Современные методы диагностики вич-инфекции. Диагностика вич-инфекции Скрининговый метод диагностики вич инфекции

Диагностика ВИЧ– одна из первостепенных задач, что стоят перед работниками кожно-венерологического диспансера, а также сотрудниками поликлиники.

Заболевание характеризуется врачами, как очень коварное. Характеризуется хроническим течением и не поддается полноценному лечению. Его важно своевременно выявлять, чтобы брать под контроль и предотвращать бесконтрольное распространение. В чем особенности вируса иммунодефицита человека, и как им можно заразиться, часто интересуются пациенты.

Какие есть способы диагностики болезни, и какие признаки позволяют заподозрить инфицирование?

Сегодня отовсюду можно услышать о том, насколько опасна ВИЧ-инфекция. Однако мало кто объясняет, в чем эта опасность заключается. В результате пациенты обладают неполным набором информации и, как следствие, не воспринимают угрозу всерьез. А ведь ВИЧ отличается крайней опасностью. Его относят к медленно прогрессирующим вирусным заболеваниям, склонным к хроническому течению. Поражается при этой патологии в первую очередь иммунная система.

Врачи обращают внимание пациентов на то, что смерть происходит не от самого вируса иммунодефицита, как такового.

Человек погибает от сопутствующих инфекций, обеспечить полноценную защиту от которых организм уже не способен. Также причиной гибели становятся раковые опухоли, с которыми оказывается не в состоянии бороться сниженный иммунитет.

На самом деле механизм воздействия ВИЧ-инфекции на иммунную систему довольно сложен. Как отмечают доктора, пациентам вовсе не обязательно понимать его досконально. Достаточно знать, что заболевание способно снижать уровень иммунитета до критических значений. В результате организм окажется неспособен защищаться от различных воздействий извне, что приведет к гибели рано или поздно.

Как происходит заражение

Важно понимать, что ВИЧ-инфекция сегодня окружена большим количеством самых разнообразных мифов.

Пациенты очень плохо информированы о том, в каких случаях можно заразиться, а когда здоровье находится вне опасности.

Первое, что необходимо запомнить, это то, что ВИЧ отличается очень сильной неустойчивостью в окружающей среде. Это значит, что патогенный микроорганизм способен полноценно и длительно жить только в человеческом теле. Он не переносит нагревания свыше 50 градусов (умирает мгновенно). Также не способен противостоять процессам высыхания. Далеко не все жидкости организма содержат достаточное количество вируса для того, чтобы произошло заражение.

Наибольшую опасность представляют:

  • кровь;
  • предэякулят;
  • сперма;
  • выделения из женского влагалища;
  • лимфа;
  • грудное молоко.

Если любая из этих жидкостей контактирует со слизистыми оболочками, в которых есть микротравмы, или с пораженной травмами кожей, происходит заражение.

Также оно возможно в том случае, если инородная жидкость попадает напрямую в кровоток. Слюна и слезы, вопреки распространенному мнению, угрозы не представляют. Из-за особенностей вируса и его низкой выживаемости передается он несколькими способами:

  • половой путь т.е. при незащищенных половых контактах, которые неминуемо влекут за собой соприкосновение биологических жидкостей и восприимчивых к патогену слизистых оболочек организма;
  • парентеральный путь т.е. перенос вируса с кровью при ее переливании или из-за использования нестерильного инструментария в медицинских целях;
  • вертикальный путь т.е. от матери к ребенку (сегодня если женщина принимает антиретровирусную терапию и отказывается от кормления грудью, вероятность заражения ребенка в родах сводится к минимуму).

Важно понимать, что если для заражения через кожу микротравмы или открытые раны обязательны, то для заражения через слизистую это не обязательно условие. Объясняется разница тем, что слизистые оболочки и кожные покровы человеческого организма имеют совершенно разное строение. Эту разницу необходимо учитывать.

По каким признакам заподозрить ВИЧ

Многие пациенты интересуются вопросом о том, по каким признакам обычно можно заподозрить заражение вирусом иммунодефицита человека.

  • необоснованное повышение температуры системного типа, которое нельзя объяснить какой-либо другой инфекцией, и которое сохраняется в течение длительного времени, несмотря на предпринимаемые для лечения меры;
  • сильное увеличение лимфатических узлов в размерах (в первую очередь страдают узлы в области паха, но возможно и их вовлечение во всем организме);

  • сильное снижение массы тела, которое нельзя объяснить диетами, стрессами, гормональными сбоями и другими причинами;
  • жалобы на расстройства стула, которые преследуют пациента в течение длительного времени, а найти причину, по которой они появились, не удается;
  • выраженная склонность к переходу любых инфекционных заболеваний в хронические формы, причем природа возбудителя особого значения не имеет, хронизируются как бактериальные, так и вирусные патологии;
  • развиваются заболевания, провоцируемые условно-патогенной микрофлорой, которая не представляет угрозы для человека, чей иммунитет работает в полной мере (например, микоплазмоз, уреаплазмоз, кандидоз и др.).

