorci biopsije pljuč. Če je mogoče, dobimo koščke tkiva velikosti 1-3 cm.Če je lezija velika ali jih je več, se odvzame več vzorcev. Vzorec damo v sterilno posodo za enkratno uporabo z navojno zaporko ali v transportno posodo z anaerobnim medijem ali v posodo (epruveto) s tioglikolnim medijem, zaprto s sterilnim gumijastim zamaškom.

6.6. Testi za infekcijske in vnetne procese genitourinarnega sistema

6.6.1. Vzorci urina.

6.6.1.1. Splošna pravila za vzorčenje:

ni dovoljeno zbirati urina iz posteljnega perila ali iz pisoarja;

za analizo urina med naravnim uriniranjem uporabite povprečni jutranji del;

pred odvzemom vzorca je treba zunanje spolne organe in anus temeljito sprati s toplo kuhano vodo; posebno pozornost je treba nameniti obdelavi odprtine sečnice pri moških (predvorje vagine - pri ženskah), da se zagotovi, da se vzorec med postopkom ne bo dodatno onesnažil z mikrobi;

za obdelavo ni dovoljeno uporabljati razkužil, ker. če pridejo v vzorec, lahko zavirajo rast mikroorganizmov;

vzorec se prenese v laboratorij najpozneje 2 uri od trenutka odvzema;

za odvzem in dostavo vzorcev v laboratorij se uporabljajo sterilne posode za enkratno uporabo z navojno zaporko ali epruvetami (lahko se uporabijo sterilne, posebej vgrajene steklene epruvete s plinsko prepustnim celuloznim ali bombažno-gaznim zamaškom, vendar pazimo, da se ne namočite zamašek);

dostava vzorcev aspirata, pridobljenih s tehniko suprapubične punkcije mehurja, v laboratorij poteka v transportni posodi s posebnim medijem za anaerobe ali v zaprti brizgi brez igle;

če obstaja sum na virusno okužbo, se vzorce dostavi v laboratorij v sterilni posodi za enkratno uporabo, ki je postavljena na taljen led (suh led ni dovoljen!);

vsak postopek za pridobitev vzorca z uporabo katetra (zlasti pri ženskah) se izvaja ob skrbnem upoštevanju pravil asepse, da se prepreči dodatna kontaminacija bolnika med uvedbo katetra;

za mikrobiološke raziskave ni dovoljena uporaba vzorca iz dnevnega m

6.6.1.2. Odvzem vzorcev urina pri ženskah med naravnim uriniranjem.

Uporabite srednji del, ker. prvi prehod urina bi moral odstraniti komenzale po možnosti v sečnici. Vzorec, zbran na naslednjih prehodih, ne sme biti kontaminiran. Zanesljivost pozitivnih rezultatov takšnega materiala je 80 % pri odvzemu enega vzorca, 90 % pri odvzemu dveh zaporednih vzorcev in 100 % pri treh, če vsi vzorci dajejo enake rezultate.

Zdravstveni delavec, ki jemlje vzorec, si mora roke umiti z milom in vodo, jih sprati z vodo in posušiti. Če vzorec vzame bolnik sam, mu je ob upoštevanju zgoraj opisane priprave podrobno razloženo, kako se to naredi, in opozorjeno, kaj se lahko zgodi, če krši pravila:

temeljito sperite odprtino sečnice in predel preddverja vagine, pa tudi presredek in anus z milnico ali tekočim milom, sperite s toplo kuhano vodo, posušite s sterilno krpo iz gaze;

odprtino vagine je treba zapreti s sterilno vatirano palčko;

držite zunanje sramne ustnice med uriniranjem na razdalji drug od drugega;

izpraznite majhno količino urina v posebno posodo za odstranjevanje brez ustavljanja uriniranja;

zberite povprečen delež urina (10-20 ml) v posebno posodo za enkratno uporabo z navojnim pokrovom ali sterilno stekleno posodo, ki je posebej sestavljena v laboratoriju.

6.6.1.3. Odvzem vzorcev urina pri moških med naravnim uriniranjem.

Pri moških je za mikrobiološki pregled potreben en del urina, ker. verjetnost okužbe je bistveno manjša kot pri ženskah.

Oseba, ki jemlje vzorec, si mora umiti roke z milom, sprati z vodo in posušiti. Če bolnik sam zbira vzorce, mu je treba podrobno razložiti, kako se to naredi, ob upoštevanju naslednje priprave in opozoriti, kaj se lahko zgodi, če se pravila kršijo:
[email protected], bomo ugotovili.

Izvajanje študij PCR je dovoljeno na podlagi obstoječih laboratorijev, pod pogojem, da je v laboratoriju organizirana samostojna ali dodeljena delovna območja kot del drugih funkcionalnih prostorov, ki ustrezajo fazam analize PCR.

Laboratorij PCR mora vključevati naslednji minimalni nabor delovnih področij:

• sprejem, registracija, analiza in primarna obdelava gradiva;
• izolacija DNK/RNA;
• priprava reakcijskih zmesi in PCR;
• odkrivanje produktov amplifikacije z elektroforezo ali HyFA.

