Ang mga sinusoidal cells (endothelial cells, Kupffer cells, stellate at pit cells), kasama ang bahagi ng mga hepatocytes na nakaharap sa sinusoidal lumen, ay bumubuo ng functional at histological unit.
Endothelial cells line sinusoids at naglalaman ng fenestra, na bumubuo ng stepped barrier sa pagitan ng sinusoid at ng Disse space. Ang mga selula ng Kupffer ay nakakabit sa endothelium.
Mga stellated na selula ang atay ay matatagpuan sa Disse space sa pagitan ng mga hepatocytes at endothelial cells. Disse space naglalaman ng tissue fluid na dumadaloy pa sa mga lymphatic vessel ng mga portal zone. Sa pagtaas ng sinusoidal pressure, ang produksyon ng lymph sa Disse space ay tumataas, na gumaganap ng isang papel sa pagbuo ng ascites sa kaso ng kapansanan sa venous outflow mula sa atay.
Ang Kupffer cell ay naglalaman ng mga partikular na receptor ng lamad para sa mga ligand, kabilang ang immunoglobulin Fc fragment at ang C3b complement component, na may mahalagang papel sa pagtatanghal ng antigen.
Ang mga cell ng Kupffer ay isinaaktibo sa mga pangkalahatang impeksyon o trauma. Sila ay partikular na sumisipsip ng endotoxin at bilang tugon ay gumagawa ng ilang mga kadahilanan, tulad ng tumor necrosis factor, interleukins, collagenase at lysosomal hydrolases. Ang mga salik na ito ay nagpapataas ng pakiramdam ng kakulangan sa ginhawa at karamdaman. Ang nakakalason na epekto ng endotoxin, samakatuwid, ay dahil sa mga produkto ng pagtatago ng mga selula ng Kupffer, dahil ito mismo ay hindi nakakalason.
Ang Kupffer cell ay nagtatago din ng mga metabolite ng arachidonic acid, kabilang ang mga prostaglandin.
Ang Kupffer cell ay may partikular na mga receptor ng lamad para sa insulin, glucagon at lipoprotein. Ang carbohydrate receptor para sa N-acetylglycosamine, mannose at galactose ay maaaring mamagitan sa pinocytosis ng ilang glycoproteins, lalo na ang lysosomal hydrolases. Bilang karagdagan, pinapamagitan nito ang pagkuha ng mga immune complex na naglalaman ng IgM.
Sa atay ng pangsanggol, ang mga selula ng Kupffer ay gumaganap ng isang erythroblastoid function. Ang pagkilala at rate ng endocytosis ng mga cell ng Kupffer ay nakasalalay sa mga otopsonin, plasma fibronectin, immunoglobulin at tuftsin, isang natural na immunomodulatory peptide. Ang mga "liver sieves" na ito ay nagsasala ng mga macromolecule na may iba't ibang laki. Ang malalaking, triglyceride-saturated chylomicrons ay hindi dumaan sa kanila, ngunit ang mas maliit, triglyceride-poor, residues na puspos ng cholesterol at retinol ay maaaring tumagos sa Disse space. Ang mga endothelial cell ay medyo naiiba depende sa kanilang lokasyon sa lobule. Ang pag-scan ng electron microscopy ay nagpapakita na ang bilang ng mga fenestres ay maaaring makabuluhang bawasan sa pagbuo ng isang basement membrane; ang mga pagbabagong ito ay lalo na binibigkas sa zone 3 sa mga pasyente na may alkoholismo.
