PAKSANG ARALIN: Bacteriological laboratory at ang mga patakaran ng trabaho sa loob nito. Pag-uuri ng mga microorganism. Ang morpolohiya ng bakterya. Mga pamamaraan para sa pagtukoy ng uri ng microbes. Bacterioscopic na pamamaraan. Microscopy technique na may immersion system.
LAYUNIN NG PAGKATUTO NG ARALIN: Kilalanin ang istraktura ng bacteriological laboratory at ang mga patakaran ng trabaho sa loob nito. Kilalanin ang mga prinsipyo ng pag-uuri ng mga microorganism. Upang pag-aralan ang mga morphological na katangian ng bakterya at mga pamamaraan para sa pagtukoy ng uri ng microbes. Upang makabisado ang bacterioscopic na paraan ng pananaliksik at ang pamamaraan ng mikroskopya na may sistema ng paglulubog.
MGA LAYUNIN NG ARALIN:
1. Kilalanin ang istraktura ng bacteriological laboratory at ang mga patakaran ng trabaho sa loob nito.
2. Kilalanin ang mga prinsipyo ng pag-uuri ng mga mikroorganismo.
3. Upang pag-aralan ang mga morphological na katangian ng bakterya at mga pamamaraan para sa pagtukoy ng uri ng microbes.
4. Kabisaduhin ang teknik ng microscopy na may immersion system.
Bacteriological laboratory device
Ang bacteriological laboratory ay idinisenyo upang pag-aralan ang mga materyales na naglalaman ng mga pathogens ng bacterial infection, upang matukoy ang sanitary at microbiological indicator, subaybayan ang estado at intensity ng tiyak na kaligtasan sa sakit at iba pang microbiological na pag-aaral. Ang laboratoryo ng bacteriological ay dapat na matatagpuan sa mga silid na nakahiwalay sa iba pang mga laboratoryo na may mga kinakailangang kagamitan at kasangkapan. Ang laboratoryo ay dapat magkaroon ng isang hiwalay na pasukan, silid ng damit at shower room. Dapat isama ng bacteriological laboratory ang mga sumusunod na lugar:
Pagtanggap ng mga materyales at silid ng pagpaparehistro;
Mga boxed room para sa microbiological research;
Autoclave;
Washing room;
Vivarium.
Ang mga silid para sa microbiological research ay nilagyan ng mga thermostat, refrigerator, centrifuges, kaliskis, water bath, electromagnetic stirrers. Ang mga kinakailangang kagamitan ay inilalagay sa mga mesa. Ang trabaho sa mga nahawaang materyal ay isinasagawa sa boksing Sa pre-boksingero... Dapat ay may banig na babad sa disinfectant solution sa pasukan sa kahon. Sa kahon, ang mga natanggap na sample ay disassembled, smears ay inihanda at naitala, microorganisms ay inoculated sa nutrient media. Samakatuwid, ang mga talahanayan ay inilalagay sa kahon kung saan inilalagay ang mga tool na kinakailangan para sa trabaho: mga lalagyan na may mga disinfectant para sa mga ginamit na pinggan, mga rack para sa mga test tube, mga test tube at Petri dish na may nutrient media, sterile pipette, mortar, atbp. , mga sumbrero, mga maskara , at gayundin sa pre-box dapat mayroong naaalis na sapatos. Ang pre-box ay maaaring tumanggap ng mga thermostat, refrigerator, centrifuges at iba pang kagamitan. Sa mga kahon at mga silid ng pre-box, ang paglilinis ng basa, paggamot sa pagdidisimpekta at pag-iilaw na may mga bactericidal lamp ay isinasagawa araw-araw sa loob ng 30-40 minuto bago simulan ang trabaho at pagkatapos ng trabaho.
V autoclave kinakailangang magkaroon ng dalawang autoclave: isang autoclave para sa malinis na materyales (para sa pag-sterilize ng mga pinggan, culture media, mga instrumento); isa pang autoclave para sa mga nahawaang materyales (upang i-detoxify ang mga nahawaang instrumento at materyales).
Labahan nilayon para sa paghuhugas ng pinggan. Ang mga pinggan, pipette at instrumento na kontaminado ng nahawaang materyal ay hinuhugasan lamang pagkatapos ng isterilisasyon. Ang mga drying cabinet ay inilalagay sa loob nito.
Vivarium ay tinatawag na silid na ginagamit para sa pag-iingat ng mga hayop sa laboratoryo. Ang vivarium ay dapat may quarantine department, mga silid para sa mga eksperimental at malulusog na hayop, mga silid para sa paglalaba at pagdidisimpekta sa mga kulungan, imbentaryo at mga oberol, kusina para sa paghahanda ng pagkain, pantry, feed, at kalan na nasusunog sa bangkay. Lahat ng vivarium room ay dapat na nakahiwalay sa isa't isa.
BACTERIOLOGICAL LABORATORY- isang siyentipiko at praktikal na institusyon na nagsasagawa ng bacteriological, immunological at iba pang microbiological na pag-aaral. Alinsunod sa pagkakaiba-iba ng microbiology sa pangkalahatan at bacteriology bilang isa sa mga sangay nito, mayroong mga bacteriological laboratories na may iba't ibang mga gawain at pag-andar. Ang mga klinikal at diagnostic na bacteriological laboratories sa mga ospital ay nagsasagawa ng mga pag-aaral na kinakailangan upang maitaguyod o linawin ang diagnosis ng isang nakakahawang sakit, pagsubaybay sa pagiging epektibo ng paggamot.
Ang pagdadalubhasa ng mga bacteriological laboratories sa mga ospital ay tinutukoy ng profile ng ospital (talamak na mga nakakahawang sakit, mga nakakahawang sakit sa pagkabata, mga sakit sa venereal, tuberculosis, atbp.). Ang mga laboratoryo ng bakterya sa mga istasyon ng sanitary-epidemiological, tulad ng mga klinikal na laboratoryo, ay nakikibahagi sa gawaing diagnostic, na naglilingkod sa mga ospital na walang sariling mga laboratoryo, nagsasagawa ng pang-iwas na pagsusuri sa populasyon at sanitary-bacteriological na pagsusuri ng pagkain at tubig.