Клиника ВИЧ-инфекции очень неспецифична, как отмечают доктора. Из-за этого часто возникают трудности с постановкой диагноза. Многие пациенты вовсе игнорируют тревожные симптомы, предпочитая не обращаться за врачебной помощью. Даже в том случае, если заболевание сильно сказывается на их общем самочувствии.

Важно понимать, что ВИЧ-инфекция в течение длительного времени может вообще не давать о себе знать. А когда первые признаки появятся, человек может даже не связать их с возможностью своего заражения и делать попытки лечиться в домашних условиях.

Способы диагностики

Лабораторная диагностика ВИЧ разработана довольно давно и с успехом применяется для того, чтобы диагностировать это опасное заболевание.

Недуг нельзя опознать только по симптомам. Поэтому подтверждение диагноза на основании лабораторных методик часто играет решающую роль.

Существуют различные методы диагностики ВИЧ. В России в первую очередь предпочтение отдается иммунному блоттингу, а также ИФА-реакциям. Эти способы используются часто в качестве скрининговых, например, при проверке медицинского персонала.

ИФА-системы

Часто пациенты спрашивают у своих врачей, с какого способа стоит начать диагностический поиск при подозрении на заражение вирусом иммунодефицита человека.

Любой грамотный доктор скажет, что предпочтение стоит отдать иммуноферментному анализу. Именно эта методика на территории России является первым диагностическим этапом.

Принцип работы ИФА прост. В лаборатории врачами были созданы специальные белки. Они способны обнаруживать антитела, вырабатываемые организмом в ответ на контакт с ВИЧ, и взаимодействовать с ними. Затем к системе добавляют специальный фермент-индикатор, который изменяет свой цвет. На конечном этапе материал обрабатывается с помощью специального аппарата, и врач получает итоговый результат.

ИФА пользуется большой популярностью.

Прежде всего из-за того, что получить результаты можно даже в том случае, если с момента внедрения патогенна в организм прошло не более нескольких недель.

Важно понимать, что иммуноферментный анализ определяет не сам вирус в крови, а антитела к нему.

У многих людей они могут начать вырабатываться позже, чем через две недели, из-за чего результат может быть ошибочным. Существует несколько поколений ИФА-тестов.

Самыми современными и высокоточными считаются те, что относятся к 3 и 4 поколениям. Врачи отмечают, что лучше всего, если есть выбор, отдавать предпочтение Европейским реагентам, так как их точность достигает 99%. Сроки получения результатов ИФА составляют в среднем от 2 до 10 дней.

Почему ИФА может быть ложной

Важно понимать, что иммуноферментный анализ может давать как ложноположительные, так и ложноотрицательные результаты. Хотя риск подобного развития событий крайне мал.

Ложноотрицательные результаты пациент может получить в том случае, если анализ был сдан слишком рано, и антитела еще не успели образоваться в организме.

Чтобы исключить подобную реакцию, пациентам рекомендуется сдавать анализ несколько раз с различным промежутком времени.

Ложноположительный тест встречается при некоторых заболеваниях. Например, получить положительные результаты могут пациенты с:

  • алкогольным гепатитом;
  • миеломами в большом количестве;
  • некоторыми аутоиммунными болезнями;
  • женщины в период беременности и др.

При подобных заболеваниях кровь человека пополняется антителами. Они могут напоминать по структуре антитела к ВИЧ, что вводит реагенты в замешательство, провоцируя реакцию. Конечно, в последние годы тестовые системы становятся все более и более чувствительными. Однако пока до конца решить проблему ложных результатов не удалось.

Иммуноблоттинг

В современных условиях поставить положительный диагноз ВИЧ, опираясь только на ИФА, нельзя. Необходимо подтверждение полученных результатов, которое выполняется с помощью реакции иммунного блоттинга (иммуноблоттинг, ИБ).

Чтобы выполнить ИБ, в лаборатории должны присутствовать специальные тестовые полоски. На них наносятся вирусные белки. Перед тем, как проводить анализ, кровь пациента, взятую из вены, подготавливают специальным образом.

Полученный биологический материал добавляют в гель, в котором происходит разделение белков по их весу. Затем в полученную массу опускают предварительно заготовленную полосу.

Полоса намокает (происходит блоттинг), на ней выявляются полосы, если в материале есть белки ВИЧ-инфекции. Если белки отсутствуют, намокание не изменяет внешний вид полосы.

Существует несколько трактовок иммуноблоттинга. Однако по какому бы способу конкретная больница или лаборатория не выполняла расшифровку, вероятность правильности постановки диагноза составляет 99,9%.

Может ли иммуноблоттинг давать неверные результаты, часто интересуются пациенты? Да, это возможно, например, если пациент болен туберкулезом, находится в состоянии беременности, страдает от онкологии.