Ang mga sinusoidal endothelial cells ay aktibong nag-aalis ng mga macromolecule at maliliit na particle mula sa sirkulasyon gamit ang receptor-mediated endocytosis. Nagdadala sila ng mga surface receptor para sa hyaluronic acid (ang pangunahing polysaccharide component ng connective tissue), chondroitin sulfate at glycoprotein na naglalaman ng mannose sa dulo, pati na rin ang type II at III receptors para sa FcIgG fragment at isang receptor para sa isang protina na nagbubuklod sa lipopolysaccharides. Ang mga endothelial cell ay gumaganap ng isang function ng paglilinis sa pamamagitan ng pag-alis ng mga enzyme na nakakapinsala sa tissue at mga pathogenic na kadahilanan (kabilang ang mga microorganism). Bilang karagdagan, nililinis nila ang collagen mula sa dugo at nagbubuklod at sumisipsip ng mga lipoprotein.
Stellated na mga selula ng atay(mga cell na nag-iimbak ng taba, mga lipocytes, mga selulang Ito). Ang mga cell na ito ay matatagpuan sa subendothelial space ng Disse. Naglalaman ang mga ito ng mahabang paglaki ng cytoplasm, ang ilan sa mga ito ay malapit na nakikipag-ugnayan sa mga selulang parenchymal, habang ang iba ay umaabot sa ilang sinusoid, kung saan maaari silang lumahok sa regulasyon ng daloy ng dugo at, sa gayon, makakaapekto sa portal hypertension. Sa isang normal na atay, ang mga selulang ito ay, kumbaga, ang pangunahing lugar ng imbakan para sa mga retinoid; morphologically, ito ay nagpapakita ng sarili sa anyo ng mataba droplets sa cytoplasm. Pagkatapos ng paglabas ng mga droplet na ito, ang mga stellate cells ay nagiging fibroblast-like. Naglalaman ang mga ito ng actin at myosin at nababawasan kapag nalantad sa endothelin-1 at substance R. Kapag nasira ang mga hepatocytes, nawawala ang mga fat droplet ng stellate cells, dumadami, lumilipat sa zone 3, nakakakuha ng phenotype na kahawig ng phenotype ng myofibroblast, at gumagawa ng mga uri ng collagen I, III, at IV, at pati na rin ang laminin. Naglalabas din sila ng mga cell matrix proteinases at ang kanilang mga inhibitor, tulad ng mga tissue inhibitor ng metalloproteinases (tingnan ang Kabanata 19). Ang collagenization ng Disse space ay humahantong sa isang pagbawas sa paggamit ng mga substrate na nakagapos sa protina sa hepatocyte.
Mga dimple cell. Ang mga ito ay napaka-mobile na lymphocytes - mga natural na mamamatay na nakakabit sa endothelial surface na nakaharap sa sinusoidal lumen. Ang kanilang microvilli o pseudopodia ay tumagos sa pamamagitan ng endothelial lining, na kumukonekta sa microvilli ng parenchymal cells sa Disse space. Ang mga cell na ito ay hindi nabubuhay nang matagal at na-renew sa gastos ng nagpapalipat-lipat na mga lymphocyte ng dugo, na naiiba sa sinusoid. Nagpapakita sila ng mga katangiang butil at bula na may mga baras sa gitna. Ang mga pit cells ay kusang cytotoxic patungo sa tumor at mga hepatocyte na nahawaan ng virus.
Mga pakikipag-ugnayan ng sinusoidal cell
Ang isang kumplikadong pakikipag-ugnayan ay nagaganap sa pagitan ng mga selula ng Kupffer at mga selulang endothelial, gayundin sa pagitan ng mga selulang sinusoid at mga hepatocytes. Ang pag-activate ng cell sa pamamagitan ng Kupferalipopolysaccharides ay pumipigil sa pagkuha ng hyaluronic acid ng mga endothelial cells. Ang epektong ito ay posibleng pinamagitan ng mga leukotrienes. Ang mga cytokine na nabuo ng mga sinusoidal na selula ay maaaring parehong pasiglahin at sugpuin ang paglaganap ng mga hepatocytes.