Bilang karagdagan sa medikal, mayroong isang malawak na network ng mga beterinaryo na bacteriological laboratories na nagsasagawa ng diagnostic at prophylactic na pag-aaral ng mga nakakahawang sakit sa mga hayop (tingnan ang Veterinary laboratoryo). Ang mga bacteriaological laboratories na gumaganap ng mga control function ay lubos na dalubhasa, tulad ng mga bacteriological laboratories sa waterworks, control laboratories sa mga negosyong gumagawa ng mga bakuna, serum at iba pang bacterial na paghahanda. Ang mga espesyal na laboratoryo ng bacteriological ay nakaayos sa mga pasilidad ng pagdidisimpekta. Ang kanilang gawain ay upang kontrolin ang bacteriological na kalidad ng pagdidisimpekta na ginawa. Kasama ng mga bacteriological laboratories ng isang medikal at beterinaryo na profile, mayroong mga dalubhasang bacteriological laboratories na nagsisilbi sa mga pangangailangan ng industriya ng pagkain (paggawa ng alak, panaderya, paggawa ng serbesa at iba pang mga negosyo), agrikultura, atbp. Ang mga institusyon ay nagbibigay ng mga bacteriological laboratories ng iba't ibang mga profile, na idinisenyo upang malutas ang iba't ibang mga suliranin sa pananaliksik. Ang mga bacteriaological laboratories ay maaaring nakatigil at mobile. Ang huli ay ginagamit para sa sanitary at anti-epidemya na serbisyo ng mga yunit ng militar, pati na rin sa ekspedisyonaryong, mga kondisyon sa larangan (tingnan ang. Laboratory, sa mga kondisyon ng larangan ng militar). Bilang karagdagan sa mga mobile, ang mga tropa ay mayroon ding mga nakatigil na laboratoryo. Ang pagtitiyak ng pananaliksik na isinagawa sa mga bacteriological laboratories ay tumutukoy sa istraktura ng mga laboratoryo at ang mode ng operasyon sa kanila.
Ang pangunahing kinakailangan para sa mga bacteriological laboratories at nagmula sa mga detalye ng trabaho nito ay ang paglikha ng mga kondisyon na nagsisiguro sa pagganap ng pananaliksik sa mga pinaka-steril na kondisyon at ginagarantiyahan ang mga tauhan at iba pa mula sa posibleng impeksyon. Ang istraktura ng bacteriological laboratory ay kinabibilangan ng: ang laboratoryo mismo at isang bilang ng mga karagdagang subdivision dito. Kabilang dito ang: sredovarnya, paghuhugas, paghahanda, isterilisasyon at vivarium (tingnan). Ang mga nakalistang subdibisyon, bilang mga independiyenteng yunit ng istruktura, ay bahagi ng malalaking laboratoryo ng bacteriological. Sa mga maliliit na laboratoryo ng bacteriological, isang vivarium at isang espesyal na silid ng paghahanda ay wala, at ang isang medium na brewery at isang silid ng isterilisasyon ay maaaring pagsamahin sa isang silid.
Device at kagamitan
kanin. 5. Glass spatula. Larawan 6. Platinum wire spatula.
Ang silid para sa mga bacteriological laboratories ay dapat na maliwanag at sapat na maluwang. Ang mga dingding ay dapat na pininturahan ng pintura ng langis at ang sahig ay dapat na walang mga bitak. Ang mga bintana ng laboratoryo ay dapat na nakatuon sa hilaga o hilagang-kanluran. Kapag nakaharap sa timog, ang mga bintana ay natatakpan ng mga puting kurtina. Ang bacteriological laboratory ay dapat may washbasin o washbasin, kung saan inilalagay ang isang bote ng hand sanitizer sa isang istante. Ang talahanayan ng trabaho ng bacteriologist, kung maaari, ay inilalagay sa layo na 1 m mula sa bintana at natatakpan ng linoleum o salamin. Ang isang gas burner ay inilalagay sa mesa (sa kawalan ng isang gas burner, isang alkohol burner). Ang obligadong kagamitan sa lugar ng trabaho ay isang garapon para sa mga pipette na may disinfectant solution (3% carbolic acid solution), isang closable porcelain o glass container para sa cotton wool, isang holder para sa bacterial loop, isang set ng bacterial standards, test tube racks, enamel cuvettes, tweezers, gunting at isang scalpel, malinis na mga slide na may at walang mga balon, at mga cover slip. Karaniwan, ang mga glass slide na may sukat na 26 X 76 mm at 1 - 1.2 mm ang kapal, ginagamit ang mga cover slip na 18 x 18 o 20 x 20 mm. Ang bacteriological laboratory ay dapat na nilagyan ng mga metal tray para sa paglilipat ng mga Petri dish, galvanized bucket o mga lalagyan para sa pagbagsak ng mga nahawaang pinggan o kagamitan. Ang mga mikroskopyo ay nakaimbak sa isang kahon o sa ilalim ng takip ng salamin. Ang desktop ay hindi dapat maging kalat ng mga hindi kinakailangang bagay. Karaniwan sa laboratoryo ng bacteriological, ang isang karagdagang maliit na mesa ay nilagyan para sa paglamlam ng mga nakapirming paghahanda. Sa naturang mesa ay inilalagay: isang hanay ng mga kinakailangang tina at reagents sa isang bloke na may mga pipette at goma na lata (Larawan 1), isang enamel cuvette o crystallizer na may stand para sa mga paghahanda, wire tweezers o Kornet tweezers (Fig. 2) para sa pag-aayos ng mga slide, mga sheet ng filter na papel upang alisin ang likido mula sa hugasan na mga paghahanda, isang washer (Larawan 3) o isang bote ng tubig. Ang bacteriological laboratory ay nilagyan ng iba't ibang kagamitan na kailangan para sa pananaliksik. Bilang karagdagan sa mga ordinaryong kemikal na kagamitan (mga silindro, flasks, beakers, pagsukat ng mga pipette, atbp.), Ang mga espesyal na kagamitan ay kailangan para sa bacteriological at immunological na pag-aaral: 1) glass Petri dishes na ginagamit para sa lumalaking bakterya sa solid media at pagkuha ng mga nakahiwalay na bacterial colonies; 2) bacterial mattresses (Larawan 4) - mga flat na bote (22 x 17 x 5 cm), na ginagamit upang palaguin ang isang malaking bilang ng mga bakterya; 3) tubes Ru na may constriction para sa lumalaking bakterya sa shoals ng patatas; 4) Wasserman test tubes na 90 mm ang haba at 9-10 mm ang inner diameter para sa pagtatanghal ng complement binding reaction at ang agglutination reaction; 5) precipitation tubes na 90 mm ang haba at 3-5 mm ang diameter para sa pag-set up ng precipitation reaction; 6) bacterial test tubes na ginagamit para sa lumalaking bacteria sa solid at liquid nutrient media; 7) Pasteur pipettes na ginagamit para sa inoculating liquid materials, diluting liquids na may drop method, paglalagay ng dyes, atbp. ; 8) Mohr pipettes o pipettes na may spherical expansion sa gitnang bahagi para sa inoculation ng mga nahawaang likidong materyal, pati na rin ang mga awtomatikong pipette o pipettes na may rubber pears, na hindi kasama ang pagsipsip ng materyal sa pamamagitan ng bibig. Para sa lumalagong mga kultura sa likidong nutrient media, pag-iimbak at pagpuno ng nutrient media, reagents, atbp., ginagamit ang ordinaryong kagamitan sa laboratoryo. Ang mga pagkaing ginagamit sa bacteriological laboratory ay dapat na pre-leached, kung saan sila ay karaniwang pinakuluan sa isang 1-2% na solusyon ng hydrochloric acid. Ang pagdidisimpekta ng mga bacteriological dish kung saan ang mga mikrobyo ay nilinang ay dapat na isagawa lamang sa tulong ng isang mataas na temperatura nang walang paggamit ng anumang mga disinfectant, dahil ang pagkakaroon ng huli, kahit na sa anyo ng mga bakas, ay maaaring higit pang pagbawalan ang pag-unlad ng mga mikrobyo. Ang inoculation ng mga microorganism sa isang bacteriological laboratory ay isinasagawa gamit ang bacteriological loops, glass o platinum spatulas (Fig. 5 at 6). Ang paglilinang ng bakterya ay isinasagawa sa isang air thermostat (tingnan), at sa mga malalaking laboratoryo ng bacteriological - sa mga espesyal na thermostatic room.