ПЦР в помощь

ПЦР – еще один метод, который может диагностировать вирус иммунодефицита человека в крови и других биологических жидкостях, где его концентрация достаточно высока.

Как отмечают доктора, полимеразная цепная реакция может дать положительный результат уже через 10 дней после того, как произошел первый контакт организма с инфекцией.

Важно понимать, что ПЦР в ряде случаев дает ложноположительные результаты. Объясняется это тем, что метод обладает очень высокой чувствительностью.

В результате нередко он реагирует на похожие антитела, свидетельствующие о совсем других патологических процессах в организме пациента.

Несмотря на высокую чувствительность и невысокую вероятность получения ложных результатов, ПЦР не используется повсеместно. Объясняется это несколькими факторами. Во-первых, для выполнения полимеразной цепной реакции требуется специальное оборудование, цена на которое довольно велика. Во-вторых, персонал, работающий с оборудованием, должен обладать высокой квалификацией, что тоже может вызывать затруднения. Эти особенности в комплексе делают ПЦР дорогим методом диагностики и, как следствие, доступным далеко не всем.

Несмотря на то, что ПЦР не является скрининговым методом, его применяют, например, для проверки новорожденного на заражение вирусом иммунодефицита человека.

Экспресс-системы для диагностики

Врачи и ученые потратили множество усилий на то, чтобы создать экспресс-тесты для оценки зараженности ВИЧ-инфекцией. Как отмечают доктора, при использовании этих систем есть возможность получить результат уже через 15 минут после того, как тест был проведен.

Экспресс-тесты на ВИЧ строятся на принципе иммунохроматографии. В систему обычно входит полоска, пропитанная специальными реагентами.

Задача пациента состоит в том, чтобы нанести на нее кровь, сперму или любую другую биологическую жидкость, в которой могут содержаться антитела к вирусу.

Если они обнаружатся, то на полоске появятся две цветные полосы, одна из которых контрольная, а другая диагностическая. Если не обнаружатся, то выявится только контрольная полоса.

Важно понимать, что экспресс-тесты не дают 100% гарантии того, что человек не заражен или, напротив, заражен ВИЧ-инфекцией. В любом случае результаты, полученные с их помощью, необходимо подтверждать в лаборатории с помощью иммуноблоттинга.

Тест-системы экспресс типа удобны пациентам, которые хотят в домашних условиях успокоить себя. Однако, как отмечают доктора, даже если с их помощью человек получил отрицательный результат, при подозрениях на негативные изменения в организме все же стоит обратиться к врачу.

К какому врачу обратиться при подозрении на заражение

Многие пациенты задаются вопросом о том, к какому врачу им обращаться в том случае, если есть подозрение на заражение ВИЧ-инфекцией. В первую очередь рекомендуется посетить врача венеролога. Именно этот медицинский работник специализируются на заболеваниях, которые способны передаваться от человека к человеку половым путем.

Венеролог сможет провести грамотный осмотр, собрать анамнез и принять решение о том, какие обследования необходимы пациенту для точной постановки диагноза. По своему усмотрению он также может направить пациента в инфекционную больницу. Особенно в том случае, если все же подозревает у него ВИЧ.

Вирус иммунодефицита человека – распространенное заболевание. Столкнуться с ним может любой человек, ведущий активную половую жизнь.

Знание особенностей распространения и диагностики этой болезни в современных реалиях является жизненно-необходимым, если пациент хочет сохранить свое здоровье и долголетие. Только своевременное обращение к доктору позволит взять инфекцию под контроль и защититься от нее!

Перед тестированием или скринингом на антитела к ВИЧ стоят две широкие, но очень четко определенные цели - выявление случаев и эпидемиологический надзор. При выявлении случаев прежде всего нужно уточнить статус инфицированности ВИЧ каждого данного индивидуума для назначения соответствующего лечения или для наблюдения с принятием надлежащих мер.

Цель эпидемиологического надзора заключается в оценке распространенности ВИЧ, распределения случаев инфекции и ее тенденций в группе или целой популяции.

Чувствительность теста на антитела к ВИЧ есть мера его способности точно выявлять эти антитела в пробе, а специфичность теста - мера его способности точно подтверждать отсутствие антител, если их в пробе нет. В идеале чувствительность и специфичность теста должны достигать 100%. На практике же ни один биологический тест этому требованию не удовлетворяет и тем не менее применяемые тесты на антитела к ВИЧ принадлежат к числу наиболее чувствительных и специфичных тестов, имеющихся в настоящее время

Лабораторная диагностика СПИДа состоит в проведении вирусологических, серологических, иммунологических исследований материала от больных лиц с подозрением на это заболевание.

