N ацетил цистеин нац. Глутатион и N-ацетил цистеин

4,7 от 5

Ацетилцистеинът, известен също като N-ацетилцистеин или N-ацетил-L-цистеин, е муколитично средство, предназначено за облекчаване на вискозна, гъста храчка при редица респираторни състояния. Ацетилцистеинът се използва и за лечение на състояния, произтичащи от предозиране на парацетамол. Освен това веществото ацетилцистеин е част от капките за очи.

Химическата формула на ацетилцистеина е: C5H9NO3S. Представлява кристален прах с бял или леко жълтеникав цвят, със специфична, лека миризма. Прахът е силно разтворим в алкохол и вода.

Лекарството се произвежда в много страни в различни дозирани форми:

• под формата на инжекционен разтвор;
• под формата на прах за приготвяне на разтвор за перорално приложение;
• под формата на ефервесцентни таблетки;
• под формата на разтвори за инхалация;
• под формата на очни разтвори.

В съответствие с формата на освобождаване, употребата на ацетилцистеин ​​може да бъде интравенозно (инжекции), перорално (вътре), локално (вдишване, капки за очи).

Прахове за приготвяне на перорални разтвори и ефервесцентни таблеткив повечето страни, включително Русия, те се отпускат в аптеките без лекарско предписание. Препарати за интравенозно приложениеа инхалациите се продават стриктно по рецепти.

Механизъм на действие на ацетилцистеин

Ацетилцистеинът (или N-ацетилцистеинът), поради наличието на сулфхидрилна група в неговата молекула, разцепва дисулфидните връзки, които свързват мукопротеините - слузните протеини. Под въздействието на лекарството храчката става по-малко плътна и се увеличава по обем, по-лесно се отхрачва. В резултат на увеличаване на обема на храчката и увеличаване на скоростта на нейното изхвърляне, ефектът на детоксикация се засилва, тъй като храчките съдържат значително количество токсични отпадъчни продукти на патогени.

Сулфхидрилната група на ацетилцистеина реагира с някои вътреклетъчни рецептори, стимулирайки производството на глутатион. Глутатионът от своя страна е в състояние да потисне определени реакции на окисление на липидите, които водят до увреждане на клетките. По този начин ацетилцистеинът има и антиоксидантни свойства.

Лекарството се абсорбира бързо и добре в червата. Максималната му концентрация в кръвната плазма се наблюдава 2-4 часа след поглъщане. Ацетилцистеинът се метаболизира главно в черния дроб.

Показания за употреба на ацетилцистеин

Повечето широко приложениеоткрити перорални форми на ацетилцистеин като муколитично средствоулесняване на отхрачването на храчките. Съгласно инструкциите, ацетилцистеинът се предписва за следните заболявания:

• остър и хроничен бронхит;
• трахеит от бактериален или вирусен произход;
• пневмония;
• бронхиектазии;
• ателектаза (падане, загуба на въздушност) на белия дроб;
• бронхиална астма;
• синузит;
• кистозна фиброза (като част от комплексно лечение).

Както е посочено в инструкциите, ацетилцистеинът е противопоказан при свръхчувствителностлице към това лекарство, с белодробни кръвоизливи и хемоптиза, с обостряне на пептична язва.

Относителни противопоказания за прием на ацетилцистеин са функционална недостатъчност и тежко увреждане на черния дроб и бъбреците.

За деца в бебешка възрастлекарството обикновено не се предписва.

На бременни жени се предписва ацетилцистеин само ако ползата за майката далеч надвишава риска от патологии в развитието на плода. По време на кърмене приемането на ацетилцистеин е разрешено.

Като странични ефектирядко се вижда алергични реакции, гадене и повръщане, тежест в стомаха, стоматит, бронхоспазъм.

Дозировка на лекарството

Дозите на лекарството се изчисляват от лекаря индивидуално. Това отчита не само клинични проявленияно също и възрастта и телесното тегло на пациента.

Въпреки това, има обща схема, която изглежда така:

• на деца на възраст 1-2 години лекарството се предписва 100 mg 1 път на ден
• пациенти на възраст 2-6 години, според инструкциите, ацетилцистеин се приема два пъти дневно, 200 mg;
• деца над 6 години и възрастни приемат лекарство 2-3 пъти на ден, 200 mg.

В остри заболяваниябез усложнения, продължителността на лечението обикновено е 5-7 дни. При хронични заболявания лекарството се приема дълго време, на курсове. Продължителността на курса на лечение се определя от лекаря.

Използване на ацетилцистеин при други заболявания

При редица заболявания ацетилцистеинът или N-ацетилцистеинът се използва широко под формата на интравенозни инжекции . N-ацетилцистеинът под формата на разтвори за интравенозно приложение се използва успешно за лечение на предозиране на парацетамол. В допълнение, лекарството се използва широко в психиатрията за лечение различни видове психични разстройстваособено шизофрения, аутизъм, биполярно разстройствои различни мании. Също така, лекарството се използва при лечение на зависимост от някои наркотични веществаи прекомерен хазарт.

N-ацетилцистеинът е ефективен при лечението на умерени и леки черепно-мозъчни травми, мозъчни увреждания след исхемичен инсулт. В тези случаи лекарството трябва да се приложи възможно най-скоро след нараняване или диагностициране на инсулт.

Взаимодействие на ацетилцистеин с други лекарства

Ацетилцистеинът забавя усвояването на много антибиотици, така че това лекарство не трябва да се приема по-рано от 2 часа след приема на антибиотика.

Употребата на ацетилцистеин намалява токсичния ефект на парацетамола върху черния дроб.

Ацетилцистеинът засилва ефекта на бронходилататорите. И също така - съдоразширяващият ефект на нитроглицерина.

Инструкция за ацетилцистеин

Ацетилцистеинът е муколитик, отхрачващо и детоксикиращо средство лекарствен продукт. Всички тези ефекти се дължат на наличието на химическа структурасвободна сулфхидрилна група, която разрушава дисулфидните връзки в киселинните мукополизахариди на храчките, намалява вискозитета на мукозния секрет и инхибира полимеризацията на мукопротеините. Това лекарство едновременно разрежда вискозните храчки, като значително увеличава обема му (в някои случаи употребата му изисква използването на електрическо засмукване, за да се предотврати "наводняване" на белите дробове, особено при бебета). Също така има активно стимулиращо действие върху клетките на лигавицата, повишава синтеза на глутатион и стимулира процесите на детоксикация. Противовъзпалителните свойства на ацетилцистеина се дължат на потискането на образуването на реактивни кислородни метаболити и свободни радикали, които причиняват развитието на остри и хронично възпалениев белодробната тъкан и дихателните пътища.

Когато се приема перорално, ацетилцистеинът се абсорбира добре, но бионаличността на това лекарство е доста ниска (10%), поради факта, че при преминаване през черния дроб той се деацетилира (метаболизира) с последващо образуване на цистеин. Максималната концентрация на това лекарство в плазмата се достига в рамките на един до три часа, а свързването с плазмените протеини е 50%. Ацетилцистеинът се намира в амниотичната течност, което се свързва с доброто му проникване през плацентарната бариера. Това лекарство под формата на неактивни метаболити се екскретира главно от бъбреците (като диацетилцистеин и неорганични сулфати), а част се екскретира непроменена от червата.

Ацетилцистеинът се използва в терапевтичната, педиатричната практика и отоларингологията при заболявания на бронхопулмоналната система и УНГ органи, които се характеризират със затруднено отделяне на храчки или лигавица (слузесто-гнойна секреция) поради изразена възпалителен процесза облекчаване на непродуктивна дразнеща кашлица, разреждане на вискозен секрет и трансформиране на непродуктивна кашлица във влажна, последвано от отхрачване на храчки.

Ацетилцистеинът или неговите аналози се предписват при бронхит, трахеит, бронхиолит, ларинготрахеит, пневмония, бронхиектазии, бронхиална астма, кистозна фиброза и др. вродени патологиибелите дробове и респираторен тракт. Като част от комплексна терапияс белодробен абсцес, интерстициални заболявания на бронхопулмоналната система, емфизем и ателектаза на белите дробове, които се характеризират с наличие на бронхиална обструкция поради наличието на лигавица. А също и при възпалителни заболяванияв отоларингологията: катарални и гноен среден отит, синузит (синузит, фронтален синузит и етмоидит). Това лекарство се използва широко при следоперативни и посттравматични състояния за отстраняване на вискозни секрети от дихателните пътища.

Ацетилцистеинът е антидот на парацетамол и се използва при отравяне с лекарства и предозиране на парацетамол.

Аналози на ацетилцистеин

Аналози на ацетилцистеина са препарати с основната активна съставка, която е ацетилцистеин: ACC, Fluimucil, Mukoneks, Mukomist, Acestin, както и спрей за нос Rinofluimucil, който има в състава си ацетилцистеин и туаминохептан сулфат.

Противопоказания за прием на ацетилцистеин и неговите аналози

Противопоказания за употребата на ацетилцистеин са:

• Заболявания на стомашно-чревния тракт, характеризиращи се с наличието на ерозии или улцерозни процеси в острата фаза ( пептична язвастомаха и/или дванадесетопръстника, Болест на Крон);
• наличието на хемоптиза и белодробно кървене в анамнезата;
• свръхчувствителност към активното активно вещество (ацетилцистеин) или други спомагателни или формиращи компоненти на лекарството;
• кърмене и бременност;
• детска възраст: деца под две години не използват лекарството под формата на гранули за приготвяне на разтвор в доза от 100 mg и 200 mg, деца под шест години - ацетилцистеин под формата на гранули в доза от 200 mg и деца под четиринадесет години - лекарство в доза от 600 mg.

Внимание и под постоянно динамично наблюдениелекуващият лекар, това лекарство се предписва на пациенти с разширени венивени на хранопровода, със заболявания на надбъбречните жлези, с бронхиална астма, както и с чернодробна и / или бъбречна недостатъчност.

N-ацетилцистеин

N-ацетилцистеинът е синоним на името на лекарството ацетилцистеин, със съкратената форма на името ACC.

Ацетилцистеин за инхалация

В зависимост от формата на освобождаване, ацетилцистеинът се прилага перорално (като разтвор, приготвен от гранули), парентерално (in / in, in / m), инхалаторно, локално или ендобронхиално. Режимът на дозиране е индивидуален и зависи от възрастта на пациента, нозологичната форма на заболяването и общо състояниеболен.

Инхалация Ацетилцистеин се предписва по една ампула (300 mg) от един до два пъти на ден през пулверизатор или друго оборудване за инхалиране (с изключение на инхалатори с влажна пара) за продължителност от пет до десет дни, с хроничен процес и кистозна фиброза , това лекарство може да се предписва и по-дълги курсове.

Цена на ацетилцистеин

Средната цена на лекарството Ацетилцистеин или неговите аналози е 130-300 рубли, в зависимост от формата на освобождаване, производителя и дозата.

Отзиви за ацетилцистеин

AT клинична практикаАцетилцистеинът се използва широко като отхрачващо и противовъзпалително синтетично лекарство. В процеса клинични изследваниявече са идентифицирани нови механизми фармакологично действие- антиоксидантни, глутатион-заместващи и детоксикиращи ефекти на N-AC. Този факт ви позволява да го предписвате за лечение на интоксикация. различни етиологииособено в случай на отравяне с ацетаминофен или соли тежки метали(олово) при токсични реакции при въвеждане на рентгеноконтрастни вещества и като спомагателно средство при химиотерапия. Ацетилцистеинът се използва и за профилактика и лечение на сърдечно-съдови патологии ( артериална хипертонияи атеросклероза). Към днешна дата, в регистъра на клиничните изпитвания, създаден от СЗО, ефективността на N-ацетилцистеин се проучва в сърдечната хирургия, лечението на индуцирана от контраст нефропатия, онкологични заболяванияи диабет.

Възпалителните патологии могат да бъдат предизвикани от всеки фактор, ако имунитетът на човек е отслабен. Естествено, те трябва да бъдат лекувани. "N-Ацетилцистеин" е лекарство, което има противовъзпалително, отхрачващо и силно детоксикиращо действие.

