टी lymphocytes, या टी कोशिकाएं(अक्षांश से। टीहाइमस "थाइमस") - लिम्फोसाइट्स जो थाइमस में स्तनधारियों में अग्रदूतों से विकसित होते हैं - प्रीथिमोसाइट्स लाल अस्थि मज्जा से इसमें प्रवेश करते हैं। थाइमस में, टी-लिम्फोसाइट्स टी-सेल रिसेप्टर्स (टीसीआर, अंग्रेजी टीसीआर) और विभिन्न सह-रिसेप्टर्स (सतह मार्कर) प्राप्त करके अंतर करते हैं। वे अधिग्रहित प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया में एक महत्वपूर्ण भूमिका निभाते हैं। वे विदेशी प्रतिजनों को ले जाने वाली कोशिकाओं की पहचान और विनाश प्रदान करते हैं, मोनोसाइट्स, एनके कोशिकाओं की क्रिया को बढ़ाते हैं, और इम्युनोग्लोबुलिन आइसोटाइप को बदलने में भी भाग लेते हैं (प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया की शुरुआत में, बी कोशिकाएं आईजीएम को संश्लेषित करती हैं, बाद में वे आईजीजी के उत्पादन में बदल जाती हैं। , आईजीई, आईजीए)।
टी-लिम्फोसाइटों के प्रकार
टी-सेल रिसेप्टर्स टी-लिम्फोसाइटों के मुख्य सतह प्रोटीन कॉम्प्लेक्स हैं जो प्रमुख हिस्टोकोम्पैटिबिलिटी कॉम्प्लेक्स (एमएचसी) अणुओं से जुड़े संसाधित एंटीजन की पहचान के लिए जिम्मेदार हैं। प्रमुख हिस्टोकम्पैटिबिलिटी कॉम्प्लेक्स (एमएचसी)) एंटीजन-प्रेजेंटिंग कोशिकाओं की सतह पर। टी सेल रिसेप्टर एक अन्य पॉलीपेप्टाइड झिल्ली परिसर, सीडी 3 से जुड़ा हुआ है। सीडी 3 कॉम्प्लेक्स के कार्यों में सेल में सिग्नल ट्रांसडक्शन, साथ ही झिल्ली की सतह पर टी-सेल रिसेप्टर का स्थिरीकरण शामिल है। टी सेल रिसेप्टर अन्य सतह प्रोटीन, इसके सह-रिसेप्टर्स के साथ जुड़ सकता है। कोरसेप्टर और किए गए कार्यों के आधार पर, दो मुख्य प्रकार की टी कोशिकाओं को प्रतिष्ठित किया जाता है।
टी-हेल्पर्स
टी-हेल्पर्स (अंग्रेजी सहायक से - सहायक) - टी-लिम्फोसाइट्स, जिनमें से मुख्य कार्य अनुकूली प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया को बढ़ाना है। वे सीधे संपर्क द्वारा टी-किलर, बी-लिम्फोसाइट्स, मोनोसाइट्स, एनके कोशिकाओं को सक्रिय करते हैं, और विनोदी रूप से, साइटोकिन्स जारी करते हैं। टी-हेल्पर्स की मुख्य विशेषता कोशिका की सतह पर सीडी 4 सह-रिसेप्टर अणु की उपस्थिति है। हेल्पर टी कोशिकाएं एंटीजन को तब पहचानती हैं जब उनका टी सेल रिसेप्टर प्रमुख हिस्टोकोम्पैटिबिलिटी कॉम्प्लेक्स क्लास II अणुओं से बंधे एंटीजन के साथ इंटरैक्ट करता है। प्रमुख हिस्टोकम्पैटिबिलिटी कॉम्प्लेक्स II (MHC-II)).
टी-हत्यारे
टी-हेल्पर्स और टी-किलर एक समूह बनाते हैं प्रभावकारी टी-लिम्फोसाइट्सप्रतिरक्षा प्रतिक्रिया के लिए सीधे जिम्मेदार। इसी समय, कोशिकाओं का एक और समूह होता है नियामक टी-लिम्फोसाइट्स, जिसका कार्य प्रभावकारी टी-लिम्फोसाइटों की गतिविधि को विनियमित करना है। टी एफेक्टर सेल गतिविधि के नियमन के माध्यम से प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया की ताकत और अवधि को संशोधित करके, नियामक टी कोशिकाएं शरीर के अपने एंटीजन के प्रति सहिष्णुता बनाए रखती हैं और ऑटोइम्यून बीमारियों के विकास को रोकती हैं। दमन के कई तंत्र हैं: प्रत्यक्ष, कोशिकाओं के बीच सीधे संपर्क के साथ, और दूर, दूरी पर किया जाता है - उदाहरण के लिए, घुलनशील साइटोकिन्स के माध्यम से।
टी-लिम्फोसाइट्स
टी-लिम्फोसाइट्स संशोधित टी-सेल रिसेप्टर के साथ कोशिकाओं की एक छोटी आबादी है। अधिकांश अन्य टी कोशिकाओं के विपरीत, जिनके रिसेप्टर का निर्माण होता है α (\displaystyle \alpha )और β (\displaystyle \बीटा )सबयूनिट्स, टी-सेल रिसेप्टर (\displaystyle \gamma\delta )-लिम्फोसाइट्स बनते हैं (\displaystyle \गामा )और (\displaystyle \delta )उप इकाइयां ये सबयूनिट एमएचसी प्रोटीन द्वारा प्रस्तुत पेप्टाइड एंटीजन के साथ बातचीत नहीं करते हैं। यह मान लिया है कि (\displaystyle \gamma\delta )टी-लिम्फोसाइट्स लिपिड एंटीजन की पहचान में शामिल हैं।
टी शामक
टी-लिम्फोसाइट्स जो प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया का केंद्रीय विनियमन प्रदान करते हैं।
थाइमस में अंतर
टी-लिम्फोसाइटों के विभेदन के चरण
सभी टी कोशिकाएं लाल अस्थि मज्जा हेमटोपोइएटिक स्टेम कोशिकाओं से उत्पन्न होती हैं जो थाइमस की ओर पलायन करती हैं और अपरिपक्व में अंतर करती हैं थायमोसाइट्स. थाइमस एक पूरी तरह कार्यात्मक टी सेल प्रदर्शनों की सूची के विकास के लिए आवश्यक माइक्रोएन्वायरमेंट बनाता है जो एमएचसी-सीमित और आत्म-सहिष्णु है।
विभिन्न सतह मार्करों (एंटीजन) की अभिव्यक्ति के आधार पर थायमोसाइट भेदभाव को विभिन्न चरणों में विभाजित किया गया है। प्रारंभिक चरण में, थायमोसाइट्स सीडी4 और सीडी8 सह-रिसेप्टर्स को व्यक्त नहीं करते हैं और इसलिए उन्हें डबल नेगेटिव (अंग्रेजी डबल नेगेटिव (डीएन)) (सीडी4-सीडी8-) के रूप में वर्गीकृत किया जाता है। अगले चरण में, थायमोसाइट्स दोनों कोरसेप्टर्स को व्यक्त करते हैं और उन्हें डबल पॉजिटिव (Eng। डबल पॉजिटिव (DP)) (CD4+CD8+) कहा जाता है। अंत में, अंतिम चरण में, कोशिकाओं का चयन किया जाता है जो केवल एक सह-रिसेप्टर्स (इंग्लैंड। सिंगल पॉजिटिव (एसपी)) को व्यक्त करते हैं: या तो (सीडी 4+) या (सीडी 8+)।
प्रारंभिक चरण को कई उप-चरणों में विभाजित किया जा सकता है। तो, DN1 सबस्टेज (अंग्रेजी डबल नेगेटिव 1 ) पर, थायमोसाइट्स में मार्करों का निम्नलिखित संयोजन होता है: CD44 + CD25 -CD117 +। मार्करों के इस संयोजन के साथ कोशिकाओं को प्रारंभिक लिम्फोइड पूर्वज भी कहा जाता है। प्रारंभिक लिम्फोइड पूर्वज (ईएलपी)) अपने विभेदन में प्रगति करते हुए, ईएलपी सक्रिय रूप से विभाजित होता है और अंत में अन्य प्रकार की कोशिकाओं (उदाहरण के लिए, बी-लिम्फोसाइट्स या मायलोइड कोशिकाओं) में बदलने की क्षमता खो देता है। DN2 सबस्टेज (इंग्लैंड। डबल नेगेटिव 2 ) में जाकर, थायमोसाइट्स CD44 + CD25 + CD117 + को व्यक्त करते हैं और प्रारंभिक टी-सेल पूर्वज बन जाते हैं (इंग्लैंड। प्रारंभिक टी-सेल पूर्वज (ईटीपी)) DN3 सबस्टेज (Eng। डबल नेगेटिव 3) के दौरान ETP सेल में CD44-CD25 + का संयोजन होता है और प्रक्रिया में प्रवेश करता है β-चयन।
β चयन
टी-सेल रिसेप्टर जीन में तीन वर्गों से संबंधित दोहराए जाने वाले खंड होते हैं: वी (इंग्लैंड। चर), डी (इंग्लैंड। विविधता) और जे (इंग्लैंड। जुड़ना)। दैहिक पुनर्संयोजन के दौरान, जीन खंड, प्रत्येक वर्ग से एक, एक साथ जुड़े होते हैं (V(D)J पुनर्संयोजन)। वी (डी) जे खंड अनुक्रमों के यादृच्छिक संयोजन के परिणामस्वरूप प्रत्येक रिसेप्टर श्रृंखला के लिए अद्वितीय चर डोमेन अनुक्रम होते हैं। चर डोमेन के अनुक्रमों के गठन की यादृच्छिक प्रकृति टी कोशिकाओं की पीढ़ी की अनुमति देती है जो बड़ी संख्या में विभिन्न एंटीजन को पहचान सकती हैं और परिणामस्वरूप, तेजी से विकसित होने वाले रोगजनकों के खिलाफ अधिक प्रभावी सुरक्षा प्रदान करती हैं। हालांकि, यही तंत्र अक्सर टी-सेल रिसेप्टर के गैर-कार्यात्मक उप-इकाइयों के गठन की ओर जाता है। रिसेप्टर के β-सबयूनिट को कूटने वाले जीन डीएन3 कोशिकाओं में पुनर्संयोजन से गुजरने वाले पहले व्यक्ति हैं। एक गैर-कार्यात्मक पेप्टाइड के गठन की संभावना को बाहर करने के लिए, β-सबयूनिट प्री-टी-सेल रिसेप्टर के अपरिवर्तनीय α-सबयूनिट के साथ एक कॉम्प्लेक्स बनाता है, जो तथाकथित बनाता है। प्री-टी सेल रिसेप्टर (प्री-टीसीआर)। कार्यात्मक प्री-टीसीआर बनाने में असमर्थ कोशिकाएं एपोप्टोसिस से मर जाती हैं। थायमोसाइट्स जो सफलतापूर्वक β-चयन पारित कर चुके हैं, DN4 सबस्टेज (CD44 -CD25 -) में चले जाते हैं और प्रक्रिया से गुजरते हैं सकारात्मक चयन.