Kung kailangan mo ng tumpak na kontrol sa temperatura at medyo panandaliang paglilinang ng bakterya o kapag nagse-set up ng mga immunological na reaksyon, maginhawang gumamit ng mga ultrathermostat ng tubig. Ang bawat bacteriological laboratory, kung saan sila ay nakikibahagi sa pag-aaral ng mga anaerobes, ay dapat na nilagyan ng anaerostat (tingnan), mga desiccator at mga vacuum pump upang maalis ang hangin. Ang huli ay ginagamit din para sa pagsala. Upang makamit ang pinakamahusay na mga kondisyon ng aseptiko na kinakailangan para sa inoculation, paghihiwalay o subculture ng mga kultura, ang mga bacteriological laboratories ay nilagyan ng mga espesyal na glazed box na may mga prebox. Ang kahon ay naglalaman ng isang gas burner, isang lalagyan na may disinfectant solution, at, kung posible, isang bactericidal UV lamp. Sa kawalan ng isang nakatigil na kahon, kapag nagsasagawa ng ilang trabaho na nangangailangan ng mataas na antas ng asepsis, maaari kang gumamit ng portable na kahon ng desktop (tingnan ang Mga Kahon, microbiological).
kanin. 7. Awtomatikong counter ng mga kolonya na may aparatong pangkontrol sa telebisyon: 1 - Petri dish na may mga malalaking kolonya; 2 - electronic board na may mga numero na nagpapahiwatig ng bilang ng mga kolonya sa isang Petri dish; 3 - TV screen para sa pagmamasid sa isang pinalaki na imahe ng mga kolonya na lumaki sa isang Petri dish.
Ang mga bacterial culture, therapeutic at diagnostic sera, phages at iba pang mga substrate ng isang biological na kalikasan (sera, peptone solution, atbp.) ay naka-imbak sa refrigerator. Ang mga kultura ng bakterya ay dapat na naka-imbak sa mga selyadong test tube o ampoules, kung saan sa mga bacteriological laboratories kinakailangan na magkaroon ng isang panghinang na sulo o isang ordinaryong blowtorch. Ang isang obligadong accessory ng anumang bacteriological laboratory ay isang mikroskopyo (tingnan). Para sa karamihan ng mga pag-aaral, isang MBI-3 na mikroskopyo at mga illuminator ang ginagamit. Ang mga bacteriological laboratories ng pananaliksik ay nilagyan din ng phase contrast, luminescent at electron microscope. Ang mga counter ng iba't ibang sistema ay ginagamit upang mabilang ang dami ng bacterial colonies na lumaki sa mga Petri dish. Ang isa sa mga counter na ito ay isang awtomatikong counter na may isang aparato sa pag-scan at isang monitor sa telebisyon na may kakayahang magbilang ng hanggang 500 tasa bawat oras (Larawan 7). Ang apparatus para sa pag-alog ay mahalagang mga elemento ng kagamitan para sa bacteriological laboratories, na ginagamit sa mga kaso kung saan kinakailangan upang matiyak ang paghahalo at pag-alog ng materyal para sa isang tiyak na oras (defibrination ng dugo, homogenization ng materyal, atbp.). Para sa sedimentation ng mga siksik na particle (microbial cells, tissue cells, suspension ng test material) sa likido, gumamit ng centrifuges (tingnan). Para sa karamihan ng mga pag-aaral, ang mga centrifuges na umiikot sa bilis na 3000 - 3500 rpm ay kadalasang ginagamit. Sa kawalan ng mga electric centrifuges, ginagamit ang mga manual centrifuges.
Ang aktibidad ng mga bacteriological laboratories ay higit sa lahat ay nakasalalay sa pagsunod sa pangunahing kinakailangan - magtrabaho sa mga kondisyon ng aseptiko na may mga sterile na bagay (mga kasangkapan, media ng kultura, mga pinggan). Samakatuwid, sa kagamitan ng mga bacteriological laboratories, isang makabuluhang lugar ang inookupahan ng kagamitan para sa isterilisasyon (tingnan). Ang bawat bacteriological laboratory ay may autoclave (tingnan), isang Koch apparatus, isang Pasteur oven (tingnan ang Pasteur oven), isang apparatus para sa coagulating serum. Para sa isterilisasyon sa pamamagitan ng pagpapakulo, gumamit ng mga maginoo na sterilizer (tingnan), pinainit mula sa elektrikal na network o sa iba pang paraan.
Para sa isterilisasyon ng mga likidong substrate na nagbabago kapag nalantad sa temperatura, gumamit ng mga filter na bacterial (tingnan). Ang pagpapatayo ng mga moistened na bagay (mga pinggan, mga tool) pagkatapos ng isterilisasyon na may singaw o sa ilalim ng presyon ay isinasagawa sa mga cabinet ng pagpapatayo (tingnan). Ang mga kagamitan ng bacteriological laboratories na kinakailangan para sa paghahanda ng pinakakaraniwang nutrient media, bilang karagdagan sa tinukoy na kagamitan, ay may kasamang mga aparato para sa pagpuno ng media, reagent kit at mga kagamitan para sa pagsasagawa ng ilang mga pagsusuri sa kemikal (pagpapasiya ng amine nitrogen, tryptophan, chlorides, atbp. .), pati na rin ang mga aparato at reagents para sa pagpapasiya ng pH ng kapaligiran; universal indicator, indicator at Michaelis comparator o potentiometer.
Ang pakikipagtulungan sa mga hayop sa mga bacteriological laboratories ay isinasagawa sa isang espesyal na silid - vivarium. Ang mga eksperimento sa mga hayop ay hindi pinahihintulutan sa bacteriological laboratories proper. Upang maisagawa ang pangunahing gawain sa mga hayop (pagkuha ng dugo, pagtatakda ng mga biological na sample, mga diagnostic na reaksyon, atbp.), Dapat kang magkaroon ng: mga kaliskis para sa pagtimbang ng mga daga, baboy at kuneho, mga makina o aparato para sa pag-aayos ng mga ito (Larawan 8), isang hanay ng mga hiringgilya, mga numero para sa mga tag na hayop (o mga tina), depilatoryo.