Състав и форми на освобождаване

Представеното лекарство е внос, тъй като се произвежда в САЩ. Произвежда се под формата на целулозни капсули, от които в опаковката има 100 броя. Под формата на прах не можете да закупите такова лекарство навсякъде.

"N-ацетилцистеин" в състава си съдържа основните активно веществоацетилцистеин в количество от 100 до 600 mg. Има и допълнителни елементи: селен, молибден. Представеният агент е много разтворим във вода, така че неговата бионаличност е много по-висока от тази на други лекарства и е 90%.

Характеристики на лекарството

Средството има добър муколитичен ефект, тъй като ефективно разрежда храчките и улеснява отстраняването им от дихателната система. Експекторацията е по-бърза и по-добра, а вискозитетът на слузта намалява. Ефективно лекарствое дори при наличие на гнойни храчки.

Активното вещество на лекарството участва в производството на глутатион, който е най-мощният антиоксидант и помага за унищожаването на много токсини в организма. Самото лекарство има такъв ефект, тъй като съдържа групата SK. Продуктът предотвратява образуването на злокачествени клетки, поради което се използва за профилактика.

"N-ацетилцистеин" добре неутрализира ефектите на тежките метали. Той ефективно предпазва човек от отрицателно въздействиеотработени газове, живачни изпарения, тютюнев дим, както и други външни фактори. При различни видове отравяния може да се използва като антидот.

Поради потискането на синтеза на ензими, които поддържат възпалението, лекарството е в състояние да елиминира и дори да предотврати този процес. Лекарството може да се използва за предотвратяване на развитието на атеросклероза. Освен това продуктът има защитен ефект върху черния дроб и мозъчните мембрани.

При лекарство като N-ацетилцистеин, механизмът на действие е прост: неговите компоненти са в състояние да разрушат връзките на киселинните мукополизахариди на храчките, така че става по-малко вискозен.

Показания за употреба

"N-ацетилцистеин" се предписва за лечение на:

• Патологии дихателни органи, които са придружени от производството на упорита, вискозна слуз: пневмония, остра и хроничен бронхит, бронхиална астма, белодробен абсцес, емфизем, ринит, синузит, гноен отит.
• Дефицит на глутатион в черния дроб.
• Кистозна фиброза.
• Интоксикация на тялото поради прекомерна употреба на алкохол, лекарства.
• Патологии на сърдечно-съдовата система: хипертония, атеросклероза, както и тяхната превенция.
• Енцефалопатии.
• Дефицит на сяра, провокиращ косопад, чупливи нокти.
• Хронична обструктивна белодробна болест.

И лекарството се използва и за предотвратяване на заболявания, причинени от излагане на рентгенови лъчи (при работници от атомни електроцентрали). Веществото се препоръчва за употреба от тези пациенти, които не консумират достатъчно протеин.

Лекарството се използва за профилактика инфекциозен процесслед респираторна операция.

Какви са противопоказанията за употреба?

Ако на пациента е предписан "Ацетилцистеин N" (ацетил 1 цистеин NAC), той трябва да е наясно, че лекарството не винаги може да се използва. Има такива противопоказания за употребата му:

1. Индивидуална непоносимост към основното вещество или други негови компоненти.
2. Хемоптиза или вътрешно кървене.
3. Стомашна язва или увреждане на дванадесетопръстника по време на обостряне.
4. Бременност.
5. период на кърмене.
6. Разширени вени в хранопровода.
7. Непоносимост към фруктоза (тя е част от лекарството).

Преди да започнете да приемате лекарството, е задължителна консултация с лекар.

Начин на приложение

Ако пациентът трябва да приема "N-ацетилцистеин", инструкцията предвижда следните методи на приложение:

1. Деца под 2 години: 100 mg 2 пъти на ден, от 2 до 6 години - 100 mg три пъти дневно.
2. Деца над 6 години и възрастни: 200 mg 2-3 пъти дневно.

В интрамускулна инжекцияеднократна доза за възрастен пациент е 300 mg, дете - 150 mg. Инжектирането се прави веднъж дневно. При заболявания на дихателните пътища, които се характеризират с кратък периодразбира се, достатъчно е да се подложите на 5-дневен курс на лечение.

Какви странични ефекти причинява лекарството?

Преди да използвате лекарството NAC "N-ацетилцистеин", е необходимо да се помисли кое нежелани последицитой може да се обади. Така че лекарството може да провокира развитието на такива странични ефекти:

• Гадене и повръщане, диария, киселини, усещане, че стомахът е пълен.
• Леко усещане за парене с плитко инжектиране на лекарството в мускула. Неприятно усещанеминава бързо.
• Алергични кожни обриви: сърбеж, уртикария и бронхоспазъм.
• Дразнене на дихателните пътища, стоматит или ринит при употреба на лекарството под формата на вдишване.
• Кървене от носа.
• Шум в ушите.
• Промяна лабораторни показателикръв.
• главоболие.
• тахикардия.
• Понижено кръвно налягане.

Появата на нежелани реакции е ниска, ако лекарството се използва съгласно инструкциите. Ако се почувстват неприятни явления, трябва незабавно да спрете приема на лекарството и да се консултирате с лекар, за да коригирате лечението.

специални инструкции

Ако пациентът трябва да използва "N-ацетилцистеин", инструкциите за употреба говорят за следните характеристики на лекарството:

• Необходимо е да бъдете особено внимателни при използването на това лекарство за тези хора, които са диагностицирани с тежко нарушение на функционалността на черния дроб и бъбреците.
• Трябва да се обърне повишено внимание на пациенти с астма, както и патологии на надбъбречните жлези. При астматици при предписване на лекарства е необходимо да се осигури дренаж на храчките.
• Използването на лекарството за лечение на новородени е възможно само по здравословни причини. В този случай дозата не трябва да надвишава 10 mg / kg, а лечението се извършва под стриктното наблюдение на лекар.
• Между последната и следващата доза от лекарството трябва да спазвате интервала от време - 1-2 часа.
• Ако пациентът пие голям бройтечност, това ще засили муколитичния ефект на лекарството.
• В обструктивен бронхитсъщо така е необходимо да се внимава, тъй като бронхиалната проходимост трябва постоянно да се следи.
• Когато използвате лекарството, са необходими стъклени съдове. Не трябва да има контакт с метали, каучук, кислород, както и вещества, които могат бързо да се окислят.
• "N-ацетилцистеин", чиито прегледи са предимно положителни, не оказва неблагоприятно влияние нервна система(скорост на психомоторните реакции и способност за шофиране).

В правилна употребаняма да донесе средства нежелани реакции. В случай на предозиране на лекарството е необходимо спешно да се измие стомаха.

Взаимодействие с други лекарства

Не използвайте представеното лекарство заедно с антитусивни лекарства. Това ще провокира стагнация на храчките поради потискане на кашличния рефлекс.

Когато се комбинира с тетрациклини и пеницилинови антибиотицивъзможно взаимодействие с тиоловата група на ацетилцистеина. Тоест тук има несъвместимост. Представеното лекарство може да се използва заедно с парацетамол, докато токсичният ефект върху черния дроб на последния е намален. Съвместно приложениепродукти с "нитроглицерин" насърчава изразена вазодилатация.

Характеристики на съхранение и цена на лекарството

Така представеното лекарство може да се съхранява 36 месеца. Освен това температурата, при която лекарството не губи свойствата си, не трябва да надвишава 25 градуса. Естествено, мястото за съхранение не трябва да е достъпно за деца.

Що се отнася до цената, за 10 сашета за готвене лекарствен разтвортрябва да платите около 50 рубли. Въпреки факта, че цената на продукта е малка, той се счита за доста ефективен. Можете да закупите лекарство във всяка аптека и това не изисква рецепта.

Собствениците на патент RU 2549433:

Изобретението се отнася до метод за лечение на бозайник с ендометриоза. Този метод включва импулсен или периодичен перорално приложениеза 3-5 последователни дни, последвани от 2-4 дни почивка или за 1-3 последователни дни, последвани от 1-2 дни почивка на фармацевтичен състав, съдържащ N-ацетил-L-цистеин за период от най-малко два месеци . N-ацетил-L-цистеинът при този метод се прилага в доза от 20 до 90 mg/kg/ден. Заявения метод осигурява по-значителен ефект върху симптомите на ендометриозата в сравнение с традиционното ежедневно приложение на N-ацетил-L-цистеин. 10 з.п. ф-ли, 7 ил., 2 маси, 3 пр.

ОБЛАСТ НА ИЗОБРЕТЕНИЕТО

Настоящото изобретение се отнася до фармацевтичен състав, съдържащ N-ацетил-L-цистеин, полезен при лечението на ендометриоза и индикации, свързани с ендометриоза.

Ендометриозата е третата водеща причина за гинекологична хоспитализация в Съединените щати и засяга приблизително 14 милиона жени в Европа. Често използваните честоти на ендометриоза включват 5-10% от всички жени репродуктивна възрасти 30-40% от всички жени с проблеми с безплодието. Това е заболяване, характеризиращо се с наличието извън маточната кухина на тъкан, която е хистологично идентична с ендометриума, тоест мембраната, която огражда вътрешна частматка на бозайници. Тази анормално разположена тъкан се развива в израстъци или лезии (наричани още импланти или възли), които реагират на менструален цикълточно като ендометриалната тъкан на матката: всеки месец тъканта расте, разпада се и се отхвърля. Докато менструална кръвизтича от матката, кръвта и тъканите, откъснати от ендометриални неоплазми, няма изход. Това води до вътрешно кървене, откъсвам кръвоносни съдовеи тъкан от лезии и последващо хронично възпаление.

Двата най-чести симптома на ендометриозата са болка и безплодие. Симптомите могат да включват: дисменорея, която е болка преди или след менструални периодикакто и болка по време на или след секс; тазов хронична болкаили болки в долната част на гърба и червата; обилна менструация или кървави проблемии кървене между менструациите; болезнени движения на червата или болезнено уриниране по време на менструация; безплодие.

Причината за ендометриозата в момента е неизвестна и са предложени няколко теории, които да оправдаят извънматочната миграция и имплантиране на ендометриални клетки. Последните данни установяват връзка между появата на ендометриоза и промененото състояние на тъканта на произход: еутопичният ендометриум. В изкуството нараства вярата, че неконтролираната миграция, имплантиране и растеж на ендометриоми възникват от нарушения в еутопичните ендометриални клетки.

Понастоящем няма лечение за ендометриоза. Има много възможности за лечение и има начини за минимизиране на симптомите, причинени от това състояние. С изключение на употребата на аналгетици за лечение на болка, лечението на ендометриозата се свързва главно с потискане на функцията на яйчниците при секрецията на естрогени и следователно с хормонални лечения при различни субекти, до предизвикване на менопауза при повечето тежки случаи. хирургията се използва за отстраняване на ендометриоми, сраствания, перитонеални импланти и дълбоки лезии, разположени в ректовагиналния септум или другаде (т.е. пикочен мехур, черва) и за облекчаване на болката. Въпреки това, рецидивите се появяват както след терапия, така и след хирургично лечение. Младите жени с ендометриоза често се сблъскват с трудни решения по отношение на бъдещата им репродукция. Хормонално лечение, предназначен за потискане на функцията на яйчниците, е несъвместим с бременността.

N-ацетил-L-цистеинът (наричан по-долу NAC) е добре известно лекарство, което се използва главно като муколитично средство и при лечението на отравяне с парацетамол. AT последните годинитой също е установено, че има и други полезни свойства, като противовъзпалителни и антипролиферативни ефекти и е предложен за лечение на редица различни нарушенияи симптоми като шизофрения, диабет и рак.

Предишни проучвания, изследващи молекулярните механизми, залегнали в основата и свързани с ендометриозата, предполагат, че повишените скорости на клетъчна пролиферация при ендометриозата могат да бъдат индуцирани от оксидативен стрес в ендометриозната тъкан, причинен от свободни радикали или ROS (реактивни кислородни видове - реактивни кислородни видове). По този начин се предполага, че новите терапевтични стратегии за ендометриоза могат да се основават на антиоксиданти и ROS акцептори като NAC.