सकारात्मक चयन
कोशिकाएं जो अपनी सतह पर प्री-टीसीआर व्यक्त करती हैं, वे अभी भी प्रतिरक्षात्मक नहीं हैं, क्योंकि वे प्रमुख हिस्टोकोम्पैटिबिलिटी कॉम्प्लेक्स के अणुओं को बांधने में सक्षम नहीं हैं। टी-सेल रिसेप्टर द्वारा एमएचसी अणुओं की पहचान के लिए थायमोसाइट्स की सतह पर सीडी 4 और सीडी 8 सह-रिसेप्टर्स की उपस्थिति की आवश्यकता होती है। प्री-TCR और CD3 सह-रिसेप्टर के बीच एक कॉम्प्लेक्स के गठन से β-सबयूनिट जीन की पुनर्व्यवस्था का निषेध होता है और साथ ही, CD4 और CD8 जीन की अभिव्यक्ति के सक्रियण का कारण बनता है। इस प्रकार थायमोसाइट्स डबल पॉजिटिव (DP) (CD4+CD8+) बन जाते हैं। डीपी-थाइमोसाइट्स सक्रिय रूप से थाइमस कॉर्टेक्स में चले जाते हैं, जहां वे एमएचसी (एमएचसी-आई और एमएचसी-द्वितीय) के दोनों वर्गों के प्रोटीन को व्यक्त करने वाले कॉर्टिकल एपिथेलियल कोशिकाओं के साथ बातचीत करते हैं। कोशिकाएं जो कॉर्टिकल एपिथेलियम के एमएचसी प्रोटीन के साथ बातचीत करने में असमर्थ हैं, एपोप्टोसिस से गुजरती हैं, जबकि ऐसी बातचीत को सफलतापूर्वक करने वाली कोशिकाएं सक्रिय रूप से विभाजित होने लगती हैं।
नकारात्मक चयन
सकारात्मक चयन से गुजरने वाले थाइमोसाइट्स थाइमस की कॉर्टिको-मेडुलरी सीमा की ओर पलायन करना शुरू कर देते हैं। एक बार मज्जा में, थायमोसाइट्स शरीर के अपने प्रतिजनों के साथ बातचीत करते हैं, जो मेडुलरी थाइमिक एपिथेलियल कोशिकाओं (एमटीईसी) पर एमएचसी प्रोटीन के संयोजन में प्रस्तुत किए जाते हैं। अपने स्वयं के प्रतिजनों के साथ सक्रिय रूप से बातचीत करने वाले थायमोसाइट्स एपोप्टोसिस से गुजरते हैं। नकारात्मक चयन स्व-सक्रिय टी कोशिकाओं के उद्भव को रोकता है जो ऑटोइम्यून बीमारियों को पैदा करने में सक्षम हैं, जो शरीर की प्रतिरक्षात्मक सहिष्णुता का एक महत्वपूर्ण तत्व है।
विषय के लिए सामग्री की तालिका "सीडी 8 लिम्फोसाइट्स। एंटीजन (एजी) कोशिकाओं का प्रतिनिधित्व करते हैं। एंटीजन (एजी) का वर्गीकरण।":टी सेल रिसेप्टर. टी-कोशिकाएं दो प्रकार के झिल्ली ग्लाइकोप्रोटीन - टी-सेल रिसेप्टर्स और सीडी 3 का उपयोग करके एंटीजन को पहचानती हैं। टी-सेल रिसेप्टर एक हेटेरोडिमर है जिसमें 40-50 केडी के आणविक भार के साथ ए- और पी-चेन (सभी टी-कोशिकाओं का लगभग 98%) या 5-चेन (लगभग 1.5-2% कोशिकाएं) होते हैं। टी-सेल रिसेप्टर मान्यता प्रतिक्रियाओं में शामिल आईजी-जैसे सेल सतह अणुओं के एक सुपरफैमिली का हिस्सा है। टी सेल रिसेप्टर से ट्रांसमेम्ब्रेन ट्रांसमिशन के तंत्र अज्ञात रहते हैं; संभवतः वे सीडी 3 के कारण हैं, गैर-सहसंयोजक टी-लिम्फोसाइट रिसेप्टर्स के साथ जुड़े हुए हैं।
टी सेल सक्रियण
टी कोशिकाओं को सक्रिय करने के लिएमैक्रोफेज से दो संकेतों की जरूरत है। पहला संकेत एजी की प्रस्तुति है, दूसरा एक सक्रिय कारक (आईएल -1) का स्राव है। उत्तरार्द्ध टी-लिम्फोसाइटों द्वारा आईएल -2 के संश्लेषण को उत्तेजित करता है, जो इन कोशिकाओं (ऑटोक्राइन विनियमन) को सक्रिय करता है। इसी समय, टी कोशिकाओं की झिल्लियों पर IL-2 (CD25) के लिए रिसेप्टर्स की अभिव्यक्ति बढ़ जाती है।
टी-लिम्फोसाइटों की उप-जनसंख्या
सतह मार्करों के आधार पर, कई हैं टी-लिम्फोसाइटों की उप-जनसंख्याविभिन्न कार्यों का निष्पादन। के लिये टी सेल भेदभावमोनोक्लोनल एंटीबॉडी के एक सेट का उपयोग करें जो सतह मार्कर सीडी-एजी का पता लगाता है [अंग्रेजी से। विशिष्टीकरण के गुच्छे]। सभी परिपक्व टी कोशिकाएंएक्सप्रेस सतह सीडी 3-एजी; इसके अलावा, टी-लिम्फोसाइटों की उप-जनसंख्या अन्य सीडी-एजी भी व्यक्त करती है।
सीडी4 + लिम्फोसाइट्स
झिल्ली अणु CD4कोशिकाओं की विभिन्न आबादी को ले जाते हैं, सशर्त रूप से नियामक (सहायक) और प्रभावकारक (T hzt) में विभाजित होते हैं।
टी-हेल्पर्स[अंग्रेज़ी से। मदद करने के लिए] विशेष रूप से एजी को पहचानते हैं और ह्यूमरल प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया के प्रेरण के दौरान मैक्रोफेज और बी कोशिकाओं के साथ बातचीत करते हैं। CD4 + /CD8 + -cells का अनुपात प्रतिरक्षा स्थिति का आकलन करने के लिए एक महत्वपूर्ण पैरामीटर है; सामान्य परिस्थितियों में, CD4 + /CD8 + अनुपात लगभग दो के बराबर होता है और उत्तेजक कारकों की प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया पर प्रमुख प्रभाव को दर्शाता है। कुछ इम्युनोडेफिशिएंसी राज्यों में, अनुपात उलट जाता है (I से कम, यानी CD8 + कोशिकाएं हावी होती हैं), जो इम्यूनोसप्रेसेरिव प्रभावों के प्रमुख प्रभाव को दर्शाता है; कई इम्युनोडेफिशिएंसी (उदाहरण के लिए, एड्स) के रोगजनन को रेखांकित करता है।
एजी-पहचानने वाले टी-लिम्फोसाइट्सलक्ष्य सेल के प्लाज्मा झिल्ली पर एमएचसी अणु के साथ जटिल रूप से वायरल या ट्यूमर एजी के एक विदेशी एपिटोप को "पहचानें"। टी एचआरटी [विलंबित प्रकार की अतिसंवेदनशीलता प्रतिक्रियाओं (डीटीएच) के टी-प्रभावक] डीटीएच प्रतिक्रियाओं में मध्यस्थता करते हैं।
पहला अध्ययन हमेशा एक ल्यूकोसाइट गिनती है (अध्याय "हेमेटोलॉजिकल स्टडीज" देखें)। परिधीय रक्त कोशिकाओं की संख्या के सापेक्ष और निरपेक्ष दोनों मूल्यों का मूल्यांकन किया जाता है।
मुख्य आबादी (टी-कोशिकाएं, बी-कोशिकाएं, प्राकृतिक हत्यारे) और टी-लिम्फोसाइट्स (टी-हेल्पर्स, टी-सीटीएल) की उप-जनसंख्या का निर्धारण। प्रतिरक्षा स्थिति के प्राथमिक अध्ययन और प्रतिरक्षा प्रणाली के गंभीर विकारों का पता लगाने के लिए WHO ने CD3, CD4, CD8, CD19, CD16+56, CD4/CD8 अनुपात के निर्धारण की सिफारिश की। अध्ययन लिम्फोसाइटों की मुख्य आबादी की सापेक्ष और पूर्ण संख्या निर्धारित करने की अनुमति देता है: टी-कोशिकाएं - सीडी 3, बी-कोशिकाएं - सीडी 19, प्राकृतिक हत्यारे (एनके) - सीडी 3-सीडी 16 ++ 56+, टी लिम्फोसाइटों की उप-जनसंख्या (टी- सहायक सीडी3+ सीडी4+, टी-साइटोटॉक्सिक सीडी3+ सीडी8+ और उनका अनुपात)।
शोध विधि
लिम्फोसाइटों के इम्यूनोफेनोटाइपिंग को मोनोक्लोनल एंटीबॉडी का उपयोग करके प्रतिरक्षा प्रणाली की कोशिकाओं पर सतही अंतर एनजाइना के लिए किया जाता है, फ्लो साइटोमीटर पर लेजर फ्लो साइटोफ्लोरोमेट्री का उपयोग किया जाता है।
लिम्फोसाइटों के विश्लेषण के लिए क्षेत्र का चुनाव अतिरिक्त मार्कर सीडी45 के अनुसार किया जाता है, जो सभी ल्यूकोसाइट्स की सतह पर मौजूद होता है।
नमूने लेने और संग्रहीत करने की शर्तें
सुबह में क्यूबिटल नस से लिया गया शिरापरक रक्त, सख्ती से खाली पेट, वैक्यूम सिस्टम में टेस्ट ट्यूब पर संकेतित निशान तक। K2EDTA एक थक्कारोधी के रूप में प्रयोग किया जाता है। नमूना लेने के बाद, रक्त को थक्कारोधी के साथ मिलाने के लिए नमूना ट्यूब को धीरे-धीरे 8-10 बार उल्टा किया जाता है। भंडारण और परिवहन सख्ती से 18-23 डिग्री सेल्सियस पर 24 घंटे से अधिक नहीं के लिए एक ईमानदार स्थिति में।
इन शर्तों का पालन करने में विफलता गलत परिणाम की ओर ले जाती है।
परिणामों की व्याख्या
टी-लिम्फोसाइट्स (CD3+ कोशिकाएं)।बढ़ी हुई मात्रा तीव्र और पुरानी लिम्फोसाइटिक ल्यूकेमिया में देखी गई प्रतिरक्षा प्रणाली की अति सक्रियता को इंगित करती है। रोग की शुरुआत में कुछ वायरल और बैक्टीरियल संक्रमणों में सापेक्ष सूचकांक में वृद्धि होती है, पुरानी बीमारियों का विस्तार होता है।
टी-लिम्फोसाइटों की पूर्ण संख्या में कमी सेलुलर प्रतिरक्षा की कमी को इंगित करती है, अर्थात्, प्रतिरक्षा के सेलुलर प्रभावकारक लिंक की कमी। यह आघात, ऑपरेशन, दिल का दौरा, धूम्रपान, साइटोस्टैटिक्स लेने के बाद विभिन्न एटियलजि, घातक नवोप्लाज्म की सूजन में पाया जाता है। रोग की गतिशीलता में उनकी संख्या में वृद्धि एक चिकित्सकीय रूप से अनुकूल संकेत है।