Pomembno je omeniti, da v primeru uporabe metode ni treba odkrivati ​​produktov ojačanja z elektroforezo. Zato delovnega območja v laboratoriju za elektroforezo ni mogoče dodeliti.

V PCR laboratorijih je treba zagotoviti tudi prisotnost pomožnih prostorov: arhiv (za računovodske dokumente), soba za osebje, pisarna vodje, garderobe za zaposlene, jedilnica, sanitarni prostori (wc), pomožni prostori (skladišče).

V idealnem primeru bi morala biti na voljo prostor za avtoklav za dekontaminacijo preskusnega materiala. Lahko se deli z drugimi oddelki ustanove, v skladu z zahtevami biološke varnosti.

Prostori za opravljanje dela v fazah PCR analize morajo biti zapakirani (škatle s predbodli). Na področju sprejema, registracije, analize in primarne obdelave gradiva izvajati sprejem materiala, pripravo vzorcev (sortiranje, označevanje, centrifugiranje ipd.), shranjevanje in primarno inaktivacijo ostankov biomateriala z razkužili. Prostor za sprejem, registracijo, analizo in primarno obdelavo gradiva se nahaja v prostorih za sprejem materiala ali v ločeni škatlasti sobi. Tukaj lahko prejmete in obdelate vzorce za raziskave z drugimi metodami (na primer imunologija), pod pogojem, da je dodeljeno ločeno opremljeno delovno mesto za PCR analizo.

Območje ekstrakcije DNK/RNA nameščen v ločenem prostoru. Pri organizaciji PCR laboratorija na podlagi obstoječega laboratorija je dovoljena izolacija DNK / RNA v prostorih, kjer se izvajajo druge vrste raziskav, razen za delo genskega inženiringa. V tem primeru je v prostoru organiziran delovni prostor za ekstrakcijo DNK/RNA, v katerem se nahaja PCR box ali biološki sef. V PCR škatli za izolacijo DNK/RNA ni dovoljeno nobeno drugo delo!

Na področju priprave reakcijskih zmesi in PCR pripravimo zmes PCR, dodamo izolirane pripravke DNA/RNA ali cDNA v epruveto za PCR, reverzno transkripcijo RNA in pomnoževanje DNK ali cDNA. Prostor za pripravo reakcijskih zmesi in PCR mora biti ločen. Priprava reakcijskih PCR zmesi poteka v škatli za PCR.

Po potrebi lahko stopnjo ekstrakcije DNA/RNA združimo v enem prostoru s fazo priprave reakcijskih zmesi in PCR, če ima ločene PCR škatle - za pripravo reakcijskih PCR zmesi in za izolacijo DNA/RNA.

Območje za odkrivanje produktov ojačanja nameščen v ločenem prostoru, po možnosti opremljen s škatlo za PCR. Če je za odkrivanje produktov pomnoževanja potrebno istočasno uporabiti metodo elektroforeze in metodo hibridizacijske analize, je treba v detekcijskem prostoru za hibridizacijsko analizo dodeliti ločen delovni prostor. V tem primeru so oprema in dodatki za vsako vrsto detekcije označeni za vsako območje. Za hibridizacijsko analizo ni dovoljeno uporabljati pipet in posod, namenjenih za elektroforezo.

Odločitve o načrtovanju in postavitvi opreme morajo zagotoviti pretok gibanja preučevanega materiala. Izmenjava zraka med prostorom za odkrivanje ojačevalnih produktov in drugimi prostori je treba popolnoma izključiti.

PCR laboratorij bo opremljen z vodovodno napeljavo, kanalizacijo, elektriko in ogrevanje. Vsi prostori PCR laboratorija so opremljeni z zadostno naravno in umetno razsvetljavo.

Pri gradnji novih ali rekonstrukciji obstoječih PCR laboratorijev so prostori opremljeni z dovodno in izpušno oziroma izpušno ventilacijo. Razlika v zračnem tlaku v prostorih PCR laboratorija je dosežena zaradi razlike v hitrosti izmenjave zraka v njih. Hitrost izmenjave zraka mora ustrezati vrednostim, navedenim v tabeli:

Po potrebi lahko klimatske naprave vgradimo v PCR laboratorij.

Notranja dekoracija prostorov se izvaja v skladu z njihovim funkcionalnim namenom. Površine sten, tal in stropov v laboratorijskih prostorih morajo biti gladke, brez razpok, enostavno obdelane, odporne na detergente in razkužila. Tla ne smejo biti spolzka. Laboratorijsko pohištvo mora imeti premaz, ki je odporen na detergente in razkužila. Površina miz ne sme imeti razpok in šivov. Laboratorijski prostori morajo biti neprepustni za glodavce in žuželke. PCR laboratorij je opremljen z gasilno opremo.

Optimalni čas za krvni test je v razponu od 1 do 4 ure po zaužitju, v razponu od 5 do 30 minut pa pride do začasne prilagoditve trombocitov na antikoagulant in njihove agregacije, kar lahko vodi do njihovega lažnega zmanjšanja vzorec krvi.