Предшестващо състояние на техниката

Шарлот Нго и др. предположи (The American Journal of Pathology (2009), Vol. 175, No. I, стр. 225-234), че оксидативният стрес може да индуцира или засили пролиферацията на ендометриоидни клетки при ендометриоза. Следователно антиоксиданти като NAC са предложени за лечение на ендометриоза. Изследване на първични клетъчни линиипациенти с ендометриоза, както и в миши модел с имплантирана ендометриоидна тъкан от човешки произход, показват, че NAC премахва признаците на оксидативен стрес, както и повишена пролиферация в съответните модели. По този начин се предполагаше, че антиоксиданти като NAC могат да се използват като безопасни и ефективно лечениеендометриоза.

Настаран Фойузи и др. също така предложи (Fertility and Sterility (2004), Vol. 82, Suppl. 3, стр. 1019-1022), че антиоксиданти като NAC могат да се използват за лечение на ендометриоза. Статията описва проучване in vitro, при което клетки, изолирани от здрави индивиди, както и пациенти с ендометриоза, са лекувани с друг антиоксидант, като NAC. Всички антиоксиданти инхибират пролиферацията на ендометриалните стромални клетки.

В Yan Wo и Sun-Wei Guo (Gynecologic and Obstetric Investigation (2006), Vol.62, No. 4, стр. 193-205; European Journal of Obstetrics & Gynecology and Reproductive Biology, (2008), Vol.137, pages 198 -203); патентна заявка US 2007/0287676 A1) изследва ефекта на NAC върху разпространението и ареста клетъчен цикълв безсмъртни човешки ендометриални стромални клетки и в сравнение с други средства, предложени за лечение на ендометриоза. Доказано е, че NAC има ефект както върху пролиферацията, така и върху спирането на клетъчния цикъл, макар и не толкова силно, колкото инхибиторите на хистон деацетилаза.

В проучване на S. Estany et al. (Journal of reproductive Immunology (2007), том 75, стр. 1-10) беше показано, че антиоксидантната активност на NAC и други антиоксидантни агенти върху ендометриалните клетки в култура подобрява жизнеспособността на окислените клетки, като предотвратява индуцирането на H 2 O 2 клетъчна цитотоксичност.

Друго свързано предшестващо състояние на техниката включва US 2003/0190381 A1, WO 2004/096206 A2, US 6239137 B1, US 2003/0119875 A1, US 2004/0014672 A1 и WO 2002/0248.

Друго описание на предшестващото състояние на техниката молекулярно действие NAC в лечението на рак включва T. Parasassi, et. ал. (Клетъчна смърт и диференциация (2005), том 12, № 10, стр. 1285-1296); E.K. Krasnowska et. ал. (Биология и медицина на свободните радикали 2008, 45(11): 1566-72) и A.C. Gustafsson et. ал. (BMC Cancer (2005), 5:75).

ОБЕКТИ НА ИЗОБРЕТЕНИЕТО

Клиничният резултат от лечението с NAC при ендометриоза, според изобретателите, не е определен в предшестващото състояние на техниката, нито е предложен ефективен режим за лечение на ендометриоза или използването на NAC за лечение на индикации, свързани с ендометриоза.

Следователно, основната цел на настоящото изобретение е да предостави решение на проблема за получаване на фармацевтичен състав, съдържащ N-ацетил-L-цистеин (NAC) за лечение на ендометриоза и свързани с ендометриоза индикации при хора и бозайници. Един аспект на тази цел е да се осигури фармацевтичен състав, съдържащ N-ацетил-L-цистеин (NAC) за използване в ефективна схемаприложение за лечение на ендометриоза и симптоми, свързани с ендометриоза при бозайници, включително хора.

РЕЗЮМЕ НА ИЗОБРЕТЕНИЕТО

Предполага се, че NAC може да се използва в нови терапевтични стратегии за ендометриоза, базирани на използването му като антиоксидант и улавящ ROS. Авторите на настоящото описание показват, че NAC индуцира молекулярни и клетъчни промени, които не само инхибират пролиферацията, но също така индуцират диференциацията на болната тъкан спрямо нормалната тъкан.

Тези открития накараха настоящите изобретатели да предложат нова употреба на NAC при лечението на ендометриоза и свързани с ендометриоза индикации при човек или бозайник. Освен това? предложен диапазон от ефективни дози NAC при лечението на ендометриоза. В едно изпълнение на настоящото изобретение може да се използва предписан режим на лечение, например за контролиране на честотата и интензивността симптоми на болка(дисменорея, диспареуния и ациклична хронична тазова болка), за намаляване на размера на ендометриозните лезии, които евентуално изчезват, за намаляване на рецидивите след операция и/или за подобряване на оплождането. Странични ефектитова лечение практически не съществува и по-специално, дадено лечениене пречи на бременността.

Настоящото изобретение осигурява фармацевтичен състав, съдържащ N-ацетил-L-цистеин за използване при лечението на бозайник, включително човек с ендометриоза, където съставът е предназначен за импулсно или периодично орално приложение, за период от време от два месеца или повече, N-ацетил-L-цистеин в доза от 20 до 90 mg/kg/ден на ден, когато се прилага.

В едно изпълнение на изобретението е осигурен фармацевтичен състав, съдържащ N-ацетил-L-цистеин за горната употреба, при което съставът е предназначен да се прилага в продължение на 3-5 последователни дни, последвани от 2-4 дневна почивка . В още едно изпълнение, фармацевтичният състав, съдържащ N-ацетил-L-цистеин, е предназначен да се прилага в продължение на 1-3 последователни дни, последвани от 1-2 дни почивка.

В едно изпълнение на изобретението е осигурен фармацевтичен състав, съдържащ N-ацетил-L-цистеин за горната употреба, при което съставът е предназначен да прилага N-ацетил-L-цистеин в доза от 30 до 60 mg/kg/ден в деня на приложение. В още едно изпълнение, фармацевтичният състав е за приложение на N-ацетил-L-цистеин в доза от 30 до 45 mg/kg/ден в деня на приложение.

В едно изпълнение на изобретението е осигурен фармацевтичен състав, съдържащ N-ацетил-L-цистеин за употребата, описана по-горе, при което фармацевтичният състав е защитен от светлина. В още едно изпълнение, фармацевтичният състав е водоразтворима таблетка. В още едно изпълнение, фармацевтичният състав съдържа натриев бикарбонат. В едно изпълнение, фармацевтичният състав е формулировка с бавно освобождаване и/или стомашен протектор.

В едно изпълнение, изобретението осигурява фармацевтичен състав, съдържащ N-ацетил-L-цистеин за използване при лечението на болка, причинена от ендометриоза. В друго изпълнение, фармацевтичният състав е за използване при лечението на безплодие, причинено от ендометриоза. В още едно изпълнение, фармацевтичният състав е за използване при предварително лечение на бозайници с ендометриоза преди лапароскопия или операция. В едно изпълнение, фармацевтичният състав е за използване при лечението на бозайници с ендометриоза след лапароскопия или операция за предотвратяване на рецидив.

В един аспект на изобретението е осигурен метод за лечение на бозайник с ендометриоза, включващ перорално приложение на фармацевтичен състав, съдържащ N-ацетил-L-цистеин, на споменатия бозайник в импулсен или периодичен режим за период от два месеца или повече N-ацетил-L-цистеин в доза, която варира от 20 до 90 mg/kg/ден на ден, когато се прилага. В едно изпълнение на метода, фармацевтичният състав се прилага в продължение на 3-5 последователни дни, последвани от 2-4 дни почивка. В още едно изпълнение, фармацевтичният състав се прилага в продължение на 1-3 последователни дни, последвани от 1-2 дни почивка.

В едно изпълнение на метода, дозата на N-ацетил-L-цистеин е 30 до 60 mg/kg/ден в деня на приложение. В още едно изпълнение на метода, дозата на N-ацетил-L-цистеин е 30 до 45 mg/kg/ден в деня на приложение.

В едно изпълнение, методът е за лечение на болка, причинена от ендометриоза. В други изпълнения, методът е за лечение на безплодие, дължащо се на ендометриоза, за предварително лечение на бозайници с ендометриоза преди лапароскопия или операция, или за лечение след лапароскопия или операция, за предотвратяване на повторение на ендометриоидни лезии.

КРАТКО ОПИСАНИЕ НА ГРАФИКАТА

Настоящото изобретение ще бъде обяснено по-подробно в следващото описание, с позоваване на придружаващите чертежи, където:

Фигура 1 показва инхибиторния ефект на NAC върху растежа на ендометриални лезии при мишки, както е показано в Пример 1. Средно общо тегло на контролни (n=10) и NAC-третирани (n=10) животни, 21 дни след имплантирането, със стандарт грешка . Значение стр<0,05. Во вставках над гистограммами воспроизведены типичные картины эндометриом для контроля (А) и обработки NAC (В). Полоска: 1 см;

Фигура 2А показва представителни полуколичествени RT-PCR (полимеразна верижна реакция в реално време) гелове, както е показано в Пример 1. Фигура 2В показва намалена експресия на COX-2 и MMP-9 в кисти на мишки, третирани с NAC, както е показано в Пример 1 Полуколичествени RT-PCR стойности, осреднени от 5 контролни и 5 NAC-третирани мишки със стандартна грешка;

Фигура 3 показва транслокация на E-cadherin в кисти на мишки, третирани с NAC, както е показано в Пример 1. Представителни изображения на имунооцветяване с E-cadherin в ендометриоми от контролни (A и B) и NAC-третирани мишки (C и D). В контролните проби може да се наблюдава дифузно кафеникаво оцветяване в цялата цитоплазма на епителните клетки, докато в пробите, третирани с NAC, това оцветяване е ясно ограничено на нивото на клетъчно-клетъчните контакти. Увеличение на оригинала 40x;

4 показва атенюирано оцветяване с Cox-2 в кисти от третирани с NAC животни, както е показано в Пример 1. Представителни изображения на имунохистохимично оцветяване на кисти от контролни мишки (A-C) и от мишки, третирани с NAC (D-F). В контролните проби се открива забележимо присъствие на кафеникаво оцветяване в няколко области, докато то трудно може да бъде открито в пробите, третирани с NAC. Увеличение на оригинала 40x;

Фигура 5 показва атенюирано оцветяване с Ki-67 в кисти на животни, третирани с NAC, както е показано в Пример 1. Представителни изображения на имунохистохимично оцветяване на кисти от контролни мишки (A-C) и мишки, третирани с NAC (D-F). Стрелките сочат към оцветени, пролифериращи клетки. Увеличение на оригинала 40x;

6 е схематично представяне на предшестващото състояние на техниката, показващо няколко механизма на работа, когато пролифериращи клетки, които са показани в примера на ракови клетки, се третират с NAC. Тези механизми се свеждат до терминална клетъчна диференциация. Примерите от настоящото описание също показват, че поне някои от тези ефекти също се появяват, ако NAC съгласно настоящото изобретение се използва за лечение на ендометриоза;

7 са показани резултатите от предварително клинично проучване, проведено върху общо 64 жени, 33 лекувани с NAC и 31 нелекувани контроли. Промяната в размера на кистата след три месеца лечение с NAC се измерва чрез ултразвук като максимален диаметър. На фиг.1а е показана промяната в размера на кистите в абсолютни числа при лекувани пациенти и контроли. 7В показва същото сравнение като процентна промяна.