बी-लिम्फोसाइट्स (CD19+ कोशिकाएं)कमी शारीरिक और जन्मजात हाइपोगैमाग्लोबुलिनमिया और एगैमाग्लोबुलिनमिया के साथ देखी जाती है, प्रतिरक्षा प्रणाली के नियोप्लाज्म के साथ, इम्यूनोसप्रेसेन्ट्स के साथ उपचार, तीव्र वायरल और पुरानी जीवाणु संक्रमण, और प्लीहा को हटाने के बाद की स्थिति।
CD3-CD16++56+ फेनोटाइप के साथ NK लिम्फोसाइट्सप्राकृतिक हत्यारा कोशिकाएं (एनके कोशिकाएं) बड़े दानेदार लिम्फोसाइटों की आबादी हैं। वे वायरस और अन्य इंट्रासेल्युलर एंटीजन, ट्यूमर कोशिकाओं, और एलोजेनिक और ज़ेनोजेनिक मूल की अन्य कोशिकाओं से संक्रमित लक्ष्य कोशिकाओं को नष्ट करने में सक्षम हैं।
एनके कोशिकाओं की संख्या में वृद्धि एंटी-प्रत्यारोपण प्रतिरक्षा की सक्रियता से जुड़ी है, कुछ मामलों में यह ब्रोन्कियल अस्थमा में मनाया जाता है, वायरल रोगों में होता है, घातक नियोप्लाज्म और ल्यूकेमिया में वृद्धि होती है, आक्षेप की अवधि में।
सीडी3+सीडी4+ फेनोटाइप के साथ हेल्पर टी-लिम्फोसाइट्सऑटोइम्यून बीमारियों में निरपेक्ष और सापेक्ष मात्रा में वृद्धि देखी जाती है, यह एलर्जी प्रतिक्रियाओं, कुछ संक्रामक रोगों के साथ हो सकता है। यह वृद्धि प्रतिजन को प्रतिरक्षा प्रणाली की उत्तेजना को इंगित करती है और हाइपररिएक्टिव सिंड्रोम की पुष्टि के रूप में कार्य करती है।
टी कोशिकाओं की पूर्ण और सापेक्ष संख्या में कमी प्रतिरक्षा के नियामक लिंक के उल्लंघन के साथ एक हाइपोरिएक्टिव सिंड्रोम को इंगित करती है, एचआईवी संक्रमण के लिए एक रोगजनक संकेत है; पुरानी बीमारियों (ब्रोंकाइटिस, निमोनिया, आदि), ठोस ट्यूमर में होता है।
सीडी3+ सीडी8+ फेनोटाइप के साथ टी-साइटोटॉक्सिक लिम्फोसाइट्सलगभग सभी पुराने संक्रमणों, वायरल, बैक्टीरियल, प्रोटोजोअल संक्रमणों में वृद्धि पाई गई है। यह एचआईवी संक्रमण की विशेषता है। वायरल हेपेटाइटिस, दाद, ऑटोइम्यून बीमारियों में कमी देखी गई है।
सीडी4+/सीडी8+ अनुपात CD4+/CD8+ (CD3, CD4, CD8, CD4/CD8) के अनुपात का अध्ययन केवल एचआईवी संक्रमण की निगरानी और एआरवी थेरेपी की प्रभावशीलता को नियंत्रित करने के लिए अनुशंसित है। आपको टी-लिम्फोसाइटों, टी-हेल्पर उप-जनसंख्या, सीटीएल और उनके अनुपात की पूर्ण और सापेक्ष संख्या निर्धारित करने की अनुमति देता है।
मूल्यों की सीमा 1.2-2.6 है। जन्मजात इम्युनोडेफिशिएंसी (डिजॉर्ज, नेजेलोफ, विस्कॉट-एल्ड्रिच सिंड्रोम), वायरल और बैक्टीरियल संक्रमण, पुरानी प्रक्रियाओं, विकिरण और जहरीले रसायनों के संपर्क में आने, मल्टीपल मायलोमा, तनाव, उम्र के साथ घटने, अंतःस्रावी रोगों, ठोस ट्यूमर में कमी देखी गई है। यह एचआईवी संक्रमण (0.7 से कम) के लिए एक रोगसूचक संकेत है।
3 से अधिक के मूल्य में वृद्धि - ऑटोइम्यून बीमारियों में, तीव्र टी-लिम्फोब्लास्टिक ल्यूकेमिया, थाइमोमा, पुरानी टी-ल्यूकेमिया।
अनुपात में परिवर्तन किसी दिए गए रोगी में सहायकों और सीटीएल की संख्या से संबंधित हो सकता है। उदाहरण के लिए, रोग की शुरुआत में तीव्र निमोनिया में सीडी 4+ टी कोशिकाओं की संख्या में कमी से सूचकांक में कमी आती है, जबकि सीटीएल नहीं बदल सकता है।
अतिरिक्त शोध और विकृति विज्ञान में प्रतिरक्षा प्रणाली में परिवर्तन का पता लगाने के लिएएक तीव्र या पुरानी सूजन प्रक्रिया की उपस्थिति और इसकी गतिविधि की डिग्री के मूल्यांकन की आवश्यकता होती है, सीडी 3 + एचएलए-डीआर + फेनोटाइप और सीडी 3 + सीडी 16+ के साथ टीएनके कोशिकाओं के साथ सक्रिय टी-लिम्फोसाइटों की संख्या की गणना करने की सिफारिश की जाती है। +56+ फेनोटाइप।
सीडी3+एचएलए-डीआर+ फेनोटाइप के साथ टी-सक्रिय लिम्फोसाइट्सदेर से सक्रियण का एक मार्कर, प्रतिरक्षा अतिसक्रियता का एक संकेतक। इस मार्कर की अभिव्यक्ति से, प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया की गंभीरता और ताकत का अंदाजा लगाया जा सकता है। तीव्र बीमारी के तीसरे दिन के बाद टी-लिम्फोसाइटों पर प्रकट होता है। रोग के अनुकूल पाठ्यक्रम के साथ, यह घटकर सामान्य हो जाता है। टी-लिम्फोसाइटों पर अभिव्यक्ति में वृद्धि पुरानी सूजन से जुड़े कई रोगों से जुड़ी हो सकती है। हेपेटाइटिस सी, निमोनिया, एचआईवी संक्रमण, ठोस ट्यूमर, ऑटोइम्यून बीमारियों के रोगियों में इसकी वृद्धि नोट की गई थी।
एनके लिम्फोसाइट्स सीडी3+सीडी16++सीडी56+ फेनोटाइप के साथटी-लिम्फोसाइट्स जिनकी सतह पर सीडी16++ सीडी 56+ मार्कर होते हैं। इन कोशिकाओं में टी और एनके दोनों कोशिकाओं के गुण होते हैं। अध्ययन को तीव्र और पुरानी बीमारियों के लिए एक अतिरिक्त मार्कर के रूप में अनुशंसित किया जाता है।
परिधीय रक्त में उनकी कमी विभिन्न अंग-विशिष्ट रोगों और प्रणालीगत ऑटोइम्यून प्रक्रियाओं में देखी जा सकती है। विभिन्न एटियलजि, ट्यूमर प्रक्रियाओं की सूजन संबंधी बीमारियों में वृद्धि देखी गई।
टी-लिम्फोसाइट सक्रियण के प्रारंभिक और देर से मार्करों का अध्ययन (CD3+CD25+, CD3-CD56+, CD95, CD8+CD38+)निदान, रोग का निदान, रोग के पाठ्यक्रम की निगरानी और चल रही चिकित्सा के लिए तीव्र और पुरानी बीमारियों में आईएस में परिवर्तन का आकलन करने के लिए अतिरिक्त रूप से निर्धारित किया गया है।
सीडी3+सीडी25+ फेनोटाइप के साथ टी-सक्रिय लिम्फोसाइट्स, आईएल2 रिसेप्टर CD25+ एक प्रारंभिक सक्रियण मार्कर है। T-लिम्फोसाइटों (CD3+) की कार्यात्मक अवस्था का प्रमाण IL2 (CD25+) के लिए व्यक्त रिसेप्टर्स की संख्या से है। हाइपरएक्टिव सिंड्रोम में, इन कोशिकाओं की संख्या बढ़ जाती है (तीव्र और पुरानी लिम्फोसाइटिक ल्यूकेमिया, थाइमोमा, प्रत्यारोपण अस्वीकृति), इसके अलावा, उनकी वृद्धि भड़काऊ प्रक्रिया के प्रारंभिक चरण का संकेत दे सकती है। परिधीय रक्त में, बीमारी के पहले तीन दिनों में उनका पता लगाया जा सकता है। इन कोशिकाओं की संख्या में कमी जन्मजात इम्युनोडेफिशिएंसी, ऑटोइम्यून प्रक्रियाओं, एचआईवी संक्रमण, फंगल और जीवाणु संक्रमण, आयनकारी विकिरण, उम्र बढ़ने, भारी धातु विषाक्तता में देखी जा सकती है।
सीडी8+सीडी38+ फेनोटाइप के साथ टी-साइटोटॉक्सिक लिम्फोसाइट्ससीटीएल लिम्फोसाइटों पर सीडी38+ की उपस्थिति विभिन्न रोगों के रोगियों में नोट की गई थी। एचआईवी संक्रमण, जलने की बीमारी के लिए सूचनात्मक संकेतक। सीडी8+सीडी38+ फेनोटाइप के साथ सीटीएल की संख्या में वृद्धि पुरानी सूजन प्रक्रियाओं, ऑन्कोलॉजिकल और कुछ अंतःस्रावी रोगों में देखी गई है। चिकित्सा के दौरान, दर कम हो जाती है।
सीडी3-सीडी56+ फेनोटाइप के साथ प्राकृतिक हत्यारों की उप-जनसंख्या CD56 अणु एक चिपकने वाला अणु है जो तंत्रिका ऊतक में व्यापक रूप से वितरित होता है। प्राकृतिक हत्यारों के अलावा, यह टी-लिम्फोसाइटों सहित कई प्रकार की कोशिकाओं पर व्यक्त किया जाता है।
इस सूचक में वृद्धि हत्यारा कोशिकाओं के एक विशिष्ट क्लोन की गतिविधि के विस्तार को इंगित करती है, जिसमें सीडी 3-सीडी 16+ फेनोटाइप के साथ एनके कोशिकाओं की तुलना में कम साइटोलिटिक गतिविधि होती है। हेमटोलॉजिकल ट्यूमर (एनके-सेल या टी-सेल लिंफोमा, प्लाज्मा सेल मायलोमा, अप्लास्टिक लार्ज सेल लिंफोमा), पुरानी बीमारियों और कुछ वायरल संक्रमणों के साथ इस आबादी की संख्या बढ़ जाती है।
प्राथमिक इम्युनोडेफिशिएंसी, वायरल संक्रमण, प्रणालीगत पुरानी बीमारियों, तनाव, साइटोस्टैटिक्स और कॉर्टिकोस्टेरॉइड्स के साथ उपचार में कमी देखी गई है।
सीडी95+ रिसेप्टरएपोप्टोसिस के रिसेप्टर्स में से एक है। एपोप्टोसिस एक जटिल जैविक प्रक्रिया है जो शरीर से क्षतिग्रस्त, पुरानी और संक्रमित कोशिकाओं को हटाने के लिए आवश्यक है। CD95 रिसेप्टर प्रतिरक्षा प्रणाली की सभी कोशिकाओं पर व्यक्त किया जाता है। यह प्रतिरक्षा प्रणाली के कामकाज के नियंत्रण में एक महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है, क्योंकि यह एपोप्टोसिस के लिए रिसेप्टर्स में से एक है। कोशिकाओं पर इसकी अभिव्यक्ति एपोप्टोसिस के लिए कोशिकाओं की तैयारी को निर्धारित करती है।