Neželeno je pregledati kri pozneje kot 8 ur po jemanju, ker. nekatere značilnosti celic se spremenijo: zmanjša se volumen levkocitov, poveča se volumen eritrocitov, kar na koncu vodi do napačnih rezultatov meritev in napačne interpretacije rezultatov. Samo koncentracija hemoglobina in število trombocitov ostaneta stabilna tekom dneva shranjevanja krvi.

Kri ni mogoče zamrzniti. Kapilarno kri s K 2 EDTA je treba hraniti pri sobni temperaturi in analizirati v 4 urah po odvzemu.

Za zagotovitev kvalitativnega rezultata raziskave je treba pred analizo strogo nadzorovati čas in pogoje shranjevanja vzorcev.

Če je treba opraviti zakasnelo analizo (prevoz na velike razdalje, tehnična okvara naprave ipd.), vzorce krvi shranimo v hladilniku (4 o - 8 o C) in jih pregledamo v 24 urah. Vendar je treba upoštevati, da celice nabreknejo in da se parametri, povezani z njihovo prostornino, spremenijo. Pri praktično zdravih ljudeh te spremembe niso kritične in ne vplivajo na kvantitativne parametre, v prisotnosti patoloških celic pa se lahko slednje spremenijo ali celo zrušijo v nekaj urah od trenutka odvzema krvi.

Neposredno pred študijo je treba kri nekaj minut temeljito premešati, da razredčimo antikoagulant in enakomerno porazdelimo tvorjene elemente v plazmi. Dolgotrajno stalno mešanje vzorcev do trenutka njihove raziskave ni priporočljivo zaradi možnih poškodb in propadanja patoloških celic.

Krvni test na avtomatskem analizatorju se izvaja pri sobni temperaturi. Kri, shranjeno v hladilniku, je treba najprej segreti na sobno temperaturo, saj se pri nizkih temperaturah viskoznost krvi poveča in krvne celice se nagibajo k lepljenju skupaj, kar posledično vodi do okvarjenega mešanja in nepopolne lize. Študija hladne krvi lahko povzroči pojav "alarmnih signalov" zaradi stiskanja histograma levkocitov.

Pri izvajanju hematoloških študij na precejšnji razdalji od mesta odvzema krvi se neizogibno pojavijo težave, povezane z neugodnimi prevoznimi pogoji. Vpliv mehanskih dejavnikov (tresenje, vibracije, mešanje itd.), temperaturnih razmer, verjetnosti razlitja in kontaminacije vzorcev lahko vpliva na kakovost analiz. Za odpravo teh razlogov je pri prevozu krvnih epruvet priporočljiva uporaba hermetično zaprtih plastičnih cevi in ​​posebnih izotermičnih transportnih posod. Med prevozom ni dovoljen stik vzorca (z domačim materialom) in napotnice, skladno s pravili biološke varnosti.

^ 4.3. Sprejem in registracija biološkega materiala

Epruvete z vzorci venske krvi se dostavijo v laboratorij na dan odvzema v stojala v posebnih vrečah za dostavo biološkega materiala, v katerih morajo biti epruvete v navpičnem položaju, pri transportu na oddaljeno razdaljo pa v posebnih zabojnikih. .

Uslužbenec laboratorija, ki prejme material, mora preveriti:

Pravilnost napotnice: na obrazcu napotnice so navedeni podatki o subjektu (priimek, ime in patronim, starost, anamneza ali številka ambulantne kartice, oddelek, diagnoza, terapija);

Označevanje epruvet z vzorci krvi (označene morajo biti s šifro ali priimkom bolnika, ki je enaka šifri in priimku v obrazcu za pošiljanje gradiva za študijo). Dostavljeni material mora laboratorijski asistent registrirati, zabeležiti število epruvet.

^ 4.4 Izračun celične sestave krvi na hematološkem analizatorju

Izračun celične sestave krvi na hematološkem analizatorju je treba izvesti v strogem skladu z navodili za napravo.

Pri delu na hematološkem analizatorju morate:

Uporabite kri, stabilizirano s K-2 EDTA v priporočenem razmerju za posebne solne in hematološke epruvete za enkratno uporabo (navadne ali vakuumske);

Pred analizo previdno, a temeljito premešajte epruveto s krvjo (za ta namen je priporočljivo uporabiti napravo za mešanje vzorcev krvi - rotomix);

Uporabljati na predpisan način registrirane reagente; pri menjavi reagentov na izdelke drugega proizvajalca preverite in nastavite kalibracijo instrumenta;

Zaženite napravo, opazujte vse stopnje izpiranja in dosežete ničelne (ozadje) vrednosti indikatorjev za vse kanale;

Bodite pozorni na sporočila instrumentov o možnih sistematičnih napakah: ne pozabite, da je povečanje MCHC nad normalnimi vrednostmi običajno posledica napake pri merjenju;

Če se odkrije napaka, je nujno odpraviti vzrok, ne delajte na okvarjeni napravi;

Izvedite postopek kontrole kakovosti po ustreznem programu. z oceno rezultata;

Delajte smiselno, primerjajte pridobljene rezultate s kliničnimi značilnostmi bolnikovih vzorcev;

Po koncu meritev temeljito sperite analizator;

Pri daljšem ustavljanju naprave je nujno potrebno izvesti vse konzervacijske postopke (če je mogoče skupaj s serviserjem);

V primeru tehničnih težav se obrnite na pomoč serviserja podjetja, ki ima licenco za vzdrževanje; Ne zaupajte dela nepoučenemu osebju.