ПОДРОБНО ОПИСАНИЕ НА ИЗОБРЕТЕНИЕТО

NAC като цяло

N-ацетил-L-цистеин (NAC) е добре известно малко молекулно фармацевтично лекарство с химическа формула

Свойствата на NAC са свързани главно с неговата тиолова група, което го прави ефективен в повечето биохимични пътища, включващи трипептид глутатион (GSH), който присъства във всички човешки тъкани в относително високи концентрации, дори над 10 mM. Цистеинът наистина е сред трите аминокиселини, съдържащи GSH, така че NAC се счита за предшественик на GSH с неговия деацетилиран цистеин. NAC е бил и все още се използва широко като муколитично средство, когато начинът на действие обикновено е свързан с редокс разграждането на чувствителните цистеинови дисулфидни мостове в слузните протеини. Всъщност NAC участва в сложния редокс цикъл на тиоловите групи, където действат няколко ензима. Всъщност цикълът на образуване и разрушаване на дисулфида, общият механизъм, чрез който се регулира протеиновата активност и клетъчната сигнализация, е от изключително физиологично значение. Ензими като протеин тирозин фосфатази и тирозин кинази, например, играят ключова роля в контрола на клетъчния цикъл, клетъчната пролиферация и диференциация и много от тях се регулират от редокс състоянието на техните цистеини.

Като цяло, въпреки че подробните механизми на действие не са окончателно изяснени, NAC изглежда действа върху всички биохимични пътища, в които участва GSH. Ензимите и протеините, чиято активност се модулира от GSH, действат в няколко процеса, директно или чрез мрежа от сигнални пътища. В тази ситуация NAC може или да действа подобно на GSH, или може да бъде дори по-ефективен от GSH.

GSH, например, обикновено образува конюгати с реактивни метаболити, образувани от парацетамол и насърчава тяхната детоксикация. Въпреки това, когато се приема твърде много парацетамол, GSH се изчерпва и метаболитите на парацетамол започват да взаимодействат с клетъчните протеини, което в крайна сметка води до клетъчна смърт. При лечението на преходна чернодробна недостатъчност след отравяне с парацетамол, NAC действа вместо GSH при детоксикацията на метаболитите на парацетамол. Смята се, че NAC практически няма нежелани странични ефекти, както е показано и от високите дози NAC, които се използват при лечението на отравяне с парацетамол - вероятно около 40 g/ден за пациент с тегло 70 kg.

За разлика от GSH трипептида, който може да се разгради още в стомаха, простата NAC молекула дифундира свободно в почти всички тъкани и клетки. Фармакокинетичните проучвания на NAC определят пикова плазмена концентрация, достигната за около един час, с елиминационен полуживот от приблизително три часа. Пълното освобождаване се извършва между шест и дванадесет часа.

NAC като антипролиферативен, диференциращ агент

Наскоро изобретателите откриха, че N-ацетил-L-цистеинът (NAC) има подчертан антипролиферативен ефект върху раковите клетки от епителен произход - от същия произход като ендометриалните клетки (Cell Death and Differentiation 2005, 12(10): 1285-1296). Въпреки че ракът и ендометриозата са предимно несвързани заболявания, те споделят някои свойства, които в крайна сметка доведоха изобретателите до идеята, че NAC може да бъде полезен и при лечението на ендометриоза. По-специално, ендометриозата, подобно на рака, е пролиферативно заболяване, макар и с различен основен молекулен механизъм и етиология. Получените наблюдения за рак ще бъдат представени в тази спецификация като предпоставка за ефектите на NAC и като вероятен начин на действие също при ендометриоза.

NAC се използва за спиране на пролиферацията и индуциране на диференциация в две аденокарциномни клетъчни линии и в първични нормални кератиноцитни клетки, всички клетки от епителен произход. В тези системи диференциацията се характеризира морфологично, биохимично и чрез анализ на генната експресия (анализът на генната експресия е широко обхванат в BMC Cancer 2005, 5: 75).

В проучване за рак, антипролиферативният ефект на NAC не е свързан с клетъчна смърт или токсичност, а вместо това е резултат от активирането на физиологичен път на диференциация, който може да се разглежда като нормализиране на клетъчните функции спрямо тъканта на произход.

В допълнение към намалената пролиферация, морфологията на третираните с NAC ракови клетки също се промени. In vitro, епителните клетки, когато се пролиферират активно, проявяват неправилна морфология - мезенхимна морфология - и често образуват няколко многоклетъчни слоя. Обратно, когато клетките преминават през процес на диференциация към структурата и функцията на крайната им целева тъкан, те спират да се размножават, тяхната морфология става правилна многоъгълна, всяка клетка понякога е по-дебела и образуват монослой от съседни клетки. Този процес е придружен от увеличени връзки клетка-клетка и клетъчен субстрат, в съответствие с преминаването от пролифериращ мезенхим към адхезивен, по-малко подвижен и диференциран фенотип.

Като цяло, сложна серия от метаболитни промени бяха открити след добавянето на NAC към раковите клетки, всички от които водят до спиране на неконтролирана пролиферация и индуциране на тяхната терминална диференциация, както е показано на схемата, показана на Фиг.6.

Специално лечението с NAC индуцира значително увеличение на адхезионните комплекси клетъчна клетка и клетъчен субстрат.Неконтролираната пролиферация може да се припише на състояние, при което клетките са загубили контактно инхибиране и способността им да реагират на сигнали за диференциация. Клетките, влизащи в пътя на диференциация, показват значително увеличение на комплексите за свързване на клетките и този процес обикновено се нарича контактно инхибиране. Някои доказателства сочат, че сигналите към клетките за влизане в крайната точка на диференциация генерират компоненти на самите междуклетъчни комплекси. Тези връзки също са път за разпространение на сигнали между клетките.

Мигриращите клетки, като ендометриални клетки при ендометриоза, трябва, освен че имат намален брой адхезионни комплекси, да имат и секретират достатъчно активни матрични металопротеинази, ензими, предназначени да разграждат извънклетъчния матрикс, за да позволят миграция през извънклетъчния матрикс. при този модел епителен рак беше установено, че NAC потиска този ензим, което предполага, че клетъчната миграция е забавена. Също така, Пример 1 от това разкритие показва, че NAC, когато се използва съгласно настоящото изобретение за лечение на ендометриоза, потиска експресията на матрична металопротеиназа 9 (ММР-9). Това предполага, че NAC може да попречи на клетъчната миграция както от еутопичен ендометриум към нови импланти (предотвратяване на рецидив), така и в ендометриозната тъкан (предотвратяване на по-нататъшни лезии).

Известният ефект на NAC също е свързан с неговия противовъзпалителен ефект, причината за добавянето му към семейството на нестероидните противовъзпалителни средства (НСПВС). Профилът на генна експресия на клетки, третирани с NAC, наистина показва потискане на циклооксигеназа-2 (COX-2), чиято индукция е свързана с възпалителни реакции. Също така, този ефект на NAC беше потвърден в ендометриозната тъкан в Пример 1 от това разкритие, което показва, че NAC може също да облекчи симптомите, свързани с възпаление при ендометриоза.

Като пример за способността на NAC да модулира сигналната трансдукция в клетките чрез редокс-отзивчивия статус на цистеините, ензимът не-рецепторна тирозин киназа c-Src беше изследван в in vitro модел на карцином на дебелото черво (CaCo-2) и яйчниците карциномни (OVCAR-3) клетки (Free Radicals Biology and Medicine 2008, 45(11): 1566-72). c-Src участва в превключвателя за пролиферация/диференциране и е активен в сглобяването/разглобяването на свързани комплекси и цитоскелетната организация. Тази киназа се регулира и свръхекспресира при редица човешки ракови заболявания, особено при карциноми на дебелото черво и яйчниците. Забележителни международни усилия за разработване на лекарства наистина са насочени към намиране на специфични инхибитори на c-Src. Вместо това беше установено, че чрез просто лечение на аденокарциномни клетки с NAC, целта за потискане на c-Src може да бъде постигната чрез механизъм, свързан с редокс преходи в чувствителни цистеинови остатъци в c-Src, способни да "изключват" тази киназа , доставяйки го в ендолизозомите, където се съхранява или унищожава. По този начин, NAC, който индуцира терминална диференциация в аденокарциномни клетки, се свързва с понижаване на c-Src. Струва си да се отбележи, че активността на тази киназа изглежда е важна по време на децидуалната фаза на ендометриалния клетъчен цикъл, което предполага, че нейната дерегулация е включена в ендометриозата (Endocrine Journal, 2008, 55(5): 795-810).

NAC и ендометриоза

Както беше обяснено в предишния раздел, по-рано се предполагаше, че NAC може да се използва в нови терапевтични стратегии за ендометриоза, базирани на използването му като антиоксидант и ROS уловител. В описаните по-горе проучвания за рак на епитела, настоящите изобретатели откриха, че NAC има някои полезни ефекти, различни от антиоксидантни и ROS акцепторни ефекти върху епителните ракови клетки, и че такива ефекти биха били полезни и при лечението на ендометриоидни клетки, ако ендометриоидните клетки реагират по подобен начин. По-специално, се очакваше, че антипролиферативните и диференциращи ефекти на NAC, открити при рак, могат да се появят и при употребата на NAC при лечението на ендометриоза.

Смяташе се, че ако NAC има следните молекулярни ефекти, наблюдавани при рак и върху ендометриоидната тъкан, той може да бъде полезен при лечението на ендометриоза;

1) увеличаване на връзките клетка-клетка и клетъчен субстрат в съответствие с преминаването от пролифериращ към диференциран фенотип;

2) намаляване на експресията на матрични металопротеинази, свързано с намаляване на клетъчната миграция;

3) намалена експресия на циклооксигеназа-2 (COX-2), свързана с намален възпалителен отговор;

4) модулиране на активността на c-Src за регулиране на цикъла на ендометриална пролиферация/децидуализация и за насърчаване на възможна бременност.

Поради това се предполага, че NAC може да има следните физиологични ефекти при ендометриоза:

1) намаляване на пролиферацията на ендометриални клетки;

2) намаляване на локалното хронично възпаление и по този начин облекчаване на свързаната с него болка;

3) нормализиране на изходната тъкан, еутопичния ендометриум, чрез по-редовен цикъл на пролиферация-диференциация;

4) намален брой ектопични ендометриални клетки, свързани с намалена клетъчна подвижност, дължаща се както на намаляване на тъканните металопротеинази, така и на редуцирани връзки клетка-клетка и клетъчен субстрат;

5) реорганизация на конформацията на естрогенните рецептори чрез повторно сглобяване на дисулфидни мостове в съответните цистеинови остатъци.

Като цяло всички предполагаеми резултати бяха потвърдени пряко или косвено чрез отговора на пациентите в клиничното проучване и чрез хистологичен анализ на техните биопсии или, в животински модел, на ниво морфология, хистология, биохимия и молекулярна биология.

По-специално, изобретателите са открили, че NAC действително намалява експресията на циклооксигеназа-2 (COX-2) и матрична металопротеиназа 9 (MMP-9) в ендометриоидната тъкан. Те също така демонстрират, че NAC индуцира преместване на Е-кадхерин от цитоплазмата към ендометриозната тъкан в междуклетъчните връзки в третираната с NAC тъкан. Това показва увеличаване на междуклетъчните връзки, което е в съответствие с намаляването на клетъчната пролиферация. Всъщност други ефекти като повишена експресия на p21 и намалена експресия на Ki-67 също показват, че лечението с NAC при ендометриоза води до намалена клетъчна пролиферация. Изобретателите също така демонстрират, че тези молекулярни ефекти от NAC лечението на ендометриоза водят до намаляване на размера на ендометриозните лезии, облекчаване на болката и желана бременност. Предимство при използването на NAC за лечение на ендометриоза или свързани с ендометриоза индикации е, че не се изисква да се използват често използвани хормонални лечения за ендометриоза, които потискат функцията на яйчниците. По този начин употребата на NAC сравнително увеличава вероятността тези пациенти да забременеят. Предоперативното лечение с NAC също доведе до по-редовни и компактни ендометриоми, които бяха по-лесни за отстраняване и причиниха много малко кървене по време на лапароскопия.