रोगियों के रक्त में CD95+-लिम्फोसाइटों के अनुपात में कमी दोषपूर्ण और संक्रमित स्वयं की कोशिकाओं को नष्ट करने के अंतिम चरण की प्रभावशीलता के उल्लंघन का संकेत देती है, जिससे रोग की पुनरावृत्ति हो सकती है, रोग प्रक्रिया की पुरानीता हो सकती है। ऑटोइम्यून बीमारियों का विकास और ट्यूमर परिवर्तन की संभावना में वृद्धि (उदाहरण के लिए, पैपिलोमाटस संक्रमण के साथ गर्भाशय ग्रीवा का कैंसर)। CD95 अभिव्यक्ति के निर्धारण का मायलो- और लिम्फोप्रोलिफेरेटिव रोगों में रोगसूचक मूल्य है।
वायरल रोगों, सेप्टिक स्थितियों और मादक दवाओं के उपयोग में एपोप्टोसिस की तीव्रता में वृद्धि देखी गई है।
सक्रिय लिम्फोसाइट्स CD3+CDHLA-DR+, CD8+CD38+, CD3+CD25+, CD95।परीक्षण टी-लिम्फोसाइटों की कार्यात्मक स्थिति को दर्शाता है और रोग के पाठ्यक्रम की निगरानी और विभिन्न एटियलजि की सूजन संबंधी बीमारियों के लिए इम्यूनोथेरेपी की निगरानी के लिए अनुशंसित है।
कुछ बैक्टीरिया (तपेदिक, कुष्ठ, प्लेग के प्रेरक एजेंट) के लिए, मैक्रोफेज "निवास स्थान" हैं। एक बार phagolysosomes में phagocytosis के परिणामस्वरूप, रोगजनक एंटीबॉडी और साइटोटोक्सिक टी-लिम्फोसाइट्स दोनों से सुरक्षित हो जाते हैं।
लाइसोसोमल एंजाइमों की गतिविधि को दबाने से, ये बैक्टीरिया सक्रिय रूप से कोशिका के अंदर गुणा करते हैं और इस प्रकार एक तीव्र संक्रामक प्रक्रिया का कारण बन जाते हैं। यह कोई संयोग नहीं है कि उदाहरण के रूप में वर्णित बीमारियों को विशेष रूप से खतरनाक संक्रमणों के रूप में वर्गीकृत किया जाता है।
शरीर में इस बल्कि कठिन स्थिति में, हालांकि, ऐसी ताकतें हैं जो रोगजनकों के प्रसार को रोकती हैं, और वे मुख्य रूप से सूजन की सीडी 4 टी-कोशिकाओं से जुड़ी होती हैं।
प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया के संगठन में इस प्रकार के लिम्फोसाइटों की भागीदारी मैक्रोफेज की सक्रियता के माध्यम से महसूस की जाती है। सक्रिय मैक्रोफेज न केवल इंट्रासेल्युलर रोगजनकों के साथ सामना करते हैं, बल्कि कुछ मामलों में अतिरिक्त गुण प्राप्त करते हैं जो जीवाणुरोधी कार्रवाई से जुड़े नहीं होते हैं, उदाहरण के लिए, कैंसर कोशिकाओं को नष्ट करने की क्षमता।
मैक्रोफेज सक्रियण के लिए दो संकेतों की आवश्यकता होती है।
इनमें से पहला इंटरफेरॉन-गामा (आईएफ-गामा) है। यह भड़काऊ सीडी4 टी कोशिकाओं द्वारा निर्मित सबसे विशिष्ट साइटोकाइन है। हेल्पर टी कोशिकाएं इस साइटोकाइन का स्राव नहीं करती हैं और सामान्य तरीके से मैक्रोफेज को सक्रिय नहीं कर सकती हैं।
मैक्रोफेज की सक्रियता के लिए दूसरा संकेत सतह टीएनएफ-अल्फा है, जो सूजन की टी-कोशिकाओं द्वारा मैक्रोफेज की झिल्ली पर इम्युनोजेन की पहचान के बाद अभिव्यक्ति के लिए प्रेरित होता है। टीएनएफ-अल्फा के एंटीबॉडी दूसरे सिग्नल के प्रभाव को रद्द कर देते हैं।
एंटीजन मान्यता के तुरंत बाद साइटोटोक्सिक टी कोशिकाएं सक्रिय हो जाती हैं, जिससे एपोप्टोसिस या नेक्रोसिस की प्रक्रिया के माध्यम से लक्ष्य कोशिकाओं को नष्ट करने के लिए आणविक तंत्र की संभावित तत्परता का एहसास होता है। इसके विपरीत, भड़काऊ सीडी 4 टी कोशिकाएं, मैक्रोफेज की सतह पर एक एंटीजन को पहचानने के बाद, मैक्रोफेज को सक्रिय करने वाले डे नोवो मध्यस्थों को संश्लेषित करने में घंटों बिताती हैं। माइक्रोवेसिकल्स में एकत्रित नव संश्लेषित साइटोकिन्स, टी कोशिकाओं के संपर्क के स्थल पर मैक्रोफेज में प्रवेश करते हैं। साइटोटोक्सिक टी-लिम्फोसाइटों के मामले में ऐसा सीधा मार्ग, सबसे किफायती और कार्यात्मक रूप से उचित है, क्योंकि यह पड़ोसी, असंक्रमित कोशिकाओं को प्रभावित नहीं करता है।
भड़काऊ टी कोशिकाओं के संपर्क के माध्यम से सक्रिय मैक्रोफेज में और आईएफ-गामा के स्राव के परिणामस्वरूप, जैव रासायनिक परिवर्तनों की एक श्रृंखला शुरू की जाती है जो इन कोशिकाओं को मजबूत जीवाणुरोधी गुण प्रदान करती हैं (चित्र 16)। भड़काऊ टी-कोशिकाओं के साथ मैक्रोफेज की बातचीत की शर्तों के तहत, फागोसोम का एक अधिक प्रभावी संलयन देखा जाता है, जिसने लाइसोसोम के साथ बैक्टीरिया को पकड़ लिया है, जो इंट्रासेल्युलर रोगजनकों को नष्ट करने वाले प्रोटियोलिटिक एंजाइमों को संग्रहीत करते हैं। फागोसाइटोसिस की प्रक्रिया तथाकथित ऑक्सीजन विस्फोट के साथ होती है - ऑक्सीजन रेडिकल्स और नाइट्रिक ऑक्साइड का निर्माण, जिसमें जीवाणुनाशक गतिविधि होती है।
टीएनएफ-अल्फा और आईएफ-गामा की लागत-निर्धारण की शर्तों के तहत, यह प्रक्रिया बहुत अधिक सक्रिय है। इसके अलावा, सक्रिय मैक्रोफेज एमएचसी वर्ग II अणुओं और टीएनएफ-अल्फा रिसेप्टर की अभिव्यक्ति को बढ़ाते हैं, जिससे अतिरिक्त भोली टी कोशिकाओं की भर्ती होती है। घटनाओं का यह पूरा परिसर इंट्रासेल्युलर रोगजनकों के खिलाफ काफी मजबूत अवरोध प्रदान करता है।
मैक्रोफेज के साथ बातचीत करने वाली भड़काऊ टी कोशिकाएं न केवल इंट्रामैक्रोफेज जैव रासायनिक प्रक्रियाओं को बढ़ाने में योगदान करती हैं, बल्कि साथ ही वे स्वयं सक्रिय होती हैं और एंटीजन के लिए एक बहुपक्षीय प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया के आयोजक के रूप में कार्य करती हैं।
चावल। 16.
सीडी 4 भड़काऊ टी-कोशिकाओं की कार्यात्मक गतिविधि।
संक्रमित मैक्रोफेज भड़काऊ सीडी4 टी कोशिकाओं का मुख्य लक्ष्य हैं। सीडी 4 मैक्रोफेज पर इम्युनोजेनिक कॉम्प्लेक्स की मान्यता के परिणामस्वरूप, भड़काऊ टी कोशिकाएं ट्यूमर नेक्रोसिस फैक्टर-अल्फा (टीएनएफ-अल्फा) को अपनी सतह पर व्यक्त करती हैं और इंटरफेरॉन-गामा (आईएफ-गामा) के उत्पादन में वृद्धि करती हैं। साइटोकिन्स की संयुक्त क्रिया फागोलिसोसोम का अधिक कुशल गठन, ऑक्सीजन रेडिकल्स और नाइट्रिक ऑक्साइड का संचय प्रदान करती है, जिसमें जीवाणुनाशक गुण होते हैं, एमएचसी वर्ग II अणुओं की अभिव्यक्ति में वृद्धि होती है, और ट्यूमर नेक्रोसिस फैक्टर-अल्फा का उत्पादन बढ़ता है। मैक्रोफेज में जैव रासायनिक प्रक्रियाओं की ऐसी सक्रियता न केवल बैक्टीरिया के इंट्रासेल्युलर विनाश में योगदान करती है, बल्कि प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया में टी कोशिकाओं के अतिरिक्त समावेश को भी निर्धारित करती है।
रोगजनकों को पुन: उत्पन्न करने से उकसाने वाली संक्रामक प्रक्रिया दो ताकतों के संघर्ष को दर्शाती है - स्वयं रोगज़नक़ और मेजबान की प्रतिरक्षा प्रणाली। उदाहरण के लिए, प्लेग रोगज़नक़ येरसेनिया पेस्टिस में अत्यधिक पोलीमराइज़्ड प्रोटीन I के संश्लेषण को प्रेरित करने की क्षमता होती है, जो एक अम्लीय पीएच पर कोशिका की दीवार पर व्यक्त होने लगती है। यह ज्ञात है कि मैक्रोफेज के साथ रोगज़नक़ के संपर्क के स्थल पर स्थानीय अम्लीकरण होता है। यह प्रोटीन I के संश्लेषण और अभिव्यक्ति को उत्तेजित करता है। मजबूत चिपकने वाले गुणों वाला यह प्रोटीन कोशिका में रोगज़नक़ के अधिक कुशल प्रवेश में योगदान देता है। इसके अलावा, यह रोगज़नक़ को लाइसोसोमल एंजाइमों की कार्रवाई से बचने में मदद करता है। फागोलिसोसोम की अम्लीय स्थितियां इस रोगजनक-सुरक्षात्मक प्रोटीन के संश्लेषण का समर्थन करती हैं।
लंबे समय से इंट्रासेल्युलर बैक्टीरिया से संक्रमित मैक्रोफेज टी कोशिकाओं द्वारा सक्रिय होने की अपनी क्षमता खो सकते हैं। प्रक्रिया में नए मैक्रोफेज का बड़े पैमाने पर समावेश तब होता है जब टीएनएफ-बीटा (लिम्फोटॉक्सिन) और आईएफ-गामा की संक्रमित कोशिकाओं पर एक सहक्रियात्मक प्रभाव के प्रभाव में रोगजनकों को जारी किया जाता है, जो सक्रिय सीडी 4 सूजन के टी-कोशिकाओं के उत्पाद हैं (चित्र 17)। .