Ang pangunahing pinagmumulan ng endotoxin sa katawanay ang gram-negative na intestinal flora. Sa kasalukuyan, walang duda na ang atay ang pangunahing organ, pagsasagawa ng endotoxin clearance. Sinabi ni EnAng dotoxin ay unang nakukuha ng cell kami Kupffer (KK), nakikipag-ugnayan sa receptor ng lamad CD 14. Maaari itong magbigkis sa receptor bilang kanyang sarili lipopolysaccharide(LPS), at ang complex nito na may lipid A-binding protein bukol ng plasma. Ang pakikipag-ugnayan ng LPS sa mga macrophage ng atay ay nagpapalitaw ng isang kaskad ng mga reaksyon batay sa paggawa at pagpapalabas ng cytokine at iba pang biologically active mga tagapamagitan.
Maraming mga publikasyon sa papel ng macrophe.liver flux (CC) sa pagkuha at clearance ng bacterial LPS, gayunpaman, ang pakikipag-ugnayan ng endothelium sa iba pang mesenchymal mga cell, lalo na sa perisinusoidal Ito mga cell, halos hindi pinag-aralan.
TEKNIK NG PANANALIKSIK
Ang mga puting lalaking daga na tumitimbang ng 200 g ay na-injected intraperitoneally sa 1 ml ng sterile saline solution napakadalisay lyophilized LPS E. coli strain 0111 sa mga dosis na 0.5,2.5, 10, 25 at 50 mg / kg. Sa 0.5, 1, 3, 6, 12, 24, 72 h at 1 linggo, ang mga panloob na organo ay tinanggal sa ilalim ng kawalan ng pakiramdam at inilagay sa buffered 10% formalin. Ang materyal ay naka-embed sa mga bloke ng paraffin. Ang mga seksyon na 5 μm ang kapal ay nabahiran immunohistochemicalstreptavidin-biotin sa pamamagitan ng mga antibodies sa desmin, α - makinis muscle actin (A-GMA) at nuclear antigen mahusay na lumalagong mga selula ( PCNA," Dako"). Ginamit si Desmin bilang pananda perisinusoidalIto cells, A-GMA - as may marker myofibroblast, PCNA - dumarami ang mga selula. Upang makita ang endotoxin sa mga selula ng atay, purified anti-Re-glycolipidantibodies (Institute ng General at Clinical Pathology ng KDO, Moscow).
RESULTA NG PAG-AARAL
Sa isang dosis na 25 mg / kg at higit pa, ang pagkabigla na may nakamamatay na kinalabasan ay naobserbahan 6 na oras pagkatapos ng pangangasiwa ng LPS. Ang talamak na epekto ng LPS sa tisyu ng atay ay sanhi ng pag-activate ng mga selulang Ito, na ipinakita sa pamamagitan ng pagtaas ng kanilang bilang. Numero desmin-positive tumaas ang mga cell mula 6 na oras pagkatapos ng iniksyon ng LPS at umabot sa maximum ma sa pamamagitan ng 48-72 h (Fig. 1, a, b).
kanin. 1. Mga seksyon ng atay ng daga pinoproseso ko LSAB -ako- chennyantibodies hanggang dec akin(isang banda α - makinis shechnomu actin (v), x400 (a, b), x200 (c).
a - bago ang pagpapakilala ng endotoxysa, single desmin-positiveIto mga cell sa periportal zone; b- 72 oraspagkatapos ng pagpapakilala ng endotox sa: marami desmin-positive Ito cell; v- 120 oras pagkatapos ng pagpapakilala ng en Dotoxin: α - makinis na kalamnan actin lang ang naroroonsa makinis na mga selula ng kalamnan kah mga sisidlan.