Схема на приемане

От проучване за лечение с NAC върху аденокарциномни клетъчни линии и първични нормални кератиноцитни клетки (Cell Death and Differentiation 2005, 12(10): 1285-1296) беше заключено, че ефективната доза NAC за индуциране на антипролиферативен ефект на диференциация варира и зависи от тип клетка. По този начин, произходът на тъканта диктува ефективната концентрация на NAC, която е необходима за наблюдаване на пълно блокиране на пролиферацията, трябва да се определи за всяка тъкан. В допълнение, дозата NAC също е свързана със злокачествеността на клетките. По-подробно, докато нормалните клетки изискват ниска доза за спиране на пролиферацията и започване на диференциация, карциномните клетки с характерна лоша прогноза изискват по-висока концентрация на NAC.

За целите на настоящото изобретение, режим на дозиране на NAC за лечение на ендометриоза при бозайници, включително хора, е проектиран въз основа на следните критерии:

1) дневна доза NAC, която е в съответствие с други текущи клинични лечения и се счита за свободна от нежелани странични ефекти;

2) доза, която се счита за достатъчно висока, за да отговори на изискването за анормално пролифериращи клетки, за да ги постави в пътя на диференциация;

3) като се има предвид докладваното намаляване на плазмените нива на NAC след продължително лечение (Pendyala L, Creaven PJ. Cancer Epidemiol Biomarkers Prev. 1995; 4:245-51), прекъсване на лечението от приблизително половината от всяка седмица се счита за оптимален биологичен отговор при лечение в продължение на два месеца или повече.

Състав от настоящото изобретение, съдържащ NAC за лечение на ендометриоза или индикация, свързана с ендометриоза, съгласно едно изпълнение, трябва да се прилага в доза от около 20 до 90 mg/kg/ден. Долната граница се основава на удвоената доза, използвана за муколитичния ефект, т.е. известно е, че има физиологичен ефект сам по себе си. Горната граница се основава на схващането, че е установено, че по-високите дози причиняват стомашни проблеми при много пациенти. В друго изпълнение на настоящото изобретение, съставът съдържа NAC за приложение в доза от приблизително 30-60 mg/kg/ден. Доказано е, че долната граница е ефективна при ендометриоза, а горната граница практически няма странични ефекти. В още едно изпълнение на настоящото изобретение, съставът съдържа NAC за приложение в доза от приблизително 30-45 mg/kg/ден. Изненадващо е доказано, че тази ниска доза е ефективна при ендометриоза.

В едно изпълнение, съставът трябва да се прилага за период от време, който е два месеца или повече, или за предпочитане три месеца или повече. За да се предотврати понижаване на нивото на NAC в плазмата след продължително лечение, е възможно NAC да се прилага в предписаната доза по интермитентен начин, т.е. според интермитентна схема на дозиране/лечение. Интермитентно приложение или лечение означава, че лечението се прекъсва за периоди, т.е. че фармацевтичният състав се прилага за период от време, като например няколко дни, последвано от прекъсване на приложението, когато фармацевтичният състав не се прилага за определен период от време, напр. като няколко дни. Интермитентното лечение може да бъде редовно, като лечение за определен брой дни или седмици, последвано от почивка за определен брой дни или седмици. Примерите включват повтарящи се схеми с лечение в продължение на 4 дни, последвани от почивка от 3 дни всяка седмица, или лечение в продължение на 2 седмици, последвано от почивка от 1 седмица. Специален случай на редовно интермитентно лечение е импулсното лечение, т.е. редовното лечение и продължителността на почивката, като прием на всеки втори ден или прием в продължение на два дни, последвани от два дни почивка и т.н. Възможни са и нередовни периодични схеми на лечение, които се повтарят нередовно или имат по-сложен режим, който се повтаря, например, в зависимост от отговора на лечението. В различни илюстративни изпълнения на настоящото изобретение, предписаната доза NAC се прилага в продължение на 3-5 последователни дни, последвани от 2-4 дни почивка, или се прилага в продължение на 1-3 последователни дни, последвани от 1-2 дни почивка.

В едно изпълнение, по отношение на телесно тегло от приблизително 60 kg, дозата NAC е в диапазона от 1,2 до 5,4 g/ден, за предпочитане 1,8 до 3,6 g/ден. Тази доза може да бъде разделена на две или повече, за предпочитане три или четири, дневни приложения на една или две дози (напр. хапчета) всяка, като всяка доза може да съдържа, например, 0,15-2,7 g NAC или за предпочитане 0,6-1,2 g NAC. Лечението включва прилагане на горните дози на импулси или периодично, например всеки втори ден или в продължение на три до четири последователни дни всяка седмица, с прекъсване от четири до три дни, съответно. Минималната обща продължителност на лечението е от два месеца, при липса на максимална продължителност. За пациенти с друго тегло, като пациенти с тегло повече или по-малко от посоченото, дневната доза трябва да бъде съответно коригирана.

В едно изпълнение на настоящото изобретение, фармацевтичен състав за лечение на ендометриоза или симптоми, свързани с ендометриоза, включва NAC в доза от 150-5400 mg за приложение в две или повече приложения на ден за период от най-малко 2 месеца, като например като най-малко 3 месеца. В предпочитано изпълнение на настоящото изобретение, фармацевтичният състав съдържа NAC в доза от 230-3600 mg за приложение в две или повече приложения на ден за период от най-малко 2 месеца, като например най-малко 3 месеца. Лечението включва прилагането на горните дози на импулси или периодично, например всеки втори ден или в продължение на три до четири последователни дни всяка седмица с почивка от четири до три дни, съответно.

Фармацевтични състави

Фармацевтичният състав съгласно настоящото изобретение може да бъде получен по начин, известен сам по себе си на специалиста във фармацевтичната област. Съставът може да съдържа ефективно количество NAC в съответствие с изобретението, както и подходящ носител или ексципиент, който служи като средство за доставяне или среда за активната съставка. Такива носители или ексципиенти са известни в областта и включват твърди вещества като лимонена киселина, натриев цитрат, натриев карбонат (киселина) плюс аромат. Фармацевтичният състав за предпочитане е адаптиран за орално приложение. Такива състави могат да се прилагат в различни форми, понастоящем за предпочитане под формата на таблетки. Възможни са също и други форми, като капсули, супозитории, разтвори, суспензии, сиропи или други подобни.

Изобретението изисква строга оценка на фармацевтичното качество на препарата NAC, за да се получи ефективна доза. Следователно трябва да се използват марки или сертифицирани генерични лекарства. NAC не е стабилна молекула, неговият активен тиолов остатък може лесно да се окисли от кислород, светлина и други лъчения, така че може да не се достигне ефективна доза. Следователно препаратът е за предпочитане защитен от светлина, в разтворими таблетки, с натриев бикарбонат, който подпомага частичното отстраняване на кислорода от водата по време на разтварянето.

Наблюдавано е, че високи дози NAC могат да причинят коремна болка. За да се преодолее това, е възможно да се предложи NAC в стомашен защитен състав, подходящ за предотвратяване на освобождаването/разтворимостта на NAC в стомаха. Такива състави са добре известни в областта и могат да бъдат използвани в настоящото изобретение. Например могат да се използват обвивки на таблетки, които са устойчиви на стомашни течности и позволяват на лекарството да се освобождава само в червата, след като е преминало през стомаха. Обикновено използваните състави включват полимери като целулозни производни, метакрилатни амино естерни кополимери. Покритието предпазва ядрото на таблетката от разграждане в киселинната среда на стомаха чрез използване на чувствителен към pH полимер, който набъбва или се разтваря след преминаване през стомаха в отговор на повишаване на pH за освобождаване на лекарството.

Друга възможност е едновременно да се намали дозата NAC, влизаща в кръвния поток. Въвеждането на NAC три или повече пъти на ден може да бъде трудно за пациента. Въпреки това, многократното приложение може да бъде желателно, за да се постигне почти постоянна серумна концентрация на NAC. За да се преодолеят тези проблеми, прилагането веднъж или два пъти дневно, например сутрин и вечер, може да бъде по-лесно за пациента. Една от възможностите е да се предложи NAC във формулировка с бавно освобождаване (наричана още като продължително освобождаване или контролирано освобождаване). Такъв състав прави възможно прилагането на по-голяма доза на по-дълги интервали, тъй като е в състояние да намали скоростта на дифузия и поемане на NAC в кръвния поток. След това дозата се разпределя в кръвта за продължителен период от време в малки количества, напр. в рамките на 12+12 часа в случай на режим два пъти дневно. Много различни технологии и състави за продължително освобождаване са отдавна известни в областта и могат да бъдат използвани в настоящото изобретение. При такива технологии активното вещество е, например, капсулирано в обвивка или матрица, която е неразтворима или по-малко разтворима в телесната течност, в която се прилага. Състави с комбиниран ефект на бавно освобождаване и стомашна защита също са възможни и могат да се използват в настоящото изобретение.

Употреби/медицински показания на настоящото изобретение

Настоящото изобретение е показано, че е полезно в много аспекти, свързани с ендометриозата и може да се използва както за лечение на ендометриоза, така и за лечение на различни индикации, свързани с ендометриоза. Под лечението на различни индикации, свързани с ендометриоза, разбирайте, например, лечение за облекчаване на симптомите на заболяването, като болка и възпаление; лечение за увеличаване на шанса за бременност; предварително лечение преди операция за улесняване на отстраняването на ендометриални лезии и за подобряване на резултата от операцията; лечение след операция за предотвратяване на повторна поява на лезии; и профилактично лечение при потвърдени, оценени рискови фактори или наличие на наследствена ендометриоза.

Доказано е, че NAC от настоящото изобретение намалява размера на лезията и връща пролиферативната тъкан към по-диференцирана, нормална тъкан. Така, в едно изпълнение на настоящото изобретение, фармацевтичният състав съдържа NAC за лечение на ендометриоза за намаляване - евентуално изчезване - ендометриоми, сраствания, перитонеални импланти и дълбоки лезии, разположени в ректовагиналния септум или другаде.

Доказано е също, че NAC от настоящото изобретение облекчава симптомите на болка, причинена от ендометриоза. По този начин, в друго изпълнение на настоящото изобретение, фармацевтичният състав съдържа NAC за облекчаване на болката, свързана с ендометриоза.

В още едно изпълнение на настоящото изобретение, фармацевтичният състав съдържа NAC за предизвикване на желана бременност при пациентка с ендометриоза.

В още едно изпълнение на настоящото изобретение, фармацевтичният състав съдържа NAC за предварително лечение преди лапароскопия или операция в случаи на ендометриоза, за улесняване на отстраняването на масата, намаляване на кървенето, за да направи тъканите по-компактни/по-малко крехки.

В друго изпълнение на настоящото изобретение, фармацевтичният състав съдържа NAC за предотвратяване на рецидив след лапароскопия или операция.

В друго изпълнение на настоящото изобретение, фармацевтичният състав съдържа NAC за използване в случай на потвърдени, оценени рискови фактори за превенция на ендометриоза, дължаща се на наследствено заболяване.

По-нататък изобретението ще бъде допълнително описано и илюстрирано с помощта на следните примери. Трябва да се отбележи обаче, че тези примери не трябва да се тълкуват като ограничаващи изобретението по никакъв начин.

Пример 1 Ефект на NAC в миши модел на ендометриоза

Материали и методи

Вещества. Освен ако не е отбелязано, всички химикали са от Sigma-Aldrich, Милано, Италия.

Животни. 36 женски мишки BALB/C на възраст 6-8 седмици бяха закупени от Charles River Italia (Calco, Италия). Пелети (обогатена стандартна диета; Mucedola, Милано, Италия) и вода бяха осигурени ad libitum. Животните се държат на 16/8 часов цикъл светлина/тъмнина при контролирани условия. Преди всяка инвазивна процедура, мишките се анестезират чрез интраперитонеална инжекция на 0,4 ml физиологичен разтвор, съдържащ 2,5% авертин.

индукция на ендометриоза. Индукцията на ендометриоза се извършва по метода, описан в Somigliana et al, Hum Reprod 1999 Dec;14(12):2944-50. Оперативните интервенции са извършени при чисти условия. Накратко, рогата на матката на сингенни мишки се отстраняват през малък среден разрез в корема точно под пъпа и се поставят в паничка на Петри, съдържаща фосфатно буфериран физиологичен разтвор (PBS). Фрагменти от ендометриума са получени чрез фино смачкване на рогата на матката с помощта на бръснач. Фрагментите се суспендират в 0,6 ml PBS и бързо се инокулират в коремната кухина на реципиентните мишки в съотношение един донор към двама реципиента. Мишките с индуцирана ендометриоза бяха разделени на случаен принцип в две групи от по 12 мишки всяка: контролна и NAC лечение.