При вирусологических исследованиях с целью выделения вируса могут быть использованы первичные культуры мононуклеарных клеток крови. Выделение и идентификация вируса методически сложны и могут выполняться в специализированных лабораториях. Наиболее эффективным методом диагностики, используемым в настоящее время для повседневных массовых обследований, является обнаружение антител к вирусу иммунодефицита человека. Антитела к ВИЧ могут появляться к концу первого месяца заражения. Поданным ряда авторов, для развитиясероконверсии требуется от 4-7 недель до 6 месяцев и больше. Наличие антител имеет диагностическое значение при СПИДе или указывает на риск его развития. Антитела - не только серологический маркер СПИДа. Выявляясь в предклинической фазе заболевания, они позволяют осуществить его раннюю диагностику. Особую значимость их наличие приобретает для обнаружения носителей. Антитела выявляются в течение многих лет, практически на протяжении всей жизни. Исследователи установили параллелизм в выявлении вируса и антител к нему, т. е. наличие антител к вирусу иммунодефицита указывает на высокую вероятность того, что человек является вирусоносителем.

Антитела к антигену ВИЧ, появившись в инкубационном периоде, продолжают интенсивно вырабатываться с развитием болезни, так как антигенное раздражение стимулируется и вирионами, выделяющимися из зараженных лимфоцитов, и субвирионными компонентами, попадающими в кровоток при распаде зараженных клеток, и зараженными лимфоцитами. В то же время провирус, встроенный в геном зараженных клеток, остается недоступным для специфических антител. Этим и объясняется, казалось бы, парадоксальный факт: чем больше антител к вирусу иммунодефицита человека в сыворотке крови, тем легче выделить сам вирус от больного. Происходит это потому, что антитела, вырабатывающиеся в ответ на инфекцию вируса, не являются нейтрализующими и вследствие этого не оказывают заметного влияния на вирус, а просто присутствуют в организме вместе с ним. Для обнаружения антител (AT) к вирусу СПИДа разработан ряд тестов, позволяющих осуществить исследования на достаточно высоком уровне специфичности и чувствительности. Это методы твердофазного радиоиммунологического анализа, радиоиммунопреципитации, иммунофлюоресцен-ции, иммуноферментного анализа и иммунного блотинга. Наиболее широкое применение в практике нашли методы иммуноферментного анализа (ИФА), который отличается высокой чувствительностью, возможностью количественного и визуального учета результатов реакции, что делает метод доступным для лаборатории любого уровня. В ИФА используются зарубежные и отечественные тест-системы.

Надо проявлять осторожность в отношении детей, рожденных от инфицированных матерей. При отсутствии клиники ребенок считается инфицированным в том случае, если AT к ВИЧ сохраняются после года. При получении положительного результата в ИФА необходимо трехкратно протестировать сыворотки, давшие однократно положительные результаты, и подтвердить положительный результат в независимой системе - иммунном блотинге

Обнаружение AT в реакции ИФА не дает достаточной информации, так как не говорито состоянии исследуемого, а свидетельствует лишь об инкубации, о болезни или о наличии бессимптомной инфекции. Иммунный блотинг дает большуюинформацию.таккакналичие AT ко многим антигенам ВИЧ характерно для выраженной болезни, в то время как реакция с 1-2 антигенами более характерна для слабовыраженного инфекционного процесса

Информативным является подсчет количества Т (хелперов) и соотношения Т4 к Те (супрессоров) лимфоцитов, определяемых с помощью моно-кпональных антител. Важным критерием заболевания может служить резкое увеличение количества иммуноглобулинов, особенно А и V. В общем клиническом анализе крови о заболевании может свидетельствовать лимфопения, лейкопения, эритропения, тромбоцитопения, эозинофилия.

Тесты на ВИЧ, используемые для эпидемиологического надзора, не должны обладать такой же точностью, какая требуется для клинических целей. Однако при очень низкой пораженности ВИЧ в популяции все положительные пробы необходимо исследовать повторно в дополнительных тестах.

Сбор крови для теста на антитела к ВИЧ или для скрининга может сопровождаться регистрацией фамилий обследуемых (поимененный сбор), либо производиться без регистрации фамилий или индивидуальной идентификационной информации (анонимный сбор) (табл. 2).

Для анонимного скрининга без учета идентификационной информации характерны следующие моменты: используются пробы крови, собранные для других целей; гарантируется анонимность благодаря тому, что идентификационные данные не собираются, либо не учитываются; не требуется получать согласия обследуемых; не требуется контакт с консультационными и социальными службами; наконец, что самое важное, сводятся к минимуму ошибки в статистических оценках, зависящие от уровня участия населения.

Хотя при анонимном исследовании на ВИЧ можно получить более точные данные, этот метод имеет следующие недостатки: он не может устранить потенциальное смещение оценки, обусловленное отбором; данные о связанном с высоким риском поведении и других важных переменных недоступны и не могут быть собраны ретроспективно; невозможно установить контакт с пораженными ВИЧ лицами, чтобы сообщить им об их состоянии; обследование можно проводить только в группах лиц, у которых кровь взята для других целей.