Sa 1 numero ng linggo desmin-positive nabawasan ang mga selula, ngunit nagingay nasa itaas ng mga benchmark. Sa ito sa anumang kaso ay hindi namin naobserbahan ang hitsura ng A-GMA-positive mga cell sa sinusoids dah ng atay. Positibo sa loob kontrol kapag nagmantsa ng antibodies sa A-GMA nagsilbi upang makilala ang makinis na mga selula ng kalamnan ng dugovenous vessels ng portal tracts na naglalaman ng A-GMA (Fig. 1, v). Dahil dito, sa kabila ng pagtaas ng bilang ng mga Ito cell, isang beses ang bagong epekto ng L PS ay hindi humahantong sa pagbabago ( transdifferentiation) ang mga ito sa myofibroblast.
kanin. 2. Mga seksyon ng atayginagamot ang mga daga LSAB -may label na antibodies sa PCNA. a - bago ang pagpapakilala ng en dotoxin: singlenagpapalaganap siya mga pathocytes, x200; b - 72 oras pagkatapos ng pangangasiwa ng endotoxin: maraming proliferating hepatocytes, x400.
Ang pagtaas ng bilang desmin-positive nagsimula ang mga cell sa loob ng portal zone. Mula 6 h hanggang 24 h pagkatapos ng pangangasiwa ng LPS perisinusoidal Ang mga cell ay matatagpuan lamang sa paligid ng mga portal tract, i.e. sa 1st zone ng aci nousa... Sa 48-72 na oras, kapag naobserbahan ang poppymaximum na halaga desmin-positive pandikit kasalukuyang, lumitaw sila sa ibang mga lugar ng acin; gayunpaman, karamihan sa mga selula ng Ito ay gayunpaman ay matatagpuan sa periportal.
Marahil ito ay dahil sa katotohanan na palagianmatatagpuan ang mga KK ang unang nakakuha endotoxin na nagmumula sa bituka sa pamamagitan ng portal vein o mula sa systemic circulation. Ak ang mga tivated QC ay gumagawa ng malawak na hanay ng cytokines na inaakalang nag-trigger ng activation ng Ito cells at transdifferentiation ang mga ito sa myofibroblast. Malinaw, ito ang dahilan kung bakit ang mga selulang Ito na matatagpuan malapit sa mga aktibong macrophage ng atay (sa 1st acinus zone) ang unang tumugon sa pagpapalabas ng mga cytokine. Gayunpaman, sa aming pag-aaral, hindi namin sila naobserbahan. transdifferentiation v myofibroblast, at ito ay nagmumungkahi na ang mga cytokine na itinago ng CC at hepatocytes ay maaaring magsilbing salik na sumusuporta sa nasimulan na proseso. transdifferentiation ngunit malamang na hindi nila ito ma-trigger sa isang solong pagkakalantad sa atay na may LPS.
Ang isang pagtaas sa proliferative na aktibidad ng mga cell ay naobserbahan din pangunahin sa 1st zone ng acinus. Ito ay malamang na nangangahulugan na ang lahat (o halos lahat) na proseso ay naglalayong out O- at paracrine regulation ng intercellular interactions, magpatuloy sa periportal zones. Ang isang pagtaas sa bilang ng mga proliferating na mga cell ay naobserbahan mula sa 24 na oras pagkatapos ng pangangasiwa ng LPS; ang bilang ng mga positibong selula ay tumaas hanggang 72 h (maximum ng proliferative activity, Fig. 2, a, b). Ang parehong mga hepatocytes at sinusoidal cells ay dumami. Gayunpaman, paglamlam sa PCNA hindi nagbibigay ang kakayahang matukoy ang uri ng paglaganap sinusoidal na mga selula. Ayon sa panitikan, ang pagkilos ng endotoxin ay humahantong sa pagtaas ang dami ng CC. Ito ay pinaniniwalaan na ito ay tungkol sa ay kapwa dahil sa paglaganap ng mga macrophage ng atay, at dahil sa paglipat ng mga monocytes mula sa ibang mga organo. Ang mga cytokine na inilabas ng CK ay maaaring tumaas ang proliferative capacity ng Ito cells. Samakatuwid, lohikal na ipagpalagay na ang mga proliferating na mga cell ay kinakatawan perisinusoidal Ito cell. Ang pagtaas sa kanilang bilang na naitala sa amin ay tila kinakailangan upang madagdagan ang synthesis ng mga kadahilanan ng paglago at maibalik ang extracellular matrix sa ilalim ng mga kondisyon ng pinsala. Ito ay maaaring isa sa mga link sa mga compensatory-restorative na reaksyon ng atay, dahil ang mga cell ng Ito ay ang pangunahing pinagmumulan ng mga bahagi ng extracellular matrix, stem cell factor at hepatocyte growth factor, na kasangkot sa pagkumpuni at pagkita ng kaibhan. sugat ng epithelial cells ng atay. Wala ang parehong pagbabago ng Ito cell sa myofibroblast ay nagpapahiwatig na ang isang yugto ng pagsalakay ng endotoxin ay hindi sapat para sa pagbuo ng fibrosis ng atay.