NAC обработка. Един ден след имплантирането на ендометриума на мишки от третираната група бяха подложени на хранене със 100 μl от 10 mg/ml изходен разтвор на NAC във вода. Контролната група получавала само вода. Въвеждането на NAC продължава ежедневно в продължение на 21 дни. Като се има предвид средното телесно тегло на мишката от 22,5±0,7, NAC доза от 1 mg/мишка съответства на 44 mg/kg/ден. Нямаше признаци на токсичност на дозата въз основа на телесното тегло - непроменено в края на лечението - по отношение на приема на храна, поддържането или нивата на активност в сравнение с контролите. В края на лечението мишките бяха убити чрез дислокация на шийните прешлени.

събиране на ендометриоми. В края на лечението животните бяха умъртвени и ендометриоидните лезии бяха внимателно изрязани от заобикалящата тъкан и бяха оценени общото им тегло и брой. Кистите се фиксират незабавно в 10% формалин или се замразяват в течен азот и се съхраняват при -80°C.

Хистология и имунохистохимия. Фиксираните с формалин проби се вграждат в парафин и тъканните срезове (дебелини 5 µm) се оцветяват с помощта на хематоксилин-еозин. Всички слайдове са оценени от опитен патолог, който е действал сляп за изследването, а хистологичната диагноза на ендометриозата се основава на морфологичната идентификация на ендометриалната жлезиста тъкан и строма.

За имунохистохимия срезовете бяха депарафинизирани и рехидратирани в марков етанол. За извличане на антиген, срезовете се облъчват с микровълни за 6 минути в 0,1 М цитратен буфер (рН 6,0) и ендогенната пероксидазна активност се блокира чрез инкубиране в продължение на 20 минути в 3% Н2О2/метанол. Секциите се промиват в PBS/TritonX-100, потапят се за 15 минути в 1% PBS-говежди серумен албумин (BSA) за блокиране на неспецифични места на свързване и след това се инкубират с избраното първично антитяло, разредено в 1% PBS-BSA. За имуноанализ на циклооксигеназа (COX)-2 (поликлонална от заек към мишка, Cayman Chemical, Милано, Италия), Ki-67 (поликлонална от заек към човек, Monosan Xtra, DBA Italia, Segrate, Италия) и E-cadherin (BD Biosciences, Милано, Италия) инкубацията се извършва за една нощ при 4°С и разрежданията са съответно 1:100, 1:600, 1:200. Имунохистохимичното оцветяване беше продължено с помощта на DAKO Cytomation LSAB2 System-HRP (Dako Italia, Милано, Италия) и местата на свързване на антителата бяха визуализирани с разтвор на заешки античовешки стрепт на поликлонални антитела на комплекс от авидин-биотин пероксидаза, използвайки диаминобензидин като хромоген. Срезовете се оцветяват с хематоксилин, дехидратират се, поставят се в канадски балсам и след това се гледат под микроскоп Leica. Експресията на Ki-67 се определя количествено по сляп начин с двама независими наблюдатели; всеки наблюдател преброи най-малко 200 клетки в повече от 10 произволно избрани полета за всяка проба и индексът на маркиране на Ki-67 беше изразен като процент.

Екстракция на РНК, полуколичествена RT-PCR (полимеразна верижна реакция с обратна транскрипция) и qRT-PCR (количествена RT-PCR). Общата РНК се изолира чрез лизиране на замразени ендометриални кисти с TissueLyser (QIAGEN, Милано, Италия), като се използва реагент Trizol (Invitrogen, Милано, Италия) съгласно инструкциите на производителя. Един микрограм от общата РНК от всяка проба се третира с 1 U ДНКаза I (Invitrogen) и се транскрибира обратно с 200 U обратна транскриптаза Superscript III (Invitrogen), като се използват 250 ng произволно избрани праймери в краен обем от 20 µl. Същият сДНК продукт, получен от всяка проба, се използва за последваща PCR амплификация с праймерни набори, получени за целевите гени. Конститутивният 18S РНК ген се използва като вътрешен контрол. Отрицателните контролни проби се състоят от реакционна смес и праймери без сДНК матрица. Праймерните последователности (Таблица 1) бяха генерирани с помощта на софтуера Primer-BLAST, достъпен онлайн на адрес: http://www.ncdi.nlm.nih.gov/

Първо, съотношението между пробата и конститутивния ген се изчислява чрез синхронно амплифициране на генно-специфична иРНК и 18S РНК в една реакционна епруветка. Тъй като тази процедура не беше успешна за всички проби - може би поради относително малкия брой специфични транскрипти и по този начин преференциалното амплифициране на 18S иРНК - за да се предотвратят количествени неточности в резултат на конкурентни ефекти, целевите гени и 18S кДНК, създадени в един и същата RT реакция се амплифицира в отделни епруветки. За да се документира експоненциална амплификация, беше генерирана диаграма на амплификация за 18S РНК и избран подходящият брой цикли. Полуколичествена PCR се извършва в 25 μl реакционен обем с 1 μl cDNA, 2 mM MgCl2, 0,2 mM dNTP, 0,5 μM всеки праймер и 1,25 U Hotstart Taq полимераза (QIAGEN). PCR амплификацията се извършва с помощта на iCycler (Bio-Rad, Милано, Италия). След това PCR продуктите се разделят електрофоретично върху 1,5% агарозен гел и се оцветяват с етидиев бромид. Целевите нива на иРНК се оценяват чрез денситометрично сканиране и се нормализират спрямо 18S натоварени контроли. Денситометричните анализи на PCR продукти бяха извършени с помощта на софтуер за изображения Quantity One (VersaDOC, Bio-Rad).

маса 1
Праймерна последователност, използвайте за полуколичествена qRT-PCR
Целева иРНК	Грундове	Подпоследователност	Отгряване (за 30 секунди)	Брой цикли	PCR продукт (bp)
18S РНК NR_003278.1	директно обратно	CGCGGTTCTATTTTGTTGGT	60°C	18-24	219
AGTCGGCATCGTTTATGGTC
SOH-2 NM_011198.3	директно обратно	CCCCCACAGTCAAAGACACT	60°C	35	196
AGTTGCTCATCACCCCACTC
MMP-9 NM_013599.2	директно обратно	TGAATCAGCTGGCTTTTGTG	60°C	35	242
GTGGATAGCTCGGTGGTGTT
P21 (cdknla) NM_007669.4	директно обратно	TCCACAGCGATATCCAGACA	60°C	35	196
ACGAAGTCAAAGTTCCACCG

резултати

Ефект от лечението с NAC върху растежа на ендометриозни лезии. Двадесет и един дни след индуцирането на ендометриоза, всички експериментални мишки бяха умъртвени и техните ендометриоми бяха отстранени и събрани. От 12 контролни мишки една умря, а една не развие ендометриоми. От 12 мишки, лекувани с NAC, две не са развили ендометриоми. Морфологично, ектопичните лезии са големи, кистични и васкуларизирани: те се състоят от пълни с течност кисти, които са или бели, червени или понякога кафяви на цвят и са локализирани предимно в перитонеума на коремно-тазовата кухина. Във вмъкванията на фигура 1.1 представяме представителни изображения на кисти от контролни (А) и третирани с NAC (В) животни. Средно се наблюдава значително намаляване на теглото в третираната група (n=10) в сравнение с контролите (n=10) (Фигура 1).

NAC намалява експресията на COX-2 и MMP-9 и изключва пролиферацията. RT-PCR анализът показа, че по отношение на кисти от контролни мишки (n=5), лечението с NAC (n=5) индуцира значително намаляване на нивата на COX-2 (-32%) и MMP-9 (-34%) иРНК , съзначение п<0,01, которые нормализовали к экспрессии 18S (Фиг.2А и В). Ген Р21, обычно экспрессирующийся только, когда цикл пролиферации блокирован, ни разу не экспрессировался в 5 контролях, хотя он экспрессировался в 3 из 5 изучаемых NAC-обработанных образцах (типичный пример на Фиг.2А).

NAC задвижва преместването на E-cadherin. Имунохистохимичното откриване на E-cadherin е положително в 100% от изследваните случаи. Етикетирането е ограничено до жлезисти епителни клетки, докато нито една от пробите не представя стромално оцветяване. На клетъчно ниво, в кисти на контролни мишки, изобретателите откриват, че оцветяването с E-cadherin е разпръснато в цялата клетъчна цитоплазма, докато в кисти на мишки, третирани с NAC, E-cadherin се намира главно по междуклетъчните връзки (Фигура 3). Е-кадхеринът е част от мултипротеинов адхезионен комплекс; следователно, повишеното му присъствие на клетъчните граници показва увеличаване на междуклетъчните адхезии. Освен това и в съответствие с експресията на P21, описана по-горе, това преместване е в съответствие със загубата на пролифериращо поведение в клетките, преминали към терминална диференциация (Conacci-Sorrell et al, J. Clin. Invest. 2002, 109: 987-991; Parasassi et al, Cell Death Differ 2005, 12: 1285-1296).

Лечението с NAC намалява количеството на Cox-2 в ендометриомите. Имунохистохимичното откриване на свързания с възпалението Cox-2 протеин показва, че по отношение на кисти от контролни мишки, пробите, събрани от мишки, третирани с NAC, показват доста слабо оцветяване, което в някои случаи напълно липсва (Фигура 4).

NAC намалява броя на пролифериращите клетки. Антигенът Ki-67 (Ki-67) е класически маркер за клетъчна пролиферация в клетки в покой, фаза на покой, които напълно нямат експресия на Ki-67. Когато се използват за оцветяване на кисти на контролни мишки, могат да бъдат открити няколко белязани клетки (стрелки в панели A-C на фигура 5). Вместо това, много малко белязани клетки бяха открити в кистите на мишки, третирани с NAC (стрелки в панели D-F на фигура 5). Статистическата оценка, извършена върху 8 животни във всяка група (10 изображения/200 миши клетки), осигурява 54% намаление на пролифериращите клетки (Таблица II).

Дискусия

Животински модел на ендометриоза е ефективен при индуциране на ектопични ендометриални импланти. Само едно животно в контролната и две в групата, третирана с NAC, нямат ендометриоми.

Както се очакваше, масата - пропорционално на размера - на кисти е по-ниска при мишки, третирани с NAC. Това може да се обясни с антипролиферативния ефект на NAC (Parasassi et al, Cell Death Differ. 2005, 12: 1285-1296), който е подробно илюстриран тук чрез анализ на генната експресия и имунохистохимия. Всъщност, P21, ген, експресиран само в диференциращи се, непролифериращи клетки, се наблюдава при 60% от третираните с NAC животни, докато не се експресира в контролите. За разлика от тях, протеинът Ki-67, който се експресира само в пролифериращи клетки, показва 54% намаление на третираните с NAC в сравнение с контролните мишки.

Съответните протеини при ендометриоза като MMP-9 (Collette et al., Hum Reprod 2006; 21:3059-3067) и Cox-2 (Carli et al, Endocrinology 2009; 150: 3128-3137) показват намаление след лечение с NAC. MMP-9 се счита за съществен за движението на клетките и инвазивното поведение, докато Cox-2 е ензим от учебника, свързан с възпаление. И двата свързани гена показват намаление от около 30% след лечение с NAC. В допълнение, количеството Cox-2 също беше изследвано чрез хистохимично оцветяване в кистите и резултатите показаха съответно затихване на оцветяването.