В районах, где распространенность ВИЧ-инфекций считается очень низкой, надзор за нею в рамках системы здравоохранения должен прежде всего быть направлен на отдельных лиц или группы населения, для которых характерно поведение, связанное с наибольшим риском заражения Повсеместно к ним относятся лица, имеющие большое число половых партнеров

Кровь для исследования на ВИЧ в такой группе риска легче всего брать в центрах, специализирующихся на лечении болезней, передаваемых половым путем, или подобных им учреждениях. Если распространено также внутривенное введение наркотиков, пробы крови следует брать у их потребителей в специальных учреждениях. Сбор крови один раз в 3 или 6 месяцев в группах наибольшего риска из географических районов, где таких групп больше всего, будет обычно достаточным. Исключение могут составить такие группы риска, как наркоманы, практикующие внутривенное введение препаратов, для которых могут потребоваться более частные обследования.

Сейчас ВОЗ занимается созданием системы классификации (стади-рования) заболевания для клинических исследований, которую можно также использовать в испытаниях методов лечения, что может иметь также прогностическую ценность. Однако такая система не призвана заменить существующие определения СПИДа, используемые при проведении надзора в системе здравоохранения.

В настоящее время повсеместно разрабатываются системы планового (рутинного) надзора за ВИЧ. Эти системы необходимо адаптировать к существующей эпидемиологической ситуации; так, методы составления выборок в популяциях с очень низкой распространенностью вируса должны обязательно отличаться от применяемых там, где распространенность умеренная или высокая.

Такой надзор предполагает рутинные обследования четко охарактеризованных и доступных групп населения. В него прежде всего следует включать те группы, которые подвергаются наибольшему риску заражения, и в каждой из этих групп необходимо отбирать постоянное заранее установленное число лиц для обследования.

В последние годы анонимный скрининг в наблюдаемых группах без учета идентифицикационных данных получает все большую распространенность как точный и экономически эффективный способ эпидемиологического надзора за ВИЧ-инфекцией в системе здравоохранения.

Рекомендации: Обследование на наличие вируса иммунодефицита человека (ВИЧ ) должно периодически проводиться у лиц, получающих лечение от заболеваний, распространяющихся половым путем, наркоманов, гомосексуалистов, бисексуалов и других лиц, принадлежащих к группам риска. Проверка на ВИЧ должна также предлагаться беременным женщинам и женщинам, предполагающим беременность, находящимся в группе риска по ВИЧ.

Тестирование на вич инфекцию не должно проводиться без согласия и без соответствующей консультации до теста и после него, врачи должны быть осторожны в использовании соответствующих тестов и лабораторий. Лица с позитивным серологическим результатом требуют соответствующей послетестовой консультации. Требуется немедленное установление половых партнеров. Лицам с негативным результатом анализа также требуется посттестовая консультация и повторное тестирование по назначению.

Установлено, что 1-1,5 миллиона человек в США инфицированы ВИЧ . За 10 лет развития ВИЧ приблизительно у 50% инфицированных развился синдром приобретенного иммунодефицита (СПИД), у остальных - другие клинические заболевания, связанные с ВИЧ-инфекцией. В настоящее время не существует лечения, которое может предотвратить летальный исход у больных СПИДом. При пред-лицензионном изучении АЗТ (азидотимидин, зидовудин) только половина пациентов прожила больше года после диагноза; более 5 лет прожило только 15%. Из 82 764 случаев, зарегистрированных ЦКЗ на конец 1988 года, 56% (более 46 000 пациентов) умерли, среди них более 80% лиц, чей диагноз был поставлен до 1985 года.

СПИД - единственное тяжелое заболевание в США, смертность от которого возрастает. Заболеваемость наиболее высока среди молодых людей (25-44 года), и при этом СПИД - одна из основных причин сокращения срока потенциальной продолжительности жизни. Между 1984 и 1987 годами СПИД перешел с 130-го на 7-е место среди основных причин сокращения срока потенциальной продолжительности жизни до 65 лет. СПИД - основная причина смерти среди наркоманов (IV) и больных гемофилией. Между открытием СПИДа в 1981 году и концом 1988 года было зарегистрировано 82 764 случая СПИДа. Прогнозируется, что к концу 1992 года будет зарегистрировано более 365 000 заболеваний и 260 000 человек умрут от СПИДа. В настоящее время на борьбу со СПИДом тратится в США 2,2 миллиарда долларов. Эти расходы должны возрасти до 12 миллиардов в 1992 году.

ВИЧ-инфекция в основном наблюдается у гомосексуалистов и бисексуалов, наркоманов и лиц с гетеросексуальными контактами с инфицированными. Остальные группы риска включают реципиентов при переливании крови, больных гемофелией, и детей, рожденных от инфицированных матерей. Серопозитивные результаты колеблются от 20 до 50% у гомосексуалистов и бисексуалов в зависимости от места жительства и от 5 до 50-65% среди наркоманов, живущих в таких городских агломерациях, как Нью-Йорк. Негры составляют 36% всех зарегистрированных случаев СПИДа и 16% - латиноамериканцы.