Kaya, ang matinding epekto ng endotox sina sanhi ng pagtaas ng bilang desmin-positive Ito cell, na isang hindi direktang tanda ng pinsala sa atay. Dami perisinusoidal tumataas ang mga selula, tila bilang resulta ng kanilang paglaganap. Ang isang episode ng endotoxin aggression ay nagdudulot ng pagbaliktad ang aking pag-activate perisinusoidal Ito cell at hindi humahantong sa kanila transdifferentiation sa myofibroblast. Sa pagsasaalang-alang na ito, maaari itong ipagpalagay na sa mga mekanismo ng pag-activate at transdifferentiation Ang mga cell na ito ay kasangkot hindi lamang sa endotoxin at cytokine, kundi pati na rin sa ilang iba pang mga kadahilanan ng intercellular na pakikipag-ugnayan.
PANITIKAN
1. Mayansky D.N., Visse E., Decker K. // Mga bagong hangganan hepatolohiya... Novosibirsk, 1992.
2. Salakhov I.M., Ipatov A.I., Konev Yu.V., Yakovlev M.Yu. // Ang mga tagumpay ay kasinungalingan, biol. 1998. T. 118, blg. 1.S. 33-49.
3. Yakovlev M.Yu. // Kazan ... m mga yunit zhurn. 1988. Blg 5. S. 353-358.
4. Freudenberg N., Piotraschke J., Galanos C. et al. // Virchows Arch. [B]. 1992. Vol... 61. P. 343-349.
5. Gressner A. M. // Hepatogastronterology... 1996. Vol. 43. P. 92-103.
6. Schmidt C, Bladt F., Goedecke S. et al. // Kalikasan. 1995. Vol. 373, Blg. 6516. P. 699-702.
7. Wisse E., Braet F., Luo D. et al. // Toxicol. Pathol. 1996. Vol. 24, Blg. 1. P. 100-111.
Ang intercellular communication ay maaaring maisakatuparan sa pamamagitan ng paracrine secretion at direktang cell-to-cell contact. Ito ay kilala na ang hepatic perisinusoidal cells (HPC) ay nagtatatag ng regional stem cells niche at tinutukoy ang kanilang pagkakaiba. Kasabay nito, ang HPC ay nananatiling mahinang nailalarawan sa antas ng molekular at cellular.
Ang layunin ng proyekto ay pag-aralan ang mga interaksyon sa pagitan ng rat hepatic perisinusoidal cells at iba't ibang stem cell tulad ng mononuclear cell fraction ng human umbilical cord blood (UCB-MC) at rat bone-marrow na nagmula sa multipotential mesenchymal stromal cells (BM-MMSC).
Mga materyales at pamamaraan. Ang daga BM-MSC at HPC, mga selulang UCB-MC ng tao ay nagmula gamit ang mga karaniwang pamamaraan. Upang pag-aralan ang regulasyon ng paracrine ng HPC, pinagsama-sama namin ang pag-culture ng UCB-MC o BM-MMSC na mga cell gamit ang HPC gamit ang mga Boyden chamber at nakakondisyon na HPC cells media. Ang mga cell na may iba't ibang label ay co-culture at ang kanilang mga pakikipag-ugnayan ay na-obserbahan sa pamamagitan ng phase-contrast fluorescent microscopy at immunocytochemistry.