Ang pagtitiyak ng gawaing bacteriological ay tumutukoy sa partikular na mataas na mga kinakailangan para sa kalinisan ng mga lugar ng mga laboratoryo ng bacteriological. Ang partikular na kahalagahan ay ang kalinisan ng hangin, ang kawalan ng alikabok dito. Mas mainam na linisin ang lugar ng mga bacteriological laboratories sa pagtatapos ng araw ng pagtatrabaho o ilang oras bago magsimula ang trabaho, dahil ang alikabok na nakataas sa hangin sa panahon ng paglilinis ay nagdaragdag ng nilalaman ng mga mikrobyo sa loob nito at nagpapahirap sa sterile na trabaho. . Maipapayo, pagkatapos linisin ang lugar bago magtrabaho, upang ilantad ang mga ito sa pag-iilaw na may uviol bactericidal lamp sa loob ng 0.5-1 na oras. Upang maiwasan ang impeksyon sa intra-laboratoryo at ang posibilidad ng pagkalat ng impeksyon kapag nagtatrabaho sa mga bacteriological laboratories, ang mga sumusunod na pangunahing patakaran ay dapat sundin: 1) lahat ng tao sa laboratoryo ay dapat na naka-lab coat; 2) ang mga hindi kinakailangang pag-uusap at paglalakad ay hindi pinapayagan; 3) ang bawat empleyado ay dapat gumamit lamang ng nakatalagang lugar ng trabaho; 4) ang pagkain at paninigarilyo ay ipinagbabawal sa bacteriological laboratory; 5) kapag nagtatrabaho sa nakakahawang materyal, kinakailangang gumamit ng mga tool (sipit, karayom, kawit) at huwag hawakan ito sa iyong mga kamay; lahat ng imbentaryo na nakipag-ugnayan sa mga nakakahawang materyal ay dapat na isterilisado o sirain; 6) kapag sumipsip ng likidong materyal, inirerekumenda na gumamit ng mga bombilya ng goma; ang mga pipette ay dapat sarado na may mga plug ng koton; 7) ang pagsasalin ng mga nahawaang likido mula sa sisidlan patungo sa sisidlan ay isinasagawa sa isang tray o crystallizer na puno ng disinfecting liquid; 8) lahat ng trabaho na may kaugnayan sa paghahasik, muling pagtatanim, paghihiwalay ng mga kultura at paghahanda ng mga paghahanda mula sa mga nahawaang materyal ay isinasagawa sa burner, habang sinusunog ang mga gilid ng mga test tube, mga loop, spatula, atbp.; 9) ang mga test tube, flasks, vial, atbp., kung saan inilalagay ang nahawaang materyal sa proseso ng trabaho, ay agad na nakasulat na may indikasyon ng likas na katangian ng materyal, ang pangalan at numero ng kultura at ang petsa; 10) kung ang isang nakakahawang materyal ay nakuha sa mga nakapalibot na bagay, kinakailangan na agad na magsagawa ng masusing pagdidisimpekta: punan ang lugar na ito ng isang solusyon sa disimpektante, at pagkatapos, kung maaari, sunugin ito ng isang pamunas na may nasusunog na alkohol; 11) ang mga bagay at materyales na nahawaan sa panahon ng trabaho ay nakarehistro, kinokolekta sa mga tangke o balde, sarado, selyado at isterilisado sa parehong araw; 12) ang mga kultura, kung kinakailangan, ay naka-imbak sa mga haligi ng agar sa ilalim ng langis sa mga selyadong tubo na may mga label; 13) pagpaparehistro at accounting ng lahat ng mga pananim, pati na rin ang mga hayop na nahawahan sa panahon ng trabaho, ay itinatago sa journal sa isang espesyal na anyo.
Ang regulasyon ng mga kondisyon ng pagtatrabaho na may mga pathogen ng mga nakakahawang sakit ay ginawa alinsunod sa antas ng panganib ng mga microorganism sa mga tao. Sa batayan na ito, apat na grupo ng pathogenic biological agents (PBA) ang natukoy:
Pangkat I: mga sanhi ng partikular na mapanganib na impeksyon (salot, natural na bulutong, atbp.)
Pangkat II: mga ahente ng sanhi ng mataas na nakakahawang bacterial, fungal at viral infection (anthrax, cholera, rabies, atbp.)
Pangkat III: mga ahente ng sanhi ng bacterial, fungal, viral at protozoal na impeksyon na nakahiwalay sa mga independiyenteng nosological form (whooping cough, tetanus, tuberculosis, atbp.)
Pangkat IV: mga sanhi ng ahente ng bacterial, fungal, viral septicemia, meningitis, pneumonia, enteritis, nakakalason na impeksyon, talamak na pagkalason (Pseudomonas aeruginosa, atbp.).
Karamihan sa mga microbiological laboratories ay gumagana sa mga pangkat ng PBA III at IV, at tanging ang mga dalubhasang laboratoryo lamang ang nakikibahagi sa pag-aaral ng mga sanhi ng mga partikular na mapanganib na impeksyon (mga pangkat I at II).
Ang mga pangunahing laboratoryo na nagtatrabaho sa PBA ng III at IV na mga grupo ay dapat matugunan ang isang bilang ng mga kinakailangan (isang hiwalay na gusali o isang hiwalay na pasukan, ang pagkakaroon ng mga sistema ng supply ng tubig at kuryente, pagpainit, bentilasyon, atbp.) at mayroong kinakailangang hanay ng mga lugar alinsunod sa na may kapasidad ng produksyon at hanay ng pananaliksik na isinagawa ... Ang bawat laboratoryo ay dapat may "malinis" at "marumi" na lugar.
Ang "marumi" na sona ay kinabibilangan ng mga silid para sa pagtanggap at pagpaparehistro ng materyal, mga kahon at mga silid para sa pagsasagawa ng microbiological studies, thermostat, autoclave para sa pagdidisimpekta ng materyal. Ang mga bintana at pintuan ng lahat ng mga silid ay dapat na sarado nang ermetiko. Ang mga silid para sa pagtatrabaho sa mga live na microorganism ay dapat na nilagyan ng mga germicidal lamp, o may mga biological safety box. Ang supply at exhaust ventilation ng "marumi" na zone ay dapat na nilagyan ng mga filter para sa pinong paglilinis ng maubos na hangin. Ang pag-label ng mga mesa, autoclave, mga lalagyan na may mga solusyon sa disimpektante, mga rack para sa malinis at nahawaang materyal ay sapilitan. Ang laboratoryo ay dapat na nilagyan ng mga espesyal na kasangkapan, may makinis na ibabaw ng sahig at dingding, lumalaban sa pagkilos ng mga detergent at disinfectant.
Kasama sa "malinis" na zone ang mga lugar para sa paunang gawain (paghuhugas, paghahanda, silid para sa paghahanda at pagbote ng nutrient media, atbp.), isang silid para sa pagtatrabaho kasama ang dokumentasyon, mga silid na may mga refrigerator para sa pag-iimbak ng nutrient media at mga diagnostic na produkto, isang aparador para sa panlabas na damit , isang recreation room... Sa "malinis" na sona, posibleng makipagtulungan sa walang buhay na PBA (serological, molecular genetic, biochemical studies).