चावल। 17
एक जटिल प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया के आयोजक के रूप में सूजन की सीडी 4 टी-कोशिकाएं।
भड़काऊ सीडी 4 टी कोशिकाएं, मैक्रोफेज के साथ बातचीत करते समय, न केवल मैक्रोफेज को सक्रिय करती हैं, बल्कि स्वयं भी सक्रिय होती हैं। साइटोकिन्स के एक पूरे सेट का उत्पादन करके, वे इस प्रकार एक जटिल प्रतिरक्षा प्रक्रिया के आयोजक हैं। साइटोकिन्स की नियामक क्रिया की लक्ष्य कोशिकाएं मैक्रोफेज (1, 2, 5, 6) हैं, टी कोशिकाएं (3), विभेदन के मोनोसाइट-मैक्रोफेज लाइन के अग्रदूत (4)। संक्षेप: आईएफ-गामा - इंटरफेरॉन-गामा, एलटी (टीएनएफ-बीटा) - लिम्फोटॉक्सिन (ट्यूमर नेक्रोसिस फैक्टर-बीटा), आईएल -2 - इंटरल्यूकिन -2, आईएल -3 - इंटरल्यूकिन -3, जीएम-सीएसएफ - ग्रैनुलोसाइट-मैक्रोफेज कॉलोनी -उत्तेजक कारक, एमएचएफ - मैक्रोफेज केमोटैक्टिक कारक (मैक्रोफेज केमोटैक्सिस कारक), एमआईएफ - मैक्रोफेज अवरोधक कारक (मैक्रोफेज अवरोध कारक)।
साइटोकिन्स का यह संयोजन फाइब्रोब्लास्ट्स की मृत्यु के लिए भी प्रभावी है, जो संयोजी ऊतक के मुख्य घटक हैं, जो संक्रमण की साइट पर इम्युनोकोम्पेटेंट कोशिकाओं के प्रवेश को सुनिश्चित करता है। यह स्पष्ट है कि प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया जुटाने की शर्तों के तहत, प्रभावकारी टी कोशिकाओं के पूल को उच्च स्तर पर बनाए रखा जाना चाहिए। मैक्रोफेज-सक्रिय भड़काऊ टी कोशिकाएं आईएल -2 के माध्यम से अतिरिक्त प्रभावकों की भर्ती करती हैं, जो एंटीजन-विशिष्ट टी कोशिकाओं के प्रसार और भेदभाव को बढ़ावा देती हैं।
टी-इफ़ेक्टर्स के अलावा, स्वयं मैक्रोफेज भी भर्ती किए जाते हैं। इसे दो तरह से लागू किया जाता है:
सबसे पहले, आईएल -3 और ग्रैनुलोसाइट-मैक्रोफेज कॉलोनी-उत्तेजक कारक (जीएम-सीएसएफ) के प्रभाव में अस्थि मज्जा में मैक्रोफेज भेदभाव को शामिल करने के माध्यम से;
दूसरे, लिम्फोटॉक्सिन और मैक्रोफेज केमोटैक्टिक कारक के प्रभाव में नवगठित मैक्रोफेज, रक्तप्रवाह से संक्रमण की जगह पर पलायन करना शुरू कर देते हैं, जहां वे बस जाते हैं, मैक्रोफेज-अवरोधक कारक की कार्रवाई का अनुभव करते हैं, जो उनकी गतिशीलता को कम करता है।
रोगज़नक़ की विशिष्ट पहचान के बाद सक्रिय सीडी 4 भड़काऊ टी कोशिकाओं द्वारा उत्पादित साइटोकिन्स का सेट एक सेलुलर प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया के बहु-विषयक विकास के लिए प्रदान करता है। इस प्रकार, माना उप-जनसंख्या की कोशिकाएं पर्याप्त प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया के आयोजकों के रूप में कार्य करती हैं।
सेल सक्रियण को आराम की स्थिति से कार्यात्मक रूप से सक्रिय अवस्था में उनके संक्रमण के रूप में समझा जाता है - मैक्रोफेज प्रतिक्रियाशील ऑक्सीजन प्रजातियों का उत्पादन करते हैं, मस्तूल कोशिकाएं दानों को बाहर निकालती हैं, मांसपेशियों की कोशिकाएं सिकुड़ती हैं, आदि। एक लिम्फोसाइट के मामले में, सक्रियण का अर्थ आराम की स्थिति (G0) से बाहर निकलना भी है, लेकिन थोड़े अलग अर्थ में: एक आराम करने वाली लिम्फोसाइट कोशिका चक्र के बाहर है, और इसकी सक्रियता का अर्थ है चक्र में प्रवेश। लिम्फोसाइटों की सक्रियता का यह परिणाम गहराई से कार्यात्मक है, क्योंकि लिम्फोसाइटों के कार्य की किसी भी अभिव्यक्ति को उनके प्रजनन से पहले होना चाहिए (चूंकि प्रत्येक क्लोन में कोशिकाओं की प्रारंभिक संख्या कम है)। यह प्राकृतिक हत्यारों - लिम्फोसाइटों पर लागू नहीं होता है, जिनकी आबादी में क्लोनल संरचना नहीं होती है। एनके कोशिकाओं की सक्रियता प्रसार से जुड़ी नहीं है और इसका अर्थ है साइटोटोक्सिक कार्य करने के लिए तत्परता की स्थिति में संक्रमण।
टी सेल सक्रियण का आणविक आधार
लिम्फोसाइटों सहित कोशिकाओं का सक्रियण हमेशा कई जीनों की अभिव्यक्ति से जुड़ा होता है। लिम्फोसाइटों के मामले में, सक्रियण सबसे पहले जीन की अभिव्यक्ति के लिए नेतृत्व करना चाहिए जो क्लोन के प्रजनन विस्तार को सुनिश्चित करता है। प्रसार के लिए टी कोशिकाओं की तैयारी का सार मुख्य रूप से ऑटोक्राइन ग्रोथ फैक्टर जीन की अभिव्यक्ति में होता है - आईएल -2 और इसके रिसेप्टर, या बल्कि इस रिसेप्टर की ए-चेन, जो आवश्यक स्तर की आत्मीयता की उपलब्धि सुनिश्चित करता है साइटोकिन, जो रिसेप्टर के लिए अपने कार्यों को करने के लिए एक शर्त के रूप में कार्य करता है। ये दोनों जीन प्रेरक हैं; आराम की स्थिति में, उन्हें बंद कर दिया जाता है, लेकिन एक उत्प्रेरण प्रभाव के जवाब में व्यक्त किया जाता है। जीन को चालू करने का संकेत उसके नियामक (प्रवर्तक) क्षेत्र से आता है, जिसमें कुछ प्रोटीन - प्रतिलेखन कारकों के साथ विशिष्ट बातचीत की साइटें होती हैं। इनमें से कुछ प्रोटीन मूल रूप से सक्रिय रूप में कोशिका में मौजूद होते हैं, लेकिन अधिकांश अनुपस्थित होते हैं और इन्हें नए सिरे से संश्लेषित किया जा सकता है या फॉस्फोराइलेशन या निरोधात्मक सबयूनिट को हटाकर सक्रिय किया जा सकता है। इस प्रकार, सक्रियण का आणविक आधार आवश्यक प्रतिलेखन कारकों का निर्माण है जो प्रेरक जीन को शामिल करना सुनिश्चित करते हैं।
टी-लिम्फोसाइट्स सक्रियण प्रेरकों द्वारा सक्रिय होते हैं। शारीरिक स्थितियों के तहत, ऐसा प्रेरक एक एंटीजेनिक उत्तेजना है। अपने आप में, एपीसी के साथ टी-हेल्पर के संपर्क पर प्रतिजन मान्यता, नाभिक में स्थानीयकृत झिल्ली रिसेप्टर और जीन के स्थानिक पृथक्करण के कारण जीन गतिविधि को प्रभावित नहीं कर सकती है। TCR एक एंटीजन से बंधने के बाद कोशिका में प्रवेश करता है, नाभिक में माइग्रेट करने और जीन गतिविधि को प्रभावित करने के लिए नहीं, बल्कि क्लीव होने के लिए। हालांकि, जब एंटीजेनिक कॉम्प्लेक्स टीसीआर से जुड़ जाता है, तो एक कॉस्टिमुलेटरी प्रभाव के संयोजन में, एक संकेत उत्पन्न होता है जो नाभिक तक पहुंचता है और जीन अभिव्यक्ति को नियंत्रित करता है। सिग्नल ट्रांसमिशन कैस्केड सिद्धांत के अनुसार किया जाता है। सिग्नल ट्रांसडक्शन के विभिन्न चरणों में, यह एंजाइम अणुओं (मुख्य रूप से प्रोटीन किनेसेस जो सिग्नल ट्रांसडक्शन के प्रत्येक क्रमिक चरण में प्रोटीन को सक्रिय करते हैं), साथ ही एडेप्टर और जीटीपी-बाइंडिंग प्रोटीन द्वारा किया जाता है। संकेत शुरू में दोहरी है, क्योंकि इसका प्रसारण TCR और CD28 से एक साथ किया जाता है। फिर ये रास्ते प्रतिच्छेद करते हैं और फिर से कई शाखाओं में विभाजित हो जाते हैं। प्रत्येक सिग्नलिंग मार्ग के साथ सिग्नल ट्रांसडक्शन का अंतिम परिणाम एक ट्रांसक्रिप्शन कारक का गठन होता है। अंजीर पर। 3.90 इंट्रासेल्युलर सिग्नल ट्रांसमिशन की एक विशिष्ट योजना को दर्शाता है, जो प्रतिलेखन कारकों और जीन सक्रियण के गठन में परिणत होता है। टी कोशिकाओं के सक्रियण के लिए तीन प्रतिलेखन कारकों, एनएफ-एटी, एनएफ-केबी, और एपी-1 के गठन की आवश्यकता होती है। अगला, हम डेंड्राइटिक कोशिकाओं द्वारा प्रस्तुत एंटीजन की मान्यता पर टी-हेल्पर सक्रियण के उदाहरण का उपयोग करके इंट्रासेल्युलर सिग्नल ट्रांसमिशन के कार्यान्वयन पर विचार करते हैं।
MHC-II-पेप्टाइड कॉम्प्लेक्स के बंधन से TCR अणु और उससे जुड़े CD4 कोर एप्टर अणु में परिवर्तन होता है। यह अभी भी पूरी तरह से ज्ञात नहीं है कि क्या यह केवल रिसेप्टर्स की संरचना को बदलता है या क्या वे ओलिगोमेराइज करते हैं। इस तरह के परिवर्तन रिसेप्टर और कोरसेप्टर से जुड़े टाइरोसिन किनेसेस को सक्रिय करते हैं - सीडी 4 से जुड़े Lck (p56lck) और CD3 से जुड़े Fyn (p59fyn)। इन tyrosine kinases को रिसेप्टर, या समीपस्थ कहा जाता है, इस तथ्य के कारण कि वे सीधे रिसेप्टर से सटे होते हैं, रिसेप्टर कॉम्प्लेक्स में प्रवेश करते हैं। ये दोनों किनेसेस Src kinase परिवार से ताल्लुक रखते हैं। इस परिवार के किनेसेस में SH1, SH2 और SH3 डोमेन (SH - Src-होमोलॉजी से) (चित्र। 3.91) शामिल हैं। पहले डोमेन में एंजाइमेटिक गतिविधि होती है, बाकी अन्य किनेसेस और एडेप्टर प्रोटीन के साथ बातचीत करते हैं। tyrosine kinases का कार्य tyrosine अवशेषों पर लक्ष्य प्रोटीन को फॉस्फोराइलेट करना है, जो उनके सक्रियण और कार्यों की अभिव्यक्ति के लिए आवश्यक है, जिसमें एंजाइमी भी शामिल हैं। रिसेप्टर किनेसेस के लक्ष्य असंख्य हैं। इनमें Fyn और Lck अणु स्वयं शामिल हैं (जो उनके ऑटोफॉस्फोराइलेशन का कारण बनते हैं), साथ ही TCR पॉलीपेप्टाइड चेन और अन्य किनेसेस। Lck kinase के लक्ष्य विशेष रूप से विविध हैं।