Mga resulta. Sa unang linggo ng paglilinang, nagkaroon ng autofluorescence ng bitamina A dahil sa kakayahan ng PHC na mag-imbak ng taba. Nagpakita ang BM-MMSC ng mataas na posibilidad na mabuhay sa lahat ng mga modelo ng co-culture. Pagkatapos ng 2 araw na pagpapapisa ng itlog sa nakakondisyon na co-culture ng media ng BM-MMSC na may HPC ay naobserbahan namin ang mga pagbabago sa morpolohiya ng MMSC - bumaba ang mga ito sa laki at ang kanilang mga sprouts ay naging mas maikli. Ang expression ng α-Smooth Muscle Actin at desmin ay katulad ng myofibroblast - isang intermediate na anyo ng kultura ng Ito cells sa vitro. Ang mga pagbabagong ito ay maaaring dahil sa paracrine stimulation ng HPC. Ang pinakamalalim na epekto ng HPC sa mga cell ng UCB-MC ay na-obserbahan sa co-culture ng contact, kaya mahalaga para sa mga cell ng UCB-MC na lumikha ng mga direktang contact sa cell-to-cell para sa pagpapanatili ng kanilang posibilidad. Hindi namin naobserbahan ang anumang cell fusion sa pagitan ng mga cell ng HPC / UCB at HPC / BM-MMSC sa mga co-culture. Sa aming mga karagdagang eksperimento, plano naming pag-aralan ang mga salik ng paglago na ginawa ng HPC para sa hepatic differentiation ng mga stem cell.
Panimula.
Ang partikular na interes sa iba't ibang mga selula ng atay ay perisinusoidal liver cells (Ito cells)... Dahil sa pagtatago ng mga salik ng paglago at mga bahagi ng extracellular matrix, lumilikha sila ng isang microenvironment ng mga hepatocytes, at ang isang bilang ng mga siyentipikong pag-aaral ay nagpakita ng kakayahan ng mga stellate liver cells na bumuo ng isang microenvironment para sa mga progenitor cells (kabilang ang mga hematopoietic cells) at naiimpluwensyahan ang kanilang pagkita ng kaibhan sa mga hepatocytes. Ang mga intercellular na pakikipag-ugnayan ng mga populasyon ng mga cell na ito ay maaaring isagawa sa pamamagitan ng paracrine secretion ng growth factor o direktang intercellular contact, gayunpaman, ang molekular at cellular na batayan ng mga prosesong ito ay nananatiling ganap na hindi ginalugad.
Layunin ng pag-aaral.
Pag-aaral ng mga mekanismo ng pakikipag-ugnayan Ito mga cell na may hematopoietic (HSC) at mesenchymal (MMSC) stem cell sa vitro.
Mga materyales at pamamaraan.
Ang mga cell na ito ng atay ng daga ay nahiwalay sa pamamagitan ng dalawang magkaibang pamamaraan ng enzymatic. Kasabay nito, ang mga stromal MMSC ay nakuha mula sa utak ng buto ng daga. Ang mononuclear fraction ng hematopoietic stem cell ay nakahiwalay sa dugo ng umbilical cord ng tao. Ang mga epekto ng paracrine ng mga cell na Ito ay sinisiyasat sa panahon ng paglilinang ng MMSC at HSC sa daluyan kung saan lumago ang mga cell ng Ito, at sa panahon ng co-cultivation ng mga cell na pinaghihiwalay ng isang semipermeable membrane. Ang epekto ng cell-to-cell contact ay pinag-aralan sa co-cell co-cultivation. Para sa mas mahusay na visualization, ang bawat populasyon ay may label na may indibidwal na fluorescent na label. Ang cell morphology ay nasuri sa pamamagitan ng phase contrast at fluorescence microscopy. Ang mga phenotypic na katangian ng mga kulturang selula ay pinag-aralan gamit ang mga pamamaraan ng immunocytochemical analysis.