В зависимости от географического района количество рожающих женщин, инфицированных ВИЧ , колеблется от 0,02 до 3%. Существует информация, позволяющая предположить, что у беременных женщин, инфицированных ВИЧ, выше смертность от вирусных заболеваний и более высок риск развития СПИДа. Около 30-35% передают вирус своим детям. Три четверти случаев СПИДа у детей до 13 лет связаны с перенатальным заражением.

Эффективность скрининговых тестов на вич инфекцию.

Основным скрининговым тестом для определения антител к ВИЧ является ферментосвязывающий иммунный анализ (ELISA или EIA). ELISA имеет эффективность и чувствительность около 99%, когда прилагаемый набор компонентов используется в оптимальных лабораторных условиях. В обычной практике ложнопозитивные и ложно-негативные реакции появляются чаще. Ложно-негативные реакции обычно возникают из-за биологических причин в первые 6-12 недель после заражения, когда организм зараженных ВИЧ еще не успел выработать регистри руемое число антител. Ложно-позитивные реакции могут вы зываться специфическими серологическими реакциями отдельных лиц с иммунологическими заболеваниями или несколькими болезнями. Для сокращения вероятности ложноположительных реакций анализ с помощью реакции ELISA в серии последовательных тестов может иметь специфичность до 99,8%. Однако даже такая отличная чувствительность ведет к низким значениям заблаговременного распознавания положительной реакции на ВИЧ, когда обследование проводится в группе низкого риска заражения.

Показано, что трое из четырех лиц, имеющих положительную реакцию при повторяющемся тесте ELISA на вич инфекцию , имеют ложно-положительную реакцию, когда распространенность заболевания 30 на 100 000 (предполагается, что тест ELISA имеет чувствительность 98% и специфичность 99,8%).

Также необходимо подтверждать результаты ELISA проведением независимых тестов высокой специфичности на вич инфекцию (например, ««Западное пятно», радиоимунные методы анализа, и непрямые иммунофлюоресцентные методы). «Западное пятно» наиболее распространенный из этих тестов в США.

Поставленные в соответствии со стандартами последовательные тесты ELISA на вич инфекцию с завершающим их тестом ««Западное пятно» имеют уровень ложно-положительных реакций менее, чем 0,001%. Важная проблема состоит в том, что многие лаборатории не используют стандартизованных методов по работе с тестом «Западное пятно», так как точность теста сильно зависит от выбора химических реагентов, квалификации технического персонала и методов анализа результатов, лаборатории, в которых отсутствует должный контроль качества выдают больше ложно-положительных и ложно-отрицательных результатов, чем наблюдается в случае соблюдения оптимальных условий.

Кроме того, некоторые неявные сочетания вирус-специфичных групп белков могут вызвать положительный результат на вич инфекцию при применении теста «Западное пятно». Может также возникнуть необходимость в коррекции ложно-положительных результатов ELISA в случаях, когда «Западное пятно» не дает определенного результата. Это случается в 15-20% тестов, ставящихся в группах низкого риска. Если лицо не заражено, то «Западное пятно» может не давать результатов в течение нескольких месяцев. Использование в будущем вирусных культур может создать третий этап диагностических тестов для сокращения риска диагностической ошибки.

- Вернуться в оглавление раздела " "

Диагностика ВИЧ-инфекции на ранних порах просто необходима. От этого зависит сложность терапии и развитие патологических осложнений. На сегодняшний день существует множество инновационных методов исследования для выявления столь страшного диагноза. Именно об этом и пойдет речь дальше.

Какие существуют методы диагностики ВИЧ-инфекции?

На самом деле существует много методик диагностирования ВИЧ. В среднем они разделены на подгруппы – лабораторное исследование, дифференциальное обследование и аппаратное. Кроме того, нужно учитывать этапы проведения диагностических мероприятий. Обо всем этом и других аспектах подробнее поговорим дальше.

Лабораторная диагностика

Для рассматриваемого метода диагностики необходима высокоспециализированная лаборатория. В таких условиях можно выявить следующие показания:
  • Определяются антитела, антигены возбудителей и иммунные комплексы.
  • При обнаружении вируса, его культивируют и выявляют геномный материал и ферменты.
  • Оценивается функциональность иммунитета.
  • Осуществляется эпинадзор и мониторинг превалентности вируса иммунодефицита человека.
  • Изучается динамика распространения, и определяется популяция.
  • Можно определить степень безопасности трансплантации и гемотрансфузии.
Если выявляется соответствующий ВИЧ-возбудитель, больной направляется на дополнительное обследование. После этого человека ставят на учёт для дальнейшего контроля прогрессирования болезни.