Ko začnete delati na hematološkem analizatorju, je treba upoštevati meje linearnosti merjenja analiziranih parametrov. Ocenjevanje vzorcev z vrednostmi analiziranih parametrov, ki presegajo mejo merilne linearnosti, lahko privede do napačnih rezultatov. V večini primerov pri analizi vzorcev s hipercitozo analizator namesto vrednosti merjenega parametra prikaže "D" (razredčeno), kar kaže na potrebo po razredčenju vzorca in ponovnem merjenju. Redčenje je treba izvajati, dokler ne dobimo podobnih končnih rezultatov pri naslednjih dveh razredčenjih.

^ PRI me R ─ Analiza vzorca bolnika s hiperlevkocitozo na treh različnih hematoloških analizatorjih je prikazana v tabeli.

Tabela 3

¦Rezultati štetja hiperlevkocitoze na treh različnih hematoloških analizatorjih

^ Hematološki analizatorji	Stopnja redčenja vzorca				Končna vrednost
	^ Polna kri	1:1	1:3	1:4	WBC
1	D	274,5	274,5	143,1	715,5
2	322,6	253,2	177,7	141,8	709,0
3	D	D	168,3	139,1	695,5

Iz tabele je razvidno, da je pri analizi polne krvi samo en analizator (2.) dal digitalno vrednost za število levkocitov, druga dva sta kazala na potrebo po redčenju vzorca. Naknadna meritev vzorca po korakih v treh razredčitvah je omogočila doseganje tesnih končnih rezultatov na vseh napravah le pri razredčenju 1:3 in 1:4. Tako je bilo skupno število levkocitov 700,0 - 710,0 x 10 9 /l, kar je več kot 2-krat višje od začetne vrednosti, pridobljene v polni krvi na 2. analizatorju in 1,5 - pri razredčenju 1:1 na 1. in 2. analizatorji.

1. 
   ^ Kalibracija hematoloških analizatorjev

Kalibracija se nanaša na postopek prilagajanja analizatorja kot rezultat

Ki doseže enakost nič sistematične komponente napake (nič pristranskosti) ali potrdi, da je pristranskost nič, ob upoštevanju kalibracijske napake. Umerjanje hematoloških analizatorjev se lahko izvede na dva glavna načina:

Za polno kri;

Na podlagi stabiliziranih vzorcev krvi s certificiranimi vrednostmi.

^ 5.1 Umerjanje polne krvi

Umerjanje polne krvi se lahko izvede s primerjavo z referenčnim analizatorjem, katerega kalibracija je bila preverjena in se lahko vzame kot izvirnik.

Za kalibracijo s primerjavo z referenčnim analizatorjem se uporabi 20 vzorcev venske krvi pacientov, naključno izbranih iz dnevnega raziskovalnega programa laboratorija, ki ima referenčni analizator. Kri je treba vzeti v vakuumske epruvete z antikoagulantom K 2 EDTA. Po analizi na referenčnem analizatorju se krvne epruvete dostavijo v laboratorij za analizo na napravi, ki se kalibrira. Čas med meritvami na referenčnem in kalibriranem analizatorju ne sme presegati 4 ur. Analiza kalibracijskih vzorcev na instrumentu, ki se kalibrira, mora biti izvedena na enak način kot analiza vzorcev pacientov. Dobljeni rezultati se vnesejo v tabelo v obliki, podani v Dodatku 1. Ti rezultati se uporabljajo za določitev ustreznih kalibracijskih faktorjev, ki so številčno enaki koeficientom naklona kalibracijskih ravnic, ki potekajo skozi izhodišče na grafu.

Umeritveni faktorji se izračunajo na računalniku s programom EXCEL, ki je vključen v paket Microsoft OFFICE katere koli različice. Za izračun kalibracijskih faktorjev v tem programu je sestavljena razpršena grafika, kjer so izmerjene vrednosti narisane vzdolž osi X, referenčne vrednosti so narisane vzdolž osi Y, regresijska črta pa je postavljena skozi izhodišče. Program nariše kalibracijsko črto in določi njen naklon, ki je želeni kalibracijski faktor. Če se odkrijejo velike napake - točke, ki so na grafu bistveno ločene od kalibracijske črte, jih je treba odstraniti iz izračuna (izbrisati celotno vrstico v tabeli EXCEL). Nastali kalibracijski faktor se vnese v tabelo v prilogi 1 in se uporablja za ročno nastavitev kalibracije naprave v skladu z njenimi navodili za uporabo.

1. 
   ^ Kalibracija glede na stabilizirane vzorce krvi s certificiranimi vrednostmi

Ta metoda kalibracije temelji na komercialnih kalibracijskih in kontrolnih materialih, ki so umetna mešanica stabiliziranih človeških eritrocitov in fiksnih človeških ali živalskih celic, ki posnemajo levkocite in trombocite. Zaradi znatne razlike v bioloških lastnostih sestavin teh materialov od naravne krvi so certificirane vrednosti hematoloških parametrov odvisne od specifične vrste analizatorja.