हालांकि, रिसेप्टर किनेसेस के सक्रियण के लिए प्रारंभिक स्थिति, इसके विपरीत, उनका डीफॉस्फोराइलेशन है, जो पुन: प्रदान करता है-
हाइपरफॉस्फोराइलेटेड से सामान्य की ओर बढ़ना। तथ्य यह है कि एक रेस्टिंग सेल में, Lck kinase का SH2 डोमेन संवैधानिक रूप से सक्रिय Csk kinase द्वारा C-टर्मिनल टायरोसिन अवशेष Y505 के फॉस्फोराइलेशन के कारण मुड़ा हुआ रूप में होता है। फॉस्फोराइलेटेड Y505 एक फॉस्फेट समूह के माध्यम से Sffi डोमेन में एक टाइरोसिन अवशेषों के साथ संपर्क करता है, जिससे अणु का सी-टर्मिनस खींचा जाता है। इस रूप में, एंजाइम सक्रिय नहीं है, क्योंकि SH1 डोमेन में कार्यात्मक रूप से महत्वपूर्ण Y394 अवशेषों को फॉस्फोराइलेट नहीं किया जा सकता है। इस तरह के एक कार्यात्मक नाकाबंदी को हटाने के लिए, डीफॉस्फोराइलेशन आवश्यक है, इसके बाद अणु की तैनाती होती है, जिसे टायरोसिन फॉस्फेटेस की भागीदारी के साथ किया जाता है। रिसेप्टर किनेसेस को "कार्यशील" अवस्था में स्थानांतरित करने में मुख्य भूमिका CD45 अणु द्वारा निभाई जाती है, जिसके साइटोप्लाज्मिक डोमेन में टाइरोसिन फॉस्फेट की गतिविधि होती है। यह पहले ही उल्लेख किया गया था कि यह बड़ा अणु, जो वृक्ष के समान कोशिका और टी-हेल्पर के बीच निकट संपर्क के गठन को रोकता है, पहले प्रतिरक्षा synapse के क्षेत्र से हटा दिया जाता है, और फिर कुछ अणु इस क्षेत्र में अपना प्रदर्शन करने के लिए वापस आते हैं। कार्य - रिसेप्टर टाइरोसिन किनसे अणुओं का डीफॉस्फोराइलेशन। एक बार जब Y394 अवशेष फॉस्फोराइलेशन के लिए उपलब्ध हो जाता है, तो Lck टाइरोसिन किनसे गतिविधि प्रदर्शित कर सकता है।
TCR-CD3 कॉम्प्लेक्स की पॉलीपेप्टाइड श्रृंखलाओं से प्रेषित संकेतों की पीढ़ी में, सबसे महत्वपूर्ण y-, 5-, e-, और Z-चेन के साइटोप्लाज्मिक क्षेत्र में सक्रियण अनुक्रम ITAM की उपस्थिति है, जिसमें है बार-बार उल्लेख किया गया है। इस आकृति की संरचना इस प्रकार है: YXXI / L / VX (6-8) YXXI / L / V (जहाँ Y टायरोसिन है, X कोई अवशेष है, I / L / V isoleucine, leucine या valine है) (चित्र। 3.92) टायरोसिन अवशेषों का फास्फोराइलेशन
चावल। 3.92. सक्रियण और निरोधात्मक उद्देश्यों की विशेषताओं की तुलना (ITAM और ITIM)
ITAM में इस क्षेत्र को अधिक दूर स्थित सिग्नलिंग अणुओं के समान क्षेत्रों द्वारा मान्यता के लिए सुलभ बनाता है। TCR पॉलीपेप्टाइड श्रृंखलाओं में, Z श्रृंखला सिग्नल ट्रांसडक्शन के लिए सबसे महत्वपूर्ण है। TCR की y-, 5-, और ई-श्रृंखलाओं के विपरीत, जिनमें से प्रत्येक में एक ITAM साइट होती है, Z-श्रृंखला के साइटोप्लाज्मिक भाग में 3 ITAM अनुक्रम होते हैं जिन्हें tyrosine kinase ZAP-70 (से) के टायरोसिन अवशेषों के साथ बातचीत करने के लिए डिज़ाइन किया गया है। Z- संबद्ध प्रोटीन - ^- संबद्ध प्रोटीन; द्रव्यमान 70 kDa) - TCR से सिग्नल ट्रांसमिशन में एक प्रमुख कारक जब यह लिगैंड से जुड़ता है। जेड श्रृंखला का फास्फोराइलेशन सबसे अधिक जिम्मेदार है और साथ ही टी सेल सक्रियण का सबसे कमजोर चरण है। यह माना जाता है कि इस अणु के सभी ITAM रूपांकनों के फॉस्फोराइलेशन को सुनिश्चित करने के लिए टी-लिम्फोसाइट्स और डेंड्राइटिक कोशिकाओं के बीच संपर्क का दीर्घकालिक रखरखाव आवश्यक है। एक आराम करने वाली टी सेल की Z श्रृंखला में, 1 टाइरोसिन अवशेष फॉस्फोराइलेट किया जाता है; फास्फारिलीकरण की अनुपस्थिति से एपोप्टोसिस का विकास होता है (चित्र 3.93)। Z-श्रृंखला और ZAP-kinase की परस्पर क्रिया के बाद, यह शुरू होता है
चावल। 3.94. टी-सेल सक्रियण के दौरान सिग्नलिंग मार्ग की योजना। कॉस्टिम्यूलेशन के साथ संयोजन में एक एंटीजेनिक एपिटोप के साथ एमएचसी अणु के परिसर की मान्यता 5 कैस्केड के माध्यम से नाभिक को प्रेषित संकेतों की ट्रिगरिंग को प्रेरित करती है जो सेल सक्रियण के लिए आवश्यक 3 प्रतिलेखन कारकों का गठन प्रदान करती है। बोल्ड कंटूर ने उन कारकों की परिक्रमा की, जिनके लिए लागत-निर्धारण पर उच्च स्तर की निर्भरता दिखाई गई है।
एक सक्रियण संकेत (चित्र। 3.94) के संचरण के लिए कई समानांतर मार्गों के रूप में एक पूर्ण पैमाने की प्रक्रिया दिखाई देती है।
ZAP-70 अणु Syk परिवार के tyrosine kinases से संबंधित है। इसमें दो SH2 डोमेन का अग्रानुक्रम होता है। fchain के साथ इसके संपर्क के लिए शर्त ITAM fchain में tyrosine अवशेषों का प्रारंभिक फास्फारिलीकरण है। फास्फोरिलीकरण के बाद, ITAM fchain रूपांकनों में दूसरा tyrosine अवशेष ZAP-70 kinase के S^-डोमेन के tyrosine के साथ परस्पर क्रिया करता है। परिणामस्वरूप, ZAP-70 अणु के Sffi डोमेन के tyrosine के साथ phchain tyrosine का फॉस्फेट समूह सामान्य हो जाता है। इसके बाद ZAP-70 अणु के एंजाइमी डोमेन में टायरोसिन अवशेषों का फास्फोराइलेशन होता है, जो टाइरोसिन किनेसेस Lck और संभवत: Fyn द्वारा किया जाता है, जो अणु की एंजाइमेटिक (kinase) गतिविधि को शामिल करने की ओर जाता है।
इसके मुख्य सब्सट्रेट - एडेप्टर प्रोटीन एलएटी (टी-कोशिकाओं के सक्रियण के लिए लिंकर से - टी-सेल सक्रियण लिंकर) के साथ ZAP-70 की बातचीत के कारण आगे सिग्नल ट्रांसमिशन होता है। यह प्रोटीन झिल्ली से जुड़ा होता है और राफ्ट का हिस्सा होता है। ZAP-70 द्वारा उत्प्रेरित फॉस्फोराइलेशन के बाद, LAT आगे सिग्नल ट्रांसडक्शन में शामिल सिग्नल अणुओं को बांधने की क्षमता प्राप्त करता है: एडेप्टर प्रोटीन SLP-76, Grb2, फ़ैक्टर Vav, साथ ही एंजाइम PLCy1 और PI3K। कुछ उल्लिखित प्रोटीनों की सक्रियता एलएटी पर प्रत्यक्ष रूप से नहीं, बल्कि परोक्ष रूप से निर्भर करती है। तो, SH3 डोमेन के माध्यम से
Grb2 परिवार के एडेप्टर प्रोटीन, कारक SLP-76 और Sos सिग्नलिंग मार्ग से जुड़े हैं। SLP-76, बदले में, PLСy1 और GTPase रास के सिग्नलिंग मार्ग से कनेक्शन की मध्यस्थता करता है। PLCy1 का सक्रियण बीटीके परिवार से संबंधित आईटीके टाइरोसिन किनसे की भागीदारी के साथ होता है, लिम्फोसाइट सक्रियण के दौरान इंट्रासेल्युलर सिग्नल ट्रांसडक्शन में शामिल टाइरोसिन किनेसेस का तीसरा (एसआरसी और साइक के बाद) परिवार। एलएटी की प्रत्यक्ष और अप्रत्यक्ष भागीदारी के साथ सक्रियण प्रक्रिया में शामिल सभी सिग्नलिंग कारक कोशिका झिल्ली में भर्ती होते हैं और इसके फॉस्फॉइनोसाइटाइड घटकों के साथ बातचीत करते हैं। SLP-76, Vav, और Nck की परस्पर क्रिया के दौरान बनने वाला कॉम्प्लेक्स साइटोस्केलेटल प्रोटीन PAK और WASP के साथ प्रतिक्रिया करता है, जो सक्रिय कोशिकाओं के साइटोस्केलेटन में पुनर्व्यवस्था के मध्यस्थ के रूप में काम करता है।
सक्रिय PLCy1 फॉस्फेटिडिलिनोसिटॉल 4,5-बिस्फोस्फेट की दरार को उत्प्रेरित करता है जिससे डायसीलग्लिसरॉल (डीएजी) बनता है, जो झिल्ली से बंधा रहता है, और इनोसिटोल-1,4,5-ट्राइफॉस्फेट (चित्र। 3.95)। इनोसिटोल ट्राइफॉस्फेट साइटोप्लाज्म में प्रवेश करता है और एंडोप्लाज्मिक रेटिकुलम की सतह पर रिसेप्टर्स के साथ इंटरैक्ट करता है, जो इंट्रासेल्युलर स्टोरेज से सीए 2 + आयनों की रिहाई का कारण बनता है। उत्तरार्द्ध की कमी कोशिका झिल्ली में Ca2+-निर्भर चैनलों के उद्घाटन का कारण बनती है, जिसके माध्यम से Ca2+ आयन बाह्य अंतरिक्ष से कोशिका में प्रवेश करते हैं। नतीजतन, कोशिका के कोशिका द्रव्य में मुक्त Ca2+ आयनों की सांद्रता बढ़ जाती है। Ca2+ आयन कैल्सीनुरिन फॉस्फेट को सक्रिय करते हैं, जो प्रतिलेखन कारक NF-AT (सक्रिय T-कोशिकाओं का परमाणु कारक - सक्रिय T कोशिकाओं का परमाणु कारक) के साइटोप्लाज्मिक घटक को डीफॉस्फोराइलेट करता है (चित्र। 3.96)। यह कारक को नाभिक में स्थानांतरित करने, परमाणु घटक के साथ बातचीत करने और टी-सेल सक्रियण में शामिल जीन के प्रमोटर क्षेत्रों में डीएनए के साथ बातचीत करने में सक्षम एनएफ-एटी अणु के परिपक्व रूप का निर्माण करता है (आईएल 2, आईएल 2 आर, आदि।)।