Ang pagtiyak sa kaligtasan ng pagtatrabaho sa mga pathogenic microorganism ay may kasamang dalawang pangunahing kadahilanan: teknikal at tao. Ang teknikal na kadahilanan ay ang pagkakaroon ng "malinis" at "marumi" na mga lugar, kagamitan, mga sistema ng proteksyon, atbp. na kinakailangan para sa operasyon. Ang kadahilanan ng tao ay ang kawastuhan ng mga aksyon ng tao upang matiyak ang kaligtasan, ang antas ng kasanayan sa propesyonal na teknolohiya, kaalaman sa mga posibleng mapagkukunan at mekanismo ng impeksyon, naaangkop na paghahanda at pagsasanay.
Ang trabaho sa pang-edukasyon na bacteriological laboratory ay nauugnay din sa dalawang mapanganib na mga kadahilanan - mga microorganism na sanhi ng mga ahente ng mga nakakahawang sakit at bukas na apoy, na nangangailangan ng pagsunod sa mga hakbang sa anti-epidemya at kaligtasan ng sunog. Ang mga mag-aaral ay kinakailangang maging pamilyar sa mga alituntunin sa kaligtasan at mahigpit na sundin ang mga ito:
kailangan:
· Magtrabaho sa mga medikal na gown na may mahabang manggas, medikal na takip at sapin ng sapatos;
· Mag-imbak ng mga personal na gamit sa isang espesyal na itinalagang lugar, mag-iwan ng panlabas na damit sa wardrobe;
· Ang bawat uri ng aktibidad ay isinasagawa sa isang partikular na lugar: magtrabaho kasama ang mga mikroorganismo - sa isang espesyal na gamit na talahanayan ng laboratoryo, pagpuno ng mga protocol - sa desktop;
· Kung ang mga nahawaang materyal ay napunta sa mesa, sahig at iba pang mga bagay, agad na ipagbigay-alam sa guro at disimpektahin;
· Ang mga nahawaang materyales ay dapat ilagay sa matibay na lalagyan na hindi tinatablan ng tubig o mga lalagyan na may disinfectant solution, na sarado bago alisin sa laboratoryo.
· Sa panahon ng trabaho, ang mga pintuan ng laboratoryo ay dapat panatilihing nakasara.
· Sa pagtatapos ng trabaho, hugasan nang maigi ang iyong mga kamay, at, kung kinakailangan, gamutin gamit ang isang disinfectant solution.
Kumuha ng pagkain sa laboratoryo
Gumuhit ng likido sa isang pipette sa pamamagitan ng bibig
Sindihan ang isang spirit lamp mula sa isa pa
Magdala ng nasusunog na spirit lamp
Iwanan ang spirit lamp na nasusunog pagkatapos ng layuning gamitin nito
Mag-iwan ng mga hindi naayos na paghahanda, mga Petri dish na may mga inoculation at iba pang kagamitan na may nakakahawang materyal sa lugar ng trabaho
Ang pagpindot sa materyal na pansubok sa mga seeded Petri dish gamit ang iyong mga kamay
Clinical Microbiology Equipment
Ang mga modernong kagamitan para sa pag-automate ng lahat ng mga yugto ng proseso ng microbiological sa laboratoryo ng microbiology ay nagpapahintulot sa iyo na mabilis na makilala ang mga microorganism at matukoy ang kanilang pagiging sensitibo sa mga ahente ng antimicrobial para sa appointment ng maagang sapat na therapy.
Nagbibigay ang microbiology laboratory automation ng:
- Binabawasan ang oras upang makuha ang resulta sa 24-72 oras
- Mas kaunting mga error
- Epektibong pagbawas ng mga gastos sa paggawa
- Pagtaas sa pagiging produktibo
- Pagpapabuti ng pagiging epektibo ng pangangalaga sa pasyente
- Nabawasan ang average na tagal ng bed-day
- Ang kakayahang pag-aralan ang sitwasyon sa real time
- Standardisasyon ng mga resulta ng pagbasa atov
- Paglikha ng database
Ganap na automated bacteriological laboratoryoBioMerieux
Kagamitang microbiological Biovitrum
Ang kumpanya ng Biovitrum ay isa sa mga pinuno sa paggawa at pagbibigay ng mga espesyal na kagamitan sa microbiological sa Russia. Gumagawa at nagbebenta kami ng mga kagamitan para sa microbiological research na binuo gamit ang mga pinaka-makabagong teknolohiya.
Ang kagamitan ng microbiological laboratory ay dapat na ganap na sumunod sa mga modernong pamantayan ng kalidad, paggawa at kaligtasan at tulungan ang mananaliksik na malutas ang mga itinalagang gawain nang mahusay hangga't maaari. Kasama ng mga espesyal na instrumento at aparato sa laboratoryo ng microbiology, dapat mayroong pangkalahatang kagamitan sa laboratoryo , na nagbibigay-daan upang mapabuti ang kalidad at pagiging produktibo ng katulong sa laboratoryo.
Mga modernong pangkalahatang kagamitan sa laboratoryo na kinakailangan para sa pagpapatakbo ng isang microbiological laboratory
Ang gawain ng isang microbiologist ay isinasagawa sa ilalim ng mahigpit na mga kondisyon ng sterility, na nag-iwas sa microbial contamination at diagnostic error. Panatilihin ang mga sterile na kondisyon at protektahan ang mga tauhan ng laboratoryo at pagsubok ng mga bagay sa kultura mula sa mga tulong sa kontaminasyon ng microbial Ang ganitong uri ay isang mahalagang bahagi ng microbiological laboratory equipment, na nagbibigay ng napakalinis na kondisyon sa pagtatrabaho. Ang isa sa mga mahahalagang instrumento sa microbiological laboratory ay , na naghahatid sa paghiwalayin ang mga solusyon at likidong pinaghalong sa mga fraction na may magkakaibang density. Kasama rin sa pangkalahatang kagamitan sa laboratoryo ang imbakan ng reagent at pagpapanatili ng temperatura ng pagpapatakbo. Paggamit mababang temperatura ng mga refrigerator nagbibigay-daan sa iyo na mag-freeze at ligtas na mag-imbak ng mga biological sample sa temperatura hanggang -150 °.
Analytical at auxiliary pangkalahatang kagamitan sa laboratoryo
Ang pagpapalawak ng functionality ng microbiological laboratory ay nagbibigay-daan sa paggamit ng analytical pangkalahatang kagamitan sa laboratoryo ... Ito ay posible na qualitatively at quantitatively characterize ang komposisyon ng mga sample sa ilalim ng pag-aaral sa tulong ng c, na nagpapataas ng produktibidad at kadalian ng paggamit sa mga karaniwang pag-aaral.
Ang lahat ng microbiological, biochemical at molecular biological na pag-aaral ng mga microorganism ay isinasagawa sa mga espesyal na laboratoryo, ang istraktura at kagamitan na nakasalalay sa mga bagay ng pag-aaral (bakterya, virus, fungi, protozoa), pati na rin sa kanilang target na oryentasyon (pang-agham na pananaliksik, diagnosis ng mga sakit)... Ang pag-aaral ng immune response at serodiagnosis ng mga sakit sa mga tao at hayop ay isinasagawa sa immunological at serological (serum - blood serum) na mga laboratoryo.