Kadar koli je mogoče, je treba uporabiti kalibratorje, ki jih je proizvajalec posebej zasnoval za umerjanje določene vrste analizatorja. Napake nastavitvenih vrednosti v sodobnih hematoloških kalibratorjih na splošno izpolnjujejo medicinske zahteve. Vendar pa vse vrste analizatorjev nimajo takšnih kalibratorjev. Poleg tega zaradi omejenega roka uporabnosti (običajno ne več kot 45 dni) ni vedno mogoče pridobiti vzorcev, ki jim ni potekel rok uporabnosti.

Proizvajalec kontrolnih materialov ne predvideva za namene kalibracije: tolerance vrednosti so veliko širše, metode validacije in kontrole proizvodnje niso tako stroge kot pri kalibratorjih. Pri kalibraciji se lahko kontrolni materiali uporabljajo le kot eden od virov informacij o meroslovnih lastnostih naprave.

Vendar je treba upoštevati, da kadar se za namene kalibracije uporabljajo tako kontrolni materiali kot kalibratorji, značilnosti priprave vzorcev in delovanja analizatorjev pomembno vplivajo na komponente sistematične napake. Teh vplivnih dejavnikov ni mogoče upoštevati pri kalibraciji s komercialnimi materiali. Zato je treba v vseh primerih opravljeno kalibracijo preveriti z analizo statistike rezultatov, dobljenih v vzorcih bolnikov (indeksi eritrocitov, intervali normalnih vrednosti).

5.2.1 Umeritveni intervali za hematološke analizatorje

Zahteve za intervale kalibracije so običajno v navodilih za uporabo analizatorja. Praviloma je kalibracija potrebna po popravilu ali ko se pri notranjih postopkih nadzora kakovosti odkrije znaten zamik.

5.2.2 Postopek kalibracije

Postopek kalibracije se izvede v skladu z navodili za uporabo analizatorja.

5.2.3 Preverjanje rezultata kalibracije

Ta kontrola je sestavljena iz analize kalibracijskega vzorca takoj po kalibraciji. Izvedena kalibracija je sprejeta, če rezultati analize ustrezajo kalibracijskim vrednostim ob upoštevanju analitične variacije analizatorja.

5.2.4 Preverjanje kalibracije z uporabo indeksov RBC

Ta metoda preverjanja in izboljševanja kalibracije uporablja dejstvo, da imajo povprečne vrednosti indeksov eritrocitov - MCHC, MCH in MCV za bolnike precej majhno variacijo in se zato lahko učinkovito uporabljajo za nadzor kalibracije in nadaljnjo kontrolo kakovosti. Priporočeno število vzorcev za povprečje je 20. Za določitev povprečnega MCHC se lahko uporabi kateri koli vzorec bolnika, medtem ko je treba bolnike z anemijo izključiti za določitev povprečne vrednosti MCHC in MCV.

Številni sodobni hematološki analizatorji imajo vgrajene programe za izračun trenutnih povprečij, kar močno poenostavi obdelavo podatkov.

Ciljne vrednosti eritrocitnih indeksov, povprečne na 20 vzorcih bolnikov, starih od 18 do 60 let, ne glede na spol, so prikazane v tabeli 4.

Tabela 4

Ciljne vrednosti indeksov eritrocitov

Če so dobljene povprečne vrednosti izven kontrolne tolerance, potem to pomeni, da je treba popraviti kalibracijo MCV ali Hgb ali RBC.

Pri ugotavljanju razlogov za nezadovoljivo kalibracijo na podlagi rezultatov študije parametrov eritrocitov pri uporabi komercialnih kalibracijskih / kontrolnih materialov je treba upoštevati naslednjo oceno zanesljivosti certificiranih vrednosti materialov:

Najbolj natančen in časovno stabilen parameter je koncentracija eritrocitov;

Hgb je stabilen parameter, vendar je lahko odvisen od uporabljenih reagentov (na primer cianid ali brez cianida);

Najbolj nestabilen parameter je MCV. Vrednost MCV se spreminja med celotnim rokom uporabnosti materiala v precej širokem razponu vrednosti. Pri izboljševanju kalibracije MCV imajo podatki, pridobljeni z analizo povprečij indeksov eritrocitov, prednost pred certificiranimi vrednostmi v stabiliziranih vzorcih krvi.

Glede na to, da je kalibracija RBC pravilna, v tabeli 5 so navedeni možni razlogi, da povprečne vrednosti indeksov presegajo toleranco kontrole.

Tabela 5

Razlogi za preseganje povprečnih vrednosti indeksov eritrocitov

Indeksi eritrocitov	Povprečna vrednost indeksa	Povprečna vrednost indeksa	Povprečna vrednost indeksa	Povprečna vrednost indeksa
MCHC	Pod mejo	Nad mejo	Nad mejo	Pod mejo
MCH	znotraj tolerance	znotraj tolerance	Nad mejo	Pod mejo
MCV	Nad mejo	Pod mejo	znotraj tolerance	znotraj tolerance
Vzrok	Precenjen MCV	podcenjen MCV	Visok Hgb	Nizek Hgb

Primer standardnega operativnega postopka za sprejem biomateriala v medicinski laboratorij.