Diacylglycerol को पारंपरिक रूप से एक ऐसा कारक माना जाता है जो प्रोटीन किनसे C (PKC) को सक्रिय करता है - सेरीन / tre-
चावल। 3.96. Ca2+-निर्भर टी-सेल सक्रियण लिंक और साइक्लोस्पोरिन ए द्वारा इसकी नाकाबंदी। इनोसिटोल ट्राइफॉस्फेट-आश्रित सिग्नलिंग मार्ग, न्यूक्लियस में प्रतिलेखन कारक NF-AT की गतिशीलता की ओर जाता है। इस मार्ग को साइक्लोस्पोरिन ए द्वारा अवरुद्ध किया जा सकता है, जो साइक्लोफिलिन के संयोजन में, कैल्सीनुरिन फॉस्फेट को निष्क्रिय कर सकता है, जो साइटोप्लाज्मिक कारक एनएफ-एटी (जो नाभिक में इसके प्रवास के लिए एक शर्त के रूप में कार्य करता है) के डीफॉस्फोराइलेशन के लिए जिम्मेदार है।
ओनिन किनसे, टी-कोशिकाओं की सक्रियता में प्रमुख कारकों में से एक के रूप में पहचाना जाता है। हालांकि, यह पता चला कि डायसाइलग्लिसरॉल द्वारा सक्रिय पीकेसी आइसोफॉर्म टी कोशिकाओं की सक्रियता से संबंधित नहीं हैं। इसमें आइसोफॉर्म 0 पीकेसी शामिल है, जो अपनी "परिपक्वता" के चरम पर प्रतिरक्षा अन्तर्ग्रथन में प्रकट होता है। प्रतिरक्षा अन्तर्ग्रथन में इसकी भर्ती P13K और Vav की गतिविधि पर निर्भर करती है (बाद वाला कारक साइटोस्केलेटन से जुड़ा होता है, जिसकी PKC0 परिवहन में भूमिका बहुत महत्वपूर्ण है)। चूंकि Vav सक्रियण न केवल TCR के माध्यम से, बल्कि CD28 के माध्यम से भी सिग्नलिंग पर निर्भर करता है, और CD28-निर्भर मार्ग PI3K की भागीदारी के साथ महसूस किया जाता है (यह CD28 के साथ जुड़ा हुआ है - नीचे देखें), यह स्पष्ट हो जाता है कि PI3K और Vav अलग-अलग प्रतिनिधित्व करते हैं एक ही सिग्नलिंग मार्ग के चरण और इस प्रकार, PKC0 अणु की सक्रियता में भागीदारी CD28 के माध्यम से लागत-निर्धारण पर निर्भर करती है। उसी समय, PKC0 की सक्रियता में TCR से आने वाले संकेतों की भूमिका संदेह से परे है, क्योंकि PKC0 Lck kinase द्वारा फॉस्फोराइलेट (और, इसलिए, सक्रिय) है। डायसाइलग्लिसरॉल सहित अन्य कारकों को पीकेसी0 की सक्रियता में भाग लेने की अनुमति है, लेकिन ये प्रभाव गौण हैं। PKC0 का सक्रियण सक्रिय कोशिकाओं के एपोप्टोसिस को रोकने और IL2 और IL2R जीन, AP-1 और NF-kB की अभिव्यक्ति के लिए आवश्यक तीन महत्वपूर्ण प्रतिलेखन कारकों में से दो को चालू करने के लिए आवश्यक है। AP-1 के PKC0-निर्भर सक्रियण को MAP कैस्केड की Rac/JNK शाखा के माध्यम से महसूस किया जाता है (इस पर नीचे चर्चा की जाएगी)। प्रतिलेखन कारक NF-kB के सक्रियण की ओर जाने वाले मार्ग में निम्न शामिल हैं:
मध्यवर्ती लिंक क्रमिक रूप से सक्रिय (PKC0 की भागीदारी के साथ) कारक CARMA-1, Bcl-10 और MALT-1, IKK। IKK NF-kB - IkK के निरोधात्मक सबयूनिट को फॉस्फोराइलेट करता है, जिससे इसे ubiquitin को बांधने की क्षमता मिलती है, जो इसके बाद के क्षरण को पूर्व निर्धारित करता है। यह सक्रिय एनएफ-केबी सबयूनिट जारी करता है, जो नाभिक में माइग्रेट करता है और ट्रांसक्रिप्शन कारक के रूप में कार्य करता है, टी-सेल सक्रियण जीन की अभिव्यक्ति के लिए आवश्यक तीन में से एक। प्रतिलेखन कारक एनएफ-केबी, जो जन्मजात प्रतिरक्षा कोशिकाओं के सक्रियण में महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है, ऊपर चर्चा की गई थी (देखें खंड 2.2.4)।
एक अन्य सिग्नलिंग मार्ग जो टी-लिम्फोसाइट्स, एमएपी कैस्केड, या एमएपी मॉड्यूल (मिटोजेन-सक्रिय किनेसेस - माइटोजेन-सक्रिय किनेसेस से) के सक्रियण से ट्रिगर होता है, सेल सक्रियण के दौरान भी व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है। इसकी भूमिका मुख्य रूप से प्रतिलेखन कारक AP-1 (c-jun/c-fos dimer) को प्रेरित करने के लिए है। इस कैस्केड की 3 शाखाएं हैं, जो तीन प्रकार के एमएपी किनेसेस (एमएपी ^ - ईआरके 1 / ईआरके 2 (एक्स्ट्रासेलुलर सिग्नल-रेगुलेटेड किनेसेस - किनेसेस को एक्स्ट्रासेलुलर सिग्नल द्वारा विनियमित), पी 38 और जेएनके (सी-जून एनएच 2- से) के गठन की ओर ले जाती हैं। टर्मिनल किनेसेस - c -जून NH2-टर्मिनल किनेसेस। MAP-kinases की सक्रियता की ओर ले जाने वाले कैस्केड को एडेप्टर प्रोटीन और कम आणविक भार GTPases की भागीदारी के साथ चालू किया जाता है। एडेप्टर प्रोटीनों में से एक, Grb2 (ग्रोथ फैक्टर रिसेप्टर बाउंड प्रोटीन 2) ), एलएटी कारक के साथ बातचीत पर सक्रिय होता है। सक्रिय ग्रब 2 एक अन्य एलएटी-सक्रिय प्रोटीन, एसएलपी -76, और एसओएस (सात के बेटे से) को स्वचालित रूप से बांधता है, एसओएस एक गुआनिन न्यूक्लियोटाइड प्रतिस्थापन कारक है: यह जीटीपी द्वारा जीडीपी के प्रतिस्थापन का कारण बनता है छोटे जी प्रोटीन में (यानी, गुआनिन न्यूक्लियोटाइड बाध्यकारी प्रोटीन इसलिए, एसएलपी -76 / जीआरबी 2 / एसओएस कॉम्प्लेक्स जी-प्रोटीन रास के सक्रियण का कारण बनता है, जो संबंधित जीडीपी को जीटीपी में परिवर्तित करता है। रास-जीटीपी सेरीन / थ्रेओनीन किनसे राफ को सक्रिय करता है ( MAP kinase kinase kinase - MKKK। प्रतिक्रियाओं का एक झरना इस प्रकार है: R af MEK (MAP kinase kinase - MCK) को सक्रिय करता है, और MEK उपरोक्त MAP kinases ERK1 और ERO को सक्रिय करता है। एमएपी कैस्केड की जेएनके शाखा का सक्रियण ऊपर वर्णित कारक वाव द्वारा शुरू किया गया है (एलएटी के आधार पर और साइटोस्केलेटन के सक्रियण से जुड़ा हुआ है, साथ ही पीकेसी0, ऊपर देखें)। यह जी-प्रोटीन आरएसी (आरएचओ परिवार) के साथ जटिल रूप से जीडीपी को जीटीपी में बदलने का कारण बनता है। Rac-GTP MEKK kinase (MKKK के रूप में कार्य करता है) को सक्रिय करता है, यह JNKK kinase (MKK) को सक्रिय करता है, जो बदले में JNK MAP kinase को सक्रिय करता है। MAP मॉड्यूल का तीसरा मार्ग, p38 MAP kinase के निर्माण की ओर ले जाता है, यह भी Rho परिवार के G प्रोटीन पर निर्भर करता है। यह सामान्य रूपरेखा में अन्य दो मार्गों के समान है, लेकिन इसका कम विस्तार से अध्ययन किया गया है।
MAP kinases ERK1/ERK2, JNK, और p38 TXY रूपांकनों में थ्रेओनीन और टाइरोसिन अवशेषों के फॉस्फोराइलेशन द्वारा सक्रिय होते हैं, जिसमें अलग-अलग अवशेष (ग्लू, प्रो, और ग्लाइ, क्रमशः) तीन प्रकार के किनेसेस में X की भूमिका निभाते हैं। ये एमएपी किनेसेस कई सेलुलर प्रक्रियाओं में शामिल ट्रांसक्रिप्शन कारकों के गठन का निर्धारण करते हैं। ERK1/ERK2 प्रतिलेखन कारकों АР-1 और Elk-1, JNK - कारक ATF2, Elk-1 और c-Jun (घटक АР-1), p38 - कारक ATF2, Elk-1 और MEF-2C के गठन का कारण बनता है।
टी सेल सक्रियण के दौरान उपरोक्त सिग्नलिंग मार्ग का सक्रियण समानांतर TCR बाइंडिंग और CD28 अणु के माध्यम से कॉस्टिम्यूलेशन के साथ होता है। इन झिल्ली अणुओं के माध्यम से स्विच किए गए सिग्नलिंग पथों का विभेदन, साथ ही साथ इन पथों के अंतःक्रिया की व्याख्या पूरी तरह से पूरी नहीं हुई है। हालाँकि, समग्र तस्वीर स्पष्ट रूप से पर्याप्त रूप से उभरती है जो कि लागत-निर्धारण के आणविक आधार की सामान्य समझ प्रदान करती है। जब TCR बाइंडिंग को सह-रिसेप्टर बाइंडिंग के साथ समन्वित किया जाता है, तो TCR-CD3 जटिल परिवर्तनों की संरचना, CD4 रिसेप्टर टाइरोसिन किनेसेस Fyn और Lck, साथ ही साथ CD45 फॉस्फेट के सक्रियण का कारण बनता है। "समीपस्थ" घटनाओं का अंतिम परिणाम रिसेप्टर कॉम्प्लेक्स की जेड-श्रृंखला का फॉस्फोराइलेशन और ZAP-70 किनसे को एक सक्रियण संकेत का संचरण है। इसके अलावा, एडेप्टर प्रोटीन LAT, SLP-76, और Vav की भागीदारी के साथ, सिग्नल ट्रांसडक्शन में शामिल क्षेत्र का काफी विस्तार होता है, जिसमें झिल्ली से बंधे किनेसेस, साइटोस्केलेटन और छोटे G प्रोटीन शामिल हैं। Ca2+ के एकत्रीकरण और प्रतिलेखन कारक NF-AT के सक्रियण के लिए सिग्नलिंग मार्ग अग्रणी (PLCyl सक्रियण, इनोसिटोल ट्राइफॉस्फेट गठन, और कैल्सीनुरिन सक्रियण के माध्यम से) लागत-निर्धारण के दौरान उत्पन्न संकेतों की प्रत्यक्ष भागीदारी के बिना महसूस किया जाता है। अन्य रास्ते कमोबेश कॉस्टिमुलिटरी सिग्नल पर निर्भर हैं।