Дифференциальная диагностика

Дифференцируется заболевание по разным причинам:
  • При первых симптомах инфицирования ВИЧ, находящегося в фазе обострения, особенно если существует мононуклеозоподобный синдром. Диагностика отталкивается от таких патологий, как мононуклеоз инфекционного характера, сифилис, краснуха, аденовирус, лейкоз в острой форме, иерсиниоз, гиперкератоз.
  • Если ВИЧ переходит в стадию генерализованной лимфаденопатии персистирующего характера, тогда дифференцируются болезни, при которых лимфатические узлы увеличиваются. Например, лимфолейкоз, сифилис, токсоплазмоз, лимфогранулематоз. В этой фазе у больного симптоматика становится более выраженной.
  • Если обнаруживаются вторичные патологии, дифференцируется иммунодефицит, возникший на фоне приема некоторых групп препаратов – лучевая терапия, применение глюкокортикостероидных средств и цитостатических препаратов. Значительно снижается иммунитет и при таких заболеваниях, как миелома, лимфоидная лейкемия, онкологические новообразования и прочее.
  • Если ВИЧ локализуется в ротовой полости, тогда дифференцируются болезни слизистой оболочки рта.

Экспресс-диагностика

На сегодняшний день разработаны даже экспресс-тесты, благодаря которым уже через 15 минут можно определить наличие инфекции ВИЧ. Их существует несколько видов :
  • Самый точный тест – это иммунохроматографический. Тест состоит из специальных полосок, на которые наносится капиллярная кровь, моча или слюна. Если выявляются антитела к ВИЧ, то полоска имеет цветную и контрольную линию. Если ответ отрицательный – заметна лишь линия.
  • Наборы домашнего использования «OraSure Technologies1». Разработчик – Америка. Именно этот тест был одобрен организацией «FDA».
  • Существуют и прочие экспресс-тесты, но они не обладают одобрением специалистов, поэтому и нежелательны для проведения теста.

Если выявилась положительная реакция на вирус иммунодефицита человека, необходимо дополнительно провести соответствующее обследование в клинических условиях.

Ранняя диагностика

Ранняя диагностика ВИЧ существует для того, чтобы своевременно определить риски по поражению иммунитета. Благодаря этому болезнь купируется на начальных этапах, в результате чего инфицирование других внутренних органов снижается к минимуму.

Чтобы самостоятельно диагностировать патологию на ранних стадиях, обратите внимание на симптоматику, которая при этом существует:

Полимеразная цепная реакция

ПЦР или полимеразная цепная реакция используется для определения любого инфекционного возбудителя, в том числе и вируса ВИЧ. В данном случае выявляется его РНК, причем выявить возбудитель можно на очень ранних стадиях (после заражения должно пройти минимум 10 дней).

Это довольно дорогостоящая диагностика, но в некоторых случаях может давать ложный результат. Поэтому при обследовании на ВИЧ дополнительно применяются и другие методики.



Количественное выражение полимеразной цепной реакции нужно для определения скорости развития ВИЧ и осложнений, например, СПИДа. Это позволяет своевременно определить прогноз на длительность жизни ВИЧ-инфицированного больного.

Иммунный блоттинг

Иммунный блоттинг является последним методом обследования больного перед точной постановкой диагноза. В основе методики лежит использование специализированной полоски (нитроцеллюлозной) с вирусными белками. Врач собирает венозную кровь, после чего отправляет её на обработку. После этого процесса белки сыворотки разделяются в гелеобразной субстанции, исходя из молекулярной массы и заряда. Для этого используется аппаратура с действующим электрическим полем. Затем в данный гель помещается вышеуказанная полоска и промакивается, то есть подвергается блоттингу. Это осуществляется в специализированной камере.

Результат определяется по связыванию белков крови с белками, нанесенными на нитроцеллюлозную полоску. Если ВИЧ присутствует в организме больного, то просвечиваются единые линии. Существуют определенные показатели выявления линий, которые сигнализируют о наличии ВИЧ. Но бывают и заниженные цифры. В этом случае существует риск развития начальной стадии вируса иммунодефицита человека, образования онкологических опухолей, туберкулеза, трансфузии крови.

ИФА-тест

ИФА-тест относится к скрининговому методу обследования при подозрениях на ВИЧ. Исследование осуществляется в лабораторных условиях. Именно там создаются специфические белки заболевания, которые способны уловить белки, вырабатываемые человеческим организмом. При взаимодействии с реагентами меняется цвет индикатора. Таким образом, выявляется не сам возбудитель, а антитела к вирусу. Данный тест может выявить вирус иммунодефицита человека на ранних стадиях развития.

Существует несколько видов ИФА тестов, но используются только последние разработки – 3 и 4 поколение. Методика основана на сборе кровяной жидкости из вены. Существует определенная подготовка – пациент не должен потреблять пищу на протяжении 8-ми часов до сдачи анализа. Поэтому кровь собирается натощак в утреннее время.