Ang bacteriaological, virological, mycological at serological (immunological) laboratories ay bahagi ng sanitary-epidemiological stations (SES), diagnostic centers at malalaking ospital. Sa mga laboratoryo ng SES, ang mga pagsusuri sa bacteriological, virological at serological ng mga materyales na natanggap mula sa mga pasyente at mga taong nakikipag-ugnay sa kanila ay isinasagawa, sinusuri ang mga carrier ng bakterya at sanitary at microbiological na pag-aaral ng tubig, hangin, lupa, mga produktong pagkain, atbp.
Sa bacteriological at serological laboratories ng mga ospital at diagnostic center, ang pananaliksik ay isinasagawa upang masuri ang bituka, purulent, respiratory at iba pang mga nakakahawang sakit, microbiological control sa isterilisasyon at pagdidisimpekta ay isinasagawa.
Ang mga diagnostic ng partikular na mapanganib na mga impeksiyon (salot, tularemia, anthrax, atbp.) Ay isinasagawa sa mga espesyal na laboratoryo ng rehimen, ang organisasyon at pamamaraan kung saan ay mahigpit na kinokontrol.
Ang mga virological laboratories ay nagsusuri ng mga sakit na dulot ng mga virus (influenza, hepatitis, poliomyelitis, atbp.), ilang bakterya - chlamydia(psittacosis, atbp.) at rickettsia(tipus, Q fever, atbp.). Kapag nag-aayos at nagbibigay ng mga virological laboratories, ang mga detalye ng pagtatrabaho sa mga virus, mga kultura ng cell at mga embryo ng manok, na nangangailangan ng mahigpit na asepsis, ay isinasaalang-alang.
Sa mga laboratoryo ng mycological, nagsasagawa sila ng mga diagnostic ng mga sakit na dulot ng pathogenic fungi, pathogens ng mycoses.
Ang mga laboratoryo ay karaniwang matatagpuan sa ilang mga silid, ang lugar kung saan ay tinutukoy ng dami ng trabaho at ang layunin.
Ang bawat laboratoryo ay nagbibigay ng:
a) mga kahon para sa pagtatrabaho sa mga indibidwal na grupo ng mga pathogen;
b) mga silid para sa serological na pag-aaral;
c) mga lugar para sa paghuhugas at pag-sterilize ng mga pinggan, na inihanda
leaching nutrient media;
d) vivarium na may mga kahon para sa malusog at pang-eksperimentong mga hayop -
ny;
e) pagpapatala para sa pagtanggap at pag-isyu ng mga pagsusuri.
Kasama ng mga silid na ito, ang mga virological laboratories ay may mga kahon para sa espesyal na pagproseso ng materyal sa pagsubok at gumagana sa mga kultura ng cell.
Mga kagamitan sa laboratoryo ng microbiological
Ang mga laboratoryo ay nilagyan ng isang bilang ng mga kinakailangang instrumento at kagamitan.
1. Mga device para sa microscopy: biological immersion microscope na may mga karagdagang device (illuminator, phase contrast device, dark-field condenser, atbp.), fluorescent microscope.
2. Thermostat at refrigerator.
3. Mga aparato para sa paghahanda ng nutrient media, mga solusyon, atbp.: apparatus para sa pagkuha ng distilled water (distiller), teknikal at analytical scale, pH meter, kagamitan sa pagsala, paliguan ng tubig, centrifuges.
4. Isang hanay ng mga tool para sa pagmamanipula ng mga mikrobyo: bacteriological loops, spatula, needles, tweezers, atbp.
5. Laboratory glassware: test tubes, flasks, Petri dishes, mattresses, vials, ampoules, Pasteur at graduated pipettes, atbp., apparatus para sa paggawa ng cotton-gauze tubes.
Ang malalaking diagnostic complex ay may mga awtomatikong analyzer at isang computerized system para sa pagsusuri ng impormasyong natanggap.
Sa laboratoryo, ang isang lugar ay inilaan para sa paglamlam ng mga mikroskopikong paghahanda, kung saan matatagpuan ang mga solusyon ng mga espesyal na tina, alkohol, acid, filter na papel, atbp. Ang bawat lugar ng trabaho ay nilagyan ng gas burner o alcohol lamp at isang lalagyan na may disinfectant solution . Para sa pang-araw-araw na gawain, ang laboratoryo ay dapat magkaroon ng kinakailangang nutrient media, chemical reagents, diagnostic na gamot at iba pang materyales.
May malalaking laboratoryo thermostatic room para sa mass cultivation ng microorganisms, set up serological reactions. Ang mga sumusunod na kagamitan ay ginagamit para sa paglaki, pag-iimbak ng mga kultura, pag-sterilize ng mga babasagin sa laboratoryo at iba pang mga layunin.
1. Thermostat. Isang aparato kung saan pinananatili ang isang pare-parehong temperatura. Ang pinakamainam na temperatura para sa pagpaparami ng karamihan sa mga pathogenic microorganism ay 37 "C. May mga air at water thermostat.
2. Microanaerostat. Apparatus para sa lumalaking microorganism sa ilalim ng anaerobic na kondisyon.
3. C0 2 incubator. Apparatus para sa paglikha ng isang pare-pareho ang temperatura at kapaligiran ng isang tiyak na komposisyon ng gas. Idinisenyo para sa paglilinang ng mga microorganism, na hinihingi ang komposisyon ng gas ng kapaligiran.
4. Mga refrigerator. Ginagamit ang mga ito sa mga microbiological laboratories para sa pag-iimbak ng mga kultura ng mga microorganism, media ng kultura, dugo, mga bakuna, sera at iba pang biologically active na paghahanda sa temperatura na humigit-kumulang 4 ° C. Para sa pag-iimbak ng mga gamot sa mga temperatura sa ibaba 0 ° C, ang mga mababang temperatura na refrigerator ay ginagamit, kung saan ang temperatura ay pinananatili sa -20 ° C o -75 "C.
5. Mga centrifuge. Ginagamit ang mga ito para sa sedimentation ng mga microorganism, erythrocytes at iba pang mga cell, para sa paghihiwalay ng mga heterogenous na likido (emulsions, suspensions). Sa mga laboratoryo, ginagamit ang mga centrifuges na may iba't ibang mga operating mode.
6. Pagpapatuyo at isterilisasyon cabinet(Pasteur oven). Idinisenyo para sa dry-air sterilization ng glass laboratory glassware at iba pang materyal na lumalaban sa init.
7. Steam sterilizer (autoclave). Idinisenyo para sa isterilisasyon na may sobrang init na singaw (sa ilalim ng presyon). Ang mga autoclave ng iba't ibang mga modelo (vertical, horizontal, stationary, portable) ay ginagamit sa microbiological laboratories.
BACTERIOLOGICAL, VIRUSOLOGICAL, MYCOLOGICAL, IMMUNOLOGICAL LABORATORIES AT KANILANG MGA KAGAMITAN. DEVICE NG MODERN MICROSCOPES. MICROSCOPY PARAAN. MGA PARAAN SA PAG-AARAL NG MORPOLOHIYA NG MICROORGANISMS
Programa
1. Mga patakaran ng trabaho at organisasyon ng microbiological (bacteriological, virological, mycological) laboratoryo.
2. Ang mga pangunahing instrumento at kagamitan ng microbiological laboratory.
3. Mga mikroskopyo at mikroskopikong pamamaraan. Mga panuntunan para sa pagtatrabaho sa isang immersion microscope (mga layunin).