IME INSTITUCIJE
Vrsta dokumenta	Standardni operativni postopek (SOP)
	Vpis v enotni register laboratorijske dokumentacije	SOP-PA-01-2014
	primer
	Skupno število strani
	sprožiti v akcijo
	Veljavnost
Ime dokumenta	Pravila za sprejem in registracijo biomateriala v laboratoriju.

		Položaj
Oblikovano od:
Preverjeno:
Dogovorjeno:

Tekaški naslov:

	ime
	Območje uporabe
	Organizacija procesa prevoza biomateriala s kurirjem
	Sprejem biomateriala v laboratoriju
	Prenos biomateriala in napotitev na ustrezne oddelke laboratoriji
	Registracija naročilnice s strani operaterjev.
	Dodatek #1 Diagram poteka
	Priloga št. 2 Vrste neskladnosti in njihova odprava
	Dodatek št. 3 Stroj s senzorjem temperature hladilnika
	Dodatek št. 4 Obrazec-smer
	Priloga št. 5 Seznanitveni list za zaposlene s SOP

1 področje uporabe

Ta standardni operativni postopek (v nadaljnjem besedilu SOP) določa postopek sprejemanja, registracije biomateriala, ki vstopa v laboratorij iz proceduralne sobe NAZIV INSTITUCIJE in drugih institucij, ki jih laboratorij oskrbuje, ter ugotavljanje neskladnosti in njihovo odpravo.

Ta SOP je namenjen laboratorijskemu asistentu in izvajalcu laboratorija.

1. Metodološka priporočila "Organizacija predanalitične faze pri centralizaciji laboratorijskih preiskav krvi" (Odobreno na vseruski znanstveni in praktični konferenci "Prave klinične diagnostične laboratorijske storitve: stopnja skladnosti s standardi laboratorijske medicine, kakovost, stroški in cena " (Moskva, 2.-4. oktober 2012)
2. GOST R 53079.4─2008. »Tehnologije medicinskega laboratorija. Zagotavljanje kakovosti kliničnih laboratorijskih raziskav. 4. del. Pravila za izvedbo predanalitične faze. Veljati je začel 1. januarja 2010.
3. ISO 15189:2012 Medicinski laboratoriji. Zahteve za kakovost in usposobljenost"

3. Organizacija procesa prevoza biomateriala s kurirjem in odgovornost kurirja.

3.1. Temperaturo v hladilniku, ki je prikazana na prikazovalniku v potniškem prostoru avtomobila, kurir beleži v reviji "Dnevnik obračuna temperaturnega režima v hladilnikih avtomobilov" in tudi v tem dnevniku kurir navede svoje polno ime, registrsko tablico avtomobila in čas odhoda avtomobila po biomaterial tik pred odhodom v ustanove . Ta revija se nahaja v pisarni številka ___. (Fotografija temperaturnega senzorja in fotografija obrazca dnevnika sta podani v Dodatku št. 3).

3.2. Kurir, ko prispe v zdravstveno ustanovo, gre v register te ustanove, kjer pobere zabojnike z različnimi biomateriali. Vsaka posoda je označena z imenom ustanove in vrsto biomateriala (kri, urin, iztrebki, stekelca z brisi, strgani). Kurir postavi posode v vodoravni položaj v hladilniku stroja, kot je prikazano na fotografiji.

3.3. Kurir je odgovoren za celovitost posod, njihovo varnost, za zagotavljanje ustrezne temperature v hladilniku avtomobila (+4 - +8 °C), kot tudi za varnost biomateriala, dostavljenega iz institucij v laboratorij. . Med potovanjem kurir spremlja temperaturo v hladilniku avtomobila, ki je prikazana na displeju, ki je nameščen v avtomobilu.

4. Prevzem biomateriala v laboratorij.

4.1 Temperatura, ki je prikazana na zaslonu v hladilniku avtomobila v času odvzema zabojnikov, kurir zapiše v dnevnik "Dnevnik temperaturnega režima v hladilnikih avtomobilov" v ustreznem stolpcu na državno številko avtomobila. In tudi v istem dnevniku voznik navede čas prihoda avtomobila z biomaterialom iz institucij.

4.2. Označene posode z vzorci krvi, brisi in strgani kurir preda medicinsko-laboratorijskemu pomočniku v sobo št. ___.

4.3. Kurir preda označene posode z urinom in iztrebki reševalcu-laborantu v kabinetu št. ___.

4.4. V kabinetu št. ___ bolničar odpre pokrov posode in vzame epruvete s krvjo, stekelca z razmazi in strganji, mape z navodili za raziskavo.

4.5. Bolnik razvrsti krvne epruvete ločeno v stojala, glede na vrsto epruvet (biokemijske, hematološke in koagulološke) in imena ustanov, ki so označena na regalih.

4.6. V sobi #____ laboratorijski asistent odvzame vzorce iz posode z urinom, blatom in napotnico.

5. Prenos biomateriala in napotitev na ustrezne oddelke laboratorija.

5.1 V kabinetu št. ____ stojala z epruvetami za biokemične, imunološke, koagulološke študije vloži reševalec-laborant v posode z oznako »za prenos biomateriala« in jih odnese v prostor št. ___ na centrifugiranje.