Как проводят диагностику во время инкубационного периода?

Инкубационный период вируса ВИЧ составляет 90 дней. В этот промежуток выявить наличие патологии сложно, но это сделать можно посредством ПЦР.

После этого на протяжении года человек находится под пристальным вниманием докторов и проходит множественное обследование. Только через этот период можно с точностью установить диагноз – ВИЧ.

Особенности диагностики у детей

Если рождается ребенок у женщины с диагнозом вируса иммунодефицита человека, младенец обследуется на протяжении 3-х первых лет жизни. Дело в том, что антитела матери могут этот период находиться в кровяной жидкости ребенка. Но при этом даже анализы крови не подтверждают инфицирование. Конечно, существует множество случаев, когда болезнь устанавливается сразу же после рождения. Подробно о беременности при ВИЧ-инфекции .

Первые анализы на ВИЧ у ребенка берут на вторые сутки после появления на свет. Потом по достижении 2-х месяцев, затем каждые 4 месяца.

Для выявления патологии в детском возрасте используются серологические методики обследования, ПЦР. Именно последний вид диагностирования недуга позволяет выявить на первых месяцах жизни младенца ДНК и РНК вируса. Для этого у малыша осуществляется сбор крови, которая впоследствии размещается в пробирку, содержащую консервант ЭДТА. Далее материал хранится 2 дня при температуре, не превышающей 8-ми градусов. Но и замораживать кровь не допустимо. Также может быть использована и сухая кровяная жидкость, которая получена из цельной крови и высушена.


Этапы проведения диагностики

Диагностические мероприятия по выявлению вируса иммунодефицита человека проводятся в три основных этапа:
  • Предварительная сортировка, она же скрининг.
  • Референтная диагностика.
  • Подтверждающий этап или экспертная диагностика.

Скрининг – предварительная сортировка

Предварительный этап обследования позволяет определить общие антитела посредством иммуноферментного анализа, то есть ИФА. Можно получить информацию о наличии вируса уже через 3 месяца после заражения. Но были зафиксированы случаи выявления возбудителя в более ранних стадиях – через 3 недели.

Нужно знать, что ИФА может при некоторых условиях дать ложноположительный результат. Это может быть в период вынашивания ребенка, при аутоиммунных болезнях (псориазе, ревматизме, волчанке и т. д.), заболевании Эпштейн-Бара и прочих патологиях.

Референтная диагностика

На данном этапе используются разнообразные тестирования минимум дважды, максимум трижды. Если в двух случаях результат положительный – требуется этап подтверждения.

Подтверждающий этап – экспертный

На данном этапе проводится диагностика с помощью иммунного блоттинга. Определяются антитела соответственно к определенным белкам возбудителя. Результат обычно точный, но бывают и случаи ложного положительного ответа. Такое возможно при терминальной степени развития СПИДа и в период затишья заболевания ВИЧ. Поэтому важно через определенное время пройти процедуру дополнительно.

Ошибки при проведении диагностики


Как это ни парадоксально, но существует возможность получения ложноположительного результата. Обычно такое происходит при домашнем тестировании, особенно в случаях использования экспресс-тестов. В клинических условиях такое возможно только при определенных заболеваниях или положениях:

  • период беременности;
  • перекрестная реакция организма;
  • аутоиммунные патологические нарушения;
  • простудные заболевания в стадии обострения;
  • онкологические новообразования;
  • туберкулез;
  • склероз.

Особенность – если человек инфицирован вирусами и грибками, то результат тестирования может быть тоже ложным. Особенно такое отмечается при аллергических состояниях.

Подготовка к сдаче анализов

Очень важно соблюдать правила подготовки к сдаче анализов на ВИЧ, потому что от этого зависит точность получения результата:
  • В первую очередь, Вам необходимо посетить соответствующего специалиста, чтобы он дал Вам точные указания по мероприятиям подготовки.
  • Анализы крови собираются всегда натощак. Поэтому перед выходом в клинику нельзя ничего кушать. Ваше последнее потребление пищи должно осуществляться не позже 21:00.
  • Запрещено курить в день сдачи анализов.
  • Нельзя накануне употреблять алкогольные напитки.
  • Если Вы принимаете какие-либо медикаменты, обязательно заранее проконсультируйтесь с доктором. Потому что многие препараты перед сдачей анализов на ВИЧ применять запрещено.
  • Не рекомендовано за несколько дней до сбора анализа проводить ультразвуковое исследование.
  • Не желательно за день-два до процедуры кушать чрезмерно жирные блюда и потреблять много сладостей.

Диагностика ВИЧ-инфекции (видео)

Вы можете узнать более подробно о различных методах диагностики ВИЧ от квалифицированных специалистов. Для этого стоит просмотреть следующее видео.