Pagpapakita
1. Disenyo at aplikasyon ng mga pangunahing instrumento at kagamitan na ginagamit sa microbiological laboratories: thermostat, centrifuges, autoclave, drying cabinet, mga instrumento at kagamitan.
2. Ang aparato ng isang biological microscope. Iba't ibang paraan ng microscopy: dark-field, phase-contrast, luminescent, electronic.
3. Paghahanda ng mga mikrobyo (lebadura at bakterya) na may iba't ibang mikroskopikong pamamaraan.
Takdang-aralin sa mga mag-aaral
1. Microscopic at sketch na paghahanda ng yeast-like fungi ng genus Candida gamit ang iba't ibang uri ng mikroskopya.
Mga tagubilin sa pamamaraan
Mga panuntunan para sa pagtatrabaho sa mga microbiological laboratories.
Ang trabaho sa microbiological laboratory ng isang institusyong medikal ay isinasagawa kasama ang mga pathogen ng mga nakakahawang sakit - mga pathogenic microorganism.
Samakatuwid, upang maprotektahan laban sa impeksyon, dapat na mahigpit na sundin ng mga tauhan ang mga panloob na regulasyon:
1. Ang lahat ng empleyado ay dapat magsuot ng mga medikal na gown, sombrero at natatanggal na sapatos. Mahigpit na ipinagbabawal na pumasok sa laboratoryo nang walang damit. Kung kinakailangan, ang mga manggagawa ay naglalagay ng gauze mask sa kanilang mga mukha. Ang pagtatrabaho sa mga partikular na mapanganib na mikrobyo ay kinokontrol ng mga espesyal na tagubilin at isinasagawa sa mga kinokontrol na laboratoryo.
2. Ang paninigarilyo at pagkain ay ipinagbabawal sa laboratoryo.
3. Ang lugar ng trabaho ay dapat panatilihing maayos. Ang mga personal na gamit ng mga empleyado ay dapat itago sa isang itinalagang lugar.
4. Sa kaso ng hindi sinasadyang pagkakadikit sa mga nahawaang materyal sa mesa, sahig at iba pang mga ibabaw, ang lugar na ito ay dapat na maingat na tratuhin ng isang disinfectant solution.
5. Ang pag-iimbak, pagmamasid sa mga kultura ng microbes at ang kanilang pagkasira ay dapat isagawa alinsunod sa mga espesyal na tagubilin. Ang mga kultura ng pathogenic microbes ay nakarehistro sa isang espesyal na journal.
6. Sa pagtatapos ng trabaho, ang mga kamay ay dapat hugasan nang lubusan at, kung kinakailangan, tratuhin ng isang disinfectant solution.
Mga mikroskopyo at pamamaraan ng mikroskopya
kanin. 1.1. Mga mikroskopyo.
a - pangkalahatang view ng "Biolam" na mikroskopyo; b - mikroskopyo MBR-1: 1 - base ng mikroskopyo; 2 - talahanayan ng paksa; 3 - mga tornilyo para sa paglipat ng yugto ng bagay; 4 - mga terminal na may hawak na paghahanda; 5 - pampalapot; 6 - condenser bracket; 7 - tornilyo na nagpapalakas sa condenser sa manggas; 8 - hawakan para sa paglipat ng condenser; 9 - hawakan ng condenser iris diaphragm; 10 - salamin; 11 - may hawak ng tubo; 12 - hawakan ng macrometric screw; 13 - hawakan ng isang micrometric screw; 14 - layunin revolver; 15 - mga lente; 16 - hilig na tubo; 17 - tornilyo para sa paglakip ng tu-bus; 18 - eyepiece.
Para sa microbiological na pag-aaral, maraming uri ng mikroskopyo (biological, luminescent, electronic) at mga espesyal na pamamaraan ng mikroskopya (phase-contrast, dark-field) ang ginagamit.
Sa microbiological practice, ginagamit ang mga mikroskopyo ng mga domestic brand: MBR-1, MBI-2, MBI-3, MBI-6, "Bio-lam" R-1, atbp. (Fig. 1.1). Ang mga ito ay idinisenyo upang pag-aralan ang hugis, istraktura, sukat at iba pang mga tampok ng iba't ibang microbes, ang laki nito ay hindi kukulangin sa 0.2-0.3 microns.
Immersion microscopy
Ginagamit ito upang mapataas ang resolusyon ng pamamaraan liwanag na mikroskopya... Ang resolution ng isang optical microscopy system ay tinutukoy ng wavelength ng nakikitang liwanag at ang numerical aperture ng system. Ang numerical aperture ay nagpapahiwatig ng anggulo ng pinakamataas na cone ng liwanag na pumapasok sa lens at depende sa mga optical properties (refractive power) ng medium sa pagitan ng object at ng objective lens. Ang paglubog ng lens sa isang medium (mineral na langis, tubig) na may mataas na refractive index, malapit sa salamin, ay pumipigil sa liwanag mula sa pagkalat mula sa bagay.
kanin. 1.2. Ang landas ng mga sinag sa sistema ng paglulubog, n ay ang refractive index.
kanin. 1.3. Ang landas ng mga sinag sa dark-field condenser, a - paraboloid-condenser; b - cardioid condenser; 1 - lens; 2 - langis ng paglulubog; 3 - paghahanda; 4 - ibabaw ng salamin; 5 - dayapragm.
Kaya, isang pagtaas sa numerical aperture at, nang naaayon, ang resolution ay nakakamit. Para sa immersion microscopy, ang mga espesyal na layunin ng immersion ay ginagamit, na nilagyan ng marka (MI - oil immersion, VI - water immersion). Ang paglilimita ng resolution ng immersion microscope ay hindi lalampas sa 0.2 microns. Ang landas ng mga sinag sa sistema ng paglulubog ay ipinapakita sa Fig. 1.2.
Ang kabuuang pag-magnify ng isang mikroskopyo ay natutukoy sa pamamagitan ng produkto ng layunin na pag-magnify na mga beses sa eyepiece magnification. Halimbawa, ang magnification ng isang mikroskopyo na may 90 immersion na layunin at 10 eyepiece ay: 90 x 10 = 900.
Ipinadalang light microscopy (brightfield microscopy) ginagamit upang pag-aralan ang mga bagay na may bahid sa mga nakapirming paghahanda.