5.2 Paramedicinski laboratorij pokliče oddelke za hematologijo in PCR, da bi paramedicinski laboratorijski pomočniki iz posameznih oddelkov odvzeli biomaterial iz sobe št. ___

5.3. Reševalka-laborant pošlje navodila za raziskavo iz sobe št. ___ operaterjem v sobi št. ____ za vpis.

5.4 V kabinetu št. ___ reševalec-laborant posreduje navodila operaterjem, ki v isti pisarni prijavijo obrazce.

6. Registracija naročilnice s strani operaterjev.

6.1. Operaterji v kabinetu št. ___ jih po prejemu napotnic od laboratorijke iz kabineta št. ___ vpišejo v laboratorijski informacijski sistem.

Postopek registracije:

Operater črtno kodo prebere s skenerjem, ki je nalepljen na obrazec - smer;

Nato operater v LIS vnese podatke o potnem listu pacienta: polno ime, datum rojstva, naslov prebivališča in druge podatke: vir naročila (obvezno zdravstveno zavarovanje, DZI, gotovina, zdravniški pregled), številka zavoda, oddelek, polno ime zdravnik, ki je naročil študijo, diagnoza, šifra MES (medicinsko-ekonomski standard).

Po tem operater v LIS vnese tiste indikatorje, ki jih je predpisal lečeči zdravnik, in shrani ustvarjeno naročilo v LIS. Obrazec-smer je predstavljen v prilogi št.

Vloga št. 2

AT vrste neskladnosti in njihova odprava

Vrsta neskladnosti	Opis dejanj	Izvajalec	Odgovoren
Kršitev celovitosti posode	O tem obvestite višjega laboratorijskega asistenta	laboratorijski asistent	Višji asistent
Pomanjkanje napotnic za raziskave v zabojniku	Reševalka-laborant to sporoči višjemu laboratorijskemu sodelavcu, ki mora po telefonu stopiti v stik z višjim zdravstvenim delavcem. Sestra te ustanove	laboratorijski asistent	Višji asistent
Razlitje biološkega materiala v posodi	1. To sporočite višjemu laboratorijskemu sodelavcu laboratorija 2. Previdno odstranite vso vsebino iz posode 3. Razkužite samo posodo in celotno vsebino posode, ki je prišla v stik z razlitim biomaterialom.	laboratorijski asistent	Višji asistent
Poškodovana smer oblike (raztrgana, razlita vsebina posode itd.)	1. Reševalka-laborant, če je smer berljiva, vse podatke prenese v nov obrazec. 2. V primeru neberljivih navodil bolničar - laboratorijski sodelavec obvesti višjega laboratorijskega sodelavca, ki stopi v stik s starešinami med. Sestra zavoda.	laboratorijski asistent	Višji asistent
Zlomljeni diapozitiv(i) v posodi	Reševalka-laborant to sporoči višjemu laboratorijskemu sodelavcu, ki mora po telefonu stopiti v stik z višjim zdravstvenim delavcem. Sestra te ustanove in prijavi to neskladje	laboratorijski asistent	Višji asistent

Na cevi ni črtne kode	1. O tem reševalec-laborant obvesti višjega laboratorijskega sodelavca laboratorija, ki mora po telefonu stopiti v stik z višjim zdravstvenim delavcem. Sestra te ustanove in prijavi to nedoslednost. 2. To neskladje vpiše bolničar-laborant v vpisnik »Zakonska vpis«.	laboratorijski asistent	Višji asistent
Obrazec-smer, izdana v napačni obliki	1. Reševalka-laborant to sporoči višjemu laboratorijskemu sodelavcu laboratorija, ki mora po telefonu stopiti v stik z višjim zdravstvenim delavcem. Sestra te ustanove 2. Reševalka-laborant to neskladje vpiše v vpisnik »Zakonska vpis«. 3. Zdravstveni asistent-laborant to napotnico naslednji dan pošlje zavodu, iz katerega je prišla, da zdravnik napotnico prepiše v berljivi obliki.	laboratorijski asistent	Višji asistent

Vloga št. 3

senzor temperature hladilnika stroja

V tej prilogi je koristno zagotoviti tudi obrazec dnevnika, ki ga mora voznik izpolniti.

V naslednjih prilogah je podan obrazec napotnice itd.

Pravila za jemanje, shranjevanje in prevoz biomateriala

Za odkrivanje patogenov s PCR

1.1.1. Biomaterial se vzame iz pričakovanega habitata mikroorganizmov in razvoja okužbe.

1.1.2. Količina zbranega materiala mora biti majhna. Odvečni izcedek, sluz in gnoj negativno vplivajo na kakovost ekstrakcije DNK in prispevajo k razgradnji DNK med skladiščenjem in transportom.

1.1.3. Pri vnašanju biomateriala, vzetega od bolnika s sondo z vatirano palčko ali čopičem, v Eppendorfovo cev s pufrsko raztopino, je potrebno:

Upoštevajte sterilnost;

Preden v raztopino potopite biomaterial, zbran na tamponu (čopiču), ga namažite po suhi steni epruvete, nato tampon (čopič) navlažite v raztopini in z vrtenjem sonde previdno sperite ves material iz epruvete. stena epruvete in tampon (čopič);

Če je mogoče, bris stisnite ob steno epruvete, odstranite sondo z blazinico (čopičem) in epruveto zaprite.