Въз основа на широко приетата концепция, която разглежда цитоплазмения Е-кадхерин като маркер за клетъчно пролиферативно поведение, докато присъствието му в междуклетъчния адхезионен комплекс, напротив, се разглежда както като маркер, така и като индуктор на диференциация, изобретателите също изследват локализацията на E-cadherin в кисти на контролни и NAC-третирани мишки. Резултатите са в пълно съответствие с предишни данни, получени от изобретателите за аденокарциномни клетки (Parassassi et al., Cell Death Differ. 2005, 12: 1285-1296), което показва движението на Е-кадхерин от клетъчната цитоплазма към клетъчните граници след лечение с NAC. Тази асоциация на Е-кадхерин с адхезионния комплекс също е в съответствие с по-малко подвижно, по-малко инвазивно клетъчно поведение.

В заключение, във всички разглеждани отношения, NAC може да представлява оптимално лечение за ендометриоза. Когато се прехвърли към лечението на жени, това лекарство има значително предимство, като практически няма странични ефекти в сравнение с големината на нежеланите ефекти при хормонално лечение. Следователно NAC може да се използва за намаляване на размера на кистите, за намаляване на локалното възпаление и свързаната с него хронична болка и за намаляване на рецидивите след операция. Тази последна точка се дължи на намалената пролиферация и намалената клетъчна подвижност.

Пример 2 Предварително клинично изследване на ефекта на NAC при лечението на ендометриоза.

Цел на изследването. Това пилотно клинично изпитване е предназначено за лечение на жени с ендометриоза с помощта на NAC вместо други лечения. Единственото възможно допълнително лечение са аналгетици за облекчаване на болката, когато е необходимо.

Критерии за включване на пациенти. В това проучване са включени жени с първоначална диагноза на ендометриоза въз основа на болка и потвърждение на заболяването чрез ултразвуково изследване на яйчниците и пациенти с рецидив на болката и/или ендометриом на яйчниците след лапароскопско лечение.

Преди лечението интензитетът на симптомите на болката се измерва с помощта на 10-точкова визуална аналогова скала (VAS) и характеристиките на ендометриомите на яйчниците чрез трансвагинален ултразвук. По време на лечението с NAC други лечения бяха изключени, с изключение на аналгетик за овладяване на болката, когато е необходимо.

Пациенти. От февруари 2008 г. до юли 2010 г. в проучването са включени 64 жени със средна възраст 35±7 години (±SD) с диагностицирана ендометриоза на яйчниците, на 33 от които е предписано лечение с NAC (средна възраст: 37±6 години), докато и двамата 31 не са следвали NAC- или друго лечение и се считат за контроли (средна възраст: 33±8 години). Всички те са имали една или повече кисти в единия или двата яйчника.

Лечение. Предписаната доза NAC е близка до тази, използвана в проучването при животни, 30 mg/kg/ден. На практика при средно телесно тегло от 60 kg на всички регистрирани пациенти са предписани три перорални дози от 600 mg NAC три пъти дневно в продължение на три последователни дни всяка седмица с четири почивни дни. Резултатът беше 1,8 g NAC на ден, 5,4 g на седмица, 21,6 g на месец. Тези прецизни лечения се основават на следните съображения: 1) доза от 1,8 g NAC на ден е в съгласие с други текущи клинични лечения и се счита, че няма нежелани странични ефекти; 2) установени фармакокинетични параметри на NAC, три дневни дози от 0,6 mg достигат почти постоянни плазмени нива без дискомфорт за пациентите по време на комплексно лечение; 3) установеното съобщено намаление на плазмените нива на NAC след продължително лечение (Pendyala L, Creaven PJ. Cancer Epidemiol Biomarkers Prev. 1995; 4:245-51), спиране на лечението за около половината от всяка седмица осигурява оптимален биологичен отговор при продължително лечение. продължително лечение, например от два до шест месеца или повече.

Контрол. Интензитетът на симптомите на болката (VAS скала за болка) и размерът на ендометриомите на яйчниците (клинично и американско изследване) се оценяват след първите три месеца от лечението. При необходимост се провежда лапароскопско лечение след 3 месеца.

резултати

Данните след първия тримесечен период на проследяване са описани по-долу.

Промяната в размера на кистата (непроменена, увеличена или намалена) след три месеца лечение с NAC, измерена чрез ултразвук като максимален диаметър, е показана на Фигура 7А (абсолютен брой кисти) и Фигура 7В (процент на кистите). Фигурите показват сравнение на кисти при пациенти, лекувани с NAC, и кисти при нелекувани контроли. В проценти (фиг. 7В), намаляване на размера на кистата се наблюдава в 38% от случаите, докато в контролите, само по-малко от 10% от случаите показват спонтанно намаляване. Предвид намаляването на размера на ендометриомите, няколко (21 от 33) пациенти решават да отменят или отложат планираната си лапароскопия.

Болката след лечение с NAC също се промени. Болката е оценена преди и след три месеца лечение по 10-точкова визуална аналогова скала (VAS), където нула представлява липса на болка, а 10 представлява най-лошата болка, която можете да си представите. Интензитетът на симптомите беше класифициран като липсващ (0), лек (1-4), умерен (5-7) или тежък (8-10). Пациентите, лекувани с NAC, съобщават за средно намаляване на болката от 7,6±0,3 до 5,1±0,8 (p<0,01) после трех месяцев лечения.

Не са докладвани вредни странични ефекти.

Въпреки че изобретателите не са оценили дали пациентките желаят бременност и следователно не могат да характеризират статистическата значимост на откритията, изобретателите съобщават също и за три бременности, които очевидно не са възможни при използвани в момента терапии за ендометриоза, насочени към потискане на функцията на яйчниците.

Забележително беше наблюдението, описано от опитен хирург, че при лапароскопия след лечение с NAC, ендометриомът е по-правилен и компактен и по-лесно се отстранява, поради което се свързва със значително намаляване на кървенето по време на лапароскопия.

В още един случай възелът върху ректовагиналния септум изчезна, което предполага ефективността на NAC извън ендометриомите на яйчниците.

Пример 3 Ефекти от импулсно, периодично и ежедневно лечение с NAC върху експериментално индуцирана ендометриоза: вагинална свръхчувствителност на плъх като сигнал за болка - пилотно проучване

Материали и методи

Животни. Използвани са 16 възрастни неоплодени женски плъхове Sprague-Dawley. Те тежат 200-230 g в началото на изследването и са държани поотделно в помещение с контролирана температура в пластмасови клетки с постелка. Плъховете имаха свободен достъп до вода и храна за плъхове и бяха държани на 12-часов цикъл светлина/тъмнина с включени светлини в 07:00 часа. Репродуктивният статус (пре-еструс, еструс, пост-еструс и диеструс) се определя чрез ежедневна вагинален лаваж.

Експериментален модел и предоперативно обучение. Преди индуцирането на ендометриоза, плъховете бяха обучени да изпълняват реакция на избягване, за да спрат разширяването на вагината, произведено от надуваем латексов балон. Малък, ненапомпан латексов балон беше свързан към тънък катетър, смазан преди вкарване в средата на вагиналния канал. Надуването на балона с различни обеми въздух разтяга вагиналния канал. Налягането, произведено от всеки разширяем обем, се измерва за контрол с помощта на датчик за налягане с малък обем. Апаратът за изпитване беше малка цилиндрична плексигласова камера, предназначена да държи плъха по такъв начин, че да предотврати завъртането му. Отварянето на задната част на камерата позволява катетър, прикрепен към вагинален стимулатор, да бъде свързан към стимулиращ апарат. Фоточувствителният елемент определя позицията на плъха в камерата. Ако плъхът се разтегне като част от реакция на избягване, тогава светлинният лъч е прекъснат и експозицията е спряна. Плъховете се оставят да се установят в тестовата камера, като се поставят в камерата за 15 минути дневно в продължение на 5 дни. След това плъховете бяха обучени по време на тренировъчни сесии да се подложат на реакция на механично избягване, за да намалят вагиналното раздуване, което включваше издърпване на главата на плъха, за да прекъсне светлинния лъч. Всички плъхове бяха обучени за реакции на избягване в 4 сесии. След обучението започна тестовата сесия.

Тестовите сесии се провеждат 3 пъти седмично в непоследователни дни. Всяка сесия на тестване включваше серия от контролирани опити за избягване. Всеки опит се състоеше в бързо надуване на балона (1 ml/s) до фиксиран обем, който се поддържаше или докато плъхът не извърши реакция на избягване, или за 15 секунди, и балонът бързо се изпускаше. Различни обеми на разширение, включително контролен обем (0.01 ml), се инжектират всеки три пъти на случаен принцип. Максималният период на изчакване от 15 секунди се счита за липса на отговор.

Времето за реакция и реакциите на избягване се измерват като функция на обема на разширяване за всяка сесия, както е описано в Cason AM et al (Horm Behav. (2003), том 44, стр. 123-31). Колкото по-кратко е времето за реакция и колкото по-малък е обемът на отговора, толкова по-силна е реакцията на избягване при плъха. За всеки плъх бяха обединени реакциите на избягване и налягането/обемите за всички сесии при даден плъх (най-малко 12 сесии) и бяха изчислени средните стойности. И четирите експериментални групи (вижте по-долу) откриха, че изходните реакции на избягване на вагинално раздуване преди операцията за ендометриоза са много сходни.

индукция на ендометриоза. Ендометриозата при плъхове може да бъде експериментално предизвикана чрез автотрансплантация на парчета от матката. Хирургията за ендометриоза е извършена следвайки протокола, първоначално разработен от Vernon and Wilson 1985 (Fertility and Sterility, 1985, Vol. 44, pages 684-694). Плъховете в диеструс бяха анестезирани, поставени върху нагревателна подложка за поддържане на телесната температура и беше извършена операция. Направен е разрез по средната линия на коремната кухина за отваряне на матката. Четири парчета рог на матката бяха зашити около алтернативна каскада от мезентериални артерии, които хранят каудалното тънко черво. Следоперативното възстановяване е гладко и редовните цикли на еструс са възобновени при всички плъхове в рамките на една седмица.

Лечение с NAC.

Всички плъхове са лекувани с NAC при 60 mg/kg/ден (когато е приложимо, в деня на приложение) или плацебо в продължение на 8 седмици след операцията. Плъховете бяха разделени на четири експериментални групи:

Първата група получи пулсиращо лечение с NAC, т.е. лечение през ден.

Втората група получава периодично лечение с NAC, т.е. ежедневно лечение в продължение на 5 дни и 2 дни почивка (т.е. 2 дни без лечение).

Третата група получава ежедневно лечение с NAC.

Четвъртата група получи фалшиво лечение, тоест лечение с плацебо.

Реакцията на избягване на прекратяване на вагиналното раздуване, както е описано по-горе, се оценява след 8 седмици.

резултати

Резултатите показват, че вагинална хипералгезия (повишена чувствителност към болка) е била предизвикана при плъхове след операция на матката.

Реакцията на избягване (т.е. време за реакция и брой отговори в рамките на 15 секунди за дадено количество разтягане в сравнение с контролната група) и вагиналното налягане бяха определени за различни обеми на разтягане на вагиналния канал. Показани са резултатите за четири различни експериментални групи (стойностите за групата за фалшиво третиране са използвани като изходни стойности).

Относителното намаление на реакцията на избягване при 0,5 ml обем на разтягане спрямо групата с фалшиво лечение е:

1. За група за лечение с импулсно лечение с NAC: 32% намаление на отговора на избягване;

2. За групата с интермитентно лечение с NAC: 28% намаление на отговора на избягване;

3. За ежедневна група за лечение с NAC: 18% намаление на отговора на избягване.

По-специално, резултатите показват, че ефектът за намаляване на болката, предизвикан от лечението с NAC, е по-изразен в групата с импулсно лечение и в групата с интермитентно лечение в сравнение с групата на ежедневно лечение.

1. Метод за лечение на бозайник с ендометриоза, включващ импулсно или периодично перорално приложение в продължение на 3-5 последователни дни, последвано от 2-4 дневна почивка, или за 1-3 последователни дни, последвани от 1-2 дневна почивка на фармацевтичен продукт състав, съдържащ N-ацетил-L-цистеин, за период от време от най-малко два месеца, където N-ацетил-L-цистеин се прилага в доза от 20 до 90 mg/kg/ден на ден от приложението.