Dark field microscopy. Ginagamit ito para sa in vivo na pag-aaral ng mga mikrobyo sa mga katutubong hindi nabahiran na paghahanda. Ang dark field microscopy ay batay sa phenomenon ng light diffraction sa ilalim ng side illumination ng mga particle na nasuspinde sa isang likido ( Tyndall effect). Ang epekto ay nakakamit gamit ang isang paraboloid o cardioid condenser, na pumapalit sa conventional condenser sa isang biological microscope (Fig. 1.3). Sa ganitong paraan ng pag-iilaw, tanging ang mga sinag lamang na sinasalamin mula sa ibabaw ng bagay ang pumapasok sa lens. Bilang resulta, ang mga particle na kumikinang na maliwanag ay nakikita sa isang madilim na background (hindi maliwanag na larangan ng view). Ang paghahanda sa kasong ito ay may form na ipinapakita sa Fig. 1.4, b (sa insert).
Phase contrast microscopy. Idinisenyo para sa pag-aaral ng mga katutubong gamot. Ginagawang posible ng phase-contrast device na makakita ng mga transparent na bagay sa pamamagitan ng mikroskopyo. Ang liwanag ay dumadaan sa iba't ibang biological na istruktura sa iba't ibang bilis, na nakasalalay sa optical density ng bagay. Bilang isang resulta, ang isang pagbabago sa yugto ng liwanag na alon ay nangyayari, na hindi nakikita ng mata. Ang phase device, na kinabibilangan ng isang espesyal na condenser at isang lens, ay nagko-convert ng mga pagbabago sa phase ng isang light wave sa mga nakikitang pagbabago sa amplitude. Kaya, ang isang pagtaas sa pagkakaiba sa optical density ng mga bagay ay nakamit. Nakakakuha sila ng mataas na contrast, na maaaring maging positibo o negatibo. Ang isang positibong phase contrast ay isang madilim na imahe ng isang bagay sa isang maliwanag na larangan ng view, ang isang negatibo ay isang maliwanag na imahe ng isang bagay laban sa isang madilim na background (tingnan ang Fig. 1.4; sa insert).
Para sa phase-contrast microscopy, isang ordinaryong mikroskopyo at isang karagdagang phase-contrast device na KF-1 o KF-4 (Fig. 1.5), pati na rin ang mga espesyal na illuminator, ay ginagamit.
Luminescence (o fluorescence) microscopy. Batay sa phenomenon ng photoluminescence.
Luminescence- ang luminescence ng mga sangkap na nagmumula sa ilalim ng impluwensya ng panlabas na radiation: liwanag, ultraviolet, ionizing, atbp. Photoluminescence - luminescence ng isang bagay sa ilalim ng impluwensya ng liwanag. Kung iilawan mo ang isang luminescent na bagay na may asul na ilaw, pagkatapos ay naglalabas ito ng mga sinag ng pula, orange, dilaw o berde. Ang resulta ay isang kulay na imahe ng bagay.
kanin. 1.5. Phase contrast device, a - mga layunin ng phase; b - pantulong na mikroskopyo; c - phase kapasitor.
Ang haba ng daluyong ng ibinubuga na liwanag (kulay ng luminescence) ay depende sa physicochemical structure ng luminescent substance.
Pangunahin luminescence ng mga biological na bagay (sariling, o bioluminescence) ay sinusunod nang walang paunang paglamlam dahil sa pagkakaroon ng sarili nitong mga luminescent na sangkap, pangalawa (hovering) - nangyayari bilang isang resulta ng mga paghahanda sa paglamlam na may mga espesyal na luminescent dyes - fluorochromes(acridine orange, auromin, corifosfine, atbp.). Kung ikukumpara sa mga maginoo na pamamaraan, ang luminescence microscopy ay may isang bilang ng mga pakinabang: ang kakayahang suriin ang mga buhay na microbes at makita ang mga ito sa materyal na pagsubok sa mababang konsentrasyon dahil sa mataas na antas ng kaibahan.
Sa pagsasanay sa laboratoryo, ang fluorescence microscopy ay malawakang ginagamit upang kilalanin at pag-aralan ang maraming mikrobyo.
Electron microscopy. Nagbibigay-daan sa iyong pagmasdan ang mga bagay, na ang mga sukat nito ay nasa labas ng resolution ng light microscope (0.2 microns). Ang electron microscope ay ginagamit upang pag-aralan ang mga virus, ang pinong istraktura ng iba't ibang microorganism, macromolecular structures at iba pang sub-microscopic na bagay. Ang mga light ray sa naturang mga mikroskopyo ay pinalitan ng isang electron flux, na sa ilang mga acceleration ay may wavelength na mga 0.005 nm, i.e. halos 100,000 beses na mas maikli kaysa sa wavelength ng nakikitang liwanag. Ang mataas na resolution ng electron microscope, na umaabot sa 0.1-0.2 nm, ay ginagawang posible na makakuha ng kabuuang kapaki-pakinabang na magnification na hanggang 1,000,000.
Kasama ng mga device ng "translucent" na uri, ginagamit nila pag-scan ng mga mikroskopyo ng elektron, pagbibigay ng relief image ng object surface. Ang kapangyarihan ng paglutas ng mga device na ito ay mas mababa kaysa sa "transmission" type electron microscopes.
Mga panuntunan para sa pagtatrabaho sa isang mikroskopyo
Kasama sa pagtatrabaho sa anumang light microscope ang pag-install ng tamang pag-iilaw ng field of view at ang specimen at ang mikroskopya nito na may iba't ibang layunin. Ang pag-iilaw ay maaaring natural (liwanag ng araw) o artipisyal, kung saan ginagamit ang mga espesyal na mapagkukunan ng ilaw - mga illuminator ng iba't ibang mga tatak.
Kapag ang mikroskopya ng mga paghahanda na may isang immersion lens, ang isang tiyak na pagkakasunud-sunod ay dapat na mahigpit na sumunod sa:
1) maglagay ng isang patak ng langis ng paglulubog sa isang maruming pahid na inihanda sa isang slide at ilagay ito sa isang slide, na sinisiguro ito ng mga clamp;
2) i-on ang revolver sa 90x o 10Ох mark ng layunin ng paglulubog;
3) maingat na ibaba ang tubo ng mikroskopyo hanggang ang layunin ay nahuhulog sa isang patak ng langis;
4) itakda ang tinatayang focus gamit ang macrometric screw;
5) isagawa ang panghuling pagtutok ng paghahanda gamit ang isang micrometric na tornilyo, pinaikot ito sa loob isang liko lang. Huwag hayaang madikit ang lens
paratom, dahil ito ay maaaring humantong sa pagbasag ng takip na salamin o ang frontal lens ng layunin (libreng distansya ng layunin ng paglulubog ay 0.1-1 mm).
Sa pagtatapos ng operasyon ng mikroskopyo, kinakailangan na alisin ang langis mula sa immersion lens at ilipat ang revolver sa isang maliit na 8x na layunin.
Para sa dark-field at phase-contrast microscopy, ginagamit ang mga katutubong paghahanda ("durog" drop, atbp., tingnan ang paksa 2.1); microscopy na may 40x na layunin o isang espesyal na layunin ng immersion na may iris diaphragm na nagbibigay-daan sa iyong isaayos ang numerical aperture mula 1.25 hanggang 0.85. Ang kapal ng mga slide ay hindi dapat lumagpas sa 1 - 1.5 mm, cover slide - 0.15 - 0.2 mm.