Metode jemanja biomateriala za raziskave s PCR

1.2.1. Strganja. Za strganje se uporabljajo sterilne sonde za enkratno uporabo, ki imajo vatirano palčko s povečano adsorpcijo ali "čopiče", redkeje Volkmannove žličke, majhne ušesne žličke ali podobne instrumente z rahlo topimi robovi. Strganje za zbiranje materiala. Testni material mora vsebovati čim več epitelijskih celic in najmanjšo količino nečistoč sluzi, krvi in ​​eksudata. Material prenesite v sterilno Eppendorfovo epruveto s pufrsko raztopino (glejte poglavje 1.1.).

Strganje iz cervikalnega kanala: pred strganjem je potrebno odstraniti odvečno sluz s sterilno vatirano palčko, maternični vrat zdraviti s sterilno fiziološko raztopino. Sondo vstavite v cervikalni kanal do globine 0,5-1,5 cm, pri čemer se izogibajte stiku s stenami vagine, material pa zbrati s strganjem (ne do krvi). Majhno število rdečih krvnih celic v vzorcu ne vpliva na rezultat analize. V primeru erozije materničnega vratu se material vzame z meje zdravega in spremenjenega tkiva.

Strganje iz sečnice: vstavite sondo v sečnico (pri moških - do globine 2-4 cm) in zbirajte material z več rotacijskimi gibi. Na predvečer pred odvzemom materiala je dovoljena provokacija (začinjena hrana, alkohol itd.). Priporočljivo je, da se vzdržite uriniranja 1-2 uri pred vzorčenjem. Ob prisotnosti obilnega gnojnega izcedka je treba strganje vzeti najpozneje 15 minut po uriniranju.

Strganje iz konjunktive vzemite, potem ko ste predhodno anestezirali oko z 0,5 % raztopino dikaina. Po obračanju veke s sondo z vatirano palčko (ali očesnim skalpelom) poberemo epitelijske celice iz očesne veznice.

Strganje iz rektuma: vstavite sondo v anus do globine 3-4 cm in z rotacijskim gibom zberite material.

1.2.2. Možganske kapi. S sterilno sondo za enkratno uporabo z vatirano palčko ali čopičem vzemite majhno količino izcedka (iz obokov vagine, iz žrela, nazofarinksa itd.) in ga prenesite v sterilno Eppendorfovo epruveto s pufrsko raztopino (glejte poglavje 1.1.).

1.2.3. kri. Za PCR testiranje mora biti kri domačin(ni zvit).

Odvzemite kri aseptično, z venepunkcijo - v epruveto z blagovno znamko (2-3 ml) z antikoagulantom EDTA ( heparina se ne sme uporabljati kot antikoagulans!), nežno premešajte tako, da nežno obrnete cev.

Kri z EDTA je biomaterial za naslednje raziskovalne skupine:

- genetske raziskave(trenutek odvzema krvi ni pomemben).

- odkrivanje povzročiteljev okužb(Najbolj informativni so vzorci, odvzeti med mrzlico, povišano temperaturo, torej predvidoma med viremijo ali bakteriemijo).

1.2.4. Urin. V prazno sterilno posodo s tesno navojno zaporko zberite jutranji prvi ali srednji del urina v količini najmanj 10 ml. Če se vzorčenje urina izvaja čez dan, potem bolnik pred tem ne sme urinirati 1,5-3 ure.

1.2.5. Sputum. Zjutraj razkužite usta in grlo (splaknite z raztopino sode bikarbone). Izpljunek zberite v prazno sterilno vialo s širokim grlom.

1.2.6. Biopsija. Material je treba vzeti z območja domnevne lokacije povzročitelja okužbe, iz poškodovanega tkiva ali območja, ki meji na poškodbo. Biopsijo postavite v sterilno Eppendorfovo epruveto s pufrsko raztopino.

1.2.7. Slina, želodčni sok, cerebrospinalna tekočina, sinovialna tekočina. Slina (1-5 ml), želodčni sok (1-5 ml), cerebrospinalna tekočina (1-1,5 ml) - postavite v prazno sterilno epruveto (posodo).

1.2.8. Sok prostate. Po masaži prostate zberemo sok v količini 0,5-1 ml v prazno sterilno epruveto (posodo). Če soka ni mogoče dobiti, se takoj po masaži zbere prvi del urina v količini največ 10 ml (ta del vsebuje sok prostate).

1.2.9. Izpiranje, bronhoalveolarno izpiranje (BAL). S sterilno vatirano palčko in 5-7 ml fiziološke raztopine opravimo izpiranje, na primer s konice endoskopa ali bronhoskopa, 0,5-5 ml izpiranja pa damo v prazno sterilno epruveto (posodo).

1.2.10. Iztrebki. Sondo z vatirano palčko postavimo v blato in jo rahlo zavrtimo, tako da zajamemo majhno količino materiala. Nato material damo v sterilno Eppendorfovo epruveto s pufrsko raztopino.