2. Метод съгласно претенция 1, където N-ацетил-L-цистеинът се прилага в доза от 30 до 60 mg/kg/ден в деня на приложение.

3. Метод съгласно претенция 2, където N-ацетил-L-цистеинът се прилага в доза от 30 до 45 mg/kg/ден в деня на приложение.

4. Метод съгласно претенция 1, характеризиращ се с това, че фармацевтичният състав, съдържащ N-ацетил-L-цистеин, е защитен от светлина.

5. Метод съгласно претенция 1, характеризиращ се с това, че фармацевтичният състав, съдържащ N-ацетил-L-цистеин, е водоразтворима таблетка.

6. Метод съгласно претенция 1, характеризиращ се с това, че фармацевтичният състав, съдържащ N-ацетил-L-цистеин, съдържа натриев бикарбонат.

7. Метод съгласно претенция 1, при който фармацевтичният състав, съдържащ N-ацетил-L-цистеин, включва полимерно покритие на таблетката на базата на целулозни производни или кополимери на метакрилат амино естер, което осигурява чревно освобождаване на лекарството.

8. Метод съгласно претенция 1, който се използва при лечение на болка, причинена от ендометриоза.

Група от изобретения се отнася до медицината и се отнася до стабилен състав от наноструктуриран силденафил, който инхибира cGMP-специфичната фосфодиестераза тип 5 (PDEV), съдържащ наноструктурирана основа на силденафил или негови фармацевтично приемливи соли със среден размер на частиците по-малък от около nm5 , стабилизатор, където съставът се получава в поток непрекъснат реактор, базиран на микрофлуидна технология и където съставът има полуаморфна структура.(57) Изобретението се отнася до областта на медицината и е предназначено да повлияе на микроциркулацията в костната тъкан при експериментална остеопороза и фрактури, свързани с нея. // 2540481

Изобретението се отнася до фармацевтичната индустрия и представлява офталмологичен разтвор, съдържащ рибофлавин и витамин Е за защита на вътрешните структури на очната ябълка от UV-A лъчи или за лечение на кератоконус чрез трансепително омрежване.

Изобретението се отнася до фармацевтичната индустрия и представлява балансиран инфузионен разтвор, съдържащ натриев, калиев и магнезиев хлорид, разтворител и натриев L-аргинин сукцинат с формула: , като компонентите в разтвора са в определено съотношение в тегловни %. ЕФЕКТ: Изобретението осигурява повишена детоксикираща активност, ниска токсичност и широка област на клинично приложение. 11 табл., 6 пр.

Изобретението се отнася до метод за лечение на бозайник с ендометриоза. Този метод включва импулсно или периодично перорално приложение в продължение на 3-5 последователни дни, последвано от 2-4 дни почивка или за 1-3 последователни дни, последвани от 1-2 дневна почивка на фармацевтичен състав, съдържащ N-ацетил-L-цистеин, за период от най-малко два месеца. N-ацетил-L-цистеинът при този метод се прилага в доза от 20 до 90 mg/ден. Заявения метод осигурява по-значителен ефект върху симптомите на ендометриозата в сравнение с традиционното ежедневно приложение на N-ацетил-L-цистеин. 10 з.п. ф-ли, 7 ил., 2 маси, 3 пр.

При заболявания на дихателните пътища се използва широк спектър от лекарства, които засягат причината, механизма на развитие на патологията и нейните отделни симптоми. Специално място сред тях се отделя на отхрачващите лекарства, които улесняват отделянето на храчки. Едно такова лекарство е ацетилцистеинът. Какво представлява, какъв ефект има, как и кога се прилага, има ли противопоказания и странични ефекти – това са основните аспекти, които вълнуват пациентите при предписване на лечение. Повечето от информацията е отразена в инструкциите, а останалата част може да бъде поискана от лекаря.

Ацетилцистеинът (N-ацетилцистеин) е бяло кристално вещество (натриева сол) с лек специфичен мирис. Според структурата на молекулата е производно на аминокиселината L-цистеин. Лесно се разтваря във вода и етилов алкохол. В същото време той дава неутрална реакция без изместване на киселинно-алкалния баланс. Дозираните форми, съдържащи ацетилцистеин, са представени от разтвор за инхалиране и инжектиране (небули и ампули), таблетки и прах (гранули) за перорално приложение.

Действие

Лекарството е включено в списъка на основните лекарства. N-ацетилцистеинът помага за намаляване на вискозитета на храчките чрез разрушаване на дисулфидните връзки между мукополизахаридните молекули и забавяне на полимеризацията на протеиновите молекули. Той стимулира клетките на лигавицата на дихателните пътища, като ги кара да произвеждат повече литични ензими, които разтварят фибриновите влакна. В резултат на това се увеличава обемът на секрета и се засилва отделянето му от дихателните пътища.

Лекарството е в състояние да намали адхезията на микробите към епитела, да потисне окислителните процеси (образуването на реактивни кислородни видове) и благодарение на тиоловата група (-SH) може да инактивира различни токсини. С оглед на гореизложеното, ефектите на ацетилцистеин са:

• Муко- и секретолитичен.
• Отхрачващо средство.
• Противовъзпалително.
• Антиоксидант.
• Детоксикиращо.

Трябва да се отбележи, че лекарственото вещество също така предотвратява разрушаването на алфа-1-антитрипсин от съответните ензими (миелопероксидаза). Следователно, лекарството има комплексен ефект върху органите на дихателната система, което има положителен ефект върху възстановяването на пациента.

Положителните ефекти на ацетилцистеина причиняват широкото му използване сред практикуващите.

Разпределение в тялото

Лекарството се абсорбира добре от стомашно-чревния тракт. Въпреки това, когато се приема перорално, бионаличността е ниска (около 10%). Максималната концентрация в кръвта се достига средно след 2 часа. Половината от N-ацетилцистеина, който влиза в плазмата, се свързва с протеина. Метаболизмът се осъществява в черния дроб, където веществото се превръща в аминокиселината цистеин. Неговият полуживот е 60 минути. Екскретира се от тялото главно чрез бъбреците с неактивни метаболити или червата.

Показания

Основният обхват на ацетилцистеина са респираторни заболявания, придружени от образуване на вискозни и трудно отделими храчки. Те включват следното:

• Ларинготрахеит.
• Бронхит и бронхиолит.
• Пневмония.
• Бронхиална астма.
• Кистозна фиброза.
• бронхиектазии.
• Белодробен абсцес.
• емфизем.

Лекарството може успешно да се използва като препарат за диагностични и терапевтични процедури на дихателните пътища (бронхоскопия или бронхография). Освен това той е намерил своята ниша в УНГ патология, когато е необходимо да се улесни отделянето на секрети (риносинузит, отит на средното ухо). Ацетилцистеиновият разтвор се използва и за промиване на носните проходи и синусите, за лечение на кухини и фистули. Използва се като антидот при отравяне с парацетамол.

Приложение

Препарати на базата на N-ацетилцистеин се предлагат във всяка аптечна верига. Но това не означава, че те могат да се използват за самолечение. Дали е необходимо да се използва това лекарство, в каква доза и колко дълго - това може да определи само лекар. На първо място е необходимо да се разбере какво се случва с пациента, след като е поставена диагноза, и след това да се заеме с въпросите на терапията.

Начин на приложение

Въз основа на дозираните форми и показанията, съществуващи на фармацевтичния пазар, може да се заключи, че пътищата на приложение на ацетилцистеин са много разнообразни. Вътре (перорално) се приема под формата на гранули или таблетки за приготвяне на разтвор, суспензия или сироп. Възрастните могат да приемат лекарството три пъти дневно, а децата могат да го използват два пъти дневно, въпреки че в някои случаи честотата, дозировката и курсът се променят (хронични възпалителни заболявания и кистозна фиброза).

Лекарството за инхалиране се прилага с помощта на пулверизатор, пръскане на разтвора и вдишване на аерозола. Продължителността на сесията е около 20 минути, кратността е до 4 пъти на ден. Курсът на терапия, в зависимост от тежестта на патологичния процес, може да варира от 7 дни до 6 месеца. Ацетилцистеинът може да се прилага интравенозно (капково или струйно), като се разрежда с изотоничен натриев хлорид. Но за деца под 6-годишна възраст би било по-правилно да се дават формуляри за перорално приложение. Локалната терапия се извършва чрез накапване на разтвора в носните проходи или ушите.

Лекарството трябва да се приема в съответствие с препоръките на лекаря. Начинът на приложение, дозата и курсът на приложение се определят само от специалист.

Препарати

Има доста лекарства с ацетилцистеин. Всяка фармацевтична компания измисля собствено търговско наименование за тях, но активното вещество остава същото. Някои от тях могат да бъдат отбелязани:

• Флуимуцил.
• Wix Active.
• ацестин.
• Мукомист.
• Мукобене.

Кое от лекарствата е по-добре да изберете е доста трудна задача. Винаги трябва да се ръководите от препоръките на лекар и резултатите от клиничните изпитвания.

Странични ефекти

В допълнение към терапевтичния ефект, лекарството има и някои странични ефекти. Сред най-често срещаните са:

• Диспептични: киселини, гадене и повръщане, стомашен дискомфорт.
• Алергични: уртикария, сърбеж, бронхоспазъм.
• Други: сънливост, треска, шум в ушите, епистаксис.

Дългосрочната системна терапия може да доведе до чернодробна или бъбречна дисфункция. И по време на вдишвания понякога има рефлекторна кашлица и се появява воднисто течение от носа. Ако лекарството се прилага парентерално, има усещане за парене на мястото на инжектиране.

Ограничения

Преди да предпише лекарство, лекарят трябва да проведе задълбочен преглед, за да идентифицира съпътстващи състояния и други ограничения за употребата на ацетилцистеин. Пациентите от своя страна трябва да информират специалиста за всички лекарства, приемани паралелно, за да се изключат негативните им взаимодействия.

Противопоказания

Като се има предвид набора от странични ефекти на лекарството и ефекта му върху тялото, в определени ситуации употребата на N-ацетилцистеин трябва да се избягва. Инструкциите показват, че основните противопоказания ще бъдат:

• Свръхчувствителност към лекарството.
• Язвена болест.
• Белодробно кървене.
• Разширени вени на хранопровода.
• чернодробна и бъбречна недостатъчност.
• Хипертония.
• Бременност и кърмене.

Трябва също да се има предвид, че интравенозните форми на лекарството трябва да се използват с повишено внимание при бронхиална астма поради риск от спазъм на гладката мускулатура на дихателните пътища (това не се отнася за други лекарствени форми).

Трябва да се помни, че ацетилцистеинът има някои противопоказания, които ограничават употребата му при някои пациенти.

Взаимодействие

При едновременното приложение на лекарството с антитусивни средства има вероятност от стагнация на храчките и влошаване на състоянието. Паралелната употреба на антибиотик (тетрациклин, ампицилин, амфотерицин) води до инхибиране на активността на двете лекарства поради взаимодействието с тиоловата група. Ацетилцистеинът е в състояние да засили ефектите на нитроглицерина (вазодилатиращ и антитромбоцитен), както и да отслаби хепатотоксичността на парацетамола. Разтворите не трябва да се смесват с други лекарства (фармакологична несъвместимост).

специални инструкции

При пациенти с обструктивен синдром е препоръчително да се комбинира лекарството с бронходилататори. Ацетилцистеинът не трябва да влиза в контакт с гумени или метални изделия, тъй като може да образува серни съединения със силна миризма. Интравенозното инжектиране трябва да се извършва бавно и да се инжектира по-дълбоко в мускула, за да се избегне изгаряне.

Ацетилцистеинът е лекарство, широко използвано при заболявания на дихателните пътища за разреждане на вискозната храчка (секрет) и подобряване на нейното отделяне. Има и други положителни ефекти, които ви позволяват да получите сложен ефект върху патологичния процес в бронхопулмоналната система. Като използвате лекарството в съответствие с препоръките на лекаря, можете да сте сигурни в ефективността на лечението и неговата безопасност.