CD28 के माध्यम से लागत-निर्धारण का सबसे प्रत्यक्ष परिणाम झिल्ली एंजाइम PI3K की सक्रियता है, जो शारीरिक रूप से CD28 अणु के साथ जुड़ा हुआ है। यह एंजाइम फॉस्फेटिडिलिनोसिटोल 4,5-बिफॉस्फेट के गठन को उत्प्रेरित करता है, जो इनोसिटोल ट्राइफॉस्फेट के स्रोत के रूप में कार्य करता है। हालाँकि, यह घटना सीधे सक्रियण से संबंधित नहीं है और इसे प्रारंभिक माना जा सकता है। सेल सक्रियण पर, फॉस्फेटिडिलिनोसिटोल ट्राइफॉस्फेट, Vav को सक्रिय करता है, जो साइटोस्केलेटन की सक्रियता में शामिल होने के लिए जिम्मेदार एक नोडल कारक है और PKC0 प्रोटीन किनसे की भर्ती और सक्रियण में शामिल है। यह एंजाइम ट्रांसक्रिप्शन कारकों NF-kB और AP-1 के गठन के लिए अग्रणी सिग्नलिंग मार्ग के कामकाज के लिए महत्वपूर्ण है। दोनों ही मामलों में, MAP कैस्केड की Rac/JNK शाखा को शामिल करने में PKC0 की भूमिका सबसे अधिक स्पष्ट है। MAP कैस्केड की Raf/ERK और Rac/p38 शाखाएं PKC0 पर कम निर्भर हैं और फलस्वरूप, लागत-निर्धारण पर। इस प्रकार, लागत-निर्धारण का आणविक आधार तीन प्रमुख कारकों - PI3K, Vav कारक, और प्रोटीन किनसे C isoform 0 की भागीदारी के साथ कार्यान्वित सिग्नलिंग मार्ग के टी-हेल्पर सक्रियण की प्रक्रिया में भागीदारी है। तीन प्रमुख प्रतिलेखन कारकों में से ट्रिगर टी-सेल सक्रियण जीन, दो (एपी -1 और एनएफ-केबी) की अभिव्यक्ति लागत-निर्धारण पर निर्भर करती है और एनएफ-एटी के उत्पादन के लिए अकेले लागत-निर्धारण की आवश्यकता नहीं होती है।
इस प्रकार, परिणामस्वरूप, टी सेल में 3 प्रतिलेखन कारक बनते हैं - NF-AT, NF-kB AP-1। ये कारक अलग-अलग तरीकों से बनते हैं। सक्रिय NF-AT एक डिमर की असेंबली के परिणामस्वरूप बनता है जिसमें NF-AT - NF-ATc और NF-ATn के साइटोप्लाज्मिक और परमाणु उप-घटक शामिल होते हैं। यदि एनएफ-एटीएन टी सेल न्यूक्लियस में हमेशा मौजूद एक संवैधानिक कारक है, तो एनएफ-एटीसी को न्यूक्लियस में माइग्रेट करने के लिए सक्रिय किया जाना चाहिए, जो कि इसके कैल्सीनुरिन-उत्प्रेरित डिफॉस्फोराइलेशन (ऊपर देखें) द्वारा प्राप्त किया जाता है। प्रतिलेखन कारक NF-kB IkB-NF-kB कॉम्प्लेक्स से निरोधात्मक IkB सबयूनिट के दरार द्वारा सक्रिय होता है। जैसा कि ऊपर उल्लेख किया गया है, यह तब होता है जब IkB को IKK kinase द्वारा फॉस्फोराइलेट किया जाता है, जो PKC0 की भागीदारी से सक्रिय होता है। फॉस्फोराइलेटेड सबयूनिट गिरावट के लिए उपलब्ध हो जाता है
सर्वव्यापी मार्ग के साथ। फैक्टर एपी -1 दो इंड्यूसिबल प्रोटो-ऑन्कोजीन - सी-फॉस और सी-जून के प्रोटीन उत्पादों का एक डिमर है। इन जीनों और प्रोटीन संश्लेषण की अभिव्यक्ति के लिए उपयुक्त प्रतिलेखन कारकों की आवश्यकता होती है, जैसे एल्क -1 (सी-फॉस के लिए) और जेएनके (सी-जून के लिए)। जैसा कि ऊपर उल्लेख किया गया है, एल्क -1 और जेएनके एमएपी कैस्केड की विभिन्न शाखाओं के अंतिम उत्पाद हैं। सी-फॉस और सी-जून प्रोटीन संश्लेषित डे नोवो होमो- और हेटेरोडिमर्स बनाते हैं जो ट्रांसक्रिप्शन कारक एपी -1 बनाते हैं।
टी-सेल सक्रियण जीन, मुख्य रूप से IL2 और IL2R को शामिल करने के लिए तीन कारकों (NF-AT, NF-kB, और AP-1) की आवश्यकता होती है। IL2 जीन के प्रवर्तक क्षेत्र में प्रतिलेखन कारकों के लिए 9 बाध्यकारी साइट हैं (चित्र। 3.97)। उनमें से, अक्टूबर अक्टूबर के लिए 2 बाध्यकारी साइटें हैं, जो जीन प्रेरण की प्रक्रिया को सीमित नहीं करती हैं। तीन प्रमुख प्रतिलेखन कारकों में से, एनएफ-केबी अन्य प्रतिलेखन कारकों से स्वतंत्र एक साइट पर प्रमोटर के साथ बातचीत करता है। दो अन्य कारक, एनएफ-एटी और एपी-1, प्रमोटर के साथ एक दूसरे से अलग (1 बाध्यकारी साइट द्वारा) और एक जटिल (3 बाध्यकारी साइट) दोनों के साथ बातचीत करते हैं। उपयुक्त ट्रांसक्रिप्शन कारकों के साथ सभी साइटों को भरना, जीन प्रेरण के लिए अग्रणी, टी सेल सक्रियण के दौरान सिग्नल ट्रांसडक्शन का अंतिम परिणाम है।
टी-हेल्पर्स की सक्रियता में शामिल सिग्नलिंग मार्गों पर ऊपर विस्तार से चर्चा की गई है। साइटोटोक्सिक टी-कोशिकाओं का सक्रियण समान तंत्र द्वारा किया जाता है।
3.5.2.2. टी सेल सक्रियण की अभिव्यक्ति
सीडी4+ टी-कोशिकाओं (साथ ही किसी भी टी-लिम्फोसाइट्स) के सक्रियण से बड़ी संख्या में जीनों की अभिव्यक्ति होती है, जिनमें से IL2 और IL2R जीन, IL-2 साइटोकाइन और इसके रिसेप्टर α-श्रृंखला को कूटबद्ध करते हैं, सबसे बड़ी भूमिका निभाते हैं। मुख्य कारक घटनाओं के कार्यान्वयन में भूमिका। उत्तेजक संकेत प्राप्त करने के लगभग 1 घंटे बाद IL2 जीन की अभिव्यक्ति होती है। इन विट्रो में उत्तेजित टी कोशिकाओं द्वारा IL-2 प्रोटीन के स्राव का पता 3-4 घंटों के बाद लगाया जाता है; यह 8-12 घंटों के बाद चरम पर पहुंच जाता है और 24 घंटों के बाद बंद हो जाता है। विवो में, आईएल -2 स्राव एंटीजन प्रशासन के 1-3 दिन बाद शुरू होता है
चावल। 3.98. टी-सेल सक्रियण अणुओं की अभिव्यक्ति की अस्थायी गतिशीलता। ग्राफ पर
टी कोशिकाओं की उत्तेजना के बाद प्रमुख सक्रियण अणुओं की अभिव्यक्ति का समय दिखाया गया है।
(टीकाकरण) और 7-12 दिनों तक बनी रहती है। IL-2 रिसेप्टर की α-श्रृंखला की अभिव्यक्ति कुछ समय बाद होती है और लंबे समय तक चलती है - इन विट्रो में उत्तेजना के 4 घंटे बाद इसका पता लगाया जाता है; यह 2-3 दिनों के बाद अपने अधिकतम तक पहुँच जाता है और 5 दिनों के बाद रुक जाता है (चित्र 3.98)।
इसके साथ ही IL2 जीन के साथ, उत्तेजक की कार्रवाई के बाद जितनी जल्दी हो सके (शारीरिक स्थितियों के तहत, पेप्टाइड-एमएचसी एंटीजेनिक कॉम्प्लेक्स), सी-माइक और एन-माइक जीन, जिन्हें प्रारंभिक सक्रियण जीन कहा जाता है, व्यक्त किए जाते हैं। वे समसूत्रण के लिए कोशिकाओं को तैयार करने में शामिल हैं। 2-3 घंटों के बाद, सीडी 69 टी सेल की सतह पर दिखाई देता है, सबसे पहला सक्रियण प्रतिजन, आंशिक रूप से इंट्रासेल्युलर डिपो से जुटाया जाता है, और आंशिक रूप से डे नोवो व्यक्त किया जाता है। इसकी अभिव्यक्ति एक दिन से थोड़ा अधिक समय तक चलती है। CD69 के तुरंत बाद, एक और प्रारंभिक सक्रियण मार्कर, CD25, कोशिका की सतह पर प्रकट होता है, जो पहले से उल्लिखित IL-2 रिसेप्टर की एक-श्रृंखला का प्रतिनिधित्व करता है। कुछ समय पहले, कई साइटोकाइन जीनों की अभिव्यक्ति और संबंधित साइटोकिन्स (IFNy, IL-4, IL-5, IL-6) की सीमित मात्रा के संश्लेषण का पता लगाया जाता है।
सक्रियण की निम्नलिखित अभिव्यक्तियाँ उत्तेजक की कार्रवाई के एक दिन बाद देखी जाती हैं, जब ट्रांसफ़रिन (CD71) के लिए रिसेप्टर अणु व्यक्त किया जाता है। यह कारक प्रसार में महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है, क्योंकि इसके कार्यान्वयन के लिए लौह आयन आवश्यक हैं। बाद के दिनों (3-6 दिनों) में, एमएचसी-द्वितीय अणुओं को व्यक्त किया जाता है, जिन्हें टी-सेल सक्रियण के देर से मार्कर के रूप में वर्गीकृत किया जाता है, और फिर पी 1-इंटीग्रिन, जिसे बहुत देर से सक्रियण एंटीजन कहा जाता है - वीएलए (बहुत देर से सक्रियण एंटीजन ), और केमोकाइन स्रावित होते हैं। सेल सक्रियण के इन देर से अभिव्यक्तियों को प्रोलिफेरेटिव प्रक्रिया के साथ जोड़ा जाता है।