Mga resulta.
Sa loob ng isang linggo pagkatapos ng paghihiwalay ng mga perisinusoidal cells, napansin namin ang kanilang kakayahang mag-autofluorescence dahil sa kanilang kakayahang mag-ipon ng taba. Pagkatapos ang mga cell ay pumasok sa intermediate phase ng kanilang paglaki at nakakuha ng isang stellate na hugis. Sa mga paunang yugto ng co-cultivation ng Ito cells na may rat bone marrow MMSCs, ang viability ng MMSCs ay napanatili sa lahat ng opsyon sa cultivation. Sa ikalawang araw, sa panahon ng paglilinang ng mga MMSC sa medium ng kultura ng mga selulang Ito, nagbago ang morpolohiya ng mga MMSC - nabawasan ang laki nila, ang mga proseso ay pinaikli. Ang pagpapahayag ng alpha-smooth muscle actin at desmin sa mga MMSC ay tumaas, na nagpahiwatig ng kanilang phenotypic na pagkakatulad sa myofibroblast, isang intermediate na yugto sa paglaki ng mga aktibong Ito na mga cell sa vitro. Ipinapahiwatig ng aming data ang impluwensya ng mga kadahilanan ng paracrine na itinago ng mga cell ng Ito sa mga katangian ng MMSC sa kultura.
Sa batayan ng co-cultivation ng hematopoietic stem cells na may Ito cells, ipinakita na ang mga hematopoietic stem cell ay nagpapanatili ng kanilang viability lamang sa pakikipag-ugnay sa co-cultivation sa Ito cells. Ayon sa data ng pagsusuri ng fluorescence ng mga halo-halong kultura, ang hindi pangkaraniwang bagay ng pagsasanib ng cell ng iba't ibang populasyon ay hindi ipinahayag.
Mga konklusyon. Para sa pagpapanatili ng posibilidad na mabuhay ng mga hematopoietic stem cell, ang mapagpasyang kadahilanan ay ang pagkakaroon ng mga direktang intercellular contact sa mga cell na Ito. Ang regulasyon ng paracrine ay sinusunod lamang sa panahon ng paglilinang ng mga MMSC sa isang nutrient medium kung saan lumaki ang mga cell ng Ito. Ang pag-aaral ng impluwensya ng mga tiyak na kadahilanan na ginawa ng mga cell ng Ito sa pagkita ng kaibahan ng HSC at MMSC sa kultura ng cell ay pinlano na isagawa sa mga sumusunod na pag-aaral.
Shafigullina A.K., Trondin A.A., Shaikhutdinova A.R., Kaligin M.S., Gazizov I.M., Rizvanov A.A., Gumerova A.A., Kiyasov A.P.
GOU VPO "Kazan State Medical University ng Federal Agency for Healthcare and Social Development"
Sa itaas ay isang eskematiko na representasyon ng isang Ito cell (HSC) na katabi ng pinakamalapit na hepatocytes (PC), sa ibaba ng sinusoidal liver epithelial cells (EC). S - atay sinusoids; KC - Kupffer cage. Kaliwa sa ibaba - Ito na mga cell sa kultura sa ilalim ng isang light microscope. Kanan sa ibaba - binibigyang-daan ka ng electron microscopy na makita ang maraming fatty vacuoles (L) Ito cells (HSC), na mga naka-imbak na retinoid.
Ito cell(kasingkahulugan: stellate na selula ng atay, cell ng imbakan ng taba, lipocyte, Ingles Hepatic Stellate Cell, HSC, Cell ng Ito, Ito cell) - pericytes nakapaloob sa, may kakayahang gumana sa dalawang magkaibang estado - kalmado at activated. Naka-activate na mga cell ng Ito gumaganap ng malaking papel sa - paghubog cicatricial tissue kung sakaling masira atay.
Sa isang buo na atay, ang mga stellate cell ay matatagpuan sa kalmadong estado... Sa ganitong estado, ang mga cell ay may ilang mga outgrowth na sumasaklaw sa sinusoidal maliliit na ugat... Ang isa pang natatanging tampok ng mga cell ay ang presensya sa kanilang cytoplasm mga stock bitamina A(retinoid) sa anyo ng mga fat droplets. Ang Quiescent Ito na mga cell ay bumubuo ng 5-8% ng lahat ng mga selula ng atay.
Ang mga ito cell outgrowth ay nahahati sa dalawang uri: perisinusoidal(subendothelial) at interhepatocellular... Ang mga una ay umalis sa cell body at umaabot sa ibabaw ng sinusoidal maliliit na ugat, tinatakpan ito ng manipis na mga sanga na parang daliri. Ang mga perisinusoidal outgrowth ay natatakpan ng maikling villi at may katangian na mahabang micro-ejections na umaabot pa sa ibabaw ng capillary endothelial tube. Ang mga interhepatocellular outgrowth, na nagtagumpay sa plato ng mga hepatocytes at umabot sa katabing sinusoid, ay nahahati sa ilang mga perisinusoidal outgrowth. Kaya, ang cell ng Ito ay sumasaklaw sa karaniwan nang higit pa sa dalawang katabing sinusoid.
Kung nasira ang atay, pumapasok ang mga selula ni Ito naka-activate na estado... Na-activate phenotype nailalarawan sa pamamagitan ng paglaganap, chemotaxis, contractility, pagkawala ng mga tindahan ng retinoid at ang pagbuo ng mga cell na kahawig myofibroblastic... Ang mga aktibong stellate cell ng atay ay nagpapakita rin ng mas mataas na antas ng bago mga gene, tulad ng, ICAM-1 , chemokines at mga cytokine... Ang pag-activate ay nagpapahiwatig ng simula ng isang maagang yugto ng fibrogenesis at nauuna sa pagtaas ng produksyon ECM- mga protina. Ang huling yugto ng pagpapagaling sa atay ay nailalarawan sa pamamagitan ng pagtaas apoptosis isinaaktibo ang mga cell ng Ito, bilang isang resulta kung saan ang kanilang bilang ay nabawasan nang husto.
Ang paglamlam ay ginagamit upang mailarawan ang mga selula ng Ito sa panahon ng mikroskopya gintong klorido... Natagpuan din na ang isang maaasahang marker para sa pagkita ng kaibahan ng mga cell na ito mula sa iba pang myofibroblast ay ang kanilang pagpapahayag ng protina. reelin.
Kwento [ | ]
V 1876 taon Karl Von Kupfer inilarawan ang mga selula, na tinawag niyang "Sternzellen" (stellate cells). Kapag nabahiran ng gintong oksido, ang mga pagsasama ay kapansin-pansin sa cytoplasm ng mga selula. Maling itinuring ang mga ito bilang mga fragment ng erythrocytes na nakuha ng phagocytosis, binago ni Kupffer noong 1898 ang kanyang mga pananaw sa "stellate cell" bilang isang hiwalay na uri ng mga cell at inuri ang mga ito bilang mga phagocytes... Gayunpaman, sa mga sumunod na taon, ang mga paglalarawan ng mga cell na katulad ng "star cells" ni Kupffer ay regular na lumitaw. Binigyan sila ng iba't ibang pangalan: mga interstitial cell, parasinusoid cells, lipocytes, pericytes. Ang papel ng mga selulang ito ay nanatiling misteryo sa loob ng 75 taon, hanggang sa natuklasan ni Propesor (Toshio Ito) sa perisinusoidal space ang atay ng tao ay ilang mga cell na naglalaman ng mga blotches ng taba. Ito ay tinawag silang "shibo-sesshu saibo" - mga selulang sumisipsip ng taba. Napagtatanto na ang mga blotches ay taba na ginawa ng mga cell mula sa glycogen, pinalitan nito ang pangalan nito ng "shibo-chozo saibo" - mga cell na nag-iimbak ng taba. V